CN103070007A - 食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法 - Google Patents
食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及生物技术领域，具体的说是一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法。其步骤是：将经分离的食用菌子实体肉块组织放置于空白试管离斜面培养基有2～5毫米侧上方的无基与有基临界点，菌丝先是在无培养基环境下萌发，当菌丝生长至接触培养基后，菌丝生长迅速、旺盛，将这种状态的菌丝通过提纯，能有效脱毒，保持菌株稳定的优良品性。本发明的菌种制作过程工艺简单，适用性强，适用于大多食用菌菌株的组织分离育种，成功率能达到99％。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及到一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法。
背景技术
我国食用菌生产仍存在“重产量、轻质量”的倾向，致使一些食用菌产品在市场上缺乏竞争力。同时，在菌种繁育方面的科研力量较为薄弱，使菌种继代繁殖太多导致菌种活力退化，菌种的优劣，直接影响到食用菌产品的产量和质量。注重优质、高产、抗病、抗虫等优良菌株的繁育，是保证食用菌提高产品产量、质量的必由之路，也是提高食用菌生产水平的重要环节。
任何一个好的食用菌品种，如果连续栽培或长期的保藏及转代过程中都会存在生产性能变劣、种性衰退的现象。所以对食用菌菌种进行分离与筛选、脱毒提纯复壮，可有效防止品种的退化和变异，也是食用菌栽培过程中的重中之重。因此要定期引种或提纯复壮，才能保证菌种质量及种性稳定，从而为最终产量稳定打下基础。当前，各食用菌生产者为了保证种性稳定，大多采用定期组织分离、严格筛选，获得菌种，通过这样的工艺来进行组织分离、提纯，必须经过三次以上转管才能实现保证菌种质量及种性稳定。
专利申请号为98126599.5的“一种食用菌试管菌种生产转接方法”，本发明操作方便，快速，省时，省力，随时可转接，平均每人1小时转接不少于100支试管，成活率99％以上，污染率0.5％以下，但该工艺不能有效的进行脱毒，菌种质量不稳定。
专利申请号为200910259431.9的“利用原生质体再生技术进行食用菌菌种复壮和脱毒的方法”，本发明而达到使食用菌复壮和脱毒的目的，恢复食用菌的优良特性。但该工艺十分复杂，一般人掌握不了。
发明内容
本发明的目的在于提供一种食用菌菌种的试管生产新工艺，它克服了传统技术工艺生产的菌种质量不稳定、工艺十分复杂等缺点。所提供一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法工艺。
本发明是通过以下技术方案来实现的：
食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法，其工艺步骤如下：
1、组织分离：选择优良健壮的食用菌子实体，在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄交界处切0.5～1厘米长的肉块组织。
2、试管培菌：将肉块组织放置于空白PDA斜面试管的离斜面培养基有2～5毫米侧上方的无基与有基临界点。
3、菌丝培养：将接好种的试管放置在温度20～25℃、相对湿度75～80％环境下培养菌丝。
4、转管提纯：菌丝生长至接触斜面培养基后，在无菌环境下挑取生长迅猛、旺盛的菌丝转接至空白PDA斜面试管，进行菌种提纯。
与现有的技术相比，本发明具有以下优点：
(1)本发明工艺简单、效果明显。
(2)本发明的创新点主要体现于菌丝先是在无培养基环境下萌发，当菌丝生长至接触培养基后，菌丝生长迅速、旺盛，将这种状态的菌丝通过提纯，能有效脱毒，保持菌株稳定的优良品性。
(3)本发明培育的菌种成功率能达到99％。
(4)本方明适用于大多食用菌菌株的组织分离，并能有效的提纯、脱毒。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的方法进一步说明。
食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法，其工艺步骤如下：
1、组织分离：选择优良健壮的食用菌子实体，在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄交界处切0.5～1厘米长的肉块组织。
2、试管培菌：将肉块组织放置于空白PDA斜面试管的离斜面培养基有2～5毫米侧上方的无基与有基临界点。
3、菌丝培养：将接好种的试管放置在温度20～25℃、相对湿度75～80％环境下培养菌丝。
4、转管提纯：菌丝生长至接触斜面培养基后，在无菌环境下挑取生长迅猛、旺盛的菌丝转接至空白PDA斜面试管，进行菌种提纯。
Claims (1)
1.一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、提纯方法，其特征是工艺步骤如下：
(1)组织分离：选择优良健壮的食用菌子实体，在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄交界处切0.5～1厘米长的肉块组织。
(2)试管培菌：将肉块组织放置于空白PDA斜面试管的离斜面培养基有2～5毫米侧上方的无基与有基临界点。
(3)菌丝培养：将接好种的试管放置在温度20～25℃、相对湿度75～80％环境下培养菌丝。
(4)转管提纯：菌丝生长至接触斜面培养基后，在无菌环境下挑取生长迅猛、旺盛的菌丝转接至空白PDA斜面试管，进行菌种提纯。
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