CN102988292A - 甾醇构成的绞股蓝皂苷脂质体及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种以甾醇构成的绞股蓝皂苷脂质体的处方,该处方含有绞股蓝皂苷、磷脂材料、甾醇,还公开了绞股蓝皂苷脂质体的制备方法。该脂质体的剂型可以为冻干针剂、注射剂、透皮制剂、气雾剂、口服液、溶液剂、眼用制剂、片剂或胶囊剂,能对高血脂、心脑血管疾病有重要的治疗作用,而且其对肿瘤、肝炎、胃炎、胃及十二指肠溃疡、胃下垂、口腔炎、糖尿病、便秘、痔疮、哮喘、偏头痛、痤疮、色斑、胆结石、肢体麻木、皮肤粗糙、男性不育、性功能衰退、肥胖及白发秃顶有积极的治疗和预防作用,还能增强人体体质,提高机体免疫力,缓解疲劳状态,明显改善睡眠质量,增进食欲,延缓衰老。
Description
技术领域
本发明涉及药物制剂领域,尤其涉及一种生产绞股蓝皂苷脂质体的方法,更具体地说,本发明涉及绞股蓝皂苷脂质体和含有绞股蓝皂苷脂质体的药物制剂。
背景技术
绞股蓝又名七叶胆、五叶参,主要有效成分为多糖类、黄酮类、皂苷类及微量元素类,其功效主要是促进人体脂肪类物质代谢、营养人体细胞,同时具有不错的解毒消炎作用,广泛应用于高血脂、脂肪肝、肥胖、便秘、失眠、乙肝、慢性呼吸道炎症(咽喉炎、肠胃炎等)的治疗与保健。皂苷是其中一种有效成分。绞股蓝皂苷之所以“神奇”是因为其皂苷类成分(84种)超过人参所含的数倍,其对治疗和预防高血压等心血管疾病、糖尿病、便秘、痔疮、哮喘、偏头痛、痤疮、色斑等症状有显著功效,并有较为明显的镇静、催眠、消除疲劳、增进食欲、抗衰老的作用,对肿瘤、肝炎、胃炎、胃及十二指肠溃疡、胃下垂、口腔炎、冠心病、动脉硬化、胆结石、肢体麻木、皮肤粗糙、男性不育、性功能衰退、肥胖及白发秃顶等具有较佳疗效。绞股蓝皂苷还可能成为21世纪人类征服心血管疾病、糖尿病、紧张症、癌症和艾滋病的主要生理活性物质。
脂质体是由一到数层脂质双层膜所组成的微小囊泡,有自行闭合的特征,可同时作为疏水性及亲水性药品的载体。脂质体的性质受组成脂质的影响,脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同,分为单室脂质体和多室脂质体。小单室脂质体(SUV):粒径约0.02~0.08μm。大单室脂质体(LUV)为单层大泡囊,粒径在0.1~1μm。多层双分子层的泡囊称为多室脂质体(MIV),粒径在1~5μm之间。脂质体属于靶向给药系统的一种新剂型,它可以将药物粉末或溶液包埋在直径为纳米级的微粒中,这种微粒具有类细胞结构,进入人体内主要被网状内皮系统吞噬,从而激活机体的自身免疫功能,并改变被包封药物的体内分布,使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄,从而提高药物的治疗指数,减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。
绞股蓝皂苷脂质体首次以脂质体作为绞股蓝皂苷的给药途径,使药物以最小的损失到达作用部位,可以提高绞股蓝皂苷的药效,减少用量,是一种新型的剂型,是技术创新的结果,具有良好的市场前景。因为它具有靶向性,能准确地达到作用部位,这种给药方法是其他方法所不能比拟的。本实验采用逆向蒸发法,薄膜分散法,乙醇注入法制备了绞股蓝脂质体,并考察了其包封率、表征等,采用正交试验,从而筛选出一种制备绞股蓝皂苷脂质体的最优方法,使其利用效率达到最高。绞股蓝皂苷脂质体能以最少的用量,达到最好的治疗效果,可能作为未来一种给药的主要发展方向。
目前尚未见有关绞股蓝皂苷脂质体的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用甾醇生产绞股蓝皂苷脂质体的处方和方法,该方法工艺简单,用该方法中介绍的植物甾醇生产的绞股蓝皂苷脂质体能减少胆固醇对人体的影响。
为了实现本发明的目的,本发明的技术方案是它主要是由绞股蓝皂苷、磷脂材料、甾醇所组成。
其中,所述的磷脂材料为:磷脂酰胆碱(卵磷脂)、磷脂酰乙醇胺(脑磷脂)、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、甘油磷脂酸、二磷脂酰甘油(心磷脂)、鞘磷脂中的一种或几种的混合物。
其中,所述甾醇为豆甾醇、α-谷甾醇、β-谷甾醇、菜油甾醇、谷甾烷醇或胆固醇中的一种或几种的混合物。
其中,可以添加选自甘露醇、葡萄糖、吐温-80、维生素E或聚乙二醇中的一种或几种的其它辅料。
本发明所述的脂质体按重量百分比该脂质体含如下组分:绞股蓝皂苷2%~45%,磷脂材料40~85%,甾醇占制剂重量的10~40%。
绞股蓝皂苷脂质体的制备方法可以包括如下步骤:
(1)原料的选取:
将绞股蓝皂苷溶解于pH为6.8~8.0磷酸缓冲液中,制成质量浓度为0.1~20mg/mL绞股蓝皂苷缓冲液;
当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。磷脂材料∶甾醇∶乙醚∶绞股蓝皂苷缓冲液溶液的比例按100~300份∶15~200份∶2~5份∶5~30份选取,备用;
(2)绞股蓝皂苷脂质体的制备:将磷脂材料、甾醇和乙醚混合,然后旋转蒸发使其成均匀类脂薄膜覆盖在梨形瓶内底部,向瓶中加入绞股蓝皂苷缓冲液溶液,加入玻璃珠,在30~60℃下旋转振荡15~60min后,放置0.5~2h充分水合即得。
绞股蓝皂苷脂质体的制备方法可以包括如下步骤:
(1)油相的制备:当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。绞股蓝皂苷∶磷脂材料∶甾醇∶乙醇的比例按10~30份∶40~300份∶10~100份∶5~50份的比例选取材料,混合均匀,制备油相;
(2)水相的制备:当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。水相为磷酸盐缓冲液5~50份,缓冲液的pH为6.8~8.0;
(3)脂质体的制备:在恒温搅拌状态下,将油相用针头匀速注入到温度为35~60℃的水相中,恒温搅拌1~4h除乙醇,即得。
绞股蓝皂苷脂质体的制备方法可以包括如下步骤:
(1)当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。磷脂材料∶甾醇∶二氯甲烷的比例为40~300份∶10~200份∶50~500份制备油相,将油相置于圆底烧瓶中,旋转蒸去二氯甲烷;
(2)当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。10~200份绞股蓝皂苷溶解于10~500份磷酸盐缓冲液中,制成水相;
(3)将水相加入油相中,冰浴下,探头超声5~30min,形成均匀的乳剂;
(4)旋蒸除去有机相,形成胶态后加入磷酸盐缓冲液10~150份,继续减压蒸发0.5~2h,探头超声3~20min,即得。
本发明制备的绞股蓝皂苷脂质体还可以进一步制备成冻干针剂、注射剂、透皮制剂、气雾剂、口服液、溶液剂、眼用制剂、片剂或胶囊剂。
本发明的有益之处是:
(1)制作简单:本发明制作工艺简单,不需要复杂设备;
(2)普通脂质体由磷脂与胆固醇构成,胆固醇的加入易造成心脑血管疾病。本发明中可选用植物甾醇作为膜材,植物甾醇具有与胆固醇类似的结构,不但和胆固醇一样能起到增加脂质体膜稳定性的作用,而且还可以减少或不使用胆固醇,有效降低有害低密度胆固醇的水平(减少了胆固醇对人体的影响),起到预防心血管疾病的作用,扩大了脂质体这一剂型在心血管疾病领域的应用。磷脂本身可以降血脂,利用植物甾醇生产的绞脂蓝皂苷脂质体能够兼具植物甾醇和绞股蓝皂苷的功效,不仅能对高血脂、心脑血管疾病有重要的治疗作用,而且对肿瘤、肝炎、胃炎、胃及十二指肠溃疡、胃下垂、口腔炎、糖尿病、便秘、痔疮、哮喘、偏头痛、痤疮、色斑、胆结石、肢体麻木、皮肤粗糙、男性不育、性功能衰退、肥胖及白发秃顶有积极的治疗和预防作用,还能增强人体体质,提高机体免疫力,缓解疲劳状态,明显改善睡眠质量,增进食欲,延缓衰老。
附图说明
图1:根据实施例1制备的绞股蓝皂苷脂质体粒径图
图2:根据实施例1制备的绞股蓝皂苷脂质体Zeta电位图
图3:根据实施例2制备的绞股蓝皂苷脂质体粒径图
图4:根据实施例2制备的绞股蓝皂苷脂质体Zeta电位图
图5:根据实施例3制备的绞股蓝皂苷脂质体粒径图
图6:根据实施例3制备的绞股蓝皂苷脂质体Zeta电位图
图7:根据实施例1制备的绞股蓝皂苷脂质体的AFM图谱
图8:根据实施例2制备的绞股蓝皂苷脂质体的AFM图谱
图9:根据实施例3制备的绞股蓝皂苷脂质体的AFM图谱
具体实施方式
下属实例用来说明本发明的技术方案的具体实施方式,但不用于限制本发明的保护范围。
实施例1
处方 | 用量 |
鞘磷脂 | 200mg |
β-谷甾醇 | 100mg |
乙醚 | 3mL |
绞股蓝皂苷 | 20mg |
磷酸盐缓冲液(pH=7.0) | 15mL |
工艺
(1)原料的选取:按上述处方取磷酸盐缓冲液和绞股蓝皂苷,将绞股蓝皂苷溶解于磷酸盐缓冲液中,备用;
(2)绞股蓝皂苷脂质体的制备:按上述处方取鞘磷脂、β-谷甾醇和乙醚,混合均匀,然后旋转蒸发使其成均匀类脂薄膜覆盖在梨形瓶内底部,向瓶中加入含绞股蓝皂苷的磷酸盐缓冲液,加入玻璃珠,在60℃下旋转振荡30min后,放置2h充分水合,即得。
实施例2
处方 | 用量 |
绞股蓝皂苷 | 20mg |
卵磷脂 | 200mg |
豆甾醇 | 50mg |
乙醇 | 10mL |
磷酸盐缓冲液(pH=6.8) | 10mL |
工艺
(1)油相的制备:按上述处方取绞股蓝皂苷、卵磷脂、豆甾醇、乙醇,混合均匀,作为油相;
(2)水相的制备:按上述处方取磷酸盐缓冲液作为水相;
(3)脂质体的制备:在恒温搅拌状态下,将油相用针头匀速注入到温度为45℃的水相中,恒温搅拌2h除乙醇,即得。
实施例3
处方 | 用量 |
绞股蓝皂苷 | 200mg |
磷脂酰丝氨酸 | 200mg |
菜油甾醇 | 50mg |
二氯甲烷 | 50mL |
磷酸盐缓冲液(pH=8.0) | 40mL |
工艺
(1)按上述处方取磷脂酰丝氨酸∶菜油甾醇∶二氯甲烷=200mg∶50mg∶50mL制备油相,将油相置于圆底烧瓶中,旋转蒸去二氯甲烷;
(2)200mg绞股蓝皂苷溶于20mL磷酸盐缓冲液(pH=8.0)中,作为水相;
(3)油相中加入20mL含绞股蓝皂苷200mg的磷酸盐缓冲液(pH=8.0),冰浴下,探头超声10min,形成均匀的乳剂;
(4)旋蒸除去有机相,形成胶态后继续加入磷酸盐缓冲液20mL,继续减压蒸发0.5h,探头超声10min,即得。
实施例4
处方 | 用量 |
磷脂酰胆碱 | 200mg |
谷甾烷醇 | 120mg |
乙醚 | 4mL |
绞股蓝皂苷 | 30mg |
磷酸盐缓冲液(pH=7.0) | 20mL |
工艺
(1)原料的选取:按上述处方取磷酸盐缓冲液和绞股蓝皂苷,将绞股蓝皂苷溶解于磷酸盐缓冲液中,备用;
(2)绞股蓝皂苷脂质体的制备:按上述处方取磷脂酰胆碱、谷甾烷醇和乙醚,混合均匀,然后旋转蒸发使其成均匀类脂薄膜覆盖在梨形瓶内底部,向瓶中加入含绞股蓝皂苷的磷酸盐缓冲液,加入玻璃珠,在60℃下旋转振荡30min后,放置2h充分水合,即得。
实施例5
处方 | 用量 |
绞股蓝皂苷 | 100mg |
卵磷脂 | 1000mg |
豆甾醇 | 300mg |
乙醇 | 50mL |
磷酸盐缓冲液(pH=6.8) | 50mL |
工艺
(1)油相的制备:按上述处方取绞股蓝皂苷、卵磷脂、豆甾醇、乙醇,混合均匀,作为油相;
(2)水相的制备:按上述处方取磷酸盐缓冲液作为水相;
(3)脂质体的制备:在恒温搅拌状态下,将油相用针头匀速注入到温度为45℃的水相中,恒温搅拌2h除乙醇,即得。
实施例6
处方 | 用量 |
绞股蓝皂苷 | 200mg |
磷脂酰甘油 | 200mg |
菜油甾醇 | 50mg |
二氯甲烷 | 50mL |
磷酸盐缓冲液(pH=8.0) | 40mL |
工艺
(1)按上述处方取磷脂酰甘油∶菜油甾醇∶二氯甲烷=200mg∶50mg∶50mL制备油相,将油相置于圆底烧瓶中,旋转蒸去二氯甲烷;
(2)200mg绞股蓝皂苷溶于20mL磷酸盐缓冲液(pH=8.0)中,作为水相;
(3)油相中加入20mL含绞股蓝皂苷200mg的磷酸盐缓冲液(pH=8.0),冰浴下,探头超声10min,形成均匀的乳剂;
(4)旋蒸除去有机相,形成胶态后继续加入磷酸盐缓冲液20mL,继续减压蒸发0.5h,探头超声10min,即得。
包封率的测定
精确吸取制备好的绞股蓝脂质体溶液4mL,16000R·min-1高速离心15min。吸取上清液,用pH为7.0的PBS缓冲液定容到10mL容量瓶中。取0,1000μL上述溶液分别置于具塞的试管中,各精密加入5%香草醛-冰醋酸与高氯酸混合液2mL(2∶8),摇匀,密塞,置60℃水浴中加热15min,立即用流水冷却至室温,各精密加入冰醋酸10mL,摇匀,在555nm处用紫外法测得吸光度。另取离心后的沉淀,溶于10%的Trition X-100乙醇溶液(0.5mL)中破乳,用乙醇定容到10mL,摇匀。分别取0、1000μL破乳溶液置于具塞试管中,同理加入显色剂,测吸光度。根据标准曲线,计算包封率。
样品 | 包封率(%) |
实施例1 | 60.2 |
实施例2 | 90.9 |
实施例3 | 45.6 |
实施例4 | 63.4 |
实施例5 | 92.9 |
实施例6 | 44.3 |
粒径、Zeta电位测定
取绞股蓝皂苷脂质体溶液,激光粒径测定仪测定其粒径及其Zeta电位。
样品 | 粒径(nm) | Zeta电位(mV) |
实施例1 | 205.2 | -30.84 |
实施例2 | 203.5 | -33.16 |
实施例3 | 198.9 | -28.66 |
实施例4 | 212.3 | -35.25 |
实施例5 | 201.2 | -35.12 |
实施例6 | 208.9 | -29.63 |
原子力显微镜观察形态(AFM)
取脂质体溶液,干燥,AFM原子力显微镜观察形态。
Claims (10)
1.一种绞股蓝皂苷脂质体,其特征在于它主要是由绞股蓝皂苷、磷脂材料、甾醇所组成。
2.如权利要求1所述的脂质体,其特征在于,所述磷脂材料为:磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、甘油磷脂酸、二磷脂酰甘油、鞘磷脂中的一种或几种的混合物。
3.如权利要求1所述的脂质体,其特征在于,所述甾醇为植物甾醇或胆固醇中的一种或几种的混合物。
4.如权利要求3所述的脂质体,其特征在于,所述植物甾醇为豆甾醇、α-谷甾醇、β-谷甾醇、菜油甾醇、谷甾烷醇的一种或几种的混合物。
5.如权利要求1所述的脂质体,其特征在于,所述脂质体的组成还包括甘露醇、葡萄糖、吐温-80、维生素E或聚乙二醇中的一种或几种。
6.如权利要求1所述的脂质体,其特征在于按重量百分比该脂质体含如下组分:绞股蓝皂苷2%~45%,磷脂材料40~85%,甾醇占制剂重量的10~40%。
7.权利要求1-6任一项所述脂质体的制备方法,其特征在于它包括如下步骤:
(1)原料的选取:
将绞股蓝皂苷溶解于pH为6.8~8.0磷酸缓冲液中,制成质量浓度为0.1~20mg/mL绞股蓝皂苷缓冲液;
当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。磷脂材料∶甾醇∶乙醚∶绞股蓝皂苷缓冲液溶液的比例按100~300份∶15~200份∶2~5份∶5~30份选取,备用;
(2)绞股蓝皂苷脂质体的制备:将磷脂材料、甾醇和乙醚混合,然后旋转蒸发使其成均匀类脂薄膜覆盖在梨形瓶内底部,向瓶中加入绞股蓝皂苷缓冲液溶液,加入玻璃珠,在30~60℃下旋转振荡15~60min后,放置0.5~2h充分水合即得。
8.权利要求1-6任一项所述脂质体的制备方法,其特征在于它包括如下步骤:
(1)油相的制备:当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。绞股蓝皂苷∶磷脂材料∶甾醇∶乙醇的比例按10~30份∶40~300份∶10~100份∶5~50份的比例选取材料,混合均匀,制备油相;
(2)水相的制备:当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。水相为磷酸盐缓冲液5~50份,缓冲液的pH为6.8~8.0;
(3)脂质体的制备:在恒温搅拌状态下,将油相用针头匀速注入到温度为35~60℃的水相中,恒温搅拌1~4h除乙醇,即得。
9.权利要求1-6任一项所述脂质体的制备方法,其特征在于它包括如下步骤:
(1)当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。磷脂材料∶甾醇∶二氯甲烷的比例为40~300份∶10~200份∶50~500份制备油相,将油相置于圆底烧瓶中,旋转蒸去二氯甲烷;
(2)当固体单位为毫克时,液体单位以毫升计,以此类推。10~200份绞股蓝皂苷溶解于10~500份磷酸盐缓冲液中,制成水相;
(3)将水相加入油相中,冰浴下,探头超声5~30min,形成均匀的乳剂;
(4)旋蒸除去有机相,形成胶态后加入磷酸盐缓冲液10~150份,继续减压蒸发0.5~2h,探头超声3~20min,即得。
10.如权利要求1所述的脂质体,其特征在于其可以制成冻干针剂、注射剂、透皮制剂、气雾剂、口服液、溶液剂、眼用制剂、片剂或胶囊剂。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20130327 |