CN103073608B - 雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种多烯高氧化度的雄甾化合物，即雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮，该化合物是从思茅藤植物中提取得到的，经实验证明化合物对ConA（伴刀豆蛋白）刺激的Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的抑制作用，与现有免疫抑制活性物质雷公藤内酯和地塞米松活性相当。
Description
技术领域
本发明涉及一种新的雄甾化合物，具体是雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮化合物及其作为免疫抑制药物的应用。
背景技术
思茅藤（Epigynum auritum）是夹竹桃科思茅藤族思茅藤属的一个种，产于云南南部。根据我们前期的研究结果，思茅藤中含有较多结构新颖的C21甾体及其它化合物。在发现新药先导化合物的兴趣驱动下，我们对这些新化合物进行了大量的生物活性筛选实验，发现其中一个多烯高氧化度的雄甾化合物［雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮］在10-40 μg/mL的浓度下与现有免疫抑制活性物质雷公藤内酯和地塞米松活性相当。
免疫抑制是指对于免疫应答的抑制作用，免疫抑制可由天然或人为因素导致；天然免疫抑制包括天然免疫耐受，机体可能会对自身组织成分不产生免疫应答。人工免疫抑制在临床上通常用来抑制器官移植后出现的排异反应，治疗骨髓移植后出现的移植物抗宿主病，或治疗类风湿性关节炎、克隆氏症等自身免疫性疾病，一般会通过药物进行免疫抑制。自身免疫性疾病大多为慢性或进行性疾病需要长期用药，而现有的糖皮质激素（如地塞米松）和免疫抑制剂长期用药普遍存在毒副作用大、使用不方便等缺点。近年来，临床上对免疫抑制类药物的需求不断增加，因此，迫切需要研制一类高效低毒的新型免疫抑制剂，天然产物是免疫抑制剂的重要来源，雷公藤内酯醇就是从雷公藤中分离出来的含环氧的二萜内酯化合物，是雷公藤发挥免疫抑制及抗炎作用的主要成份之一。本发明提供的雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮化合物及其作为免疫抑制药物目前尚未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的具有药用价值的雄甾化合物雄甾-4,6,8（9），13（14）-四烯-3,11,16-三酮，其结构式如下所示：
。
本发明雄甾-4,6,8（9），13（14）-四烯-3,11,16-三酮是从思茅藤植物中提取得到的，提取方法包括如下步骤：取思茅藤全株植物，用乙醇浸提3-4次，每次24h，过滤除渣后浓缩回收乙醇制得浸膏，将浸膏用水混悬后，先用石油醚萃取除去低极性成分，再用乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯萃取部分，用大孔吸附树脂D101进行粗分，分别用质量百分比浓度为20%、35%和60%的乙醇-水溶液进行洗脱，收集60%的乙醇-水洗脱液，浓缩后再用200-300目硅胶拌样，装柱进行柱层析，以石油醚-丙酮两相体系为流动相进行梯度洗脱，用薄层色谱法TLC检测，合并相同组分的洗脱液，对其中的含雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮的组分1分别进行硅胶和凝胶Sephadex LH-20的反复柱层析，洗脱纯化，得到雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮。
本发明的另一目的是将雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮应用在制备免疫抑制药物中。
本发明化合物雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮对ConA（伴刀豆蛋白）刺激的Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的抑制作用，与不加该化合物的对照组相比有显著性差异(p ＜0.01)，而且其免疫抑制活性与雷公藤内酯和地塞米松相当。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明的内容并不局限于此，本实施例中方法如无特殊说明的均按常规方法操作，所用试剂如无特殊说明的采用常规市售试剂或按常规方法配置的试剂。
实施例1：化合物雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮的制备
取思茅藤（Epigynum auritum）全株植物干粉8.3kg，用乙醇浸提3次，每次24h，过滤除渣后浓缩回收乙醇制得浸膏，然后将浸膏用水混悬后，先用石油醚萃取除去低极性成分，再用乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯萃取部分150g，用大孔吸附树脂D101进行粗分，分别用质量百分比浓度为20%、35%和60%的乙醇-水溶液进行洗脱，收集60%的乙醇-水洗脱液，浓缩后得20克浸膏，用200-300目硅胶拌样，干法装柱进行柱层析，以石油醚-丙酮（体积比10:1-1:1）两相体系为流动相进行梯度洗脱，用薄层色谱法（TLC）检测，合并相同组分的洗脱液，最终得到7个部分：Fr1、Fr2、Fr3、Fr4、Fr5、Fr6、Fr7；石油醚-丙酮（体积比8:1-4:1）洗脱的Fr1部分（9.2 g）用200-300目硅胶拌样，干法装柱，以石油醚-丙酮（体积比8:1-3:2）两相体系为流动相进行梯度洗脱，用薄层色谱法（TLC）进行检测，合并相同组分，对上一步操作中得到的石油醚-丙酮（4:1）洗脱的馏分，再用200-300目硅胶，以石油醚-丙酮（4:1）为流动相进行柱层析，最后，以氯仿为流动相进行凝胶（Sephadex LH-20）的柱层析，分离得到化合物雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮25mg，经鉴定此化合物为新化合物。
鉴定结果如下：
化合物雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮为黄色粉末，易溶于氯仿、丙酮等，不溶于水。旋光[α]D 19.7-27.15 （c 1.92, 甲醇）；1H NMR (CDCl3, 500Mz) ，13C NMR(CDCl3, 125Mz) 见表1；正离子ESI于m/z 295出现分子离子峰（基峰），HR-ESI-MS结合核磁共振谱推出相应分子式为：C19H19O3 (M+H)+ (计算值：295.1334，误差：-0.4055ppm）。
表1：雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮的13C NMR 和1H NMR数据
依据以上的波谱数据解析，化合物的化学结构如下式：
系统命名为：雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮[Androsta-4,6, 8(9),13(14)-tetraene-3,11,16-trione]，为一个新的天然有机化合物。
实施例2：雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮免疫抑制活性检测试验
（1）脾细胞悬浊液的制备
健康Balb/c小鼠眼球放血致死，置于75%酒精中浸泡消毒5分钟，取出，置于无菌托盘中，左侧朝上，在超净台中，用消毒过的镊子夹起腹中部皮毛，作一切口，用另外一套器械剪开腹壁各层，用第三套器械将脾取出，去除脂肪和结缔组织，放入PBS（磷酸盐缓冲液）中，洗去浮血；然后将脾组织移至盛有RPMI 1640不完全培养液的平皿中，用剪刀剪成小块，用无菌注射器芯在200目不锈钢筛网中将脾研碎，用PBS少量多次冲洗，过滤得到单个细胞悬液，细胞悬液在4℃下1200rpm离心5min，吸弃上清液，加入3mL红细胞裂解液（Tris-NH4Cl）混匀，静置2min后加入10 mL PBS终止反应，离心(1200rpm, 5min)，去上清，沉淀用5mL PBS洗涤两次，同样条件下离心。沉淀用5mL含10%胎牛血清的RPMI 1640完全培养液悬浮；以0.8%台盼兰活细胞拒染法计数，活细胞数不少于95%，加RPMI 1640完全培养液稀释，调整细胞浓度至2×106个/mL左右；
（2）供试液的制备
精密称取单体化合物2mg，加入适量的 DMSO溶解，上样前用PBS稀释至所需浓度，并使得上样后的DMSO终浓度不超过0.1%；
（3）实验分组
正常对照组：100 μL脾细胞悬液+10 μL RPMI 1640完全培养基+10 μLPBS
模型组：100 μL脾细胞悬液+10 μLConA(终浓度为5 μg/mL)+10 μLPBS
样品组：100 μL脾细胞悬液+10 μLConA(终浓度为5 μg/mL)+10 μL样品
96孔板中，每孔加入淋巴细胞悬液（2×106个/mL）100 μL，ConA 10 μL (终浓度为5 μg/mL)，不同浓度试药化合物稀释液10μL (终浓度分别为10、20、40 μg/mL)，雷公藤内酯醇和地塞米松也分别做三个对应的浓度组，正常对照组孔分别用10 μL的1640完全培养液（含10%胎牛血清）和10 μL 的PBS补齐，每个浓度组设5个平行；
（4）培养：置于37℃，5 % CO2培养箱内培养 72小时；
（5） CCK-8法测定细胞OD值
培养72小时后，每孔中加入15 μL 的CCK-8试剂 (碧云天)，置于37℃，5 % CO2培养箱内继续培养4小时后，在450nm处测定每孔的吸光值以计算细胞增殖情况，并按下式计算刺激指数（SI）：
SI（刺激指数）=加有丝分裂原培养物的OD值/不加有丝分裂原培养物的OD值
（6）数据处理
实验数据OD值采用“平均数±标准差”来表示，数理统计及方差分析工作采用Origin软件完成。
（7）实验结果
表2：本发明化合物对ConA刺激的Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖的刺激指数
| 平均 | SD | 显著分析 | |||||
| 模型组 | 2.984545 | 2.466895 | 2.862048 | 2.429575 | 2.685766 | 0.279215 | |
| yp低 | 1.391728 | 1.286793 | 1.378995 | 1.197664 | 1.313795 | 0.090444 | 8.49E-05 |
| yp中 | 1.057604 | 1.045311 | 1.126976 | 1.073762 | 1.075913 | 0.03598 | 2.68E-05 |
| yp高 | 1.12522 | 1.191078 | 1.126098 | 1.129522 | 1.142979 | 0.03212 | 3.39E-05 |
雄甾-4,6,8（9），13（14）-四烯-3,11,16-三酮在浓度为10、20、40 μg/mL时的刺激指数分别为：1.31，1.08，1.14；显著性分析表明，各浓度组与模型组相比有显著差异(p < 0.01)
阳性对照结果为：
表3：地塞米松对ConA刺激的Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖的刺激指数
| 平均 | SD | 显著分析 | |||||
| 模型组 | 2.428613 | 2.305179 | 2.347667 | 2.693429 | 2.443722 | 0.174167 | |
| DSM低 | 1.289503 | 1.407076 | 1.267526 | 1.4785 | 1.360651 | 0.099629 | 3.74E-05 |
| DSM中 | 1.094645 | 1.152883 | 1.150319 | 1.290601 | 1.172112 | 0.083438 | 1.18E-05 |
| DSM高 | 1.023222 | 1.058384 | 1.167167 | 0.97524 | 1.056003 | 0.081569 | 6.94E-06 |
表4：雷公藤内酯醇对ConA刺激的Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖的刺激指数
| 平均 | SD | 显著分析 | |||||
| 模型组 | 2.736473 | 2.904163 | 2.82178 | 2.675539 | 2.784489 | 0.099814 | |
| Tri低 | 1.090426 | 1.088476 | 1.045091 | 1.263479 | 1.121868 | 0.096699 | 3.5E-07 |
| Tri中 | 1.024617 | 0.949059 | 1.017793 | 1.200107 | 1.047894 | 0.107059 | 3.68E-07 |
| Tri高 | 0.985132 | 0.980257 | 0.948084 | 1.036804 | 0.987569 | 0.036709 | 4.47E-08 |
雷公藤内酯醇在浓度为10、20、40 μg/mL时的刺激指数分别为：1.12，1.05， 0.99；显著性分析表明，各浓度组与模型组相比有显著差异(p < 0.01)；
地塞米松在浓度为10、20、40 μg/mL时的刺激指数分别为：1.36, 1.17, 1.06；显著性分析表明，各浓度组与模型组相比有显著差异(p < 0.01)；
根据实验结果可以看出：雄甾-4,6,8（9），13（14）-四烯-3,11,16-三酮化合物具有较强的免疫抑制活性，在试验所选浓度条件下，其免疫抑制活性与雷公藤内酯和地塞米松相当。
Claims (2)
1.结构式如式I所示的雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮：
式I。
2.权利要求1的所述雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮在制备免疫抑制药物中的应用。
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|---|---|---|---|---|
| WO1994000428A1 (de) * | 1992-06-24 | 1994-01-06 | Schering Aktiengesellschaft | Derivate in der vitamin d-reihe mit modifikationen in der 20 position, verfahren zu ihrer herstellung, zwischenprodukte für dieses verfahren, diese derivate enthaltende pharmazeutische präparate sowie deren verwendung zur herstellung von arzneimitteln |
| CN1100101A (zh) * | 1993-05-28 | 1995-03-15 | 日本化药株式会社 | 14α-羟基-4-雄甾烯-3，6，17-三酮水合晶体及其制备方法 |
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