CN103063752A

CN103063752A - 一种粮食中二溴氯丙烷残留量的气相色谱-质谱测定方法

Info

Publication number: CN103063752A
Application number: CN 201210302921
Authority: CN
Inventors: 宋薇
Original assignee: NINGBO PONY TESTING TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: NINGBO PONY TESTING TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2012-08-24
Filing date: 2012-08-24
Publication date: 2013-04-24

Abstract

本发明涉及一种粮食中二溴氯丙烷残留量的气相色谱-质谱测定方法。样品经粉碎后，加水润湿，有机溶剂超声提取，提取液经盐析分层，离心取上清液过滤，用气相色谱-质谱选择离子扫描测定，外标法定量。采用样品空白提取液配制不同浓度的基质标准工作液，绘制标准工作曲线，以减小基质效应。该方法具有分离效果好，测定准确、灵敏度高，分析简便、快速等技术特点。

Description

一种粮食中二溴氯丙烷残留量的气相色谱-质谱测定方法

技术领域

本发明涉及一种农药残留量的检测方法，尤其涉及粮食中二溴氯丙烷残留量的气相色谱-质谱测定方法。

背景技术

二溴氯丙烷，学名1，2-二溴-3-氯丙烷(简称：DBCP)，英文名称1，2-Dibromo-3-chloropropane，俗称黑药，CAS：96-12-8，化学式为C₃H₅Br₂Cl，分子量为236.32。二溴氯丙烷为液态熏蒸性杀虫杀线虫剂，适用于蔬菜、花卉、烟草、草莓、粮食等作物的苗床和温室大棚的熏蒸，防治根结线虫、孢囊线虫、短体线虫、螺旋线虫、纽带线虫、矮化线虫等。现为国家严禁用农药，对人体剧毒，高残留，致畸、致不育。对于二溴氯丙烷检测方法的研究国内外主要集中在上世纪80年代，国内研究中以山东省农科院植保所以及北京大学化学系为主。

汪文娟等研究了二溴氯丙烷在花生上的残留量的检测方法，该方法公开了试样加丙酮-水混剂(10∶1，V/V)高速捣碎，加压过滤，滤液加2％硫酸钠溶液，石油醚-苯混剂(7∶3，V/V)分三次提取，提取液用浓硫酸酸洗三次，再用2％硫酸钠溶液洗一次，转入容量瓶中定容，气相色谱仪测定。(汪文娟等，二溴氯丙烷在花生上的残留量及动态研究，农业环境科学学报，1984年第4期，12-15页；汪文娟等，二溴氯丙烷防治花生线虫病的残留量及新农药试验，山东农业科学，1983年第3期，47-48页)。

欧兴长等重点从前处理、仪器分析等方面对二溴氯丙烷的残留量进行研究，方法公开了试样经乙腈-水(5∶1，V/V)浸提16h以上或震荡8h，再用乙烷萃取得提取液，气相色谱仪测定。(欧兴长等，冷溶剂浸取-气相色谱法测定熏蒸剂二溴氯丙烷在花生仁、壳及花生根茎叶中的残留量，花生学报，1981年第3期，9-13页)。

上述公开方法中提取步骤较为繁琐，显著制约了检测效率，且所用提取溶剂含有毒性较大的苯、乙烷，对人体具有较大危害。因此迫切需要一种快速、简便的二溴氯丙烷的检测方法，以适应现代社会的检测工作的需求。

发明内容

本发明内容所要解决的技术问题在于，寻找一种快速、简便且较为安全的检测粮食中二溴氯丙烷残留量的方法。

为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：

本发明的一种粮食中二溴氯丙烷残留量的气相色谱-质谱测定方法包括以下步骤：

(1)提取：样品经粉碎后，加水润湿，加入一定体积有机溶剂超声提取；

(2)盐析：加入氯化钠，混匀后离心分层，上清液经有机滤膜过滤，气相色谱-质谱分析；

(3)采用样品空白基质提取液配制不同浓度标准工作液，然后以标准溶液浓度对峰面积作基质校准曲线。

优选地，试样加水润湿后，加入的有机溶剂为乙腈；

优选地，加水体积3-5mL，加入有机溶剂体积为加水体积的2倍，为6-10mL；

优选地，色谱柱为HP-5MS(或相当柱)；进样口：220260℃；进样方式为分流，分流比为10∶1；进样体积：1μL；柱温为60-80℃(保持1min)，以5-10℃/mi n升温至160-200℃(保持1min)，以2030℃/min升温至280℃(保持5min)；载气：氦气；流速：1.0mL/min(恒流)；GC/MS传输线温度：280℃；溶剂延迟：6min；电压：1.5KV离子源温度：230℃。

优选地，气相色谱-质谱法测定粮食中二溴氯丙烷残留量，二溴氯丙烷定量离子为m/z157，定性离子为m/z155、m/z75、m/z159.

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明并不局限于具体实施例。

实施例1玉米中二溴氯丙烷残留量的测定

1.前处理

玉米样品经高速粉碎机粉碎后作为待测样品，取处理后样品2.0g(精确至0.001g)，加入5mL水，10mL乙腈，涡旋混匀，超声20min，加入适量NaCl，涡旋混匀后，离心(9000r/min，5min)，分层，取上清液经微孔有机滤膜(0.22μm)过滤，待GC/MS分析。

2.色谱条件

色谱柱：HP-5MS(或相当柱)，30m×0.25mm(内径)，0.25μm(膜厚)；进样口：260℃；进样方式：分流，分流比：10∶1；进样体积：1μL；柱温：60℃(保持1min)，以10℃/min升温至160℃(保持1min)，以20℃/min升温至280℃(保持5min)；载气：氦气；流速：1.0mL/min(恒流)；GC/MS传输线温度：280℃；溶剂延迟：6min；电压：1.5KV；离子源温度：230℃；选择定性、定量离子见表1：

表1二溴氯丙烷定量、定性离子

3.基质标准曲线的制备

依照上述色谱条件，分别对粮食样品采用样品空白基质提取液配制标准工作液各点：0.10，0.20，0.50，1.0，2.0，5.0μg/mL，，然后以标准溶液浓度对峰面积作基质校准曲线，求出回归方程为Y＝7250X+221，相关系数R²＝0.9983。

4.样品含量的测定

在实验条件下，按上述实验方法分别测定粮食样品中的二溴氯丙烷的残留量。测定结果如下：

表2样品测定结果

实施例2玉米样品中二溴氯丙烷精密度、加标回收实验

1.精密度实验

实验所用玉米样品未检出二溴氯丙烷，采用阴性样品加标(加标量为0.50μg，即加标浓度为0.05μg/mL)进行精密度实验，结果见表3。

表3精密度实验结果(n＝6)

实验结果表明，本方法的精密度相对标准偏差RSD为3.2％，符合检测要求。

2.加标回收实验

采用上述未检出二溴氯丙烷的玉米样品做加标回收实验，样品中分别添加0.50μg、1.00μg(即加标浓度分别为0.05μg/mL、0.10μg/mL)二溴氯丙烷，依上述步骤进行测定含量，计算二溴氯丙烷回收率。

本方法加标回收率在94.0-109％之间，相对标准偏差在4.2-4.7％之间，符合检测要求。

上述结果可以看出，玉米样品的加标回收实验结果满足农药残留相关标准的规定。

显而易见，本领域的普通技术人员，可以用本发明对粮食中二溴氯丙烷残留量进行测定。

上述实施例仅供说明本发明之用，而并非是对本发明的限制，有关技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明范围的情况下，还可以作出各种变化和变型，因此所有等同的技术方案也应属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由各权利要求限定。

Claims

1.一种测定乳制品中乳铁蛋白的高效亲和色谱法，其特征在于：所述测定方法包括如下的步骤：

试样经水提取，提取液经有机酸调节pH值至4.6沉淀酪蛋白后，离心，采用亲和层析柱分离，用配置二极管阵列检测器的高效液相色谱系统测定含量。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的有机酸为甲酸或乙酸。

3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的亲和层析柱为肝素亲和层析柱。

4.根据权利要求3所述的测定方法，其特征在于，所述的肝素亲和层析柱优选GE Healthcare Hitrap Heparin HP柱，1mL或5mL。

5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的高效液相色谱测定系统的流动相为A：0.01mol/L，pH＝7的磷酸钠缓冲溶液，B：0.01mol/L，pH＝7的含有1mol/L的氯化钠的磷酸钠缓冲溶液；二元梯度洗脱：0-5min，采用体积比为100％流动相A；5-12min，由体积比为100％流动相A线性转换为100％流动性B；12-19min，采用体积比为100％流动相B；19-20min，由体积比为100％流动相B线性转换为100％流动性A，保持5min。

6.根据权利要求1或5所述的测定方法，其特征在于，所述的高效液相色谱系统的色谱条件还包括：流动相流速0.4-1.0mL/min；检测波长280nm；柱温25-30℃，进样体积10-50μL。

7.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的乳制品为婴幼儿配方食品、牛奶、羊奶、人乳、还原乳或含乳饮料。