CN102976801A - 利用餐饮垃圾制备功能性微生物有机肥的生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了利用餐饮垃圾制备功能性微生物有机肥的生产方法。本发明对餐饮垃圾进行固液分离，分别利用，既达到了节约培养菌种时所购培养基的花费，又对垃圾的利用达到充分化和最大化，且不产生二次污染。对发酵底物的第一次发酵，采用大量有益菌的接种，以短时间快速繁殖有益菌，并使其在发酵底物中占据绝对优势，起到灭菌的效果，减少了灭菌所需的能耗和投入，同时也缩短了对底物“腐熟”的时间。二次发酵时选择运用特异地功能性菌种，能起到对植物防病、抗病、治病的效果，充分体现了产品的附加值。本发明对餐饮垃圾处理合理且彻底，并通过功能性菌种使用生产出实用性更强价值更高的功能性微生物肥料，实现废物利用价值的最大化且绿色无污染。
Description
技术领域：
本发明属于微生物发酵领域，具体涉及一种利用餐饮垃圾制备功能性微生物有机肥的生产方法。
背景技术：
餐饮垃圾，又叫餐厨垃圾，是指厨房食品加工过程中产生的废料和餐桌上吃剩的食品,是居民在生活消费过程中的一种生活废物,前者和后者产生的垃圾在时下的餐馆各占50%。主要包括：米和面粉类食品残余、蔬菜、植物油、动物油，肉骨、鱼刺等等。从化学组成上,有淀粉、纤维素、蛋白质、脂类和无机盐。其中以有机组分为主，含有大量的淀粉和纤维素,无机盐中NaCl的含量较高，同时含有一定量的钙、镁、钾、铁等微量元素。
餐饮垃圾的处理一直是令世界各国头痛的一个大问题。我国餐饮垃圾的回用率较低，长期以来，国内对餐饮垃圾没有具体管理的机构和办法，无指定销毁地点和渠道。大部分城市餐饮垃圾(60%~70%)直接作为饲料供给养殖场喂猪，导致动物和人类疾病的互相感染；少量的餐饮垃圾未经处理直接排入下水道，以致出现地沟油提炼食用油；餐饮垃圾常同生活垃圾混合进行处理。另外，餐饮垃圾极易腐败，散发出恶臭气体，给暂存地点、转运过程中的环境造成很大的影响。
目前，处理餐饮垃圾的主要方法有：填埋、粉碎直排、简单堆肥、生物处理机、生物制气等。相比之下，填埋或粉碎直排，均易造成二次污染；生物处理机和生物制气的技术要求、成本较高，不宜推广；简单的生物堆肥制备有机肥，未能充分利用餐厨垃圾中的丰富的营养物质，生产成本相对较高，企业难以维持。
与此同时，随着对功能性微生物研究的深入，人们发现微生物既可以通过自身一些酶系的作用，直接或间接为植物提供养分（如固氮菌、解磷菌），又可以通过生物间的竞争作用、抗菌作用、重寄生作用、交叉保护作用及诱发抗病性等来抑制某些病原菌的存活和活动，达到防治植物病害的效果。因其无污染，无耐药性等优势，备受关注。
将餐饮垃圾固液分离，使其成为营养丰富的微生物培养基，制备功能性微生物肥料，目前鲜见有相关报道。
发明内容：
本发明的目的是提供一种通过复合微生物结合酶制剂，降解餐饮垃圾进而将餐饮垃圾转化为功能性微生物有机肥的利用餐饮垃圾制备功能性微生物有机肥的生产方法。
本发明的利用餐饮垃圾制备功能性微生物有机肥的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：
收集新鲜的餐厨垃圾，固液分离，得到固体垃圾和液体垃圾，将固体垃圾中的碎玻璃和塑料挑出；
（a）发酵底物的制备：该发酵底物按总质量百分数100%计，包括固体垃圾35~70%，稻壳3~10%，秸秆5~15%，木薯渣5~10%，草木灰5~10%，甘蔗渣3~10%，锯末5~10%，糠醛渣3~10%，将上述原料分别或混合粉碎后，混合均匀，制得发酵底物；
（b）将假丝酵母属（Candida）的菌按每千克发酵底物接种（0.3~2）×109CFU的量接种到发酵底物中，将枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）按每千克发酵底物接种（0.5~2）×109CFU的量接种到发酵底物中，将乳杆菌属（Lactobacillus）的菌按每千克发酵底物接种（0.5~2）×109CFU的量接种到发酵底物中，将黑曲霉（Aspergillusniger）按每千克发酵底物接种（1~3）×109CFU的量接种到发酵底物中，搅拌均匀，并调节含水量至40~65%，堆垛发酵，进行第一次发酵腐熟，发酵时间为3~10天；
（c）将第一次发酵腐熟完成的发酵物，翻堆接种枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）和链霉菌属（Streptomyces）的菌，接种量分别为在每千克发酵物中接种（0.3~1.5）×109CFU的枯草芽孢杆菌，接种（0.5~2）×109CFU的荧光假单胞菌和接种（0.5~2）×109CFU的链霉菌属的菌，用氢氧化钙或稀盐酸调整发酵物的pH值至6.5～7.5，水分含量为35～50%，温度升高保持在50℃~70℃之间，翻堆，发酵2~7天后，冷风干燥，即得成品功能性微生物有机肥。
所述的堆垛发酵，其堆垛高度优选为0.8~1.5m。
所述的假丝酵母属（Candida）的菌是通过以下方法制备的：将假丝酵母属的菌从假丝酵母菌斜面培养基上挑去一环接种至液体假丝酵母菌种子培养基中，于28~37℃，150~200rpm，振荡培养12～48h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得假丝酵母菌一级菌种；然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有假丝酵母菌种子培养基的发酵罐中，温度为28～35℃，搅拌转速200～300rpm，通气量2～4L/（L·min），发酵时间24～72小时，得到假丝酵母属的菌液，所述的假丝酵母菌斜面培养基含葡萄糖5g/L，蛋白胨2g/L，酵母膏1g/L，氯化钠0.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6.5～7.5；所述的假丝酵母菌种子培养基含蛋白胨3～4g/L，酵母膏7～9g/L，葡萄糖3～5g/L，液体垃圾50～150mL/L，余量为水，pH6.5～7.5。
所述的枯草芽孢杆菌是通过以下方法制备的：将枯草芽孢杆菌从枯草芽孢杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体枯草芽孢杆菌种子培养基中，于28～37℃，150～230rpm，振荡培养24～48h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得枯草芽孢杆菌一级菌种，然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有枯草芽孢杆菌种子培养基的发酵罐中，温度28～35℃，搅拌转速250～350rpm，通气量1～2L/（L·min），发酵时间24～72小时，得到枯草芽孢杆菌液，所述的枯草芽孢杆菌斜面培养基含蛋白胨9～11g/L，牛肉膏4.5～5.5g/L，葡萄糖9～11g/L，氯化钠4.5～5.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6.5～7.5，所述的枯草芽孢杆菌种子培养基含蛋白胨4～5g/L，酵母膏2～3g/L，葡萄糖3～5g/L，液体垃圾50～200mL/L，余量为水，pH6.5～7.5。
所述的乳杆菌属（Lactobacillus）的菌是通过以下方法制备的：将乳杆菌从乳杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体乳杆菌种子培养基中，于28～37℃，静置培养24～60h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得乳杆菌一级菌种，然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有乳杆菌种子培养基的发酵罐中，温度35～40℃，搅拌转速100～250rpm，发酵时间24～72小时，得到乳杆菌菌液，所述的乳杆菌斜面培养基含脱脂奶粉100.0g/L，酵母粉1g/L，K2HPO45g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6～7；所述的乳杆菌种子培养基含蛋白胨2～3g/L，葡萄糖2～3g/L，液体垃圾50～100mL/L，余量为水，pH6.0～7.0。
所述的黑曲霉（Aspergillusniger）是通过以下方法制备的：将黑曲霉从黑曲霉斜面培养基上挑去一环接种至液体黑曲霉菌种子培养基中，于28～37℃，110～160rpm振荡培养12～48h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得黑曲霉一级菌种，然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有黑曲霉菌种子培养基的发酵罐中，温度28～37℃，搅拌转速200～300rpm，通气量2～4L/（L·min），发酵时间24～72小时，得到黑曲霉菌菌液，所述的黑曲霉斜面培养基含可溶性淀粉40g/L，柠檬酸铵10g/L，磷酸二氢钾3g/L，氯化钙0.1g/L，七水合硫酸亚铁0.01g/L，七水合硫酸镁1g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6～7；所述的黑曲霉菌种子培养基含可溶性淀粉10～20g/L，柠檬酸氢二铵7～10g/L，氯化钙10～15g/L，液体垃圾20～50mL/L，余量为水，pH5.0～5.5。
所述的荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）是通过以下方法制备的：将荧光假单胞菌从荧光假单胞菌斜面培养基上挑去一环接种至液体荧光假单胞菌种子培养基中，于28～37℃，150～230rpm，振荡培养12～48h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得荧光假单胞菌一级菌种，然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有荧光假单胞菌种子培养基的发酵罐中，温度35～40℃，搅拌转速200～300rpm，通气量1～2L/（L·min），发酵时间24～72小时，得到荧光假单胞菌菌液，所述的荧光假单胞菌斜面培养基含蛋白胨20g/L，甘油10mL/L，磷酸氢二钾1.5g/L，七水合硫酸镁1.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6.5～7.5；所述的荧光假单胞菌种子培养基含蔗糖30～40g/L，甘油10～15%，蛋白胨3～5g/L，磷酸二氢钾3～5g/L，磷酸氢二钾1～3g/L，液体垃圾50～120mL/L，余量为水，pH6.5～7.5。
所述的链霉菌属（Streptomyces）的菌是通过以下方法制备的：将链霉菌属的菌从链霉菌斜面培养基上挑去一环接种至液体链霉菌种子培养基中，于28～37℃，150～230rpm，振荡培养24～72h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得链霉菌一级菌种；然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有链霉菌种子培养基的发酵罐中，温度35～40℃，搅拌转速250～350rpm，通气量2～4L/（L·min）发酵时间24～72小时，得到链霉菌菌液，所述的链霉菌斜面培养基含可溶性淀粉20g/L，硝酸钾1g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，氯化钠0.5g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸亚铁0.01g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6～7；所述的链霉菌种子培养基含胰蛋白胨3～5g/L，酵母浸膏1～3g/L，麦芽浸粉2～5g/L，葡萄糖1～3g/L，液体垃圾50～100mL/L，余量为水，pH6.5～7.5。
所述的假丝酵母属（Candida）的菌优选为热带假丝酵母（Candida tropicalis）。
所述的链霉菌属（Streptomyces）的菌优选为细黄链霉菌（Streptomyces microflavus）。
所述的乳杆菌属（Lactobacillus）的菌优选为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。
与现有技术相比，本发明具有下述有益效果：
本发明对餐饮垃圾进行固液分离，分别利用，既达到了节约培养菌种时所购培养基的花费，又对垃圾的利用达到充分化和最大化，且不产生二次污染。对发酵底物的第一次发酵，采用大量有益菌的接种，以短时间、快速繁殖有益菌，并使其在发酵底物中占据绝对优势，起到灭菌的效果，减少了灭菌所需的能耗和投入，同时，也缩短了对底物“腐熟”的时间。二次发酵时，选择运用特异地功能性菌种，如特别选取了可产生大量蛋白水解物质和抗生素类物质的枯草芽孢杆菌、具有良好的促根生长效果，并可预防和抑制番茄、茄子、辣椒、烟草等茄科作物的青枯病、姜瘟病等土传病害的发生，且具有促进种子萌发、提高发芽势和出苗率等功能特点的荧光性假单胞菌、可抑制土传病虫害，如线虫病的放线菌，使得成品中，除了具备植物生长所需的营养元素外，还能起到对植物防病、抗病、治病的效果，充分体现了产品的附加值。本发明制备得到的功能性微生物有机肥施用于朝天椒种植试验中，与正常施用有机肥和化肥不进行病害防护或正常施用有机肥和化肥进行病害防护的两个对照相比，本发明的功能性微生物有机肥的效果显著好于两个对照。
由此可见，本发明同时解决了餐饮垃圾处理和低成本制作功能性微生物有机肥两个关键性问题。本发明对餐饮垃圾处理合理且彻底，并通过功能性菌种使用，生产出实用性更强、价值更高的功能性微生物肥料，实现废物利用价值的最大化，且绿色、无污染。
具体实施方式：
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1：
收集新鲜的餐厨垃圾，固液分离，得到固体垃圾和液体垃圾，将固体垃圾中的碎玻璃和塑料等杂质挑出。
1、热带假丝酵母菌（Candida tropicalis）菌液的制备：将热带假丝酵母菌（购自中国典型培养物保藏中心（CCTCC），其保藏编号为：CCTCC AY92045）从假丝酵母菌斜面培养基上挑去一环接种至液体假丝酵母菌种子培养基中，于28℃，150rpm，振荡培养24h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得热带假丝酵母菌一级菌种；然后按3%（v/v）的接种量接入盛有假丝酵母菌种子培养基的发酵罐中，温度为28℃，搅拌转速250rpm，通气量3L/（L·min），发酵时间24小时，得到热带假丝酵母菌液，所述的假丝酵母菌斜面培养基含葡萄糖5g/L，蛋白胨2g/L，酵母膏1g/L，氯化钠0.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的假丝酵母菌种子培养基含蛋白胨4g/L，酵母膏8g/L，葡萄糖4g/L，液体垃圾100mL/L，余量为水，pH7。用假丝酵母菌种子培养基调节热带假丝酵母菌液的浓度为1×108CFU/ml。
2、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌液的制备：将枯草芽孢杆菌（购自中国典型培养物保藏中心（CCTCC），其保藏编号为：CCTCC AB205139）从枯草芽孢杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体枯草芽孢杆菌种子培养基中，于28℃，150rpm，振荡培养24h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得枯草芽孢杆菌一级菌种，然后按3%（v/v）的接种量接入盛有枯草芽孢杆菌种子培养基的发酵罐中，温度28℃，搅拌转速250rpm，通气量1.5L/（L·min），发酵时间24小时，得到枯草芽孢杆菌液，所述的枯草芽孢杆菌斜面培养基含蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，葡萄糖10g/L，氯化钠5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的枯草芽孢杆菌种子培养基含蛋白胨5g/L，酵母膏3g/L，葡萄糖4g/L，液体垃圾150mL/L，余量为水，pH7，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用枯草芽孢杆菌种子培养基调节枯草芽孢杆菌液的浓度为1×108CFU/ml。
3、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）菌液的制备：将植物乳杆菌（购自中国典型培养物保藏中心（CCTCC），其保藏编号为：CCTCC M 206032）从乳杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体乳杆菌种子培养基中，于28℃，静置培养24h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得植物乳杆菌一级菌种，然后按3%（v/v）的接种量接入盛有乳杆菌种子培养基的发酵罐中，温度35℃，搅拌转速150rpm，发酵时间24小时，得到植物乳杆菌菌液，所述的乳杆菌斜面培养基含脱脂奶粉100.0g/L，酵母粉1g/L，K2HPO45g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的乳杆菌种子培养基含蛋白胨3g/L，葡萄糖3g/L，液体垃圾50mL/L，余量为水，pH6.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用乳杆菌种子培养基调节植物乳杆菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
4、黑曲霉（Aspergillus niger）菌液的制备：将黑曲霉（购自中国典型培养物保藏中心（CCTCC），其保藏编号为：CCTCC AF93305）从黑曲霉斜面培养基上挑去一环接种至液体黑曲霉菌种子培养基中，于30℃，120rpm振荡培养24h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得黑曲霉一级菌种，然后按3%（v/v）的接种量接入盛有黑曲霉菌种子培养基的发酵罐中，温度28℃，搅拌转速200rpm，通气量2L/（L·min），发酵时间28小时，得到黑曲霉菌菌液，所述的黑曲霉斜面培养基含可溶性淀粉40g/L，柠檬酸铵10g/L，磷酸二氢钾3g/L，氯化钙0.1g/L，七水合硫酸亚铁0.01g/L，七水合硫酸镁1g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的黑曲霉菌种子培养基含可溶性淀粉15g/L，柠檬酸氢二铵8g/L，氯化钙12g/L，液体垃圾30mL/L，余量为水，pH5.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用黑曲霉菌种子培养基调节黑曲霉菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
5、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）菌液的制备：将荧光假单胞菌（购自中国典型培养物保藏中心（CCTCC），其保藏编号为：CCTCC AB 93119）从荧光假单胞菌斜面培养基上挑去一环接种至液体荧光假单胞菌种子培养基中，于28℃，180rpm，振荡培养24h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得荧光假单胞菌一级菌种，然后按3%（v/v）的接种量接入盛有荧光假单胞菌种子培养基的发酵罐中，温度35℃，搅拌转速200rpm，通气量1L/（L·min），发酵时间24小时，得到荧光假单胞菌菌液，所述的荧光假单胞菌斜面培养基含蛋白胨20g/L，甘油10mL/L，磷酸氢二钾1.5g/L，七水合硫酸镁1.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的荧光假单胞菌种子培养基含蔗糖35g/L，甘油10%，蛋白胨4g/L，磷酸二氢钾4g/L，磷酸氢二钾2g/L，液体垃圾70mL/L，余量为水，pH7，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用荧光假单胞菌种子培养基调节荧光假单胞菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
6、细黄链霉菌（Streptomyces microflavus）菌液的制备：将细黄链霉菌（购自广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为：GIM4.26）从链霉菌斜面培养基上挑去一环接种至液体链霉菌种子培养基中，于30℃，180rpm，振荡培养24h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得细黄链霉菌一级菌种；然后按3%（v/v）的接种量接入盛有链霉菌种子培养基的发酵罐中，温度35℃，搅拌转速250rpm，通气量2L/（L·min）发酵时间24小时，得到细黄链霉菌菌液，所述的链霉菌斜面培养基含可溶性淀粉20g/L，硝酸钾1g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，氯化钠0.5g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸亚铁0.01g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的链霉菌种子培养基含胰蛋白胨4g/L，酵母浸膏2g/L，麦芽浸粉2g/L，葡萄糖2g/L，液体垃圾80mL/L，余量为水，pH7，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用链霉菌种子培养基调节细黄链霉菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
5、发酵底物的制备：该发酵底物按总质量百分数100%计，包括固体垃圾50%，稻壳5%，秸秆5%，木薯渣10%，草木灰5%，甘蔗渣5%，锯末10%，糠醛渣10%，将上述原料分别用粉碎机碎后，混合均匀，制得发酵底物；
6、将热带假丝酵母菌（Candida tropicalis）菌液按每千克发酵底物接种1×109CFU的量接种到发酵底物中，将枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）按每千克发酵底物接种1×109CFU的量接种到发酵底物中，将植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）按每千克发酵底物接种1×109CFU的量接种到发酵底物中，将黑曲霉（Aspergillus niger）按每千克发酵底物接种2×109CFU的量接种到发酵底物中，搅拌均匀，并调节含水量至50%，堆垛发酵，堆垛高度1m，进行第一次发酵腐熟，发酵时间为5天；
7、将第一次发酵腐熟完成的发酵物，翻堆接种枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）和细黄链霉菌（Streptomyces microflavus），接种量分别为在每千克发酵物中接种1×109CFU的枯草芽孢杆菌，接种1×109CFU的荧光假单胞菌和接种2×109CFU的细黄链霉菌，用氢氧化钙或稀盐酸调整发酵物的pH值至7，水分含量为45%，温度升高保持在50℃~70℃之间，翻堆，发酵3天后，冷风干燥，即得成品功能性微生物有机肥。
对所制得成品功能性微生物有机肥随机取样，测定各项指标如下：有效活菌数：1.2×109cfu/g；杂菌率：0.05%；有机质含量（以干基计）：41%；总养分（氮+五氧化二磷+氧化钾）含量（以干基计）：7.9%；水分：11.2%；pH：7.3。
在广东省恩平市大槐镇对朝天椒种植试验中，以正常施用有机肥和化肥，但未进行病害防护为对照组（CK1）；正常施用有机肥和化肥，使用药物防病处理作为处理组1（T1）；将本实施例的成品功能性微生物有机肥取代有机肥，未进行病害防护处理的为处理组2（T2），并设定每组3个重复，进行随机试验，其它的虫害防治、病害治理、灌溉等工作正常进行，至采摘时，测定各个指标如表1：
表1：功能性微生物有机肥的施用效果
由表1可以看出，与正常施用有机肥和化肥不进行病害防护或正常施用有机肥和化肥进行病害防护的两个对照相比，本发明的功能性微生物有机肥的在平均亩产，平均株高，单株果数，平均单个果重，发病率等效果均显著好于两个对照。
实施例2：
收集新鲜的餐厨垃圾，固液分离，得到固体垃圾和液体垃圾，将固体垃圾中的碎玻璃和塑料等杂质挑出。
1、热带假丝酵母菌（Candida tropicalis）菌液的制备：将热带假丝酵母菌从假丝酵母菌斜面培养基上挑去一环接种至液体假丝酵母菌种子培养基中，于30℃，150rpm，振荡培养48h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得热带假丝酵母菌一级菌种；然后按5%（v/v）的接种量接入盛有假丝酵母菌种子培养基的发酵罐中，温度为30℃，搅拌转速200rpm，通气量2L/（L·min），发酵时间24小时，得到热带假丝酵母菌菌液，所述的假丝酵母菌斜面培养基含葡萄糖5g/L，蛋白胨2g/L，酵母膏1g/L，氯化钠0.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的假丝酵母菌种子培养基含蛋白胨4g/L，酵母膏7g/L，葡萄糖5g/L，液体垃圾50mL/L，余量为水，pH6.5。用假丝酵母菌种子培养基调节热带假丝酵母菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
2、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌液的制备：将枯草芽孢杆菌从枯草芽孢杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体枯草芽孢杆菌种子培养基中，于30℃，160rpm，振荡培养36h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得枯草芽孢杆菌一级菌种，然后按5%（v/v）的接种量接入盛有枯草芽孢杆菌种子培养基的发酵罐中，温度30℃，搅拌转速250rpm，通气量1L/（L·min），发酵时间24小时，得到枯草芽孢杆菌液，所述的枯草芽孢杆菌斜面培养基含蛋白胨9g/L，牛肉膏5.5g/L，葡萄糖9g/L，氯化钠5.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的枯草芽孢杆菌种子培养基含蛋白胨4g/L，酵母膏3g/L，葡萄糖3g/L，液体垃圾200mL/L，余量为水，pH6.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用枯草芽孢杆菌种子培养基调节枯草芽孢杆菌液的浓度为1×108CFU/ml。
3、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）菌液的制备：将植物乳杆菌从乳杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体乳杆菌种子培养基中，于28℃，静置培养60h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得植物乳杆菌一级菌种，然后按5%（v/v）的接种量接入盛有乳杆菌种子培养基的发酵罐中，温度35℃，搅拌转速100rpm，发酵时间72小时，得到植物乳杆菌菌液，所述的乳杆菌斜面培养基含脱脂奶粉100.0g/L，酵母粉1g/L，K2HPO45g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的乳杆菌种子培养基含蛋白胨3g/L，葡萄糖3g/L，液体垃圾50mL/L，余量为水，pH6，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用乳杆菌种子培养基调节植物乳杆菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
4、黑曲霉（Aspergillus niger）菌液的制备：将黑曲霉从黑曲霉斜面培养基上挑去一环接种至液体黑曲霉菌种子培养基中，于28℃，160rpm振荡培养48h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得黑曲霉一级菌种，然后按5%（v/v）的接种量接入盛有黑曲霉菌种子培养基的发酵罐中，温度30℃，搅拌转速220rpm，通气量2.5L/（L·min），发酵时间24小时，得到黑曲霉菌菌液，所述的黑曲霉斜面培养基含可溶性淀粉40g/L，柠檬酸铵10g/L，磷酸二氢钾3g/L，氯化钙0.1g/L，七水合硫酸亚铁0.01g/L，七水合硫酸镁1g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的黑曲霉菌种子培养基含可溶性淀粉10g/L，柠檬酸氢二铵10g/L，氯化钙10g/L，液体垃圾50mL/L，余量为水，pH5，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用黑曲霉菌种子培养基调节黑曲霉菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
5、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）菌液的制备：将荧光假单胞菌从荧光假单胞菌斜面培养基上挑去一环接种至液体荧光假单胞菌种子培养基中，于28℃，230rpm，振荡培养48h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得荧光假单胞菌一级菌种，然后按5%（v/v）的接种量接入盛有荧光假单胞菌种子培养基的发酵罐中，温度35℃，搅拌转速230rpm，通气量1.2L/（L·min），发酵时间24小时，得到荧光假单胞菌菌液，所述的荧光假单胞菌斜面培养基含蛋白胨20g/L，甘油10mL/L，磷酸氢二钾1.5g/L，七水合硫酸镁1.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的荧光假单胞菌种子培养基含蔗糖30g/L，甘油10%，蛋白胨5g/L，磷酸二氢钾3g/L，磷酸氢二钾3g/L，液体垃圾50mL/L，余量为水，pH6.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用荧光假单胞菌种子培养基调节荧光假单胞菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
6、细黄链霉菌（Streptomyces microflavus）菌液的制备：将细黄链霉菌从链霉菌斜面培养基上挑去一环接种至液体链霉菌种子培养基中，于28℃，230rpm，振荡培养72h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得细黄链霉菌一级菌种；然后按5%（v/v）的接种量接入盛有链霉菌种子培养基的发酵罐中，温度35℃，搅拌转速300rpm，通气量2L/（L·min）发酵时间72小时，得到细黄链霉菌菌液，所述的链霉菌斜面培养基含可溶性淀粉20g/L，硝酸钾1g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，氯化钠0.5g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸亚铁0.01g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的链霉菌种子培养基含胰蛋白胨3g/L，酵母浸膏3g/L，麦芽浸粉3g/L，葡萄糖1g/L，液体垃圾100mL/L，余量为水，pH6.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用链霉菌种子培养基调节细黄链霉菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
5、发酵底物的制备：该发酵底物按总质量百分数100%计，包括固体垃圾70%，稻壳3%，秸秆6%，木薯渣5%，草木灰5%，甘蔗渣3%，锯末5%，糠醛渣3%，将上述原料分别用粉碎机碎后，混合均匀，制得发酵底物；
6、将热带假丝酵母菌（Candida tropicalis）菌液按每千克发酵底物接种0.3×109CFU的量接种到发酵底物中，将枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）按每千克发酵底物接种0.5×109CFU的量接种到发酵底物中，将植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）按每千克发酵底物接种0.5×109CFU的量接种到发酵底物中，将黑曲霉（Aspergillus niger）按每千克发酵底物接种1×109CFU的量接种到发酵底物中，搅拌均匀，并调节含水量至40%，堆垛发酵，堆垛高度0.8m，进行第一次发酵腐熟，发酵时间为10天；
7、将第一次发酵腐熟完成的发酵物，翻堆接种枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）和细黄链霉菌（Streptomyces microflavus），接种量分别为在每千克发酵物中接种0.3×109CFU的枯草芽孢杆菌，接种0.5×109CFU的荧光假单胞菌和接种0.5×109CFU的细黄链霉菌，用氢氧化钙或稀盐酸调整发酵物的pH值至6.5，水分含量为35%，温度升高保持在50℃~70℃之间，翻堆，发酵7天后，冷风干燥，即得成品功能性微生物有机肥。
对所制得成品功能性微生物有机肥随机取样，测定各项指标如下：有效活菌数：9.1×108cfu/g；杂菌率：0.08%；有机质含量（以干基计）：38%；总养分（氮+五氧化二磷+氧化钾）含量（以干基计）：8.0%；水分：10.8%；pH：6.7。
实施例3：
收集新鲜的餐厨垃圾，固液分离，得到固体垃圾和液体垃圾，将固体垃圾中的碎玻璃和塑料等杂质挑出。
1、热带假丝酵母菌（Candida tropicalis）菌液的制备：将热带假丝酵母菌从假丝酵母菌斜面培养基上挑去一环接种至液体假丝酵母菌种子培养基中，于37℃，200rpm，振荡培养12h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得热带假丝酵母菌一级菌种；然后按1%（v/v）的接种量接入盛有假丝酵母菌种子培养基的发酵罐中，温度为35℃，搅拌转速300rpm，通气量4L/（L·min），发酵时间72小时，得到热带假丝酵母菌液，所述的假丝酵母菌斜面培养基含葡萄糖5g/L，蛋白胨2g/L，酵母膏1g/L，氯化钠0.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的假丝酵母菌种子培养基含蛋白胨3g/L，酵母膏9g/L，葡萄糖3g/L，液体垃圾150mL/L，余量为水，pH7.5。用假丝酵母菌种子培养基调节热带假丝酵母菌液的浓度为1×108CFU/ml。
2、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌液的制备：将枯草芽孢杆菌从枯草芽孢杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体枯草芽孢杆菌种子培养基中，于37℃，230rpm，振荡培养48h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得枯草芽孢杆菌一级菌种，然后按1%（v/v）的接种量接入盛有枯草芽孢杆菌种子培养基的发酵罐中，温度35℃，搅拌转速350rpm，通气量2L/（L·min），发酵时间72小时，得到枯草芽孢杆菌液，所述的枯草芽孢杆菌斜面培养基含蛋白胨11g/L，牛肉膏4.5g/L，葡萄糖11g/L，氯化钠4.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的枯草芽孢杆菌种子培养基含蛋白胨5g/L，酵母膏2g/L，葡萄糖5g/L，液体垃圾50mL/L，余量为水，pH7.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用枯草芽孢杆菌种子培养基调节枯草芽孢杆菌液的浓度为1×108CFU/ml。
3、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）菌液的制备：将植物乳杆菌从乳杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体乳杆菌种子培养基中，于37℃，静置培养24h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得植物乳杆菌一级菌种，然后按1%（v/v）的接种量接入盛有乳杆菌种子培养基的发酵罐中，温度40℃，搅拌转速250rpm，发酵时间24小时，得到植物乳杆菌菌液，所述的乳杆菌斜面培养基含脱脂奶粉100.0g/L，酵母粉1g/L，K2HPO45g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的乳杆菌种子培养基含蛋白胨2g/L，葡萄糖2g/L，液体垃圾100mL/L，余量为水，pH7，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用乳杆菌种子培养基调节植物乳杆菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
4、黑曲霉（Aspergillus niger）菌液的制备：将黑曲霉从黑曲霉斜面培养基上挑去一环接种至液体黑曲霉菌种子培养基中，于37℃，110rpm振荡培养12h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得黑曲霉一级菌种，然后按1%（v/v）的接种量接入盛有黑曲霉菌种子培养基的发酵罐中，温度37℃，搅拌转速300rpm，通气量4L/（L·min），发酵时间72小时，得到黑曲霉菌菌液，所述的黑曲霉斜面培养基含可溶性淀粉40g/L，柠檬酸铵10g/L，磷酸二氢钾3g/L，氯化钙0.1g/L，七水合硫酸亚铁0.01g/L，七水合硫酸镁1g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的黑曲霉菌种子培养基含可溶性淀粉20g/L，柠檬酸氢二铵7g/L，氯化钙15g/L，液体垃圾20mL/L，余量为水，pH5.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用黑曲霉菌种子培养基调节黑曲霉菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
5、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）菌液的制备：将荧光假单胞菌从荧光假单胞菌斜面培养基上挑去一环接种至液体荧光假单胞菌种子培养基中，于37℃，150rpm，振荡培养12h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得荧光假单胞菌一级菌种，然后按1%（v/v）的接种量接入盛有荧光假单胞菌种子培养基的发酵罐中，温度40℃，搅拌转速300rpm，通气量2L/（L·min），发酵时间72小时，得到荧光假单胞菌菌液，所述的荧光假单胞菌斜面培养基含蛋白胨20g/L，甘油10mL/L，磷酸氢二钾1.5g/L，七水合硫酸镁1.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的荧光假单胞菌种子培养基含蔗糖40g/L，甘油15%，蛋白胨3g/L，磷酸二氢钾5g/L，磷酸氢二钾1g/L，液体垃圾120mL/L，余量为水，pH7，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用荧光假单胞菌种子培养基调节荧光假单胞菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
6、细黄链霉菌（Streptomyces microflavus）菌液的制备：将细黄链霉菌从链霉菌斜面培养基上挑去一环接种至液体链霉菌种子培养基中，于37℃，150rpm，振荡培养24h，镜检纯度，菌株处于对数生长期，停止培养，制得细黄链霉菌一级菌种；然后按1%（v/v）的接种量接入盛有链霉菌种子培养基的发酵罐中，温度40℃，搅拌转速350rpm，通气量4L/（L·min）发酵时间28小时，得到细黄链霉菌菌液，所述的链霉菌斜面培养基含可溶性淀粉20g/L，硝酸钾1g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，氯化钠0.5g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸亚铁0.01g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为7，灭菌条件：115℃下灭菌20min；所述的链霉菌种子培养基含胰蛋白胨5g/L，酵母浸膏1g/L，麦芽浸粉5g/L，葡萄糖3g/L，液体垃圾50mL/L，余量为水，pH7.5，灭菌条件：115℃下灭菌20min。用链霉菌种子培养基调节细黄链霉菌菌液的浓度为1×108CFU/ml。
5、发酵底物的制备：该发酵底物按总质量百分数100%计，包括固体垃圾35%，稻壳10%，秸秆15%，木薯渣5%，草木灰10%，甘蔗渣10%，锯末8%，糠醛渣7%，将上述原料分别用粉碎机碎后，混合均匀，制得发酵底物；
6、将热带假丝酵母菌（Candida tropicalis）菌液按每千克发酵底物接种2×109CFU的量接种到发酵底物中，将枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）按每千克发酵底物接种2×109CFU的量接种到发酵底物中，将植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）按每千克发酵底物接种2×109CFU的量接种到发酵底物中，将黑曲霉（Aspergillus niger）按每千克发酵底物接种3×109CFU的量接种到发酵底物中，搅拌均匀，并调节含水量至65%，堆垛发酵，堆垛高度1.5m，进行第一次发酵腐熟，发酵时间为3天；
7、将第一次发酵腐熟完成的发酵物，翻堆接种枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）和细黄链霉菌（Streptomyces microflavus），接种量分别为在每千克发酵物中接种1.5×109CFU的枯草芽孢杆菌，接种2×109CFU的荧光假单胞菌和接种1.5×109CFU的细黄链霉菌，用氢氧化钙或稀盐酸调整发酵物的pH值至7.5，水分含量为50%，温度升高保持在50℃~70℃之间，翻堆，发酵2天后，冷风干燥，即得成品功能性微生物有机肥。
对所制得成品功能性微生物有机肥随机取样，测定各项指标如下：有效活菌数：2.5×109cfu/g；杂菌率：0.02%；有机质含量（以干基计）：42%；总养分（氮+五氧化二磷+氧化钾）含量（以干基计）：9.7%；水分：11.2%；pH：6.6。
上列详细说明是针对本发明可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本案的专利范围中。
Claims (10)
1.一种利用餐饮垃圾制备功能性微生物有机肥的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：
收集新鲜的餐厨垃圾，固液分离，得到固体垃圾和液体垃圾，将固体垃圾中的碎玻璃和塑料挑出；
（a）发酵底物的制备：该发酵底物按总质量百分数100%计，包括固体垃圾35~70%，稻壳3~10%，秸秆5~15%，木薯渣5~10%，草木灰5~10%，甘蔗渣3~10%，锯末5~10%，糠醛渣3~10%，将上述原料分别或混合粉碎后，混合均匀，制得发酵底物；
（b）将假丝酵母属（Candida）的菌按每千克发酵底物接种（0.3~2）×109CFU的量接种到发酵底物中，将枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）按每千克发酵底物接种（0.5~2）×109CFU的量接种到发酵底物中，将乳杆菌属（Lactobacillus）的菌按每千克发酵底物接种（0.5~2）×109CFU的量接种到发酵底物中，将黑曲霉（Aspergillusnger）按每千克发酵底物接种（1~3）×109CFU的量接种到发酵底物中，搅拌均匀，并调节含水量至40~65%，堆垛发酵，进行第一次发酵腐熟，发酵时间为3~10天；
（c）将第一次发酵腐熟完成的发酵物，翻堆接种枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）和链霉菌属（Streptomyces）的菌，接种量分别为在每千克发酵物中接种（0.3~1.5）×109CFU的枯草芽孢杆菌，接种（0.5~2）×109CFU的荧光假单胞菌和接种（0.5~2）×109CFU的链霉菌属的菌，用氢氧化钙或稀盐酸调整发酵物的pH值至6.5～7.5，水分含量为35～50%，温度升高保持在50℃~70℃之间，翻堆，发酵2~7天后，冷风干燥，即得成品功能性微生物有机肥。
2.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述的假丝酵母属（Candida）的菌是通过以下方法制备的：将假丝酵母属的菌从假丝酵母菌斜面培养基上挑去一环接种至液体假丝酵母菌种子培养基中，于28~37℃，150~200rpm，振荡培养12～48h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得假丝酵母菌一级菌种；然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有假丝酵母菌种子培养基的发酵罐中，温度为28～35℃，搅拌转速200～300rpm，通气量2～4L/（L·min），发酵时间24～72小时，得到假丝酵母属的菌液，所述的假丝酵母菌斜面培养基含葡萄糖5g/L，蛋白胨2g/L，酵母膏1g/L，氯化钠0.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6.5～7.5；所述的假丝酵母菌种子培养基含蛋白胨3～4g/L，酵母膏7～9g/L，葡萄糖3～5g/L，液体垃圾50～150mL/L，余量为水，pH6.5～7.5。
3.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌是通过以下方法制备的：将枯草芽孢杆菌从枯草芽孢杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体枯草芽孢杆菌种子培养基中，于28～37℃，150～230rpm，振荡培养24～48h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得枯草芽孢杆菌一级菌种，然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有枯草芽孢杆菌种子培养基的发酵罐中，温度28～35℃，搅拌转速250～350rpm，通气量1～2L/（L·min），发酵时间24～72小时，得到枯草芽孢杆菌液，所述的枯草芽孢杆菌斜面培养基含蛋白胨9～11g/L，牛肉膏4.5～5.5g/L，葡萄糖9～11g/L，氯化钠4.5～5.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6.5～7.5，所述的枯草芽孢杆菌种子培养基含蛋白胨4～5g/L，酵母膏2～3g/L，葡萄糖3～5g/L，液体垃圾50～200mL/L，余量为水，pH6.5～7.5。
4.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述的乳杆菌属（Lactobacillus）的菌是通过以下方法制备的：将乳杆菌从乳杆菌斜面培养基上挑去一环接种至液体乳杆菌种子培养基中，于28～37℃，静置培养24～60h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得乳杆菌一级菌种，然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有乳杆菌种子培养基的发酵罐中，温度35～40℃，搅拌转速100～250rpm，发酵时间24～72小时，得到乳杆菌菌液，所述的乳杆菌斜面培养基含脱脂奶粉100.0g/L，酵母粉1g/L，K2HPO45g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6～7；所述的乳杆菌种子培养基含蛋白胨2～3g/L，葡萄糖2～3g/L，液体垃圾50～100mL/L，余量为水，pH6.0～7.0。
5.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述的黑曲霉（Aspergillus nger）是通过以下方法制备的：将黑曲霉从黑曲霉斜面培养基上挑去一环接种至液体黑曲霉菌种子培养基中，于28～37℃，110～160rpm振荡培养12～48h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得黑曲霉一级菌种，然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有黑曲霉菌种子培养基的发酵罐中，温度28～37℃，搅拌转速200～300rpm，通气量2～4L/（L·min），发酵时间24～72小时，得到黑曲霉菌菌液，所述的黑曲霉斜面培养基含可溶性淀粉40g/L，柠檬酸铵10g/L，磷酸二氢钾3g/L，氯化钙0.1g/L，七水合硫酸亚铁0.01g/L，七水合硫酸镁1g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6～7；所述的黑曲霉菌种子培养基含可溶性淀粉10～20g/L，柠檬酸氢二铵7～10g/L，氯化钙10～15g/L，液体垃圾20～50mL/L，余量为水，pH5.0～5.5。
6.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述的荧光假单胞菌（Pseudomonasfluorescens）是通过以下方法制备的：将荧光假单胞菌从荧光假单胞菌斜面培养基上挑去一环接种至液体荧光假单胞菌种子培养基中，于28～37℃，150～230rpm，振荡培养12～48h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得荧光假单胞菌一级菌种，然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有荧光假单胞菌种子培养基的发酵罐中，温度35～40℃，搅拌转速200～300rpm，通气量1～2L/（L·min），发酵时间24～72小时，得到荧光假单胞菌菌液，所述的荧光假单胞菌斜面培养基含蛋白胨20g/L，甘油10mL/L，磷酸氢二钾1.5g/L，七水合硫酸镁1.5g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6.5～7.5；所述的荧光假单胞菌种子培养基含蔗糖30～40g/L，甘油10～15%，蛋白胨3～5g/L，磷酸二氢钾3～5g/L，磷酸氢二钾1～3g/L，液体垃圾50～120mL/L，余量为水，pH6.5～7.5。
7.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述的链霉菌属（Streptomyces）的菌是通过以下方法制备的：将链霉菌属的菌从链霉菌斜面培养基上挑去一环接种至液体链霉菌种子培养基中，于28～37℃，150～230rpm，振荡培养24～72h，待菌株处于对数生长期时，停止培养，制得链霉菌一级菌种；然后按1～5%（v/v）的接种量接入盛有链霉菌种子培养基的发酵罐中，温度35～40℃，搅拌转速250～350rpm，通气量2～4L/（L·min）发酵时间24～72小时，得到链霉菌菌液，所述的链霉菌斜面培养基含可溶性淀粉20g/L，硝酸钾1g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，氯化钠0.5g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸亚铁0.01g/L，琼脂20g/L，余量为水，pH为6～7；所述的链霉菌种子培养基含胰蛋白胨3～5g/L，酵母浸膏1～3g/L，麦芽浸粉2～5g/L，葡萄糖1～3g/L，液体垃圾50～100mL/L，余量为水，pH6.5～7.5。
8.根据权利要求1或2所述的生产方法，其特征在于，所述的假丝酵母属（Candida）的菌为热带假丝酵母（Candida tropicalis），所述的堆垛发酵，其堆垛高度为0.8~1.5m。
9.根据权利要求1或4所述的生产方法，其特征在于，所述的链霉菌属（Streptomyces）的菌为细黄链霉菌（Streptomyces microflavus）。
10.根据权利要求1或7所述的生产方法，其特征在于，所述的乳杆菌属（Lactobacillus）的菌为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。
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