CN102978117B - 一种色球藻培养基配方 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种用于色球藻的培养基，该培养基的配方如下：NaCl 1000～1200mg/L，NH4NO3 100～105mg/L，K2SO4 800～1000mg/L，CaCl2.2H2O 300～400mg/L，MgSO4·7H2O 200～300mg/L，K2HPO4 600～700mg/L，KI 0.5～0.55mg/L，H3BO3 10～12mg/L，MnSO4·4H2O 30～35mg/L，ZnSO4·7H2O 0.4～0.5mg/L，CuSO4·5H2O 0.05～0.1mg/L，CoCl2·6H2O 0.05～0.1mg/L；烟酸0.2～0.3mg/L，维生素B6 0.1～0.2mg/L，维生素B1 0.1～0.2mg/L，NNA 0.05～0.08mg/L，IBA 0.02～0.04mg/L。本发明所述的培养基在培养色球藻时具有存活率高，生长速率快的特点，而且不易被其他细菌污染。

Description

一种色球藻培养基配方
技术领域
本发明涉及一种藻类培养基，特别地涉及一种色球藻的培养基配方。
背景技术
微小色球藻(Chroococcus minutus)属于蓝藻门、色球藻纲、色球藻目、色球藻科、色球藻属。细胞呈球形,单一或分裂后不分离为2个相连的半球形，细胞直径2.5～4.0μm。该藻胶被极薄,无色透明;原生质体均匀,蓝绿色。微小色球藻中所含的粗蛋白含量很高,达干物质的61.82%，总脂含量很低,仅占干物质的1%左右。另外，微小色球藻含有多种氨基酸，其中谷氨酸的含量最高、其后依次为天冬氨酸、丙氨酸和亮氨酸;胱氨酸、组氨酸和甲硫氨酸的含量较低。而微小色球藻中还含有大量以亚油酸为主的不饱和脂肪酸。所有这些营养特点都与螺旋藻的营养特点相似，目前国外已有一些研究者开始尝试将微小色球藻作为饵料微藻用于水产动物的饲养。
为了进一步研究微小色球藻的生理特性，并繁育足够的微小色球藻以供干燥使用，需要对其进行实验室专项培养。但是目前关于色球藻的培养方法少有报道，而专门用于色球藻的培养基的报道就更少了。
发明内容
本发明提供了一种用于色球藻的培养基，该培养基的配方如下：
NaCl 1000～1200mg/L，NH4NO3 100～105mg/L，K2SO4 800～1000mg/L，CaCl2.2H2O 300～400mg/L，MgSO4.7H2O 200～300mg/L，K2HPO4 600～700mg/L，KI 0.5～0.55mg/L，H3BO3 10～12mg/L，MnSO4.4H2O 30～35mg/L，ZnSO4.7H2O 0.4～0.5mg/L，CuSO4.5H2O 0.05～0.1mg/L，CoCl2.6H2O 0.05～0.1mg/L；
烟酸0.2～0.3mg/L，维生素B6 0.1～0.2mg/L，维生素B1 0.1～0.2mg/L，NNA 0.05～0.08mg/L，IBA 0.02～0.04mg/L。
优选地，在上述培养基中添加Mo(NO3)3.5H2O 4～5mg/L。
本发明所述的培养基在培养色球藻时具有存活率高，生长速率快的特点，而且不易被其他细菌污染。下面的实施例以及对比实验可以清楚地反应本发明所述培养基的特点。
具体实施方式
实施例1
配制如下配方的培养基：
NaCl 1000mg/L，NH4NO3 100mg/L，K2SO4 800mg/L，CaCl2.2H2O 300mg/L，MgSO4.7H2O 200mg/L，K2HPO4 600mg/L，KI 0.5mg/L，H3BO3 10mg/L，MnSO4.4H2O 30mg/L，ZnSO4.7H2O 0.4mg/L，CuSO4.5H2O 0.05mg/L，CoCl 2.6H2O 0.05mg/L，Mo(NO3)3.5H2O 4mg/L；
烟酸0.2mg/L，维生素B6 0.1mg/L，维生素B1 0.1mg/L，NNA 0.05mg/L，IBA 0.02mg/L。
取对数生长期的微小色球藻接种到该培养基中进行培养，每天光照10小时，培养箱温度控制在35摄氏度左右，每2天记录培养基中色球藻的细胞密度。
实施例2
NaCl 1200mg/L，NH4NO3 105mg/L，K2SO4 1000mg/L，CaCl2.2H2O 400mg/L，MgSO4.7H2O 300mg/L，K2HPO4 700mg/L，KI 0.55mg/L，H3BO3 12mg/L，MnSO4.4H2O 35mg/L，ZnSO4.7H2O 0.5mg/L，CuSO4.5H2O 0.1mg/L，CoCl2.6H2O 0.1mg/L，Mo(NO3)3.5H2O 5mg/L；
烟酸0.3mg/L，维生素B6 0.2mg/L，维生素B1 0.2mg/L，NNA 0.08mg/L，IBA 0.04mg/L。
取对数生长期的微小色球藻接种到该培养基中进行培养，每天光照10小时，培养箱温度控制在35摄氏度左右，每2天记录培养基中色球藻的细胞密度。
实施例3
NaCl 1100mg/L，NH4NO3 102mg/L，K2SO4 900mg/L，CaCl2.2H2O 350mg/L，MgSO4.7H2O 250mg/L，K2HPO4 650mg/L，KI 0.52mg/L，H3BO3 11mg/L，MnSO4.4H2O 33mg/L，ZnSO4.7H2O 0.45mg/L，CuSO4.5H2O 0.075mg/L，CoCl2.6H2O 0.075mg/L，Mo(NO3)3.5H2O 4.5mg/L；
烟酸0.25mg/L，维生素B6 0.15mg/L，维生素B1 0.15mg/L，NNA 0.06mg/L，IBA 0.03mg/L。
取对数生长期的微小色球藻接种到该培养基中进行培养，每天光照10小时，培养箱温度控制在35摄氏度左右，每2天记录培养基中色球藻的细胞密度。
实施例4
NaCl 1100mg/L，NH4NO3 102mg/L，K2SO4 900mg/L，CaCl2.2H2O 350mg/L，MgSO4.7H2O 250mg/L，K2HPO4 650mg/L，KI 0.52mg/L，H3BO3 11mg/L，MnSO4.4H2O 33mg/L，ZnSO4.7H2O 0.45mg/L，CuSO4.5H2O 0.075mg/L，CoCl2.6H2O 0.075mg/L；
烟酸0.25mg/L，维生素B6 0.15mg/L，维生素B1 0.15mg/L，NNA 0.06mg/L，IBA 0.03mg/L。
取对数生长期的微小色球藻接种到该培养基中进行培养，每天光照10小时，培养箱温度控制在35摄氏度左右，每2天记录培养基中色球藻的细胞密度。
培养基对比实验
使用BG11，Zarrouk，JM这三种培养基作为对照培养基，与实施例1－4进行对比，对比的结果如下表所示：
从该表可以看出，使用本发明所提供的培养基比使用对比培养基能更快速地使微小色球藻增殖，达到色球藻密度顶峰的时间比使用对照的培养基快了2天，而且色球藻能达到的最高浓度也高于对照培养基。说明了本发明提供的培养基具有明显优势。
另外，可以注意到实施例1－3的培养基中均添加了Mo(NO3)3.5H2O，而实施例4中的培养基中未添加Mo(NO3)3.5H2O。从上表看，当微小色球藻处于增长期时加不加Mo(NO3)3.5H2O效果不明显。但是我们通过实验可以看到，实施例4中的色球藻在达到浓度顶峰之后色球藻死亡的速度远远快于实施例1－3，因此添加Mo(NO3)3.5H2O可以使色球藻在培养基中保持浓度高峰水平的时间大大增加，可以增加2天左右。
对于Mo(NO3)3.5H2O的添加计量，我们做了如下实验。直接取实施例4中第6天的培养液，在其中加入不同计量的Mo(NO3)3.5H2O，然后继续培养，从而确定合适的Mo(NO3)3.5H2O的添加计量。通过下表的数据可以看出，Mo(NO3)3.5H2O的添加计量在4～5mg/L的范围内时效果最好。
Mo(NO3)3.5H2O(mg/L) 第0天(×106·ml) 第2天(×106·ml) 第4天(×106·ml)
1 83.91 61.44 38.69
2 83.91 63.64 40.44
3 83.91 70.88 58.61
4 83.91 75.69 67.98
5 83.91 76.08 68.36
6 83.91 74.65 62.34
本领域技术人员可以根据本发明公开的内容和所掌握的本领域技术对本发明内容作出替换或变型，但是这些替换或变型都不应视为脱离本发明构思的，这些替换或变型均在本发明要求保护的权利范围内。

Claims (1)

1.一种用于色球藻的培养基，该培养基的配方如下：
NaCl1000～1200mg/L，NH4NO3100～105mg/L，K2SO4800～1000mg/L，CaCl2.2H2O300～400mg/L，MgSO4.7H2O200～300mg/L，K2HPO4600～700mg/L，KI0.5～0.55mg/L，H3BO310～12mg/L，MnSO4.4H2O30～35mg/L，ZnSO4.7H2O0.4～0.5mg/L，CuSO4.5H2O0.05～0.1mg/L，CoCl2.6H2O0.05～0.1mg/L；
烟酸0.2～0.3mg/L，维生素B60.1～0.2mg/L，维生素B10.1～0.2mg/L，NNA0.05～0.08mg/L，IBA0.02～0.04mg/L，Mo(NO3)3.5H2O4～5mg/L。
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"NICKING ENDONUCLEASE IN CYANOBACTERIA";Vinodhini Sundararajan 等;《Recent Research in Science and Technology》;20101231;第2卷(第10期);第63-65页 *
"微小色球藻的培养及其营养组成分析";黄旭雄 等;《上海水产大学学报》;20080131;第17卷(第1期);第77页摘要 *
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