CN103060398B - 一种血红素的提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种血红素的提取方法，该方法以猪血为主要原料，经过血球分离、酶解、超滤、抽提、沉淀，将得到的沉淀经干燥后即获得血红素。本发明方法生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质，而且所得产品安全性高，可广泛用于食品、保健品和药品等领域。

Description

一种血红素的提取方法

技术领域

本发明涉及一种血红素的提取方法。

背景技术

血红素是一种铁卟啉化合物，具有很高的实用价值。在食品行业中，血红素可代替熟肉制品中的发色剂亚硝酸盐及人工合成色素。使肉制品产生一种诱人的鲜艳红色，增加外观美感，更重要的是可减少亚硝酸盐的致癌作用。在制药行业中，血红素可作为半合成胆红素原料，是制备抗癌的特效药。血红素还可在临床上作为补贴剂，可治疗因缺铁引起的贫血症。而非血红素补铁剂，主要是从植物性食物中提取，以氢氧化铁络合物形式存在。这种络合物在人体中吸收率极低，并含有人体有害成分。而血红素补铁剂可直接被人体吸收，吸收率高达80%。

目前从猪血中提取血红素，多数都是通过以下步骤来完成：猪血→分离血球→氯仿除纤维→沉淀→干燥→提纯→乙醚脱脂→洗涤→干燥，其工艺繁琐，能耗高，降低了企业的经济效益。

发明内容

本发明的目的是提供一种血红素的提取方法。

为了实现上述发明目的，本发明所提供的血红素的提取方法包括以下步骤：

（1）向新鲜的猪血中加入猪血质量的0.8%的柠檬酸三钠，搅拌均匀后将猪血离心处理，除去血浆，收集血球；

（2）向血球中加入0.9-1.1倍于血球质量的蒸馏水，在温度0-4℃条件下搅拌30-35分钟，使血球溶血；

（3）将猪血质量的0.5%的中性蛋白酶加入溶血后的血球中，温度50℃和搅拌条件下酶解3小时，然后再加入猪血质量的0.5%的脂肪酶，温度55℃和搅拌条件下酶解2小时，进行脱脂，脱脂完成后，经过滤得到滤液；

（4）按体积比1∶0.03的配比关系将丙酮和浓度30%的盐酸混合，制得提取剂，向滤液中加入4-5倍于其体积的提取剂；搅拌提取10-15分钟，过滤后得到提取液；

（6）向提取液中加入其体积的5%的鞣酸并混匀，静置使沉淀充分生成，将沉淀分离出并用蒸馏水清洗，干燥洗涤后的沉淀即得血红素。

所述步骤（6）中的干燥为真空干燥，干燥温度60-70℃。

本发明所用原料皆为公知产品，其中的中性蛋白酶选用丹麦诺维信公司生产的诺维信中性蛋白酶；脂肪酶选用天津诺奥科技发展公司生产的脂肪酶；中性蛋白酶和脂肪酶的酶活力分别为2.1万U/g和3.0万U/g。中性蛋白酶能彻底打开肽键，释放出原卟啉及二价铁原子，并彻底分解血球中的纤维；脂肪酶对油脂的α健和β健均可催化，能将脂肪水解为脂肪酸和甘油。

与现有技术相比，本发明有以下优点和效果：（1）避免了使用氯仿所带来的环境污染和对人体的毒害；（2）生物酶解技术，反应条件温和，产品无毒副作用；（3）脂肪酶脱脂技术代替老工艺的乙醚脱脂，生产过程中不产生污染；（4）生产周期短，成本低。

具体实施方式

实施例1

（1）向1Kg新鲜的猪血中加入8g柠檬酸三钠，搅拌均匀后将猪血用离心机以3000转/分钟的转速离心处理10分钟，除去血浆，得200克血球；（2）向200克血球中加入200g蒸馏水，在温度1℃条件下搅拌30分钟，使血球溶血；（3）将5g中性蛋白酶加入溶血后的血球中，在温度50℃和搅拌条件下酶解3小时，然后再加入5g脂肪酶，在温度55℃和搅拌条件下酶解2小时进行脱脂，脱脂完成后，用超滤机过滤，得360.5ml滤液；（4）将42ml浓度30%的盐酸加入到1400ml丙酮中，制得1442ml提取剂，将1442ml提取剂加入到360.5ml滤液中，搅拌提取10分钟，过滤后得到提取液1550ml；（6）向1550ml提取液中加入77.5ml的鞣酸，混匀后静置，使沉淀充分生成，将沉淀分离出并用蒸馏水清洗3次，在温度60℃条件下干燥洗涤后的沉淀即得血红素。

实施例2

（1）向2Kg新鲜的猪血中加入16g柠檬酸三钠，搅拌均匀后将猪血用离心机以3000转/分钟的转速离心处理10分钟，除去血浆，得420克血球；（2）向420克血球中加入420g蒸馏水，在温度2℃条件下搅拌33分钟，使血球溶血；（3）将10g中性蛋白酶加入溶血后的血球中，在温度50℃和搅拌条件下酶解3小时，然后再加入10g脂肪酶，在温度55℃和搅拌条件下酶解2小时进行脱脂，脱脂完成后，用超滤机过滤，得680ml滤液；（4）将99 ml浓度30%的盐酸加入到3301ml丙酮中，制得提取剂3400ml，将提取剂加入到680ml滤液中，搅拌提取10分钟，过滤后得到提取液3000ml；（6）向3000ml提取液中加入150ml的鞣酸，混匀后静置，使沉淀充分生成，将沉淀分离出并用蒸馏水清洗3次，在温度65℃条件下干燥洗涤后的沉淀即得血红素。

实施例3

（1）向10Kg新鲜的猪血中加入80g柠檬酸三钠，搅拌均匀后将猪血用离心机以3000转/分钟的转速离心处理10分钟，除去血浆，得1800克血球；（2）向1800克血球中加入1800g蒸馏水，在温度3℃条件下搅拌31分钟，使血球溶血；（3）将50g中性蛋白酶加入溶血后的血球中，在温度50℃和搅拌条件下酶解3小时，然后再加入50g脂肪酶，在温度55℃和搅拌条件下酶解2小时进行脱脂，脱脂完成后，用超滤机过滤，得3500ml滤液；（4）将420ml浓度30%的盐酸加入到14L丙酮中，制得提取剂14.42 L，将提取剂加入到3500ml滤液中，搅拌提取10分钟，过滤后得到提取液15L；（6）向15L提取液中加入750ml的鞣酸，混匀后静置，使沉淀充分生成，将沉淀分离出并用蒸馏水清洗4次，在温度70℃条件下干燥洗涤后的沉淀即得血红素。

实施例4

（1）向100Kg新鲜的猪血中加入800g柠檬酸三钠，搅拌均匀后将猪血用离心机以3000转/分钟的转速离心处理10分钟，除去血浆，得20Kg血球；（2）向20Kg血球中加入20Kg蒸馏水，在温度4℃条件下搅拌35分钟，使血球溶血；（3）将500g中性蛋白酶加入溶血后的血球中，在温度50℃和搅拌条件下酶解3小时，然后再加入500g脂肪酶，在温度55℃和搅拌条件下酶解2小时进行脱脂，脱脂完成后，用超滤机过滤，得38L滤液；（4）将5.1L浓度30%的盐酸加入到170L丙酮中，制得提取剂175.1L，将提取剂加入到38L滤液中，搅拌提取10分钟，过滤后得到提取液187L；（6）向187L提取液中加入9.35L的鞣酸，混匀后静置，使沉淀充分生成，将沉淀分离出并用蒸馏水清洗4次，在温度70℃条件下干燥洗涤后的沉淀即得血红素。

Claims (2)

1.一种血红素的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）向新鲜的猪血中加入猪血质量的0.8%的柠檬酸三钠，搅拌均匀后将猪血离心处理，除去血浆，收集血球；

（2）向血球中加入0.9-1.1倍于血球质量的蒸馏水，在温度0-4℃条件下搅拌30-35分钟，使血球溶血；

（3）将猪血质量的0.5%的中性蛋白酶加入溶血后的血球中，温度50℃和搅拌条件下酶解3小时，然后再加入猪血质量的0.5%的脂肪酶，温度55℃和搅拌条件下酶解2小时，进行脱脂，脱脂完成后，经过滤得到滤液；

（4）按体积比1∶0.03的配比关系将丙酮和浓度30%的盐酸混合，制得提取剂，向滤液中加入4-5倍于其体积的提取剂；搅拌提取10-15分钟，过滤后得到提取液；

（6）向提取液中加入其体积的5%的鞣酸并混匀，静置使沉淀充分生成，将沉淀分离出并用蒸馏水清洗，干燥洗涤后的沉淀即得血红素。

2.如权利要求1所述的血红素的提取方法，其特征在于所述步骤（6）中的干燥为真空干燥，干燥温度60-70℃。