CN102989017B - 黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中的用途。本发明还提供了¹⁸F标记黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中的用途。本发明还提供了一种¹⁸F标记黄连素前体化合物。本发明还提供了一种¹⁸F标记黄连素衍生物以及该衍生物的合成方法。本发明对黄连素的结构特性进行剖析，对其进行衍生化，在不改变黄连素关键活性基团结构基础上，制备出能够进行¹⁸F标记的黄连素衍生物，并完成¹⁸F核素标记。建立兔VX₂肌肉肿瘤模型，进一步研究放射性核素¹⁸F标记黄连素衍生物在活体肿瘤动物模型体内的分布、代谢与显像特性，首次初步实现¹⁸F标记黄连素衍生物活体荷瘤动物的肿瘤靶向分子显像，为进一步开发广谱肿瘤靶向放射性新药奠基。

Description

黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中的用途

技术领域

本发明涉及黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中用途。

背景技术

肿瘤是危害人们生命和健康的主要疾病之一。为提高肿瘤病人的生存率,肿瘤的早期诊断尤为重要。放射性核素肿瘤显像对肿瘤早期诊断有临床应用价值，对于良恶性肿瘤鉴别，复发和残留组织的检测及转移灶的探查有独特的优势。目前采用的肿瘤显像剂有：一、⁶⁷Ga：67Ga的物理半衰期为78h,生物半衰期2～3周,发射以下能量的γ射线:93keV(40%),184keV(24%),296keV(22%)和388keV(7%)。67Ga在血中的半清除时间约为12h。胃肠道是注药24h后的主要排泄途径，小部分经肝和胆道清除。在延迟显像前应给轻泻药,以清除结肠放射性。67Ga必须无载体，因大量的载体镓会改变67Ga在体内的生物分布,导致骨骼放射性增加。二、131I-或123I-MIBG：MIBG类似去甲肾上腺素和呱乙啶,用于肾上腺髓质和富交感神经的组织显像,可用123I或131I标记,如用123I-MIBG，注射量比131I-MIBG大7倍,这样24h123I的光子流量比131I高10倍,48h则高3倍。123I159keV的光子能量易在γ相机上获得高的空间分辨率，然而2种示踪剂对神经母细胞瘤的诊断效果无明显差异。三、201Tl：201Tl主要积聚在肿瘤活细胞内,在含炎性细胞的结缔组织内也有少量积聚,而坏死组织则不浓聚201Tl。201Tl在肿瘤内的浓聚是多因素的,包括血流、肿瘤活性、钠-钾ATP酶系统、非能量依赖性转运系统、钙离子通道系统和细胞膜通透性等。201Tl的摄取不受类固醇、化疗或放疗的影响,但放疗和化疗可抑制67Ga的积聚。治疗前测定肿瘤对201Tl的亲和力是判断治疗反应的重要因素。201Tl肿瘤显像的最佳时间是注药后20～60min,淋巴瘤则为注药后3h，因此时201Tl病灶与本底比值较高。一般剂量为111～148MBq。正常情况下201Tl分布在侧脑室脉络丛、泪腺、甲状腺、心肌、肝、脾、肾、肠等,肌肉摄取均匀,骨髓无放射性,愈合伤口处有少量放射性摄取。201Tl的清除较慢,生物半衰期10d。201Tl诊断肿瘤的灵敏度为100%,组织细胞增多症、良性骨肿瘤、应力性骨折和炎症患者可出现假阳性。四、99Tcm-MIBI：99Tcm用于闪烁显像与201Tl比较有许多优点,99Tcm-MIBI已显示出对多种肿瘤有诊断价值。（丁虹，等，常用肿瘤显像剂及其临床应用，《中华核医学杂志》，1999年19卷1期）。五、¹⁸F-FDG已用于肿瘤的分期、疗效判断及预后评估，但¹⁸F-FDG不具有肿瘤特异性，炎症、感染性疾病也可摄取¹⁸F-FDG。目前，为了提高PET/CT对肿瘤诊断的特异性，非¹⁸F-FDG肿瘤靶向正电子核素标记化合物的研发正在紧锣密鼓地进行中。

黄连素是一种传统口服抗菌药物，据近年的研究报告，黄连素通过与腺嘌呤核苷酸的易位发生相互作用，诱导线粒体功能障碍，抑制肿瘤细胞的生长。黄连素可以抑制多种肿瘤细胞，包括结肠癌、前列腺癌、胶质母细胞瘤、胃癌、表皮样癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、口腔癌、舌癌、白血病和黑色素瘤等多种肿瘤细胞的生长。虽然已有大量体外细胞实验证实黄连素具有抗肿瘤活性，尚无任何科学研究能证实其在活体动物内仍具有肿瘤靶向性及其分布、代谢特征。目前，黄连素抗肿瘤研究还处于起步阶段，尚无¹⁸F标记黄连素用于肿瘤靶向分子显像的相关研究报导。

发明内容

本发明的技术方案是提供了黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中的用途。本发明的另一技术方案是提供了¹⁸F标记黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中的用途。

本发明提供了黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中的用途。

其中，¹⁸F标记黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中的用途。

其中，所述的肿瘤为鳞状上皮细胞癌。

所述的¹⁸F标记的黄连素衍生物的结构式为：

本发明还提供了一种¹⁸F标记黄连素前体化合物，其结构式为：

其中，R为离去基团。

进一步优选地，所述的离去基团为-OTs或-OTf等容易离去的基团以便亲核基团F离子发生亲核反应完成同位素¹⁸F的标记。

本发明还提供了一种¹⁸F标记的黄连素衍生物，其结构式为：

进一步优选地，所述的化合物结构式为：

所述的化合物结构式为：

本发明还提供了一种合成所述的化合物的合成方法，包括如下步骤：

a、取式1化合物，与R-O-（CH₂）_n-O-R在碱性环境中生成前体化合物；

其中，R为离去基团；

b、前体化合物式与¹⁸F离子反应生成的¹⁸F标记的黄连素衍生物：

进一步优选地，所述的化合物的合成方法包括如下步骤：

a、利用全合成的单取代黄连素盐酸盐（1）作为底物进行衍生化，与对甲基苯磺酰基保护的1,3-丙二醇（Propane-1，3-ditosylate，2）在碱性环境中对接生成用于正电子标记的前体化合物（3）；

b、前体化合物（3）在K2.2.2作用下与医用回旋加速器生产的¹⁸F离子反应生成用于正电子核素显像的黄连素标记物（C₂₂H₂₁Cl¹⁸FNO₄，4）；

发明人对黄连素的结构特性进行剖析，对其进行衍生化，在不改变黄连素关键活性基团结构基础上，制备出能够进行¹⁸F标记的黄连素衍生物，并完成¹⁸F核素标记。建立兔VX₂肌肉肿瘤模型，进一步研究放射性核素¹⁸F标记黄连素衍生物在活体肿瘤动物模型体内的分布、代谢与显像特性，首次初步实现¹⁸F标记黄连素衍生物活体荷瘤动物的肿瘤靶向分子显像，为进一步开发广谱肿瘤靶向放射性新药奠基。

附图说明

图1¹⁸F标记黄连素前体化合物质谱图

图2¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品质谱图

图3不同浓度黄连素对MCF-7细胞增殖能力的影响与对照组(0μmol/L黄连素)比较，P＜0.05。

图4不同浓度¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品对MCF-7细胞增殖的影响

图5注射¹⁸F标记黄连素衍生物1小时后PET/CT显像（上排：PET；中排：CT；下排：PET/CT融合影像。左：冠状位；中：矢状位；右：横断位）

具体实施方式

实施例1、¹⁸F标记的黄连素衍生物的合成及¹⁸F标记

1、试剂、材料和仪器

1.1试剂

单取代黄连素盐酸盐，由药学院赠送，对甲基苯磺酰胺双取代的1,3丙二醇溶液，碳酸铯Cs₂CO₃。

1.2材料

无水硫酸钠，乙酸乙酯CH₃COOC₂H₅，对甲基苯磺酰基保护的3-氟丙醇，DMSO溶液。

1.3仪器

医用回旋加速器，HPLC分离系统，柱层析分离系统，QMA柱，¹⁸F多功能合成模块，Loop环，薄层层析检测系统。

2、¹⁸F标记黄连素衍生物前体化合物的合成

天然黄连素、常用的黄连素盐酸盐是双甲基取代的多杂环化合物，二者结构都非常稳定（分子结构如下），没有可以发生取代反应的位点。为制备本发明目标产物¹⁸F标记黄连素衍生物，必须合成出适于¹⁸F离子标记的¹⁸F标记黄连素衍生物的前体化合物。

天然黄连素和盐酸黄连素

可以以盐酸黄连素选择性脱甲基得到的单取代化合物(化合b）作为¹⁸F标记黄连素衍生物的前体化合物的先导化合物。

a）盐酸黄连素       b）单取代盐酸黄连素

以单取代黄连素盐酸盐（分子式：C₂₀H₁₈ClNO₄.2H₂O，分子量为407.8）为底物（化合物1），与对甲基苯磺酰基保护的1,3-丙二醇（化合物2）在碱性环境中对接。称取单取代黄连素盐酸盐化合物（1）357mg，1mmol溶于50ml丙酮溶液，并加入对甲基苯磺酰胺双取代的1,3丙二醇溶液（化合物2）768mg，2mmol，再向该体系中加入碳酸铯Cs₂CO₃1.1g，约5mmol，该反应液强烈搅拌下回流反应6小时左右，直至经薄层层析检测反应物转化完全。将该反应液冷却至室温后，加入40ml H₂O，并用乙酸乙酯CH₃COOC₂H₅40ml提取2次。合并有机层，无水硫酸钠干燥后，柱层析分离产品得到目的产物（化合物3）230mg，计算机显示目标产物（化合物3）产率约为30～65%。并获得目标产物（化合物3）质谱图谱（见图1），从质谱图可知，该化合物3分子量为534.2，证实该化合物确为目标产物。

¹⁸F标记黄连素衍生物前体化合物的合成

3¹⁸F标记黄连素衍生物

称取2mg化合物3，利用¹⁸F多功能合成模块进行标记反应。其运行程序按以下顺序运行：1.医用回旋加速器制备的¹⁸F-HF约300mCi通过QMA柱使¹⁸F离子被捕获在QMA柱上；K2.2.2溶液将¹⁸F洗脱入反应管；3.分两次干燥反应管；4.向反应管中加入2ml2mg底物的DMSO溶液，并在120°C下反应4分钟；4将反应液加入looP环并用HPLC分离。最后得到¹⁸F标记的黄连素¹⁸F-FC₂₂H₂₁ClNO₄30mCi，产物用薄层层析测得放化纯为40～75%。

¹⁸F标记黄连素衍生物合成

4¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品的合成

化合物4的非放射性对照品5的合成利用单取代黄连素（1）与对甲基苯磺酰基保护的3-氟丙醇（6）在碱性环境中对接即可生成。

¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品合成

获得目标产物（化合物5）质谱图谱（见图2），从质谱图可知，该化合物5分子量为381.7，证实该化合物确为目标产物。

以下通过具体功效试验证明本发明的有益效果。

试验例1黄连素及¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品抑制MCF-7细胞增殖实验

1试剂、材料及仪器

1.1试剂

黄连素购于陕西森弗生物技术有限公司，纯度≥98%，丙酮溶液，对甲基苯磺酰基保护的3-氟丙醇。

1.2材料

单取代黄连素盐酸盐（由药学院何菱老师赠送），人乳腺癌MCF-7细胞，酒精，75cm²培养瓶，噻唑蓝[3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐]，培养基(RPMI1640)，小牛血清，0.25%胰蛋白酶均购于硕博精英生物技术有限公司，PBS液自行配制。

1.3仪器

5%C0₂孵箱，倒置显微镜，酶联免疫检测仪、超净台，离心机，恒温水浴锅，高压蒸汽灭菌锅、移液枪，移液管，离心管，冻存管，微量加样器，离心机，恒温水浴箱，冰箱，液氮罐。

2细胞培养

2.1实验前准备

1）将恒温振荡水浴锅预热至37℃。2）灭菌：确认无菌室无人后打开无菌室、超净台紫外灯各20-30分钟杀菌，打开抽风机清洁空气，除去臭氧。操作人员经肥皂洗手三遍；换上隔离衣，穿好鞋套；进入无菌室，关无菌室、超净台紫外灯；用0.1%新洁尔灭溶液擦净浸泡双手、前臂及上臂5分钟、晾干；75％酒精棉球擦拭双手、前臂及上臂，晾干；倒置显微镜的载物台。用75％酒精擦拭超净台、边台。3）在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等。

2.2具体操作

1）复苏

（1）取冻存管及解冻从-196°C液氮罐中取出细胞盒，取出所需的MCF-7细胞。迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。（2）平衡离心解冻约1-2min后冻存管内液体完全溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，置入超净台内。向15ml离心管2支，分别标为：1号和2号。将冻存管内细胞悬液约2ml加入1号离心管内，更换移液管，向1号离心管内缓慢加入1640培养基，直至离心管内液体凹面处刻度为8ml；向2号离心管内缓慢加入1640培养基8ml。将2支均含8ml液体的离心管置于离心机相对位置，800r/min离心5min,将1号离心管内上清液移去。（3）重悬细胞及培养更换移液管，取75cm²细胞培养瓶1只，标记为1号。向其内加入含15%小牛血清的1640培养基8ml，向1号离心管内加入含15%小牛血清的1640培养4ml，吹打均匀（注意避免气泡产生），将新制备的细胞悬液加入细胞培养瓶内，并吹打均匀，加盖，适度拧紧后再稍回转（勿将瓶口扭紧），以利于CO₂气体的进入，将培养瓶放回CO₂培养箱。将培养瓶置于37℃和5％CO₂的培养箱内。

2）观察

每天观察细胞，并记录细胞生长状态。本次复苏的人乳腺癌MCF-7细胞贴壁生长，形态饱满，折光性好。

3）传代

镜下观察复苏3-4天后见MCF-7细胞呈发芽状在培养瓶底铺成致密单层，细胞的融合度已达80%。另取1只空培养瓶标记为2号。用镊子夹住移液管，安装于移液枪内凹槽内，在酒精灯外焰灼将移液管烧灭菌，细胞培养瓶倾斜将移液管插入瓶底部一角，吸出旧培养液，将用后的吸管弃于废弃缸里。PBS洗涤细胞一至二次，将PBS液移去。

胰蛋白酶消化、吸取0.25%胰酶3mL加入细胞培养瓶内，消化液的量恰好铺满瓶底。混匀，放于37℃孵箱中消化，1-2min后从孵箱中拿出培养瓶，显微镜下观察，见原贴壁细胞胞质回缩、边缘收起呈圆球形、细胞不再连接成片，细胞单个、漂浮状，判断细胞已被完全消化。

吹打分散细胞加入新鲜配制含15%小牛血清的1640培养液5mL，终止消化。

分装稀释细胞以移液管上下抽吸并吹打5-6次以打散细胞团块（吹打时不要用力过猛，否则易产生气泡及造成细胞损伤），混和均匀后，抽吸5ml细胞悬液移至新的培养瓶中，并向2只培养瓶内各加入含15%小牛血清的1640培养液5mL，以移液管上下抽吸、吹打5-6次以混匀细胞，将1号和2号培养瓶置于37℃和5％CO₂的培养箱内以正常培养条件培养。

4）继续培养

第二天观察MCF-7贴壁细胞生长情况，见MCF-7细胞较均匀铺展于细胞培养瓶底表面，细胞呈发芽状单层生长。每3-4天传代一次。

3.MTT法检测黄连素对MCF-7细胞增殖能力的影响

3.1配制MTT溶液

称取MTT0.5克，溶于100ml的磷酸缓冲液（PBS），即可配制成浓度为5mg/mlMTT溶液。用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃避光保存即可（在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住）。

3.2MTT法检测黄连素对细胞增殖能力的影响

取对数生长期MCF-7细胞用0.25%胰酶消化后，以细胞密度为4.0x10⁴/孔的密度接种于96孔板中，培养24小时后，按黄连素浓度0、10、25、50、75、100μmol/L分为6组，每组设4个复孔，分别加入含黄连素培养液200μl继续培养48小时，然后弃含药物培养液，每孔分别加入不含药物新鲜培养液180μl，置于细胞培养箱中平衡30分钟，每孔加入MTT溶液(5mg/ml)20μl，继续正常培养2.5小时，吸弃每培养孔上清液，每孔加入150μlDMSO中止培养，在水平摇床上振荡10min，使结晶物充分溶解，选择490nm波长，在酶标仪上测定各孔吸光度值即OD值，以OD值的大小反应细胞增殖的能力，吸光度值越大，细胞增殖能力越强。

3.3统计学分析

给予不同浓度黄连素(0、10、25、50、75、100μmol/L)孵育MCF-7细胞48小时，MTT法检测不同浓度黄连素对MCF-7细胞活力的影响。结果（见图3，表1）所示，低浓度的黄连素(10μmol/L)即对细胞活力有抑制作用(P＜0.05)，随着黄连素浓度的增加，细胞活力抑制作用显著增加，呈浓度依赖性。

3.4结果

表1不同浓度黄连素对MCF-7细胞增殖能力的影响（所有数据用均数±标准差）

组别	OD值
		对照组0μmol/L	1.055±0.049
黄连素10μmol/L	0.925±0.051
		黄连素25μmol/L	0.910±0.077
黄连素50μmol/L	0.654±0.049
		黄连素75μmol/L	0.577±0.087
黄连素100μmol/L	0.313±0.024

与对照组（0μmol/L黄连素）比较，P＜0.05

4、MTT法检测¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品对MCF-7细胞增殖能力的影响

4.1MTT法检测¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品对MCF-7细胞增殖能力的影响

取对数生长期MCF-7细胞用0.25%胰酶消化后，以细胞密度为4.0x10⁴/孔的密度接种于96孔板中，培养24小时后，按¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品浓度0、10、25、50、75、100μmol/L分为6组，每组设4个复孔，分别加入含¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品的培养液200μl继续培养48h，然后弃含药物培养液，每孔分别加入不含药物新鲜培养液180μl，置于细胞培养箱中平衡30min，每孔加入MTT溶液(5mg/ml)20μl，继续正常培养2.5小时，吸弃每培养孔上清液，每孔加入150μlDMSO中止培养，在水平摇床上振荡10min，使结晶物充分溶解，选择490nm波长，在酶标仪上测定各孔吸光度值即OD值，以OD值的大小反应细胞增殖的能力，吸光度值越大，细胞增殖能力越强。

4.2统计学分析

给予不同浓度黄连素(0、10、25、50、75、100μmol/L)孵育MCF-7细胞48h，MTT法检测不同浓度¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品对MCF-7细胞活力的影响。结果（见图4，表2）所示，低浓度的黄连素(10μmol/L)即对细胞活力有抑制作用(P＜0.05)，随着¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品浓度的增加，对细胞增殖抑制作用显著增加，呈浓度依赖性。

4.3结果

与对照组（0μmol/L¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品浓度）比较，P＜0.05。

表2不同浓度¹⁸F标记黄连素衍生物非放射性对照品对MCF-7细胞增殖的影响

组别	OD值
		对照组0μmol/L	1.045±0.056
黄连素10μmol/L	0.945±0.057
		黄连素25μmol/L	0.925±0.070
黄连素50μmol/L	0.676±0.052
		黄连素75μmol/L	0.587±0.116
黄连素100μmol/L	0.322±0.015

与对照组比较，P＜0.05

试验例2本发明¹⁸F标记黄连素或其衍生物用在制备肌肉肿瘤诊断显像剂

一、建立活体兔VX2肌肉肿瘤模型

新西兰大白兔由四川大学华西医学中心动物中心提供。取20只，体重1．5～2．5kg，雌雄不限。VX2肿瘤是1930年后期kidd用shope病毒诱导兔皮肤乳头状瘤致恶变形成的一种上皮细胞鳞癌。VX2种兔由四川大学华西第一医院核医学科提供，将带有VX2肿瘤的荷瘤兔仰卧位固定四肢后腹腔注射10%水合氯醛麻醉，对肿瘤部位皮肤进行剃毛、消毒，放置无菌洞巾，手术刀切开皮肤，剥离肿瘤，用眼科剪及镊子去除纤维结缔组织及坏死组织，并剪下肿瘤边缘生长旺盛的淡红色鱼肉样组织，加入适量生理盐水，用剪刀将其切成小于1mm³碎沫，制成肿瘤组织混悬液备用。取20只健康新西兰大白兔，仰卧位固定四肢后，分别用10%水合氯醛以3ml/kg腹腔内注射麻醉。右侧大腿近段外侧皮肤剔毛,消毒,用带有18号注射针头的1ml注射器抽取配置好的肿瘤组织混悬液,刺入右侧大腿外侧肌内，进针深度1.5cm，注入肿瘤组织混悬液0.5ml，每日通过触摸观察VX2肿瘤组织生长状况，并记录肿瘤组织直径，当肿瘤组织直径达2cm后行PET/CT扫描。

二、¹⁸F标记黄连素衍生物PET/CT兔VX₂肌肉肿瘤模型显像

1试剂、材料和仪器

1.1试剂

10%水合氯醛，0.9%生理盐水。

1.2材料

两三个月月龄荷VX₂瘤纯种新西兰大白兔3只，雌雄不限，体重1.5～1.9kg，（本实验室建立VX₂肌肉肿瘤模型），酒精，1ml及5ml注射器、兔板，绑带。

1.3仪器

实验动物操作台，PET/CT。

2PET/CT兔VX₂肌肉肿瘤显像准备

于接种后的第14天，触及VX₂兔软组织移植瘤直径约2.5cm，行18F-BBR衍生物PET/CT显像。荷瘤兔显像前不需禁饮食。扫描前测荷瘤兔身长（头顶部至踝关节）及体重2kg。将荷瘤兔仰卧位，绑带四肢固定与兔板，腹腔注射6ml10%水合氯醛，麻醉成功后，建立耳缘静脉通道，先经此静脉通道注射2ml生理盐水，检查静脉通路是否通畅,确认通畅后按18.5-37MBq；（0.5-1mCi）/kg静推¹⁸F-BBR0.74mCi，最后再注入3ml生理盐水冲管,拔出针头,压迫止血，备用。

3¹⁸F标记黄连素衍生物兔VX₂肌肉肿瘤模型靶向分子显像

注射¹⁸F标记黄连素衍生物完成后，立即采集颅底至踝关节CT图像。CT采集参数为40mAs，120keV，层厚4mm，层距4mm，矩阵为512*512。然后，分别于注射后第10、30、60、90、120min时以2min/床的速度进行PET/CT图像采集。PET图像采集采用3D采集模式，PET/CT图像采集完成后，经计算机自动重建CT及PET横断面、矢状面和冠状面图像。PET图像经CT衰减校正后以LOR方法重建。经Syntgra融合软件，同时得到PET、CT及PET/CT图像。

4¹⁸F标记黄连素衍生物PET/CT兔VX2肌肉肿瘤显像结果

18F标记黄连素衍生物，其放射化学纯度约为：60%～70%。注射¹⁸F标记黄连素衍生物1小时后PET/CT显像图像（见图5）。右侧股部可见轮廓清晰的“环状”放射性异常浓聚影（箭头区），其中央显示放射性分布缺损区为肿瘤坏死区（病理证实）。右侧股部肿瘤组织SUVmax的平均值为1.88，对侧正常肌肉组织SUVmax的平均值为0.15，肿瘤(靶)/对侧肌肉（非靶）的放射性比值=3～12.53。全身骨骼清晰显影，推测其很可能源于约30%～40%的游离18F^-沉积于骨骼所致。此外，肝脏有较高的放射性分布，提示¹⁸F标记黄连素衍生物可能经肝脏排泌。

由图示结果可见：¹⁸F标记黄连素衍生物有高度的亲肿瘤活性。右侧股部可见轮廓清晰的“环状”放射性异常浓聚影（箭头区），其中央显示放射性分布缺损区为肿瘤坏死区（病理证实）。肿瘤(靶)/对侧肌肉（非靶）的放射性比值=3～12.53。18F标记黄连素衍生物，其放射化学纯度约为：60%～70%。全身骨骼清晰显影，推测其很可能源于约30%～40%的游离18F^-沉积于骨骼所致。此外，肝脏有较高的放射性分布，提示¹⁸F标记黄连素衍生物可能经肝脏排泌。

目前已有大量体外细胞实验证实黄连素具有抗肿瘤活性，尚无任何科学研究能证实其在活体动物内仍具有肿瘤靶向性及其分布、代谢特征。本发明依靠核药学、核医学及现代分子影像学的相关知识对黄连素的结构特性进行剖析，对其进行衍生化以使其能够进行¹⁸F^-标记，并进一步研究放射性核素¹⁸F标记黄连素衍生物在活体肿瘤动物模型体内的分布、代谢与显像特性，首次初步实现¹⁸F标记黄连素衍生物活体荷瘤动物的肿瘤靶向分子显像，为进一步开发广谱肿瘤靶向放射性新药奠定了基础，具有重要临床意义和广阔的市场前景。

Claims (9)

1.¹⁸F标记的黄连素或其衍生物在制备肿瘤诊断显像剂中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述肿瘤为鳞状上皮细胞癌。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述¹⁸F标记的黄连素衍生物的结构式为：

。

4.一种¹⁸F标记黄连素前体化合物，其结构式为：

其中，R为离去基团。

5.根据权利要求4所述的¹⁸F标记黄连素前体化合物，其特征在于：所述离去基团为-OTs或-OTf。

6.一种¹⁸F标记的黄连素衍生物，其结构式为：

。

7.根据权利要求6所述的¹⁸F标记的黄连素衍生物，其特征在于：所述化合物结构式为：

。

8.一种合成权利要求6所述¹⁸F标记黄连素衍生物的方法，其特征在于：所述化合物的合成方法包括如下步骤：

a、取式1化合物，与R-O-（CH₂）_n-O-R n=2，3，4……在碱性环境中生成前体化合物；

，

其中，R为离去基团；

b、前体化合物式与¹⁸F离子反应生成的¹⁸F标记的黄连素衍生物：

。

9.一种合成权利要求7所述¹⁸F标记黄连素衍生物的方法，其特征在于：所述化合物的合成方法包括如下步骤：

a、利用全合成的单取代黄连素盐酸盐（1）作为底物进行衍生化，与对甲基苯磺酰基保护的1,3-丙二醇（Propane-1,3-ditosylate， 2）在碱性环境中对接生成用于正电子标记的前体化合物（3）；

b、前体化合物（３）在K2.2.2作用下与医用回旋加速器生产的¹⁸F离子反应生成用于正电子核素显像的黄连素标记物（C₂₂H₂₁Cl¹⁸FNO₄，4）：

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