CN104672028B - 一种具有抗虫功能的生物有机肥及其制备方法 - Google Patents

一种具有抗虫功能的生物有机肥及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种具有抗虫功能的生物有机肥的制备方法,主要包括两步骤;一是八种菌剂的复合发酵,旨在提高发酵效率;前四种菌为嗜热功能菌,通过协同作用,能够提高温度峰值并且延长堆肥高温持续时间,缺少任何一种都会使高温持续时间缩短;后四种菌为嗜温功能菌,能够在充分降解有机质的基础上加快温度的上升,使堆肥提前进入高温期;二是苏云金芽孢杆菌ABTNL‑4的混入,用于提高肥料的抗虫效果。本发明能够提高制备效率,生产得到具有抗虫功能的生物有机肥。

Description

一种具有抗虫功能的生物有机肥及其制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种具有抗虫功能的生物有机肥及其制备方法,属于农业生物技术领 域。
背景技术
[0002]化肥为我国农业生产的发展发挥了巨大作用,但在土壤中的长期施用容易造成土 壤板结、养分流失、pH失调等不利影响,此外,化肥营养元素单一,致使土壤微生物群系简单 化,易使作物发生病虫害,从而导致农产品品质低劣。
[0003]生物有机肥因其营养元素齐全、微生物群体多样,具备改良土壤、提高抗病虫能力 并提升农产品品质的优势重新受到重视。生物有机肥是有机废弃物经微生物高温发酵后形 成的一种稳定无害的终产物,是一种能够减少环境污染,对人畜安全无毒的环保型肥料。 [0004]办7X金牙孢杆菌(Bacillus thuringiensis)是一种获得途径简单、安全高效、应 用广泛的生物杀虫剂。其对鳞翅目、鞘翅目等多种昆虫具有杀灭作用,此外对植物根结线 虫、蜱螨等节肢动物都有毒杀活性,这为具有抗虫性能的生物有机肥的获得提供了条件。土 壤施用这种新型的肥料,在提高土壤肥力的同时,还可以对植物根茎部的虫害进行防控。
发明内容
[0005] 本发明的目的是提供一种具有抗虫功能生物有机肥的制备方法,旨在提高制备效 率,并生产得到具有抗虫功能的生物有机肥。
[0006] 为了达到上述目的,本发明一种具有抗虫功能的生物有机肥的制备方法,将动物 粪便及植物物料制成的堆料,通过地衣芽孢杆菌N0_ 1〇〇37、枯草芽孢杆菌 ABTNL-2号CGMCC N0_ 10〇38、热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号CGMCC N0.10〇39和苏云金芽孢 杆菌ABTNL-4号CGMCC NO. 10〇36,以及解淀粉芽孢杆菌、苍白芽孢杆菌、假单胞菌和蜡样芽 孢杆菌复合发酵制得复合发酵产物。所述复合发酵产物再次加入苏云金芽孢杆菌ABTNL—4 号,即得抗虫功能的生物有机肥。
[0007]优选方式下,本发明具有抗虫功能的生物有机肥的制备方法,具体包括如下步骤. [0008] S1、制备堆料
[0009]将猪粪、鸡粪或牛粪与枯草、树枝或秸秆按3〜4.5:1〜1_5的重量比混合均匀后, 晾晒至含水率达55%-60 %备用;
[0010] S2、获取或制备发酵液态菌剂:按体积百分比复合发酵液态菌剂,组分如下:
[0011]地衣芽孢杆菌ABTNL-1号菌液15〜20% ;
[0012]枯草芽孢杆菌ABTNL-2号菌液1〇〜15% ;
[0013]热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号菌液1〇〜15% ;
[00M]苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液15〜20% ;
[0015] 解淀粉芽孢杆菌菌液10〜15%; ’
[0016] 苍白芽孢杆菌菌液5〜10% ; L〇m/」 假早胞菌菌液6〜12%;
[0018]蜡样芽孢杆菌菌液3〜8% ;
[0019]上述菌液的浓度i〇8〜1〇9CFU • ml-i;
[0020] S3、好氧堆肥发酵:将步骤si的堆料接种步骤S2的液态菌剂,菌剂按菌液体积与堆 料质量比〇• 73〜2%添加到堆料中,进行发酵得到复合发酵产物;
[0021] S4、制备生物有机肥 ’
[0022]向^骤S3所得复合发酵产物中以3〜5ml/kg的比例加入苏云金芽孢杆菌ABTNL—4 号菌液,菌液的浓度108〜109CFU .mr1;混匀后保持30%的含水量,即得到具有抗虫功能的 生物有机肥。
[0023]其中,步骤S4,加入苏云金芽孢杆菌ABTNL—4号菌液后的堆料进行粉碎、过筛,制成 粉料,可根据商业需要进行造粒等,制得具有抗虫功能的生物有机肥。
[0024]优选方^式下,步骤S3的过程为:在堆肥容器中分层放置物料,并均匀泼洒液态菌剂 后充分混合进行微生物好氧发酵,温度随之上升,达到并维持60〜75。(:的高温;当堆料温度 首次出现明显下降时进行翻堆,并补充水分,堆料温度再一次升高,同样,温度明显下降时, 再次翻堆,如此反复2-3次,等到堆料温度接近或稍高于室温且无异味,测定发芽指数大于 80 %、含水率为3〇 %时,即得到复合发酵产物。此时,测定发芽指数大于80%时,表明堆肥已 腐熟,堆料含水率约为30 % ;堆料作为有机肥前期产品,保存备用。
[0025]本发明方法主要包括两个步骤:
[0026] —是八种菌剂的复合发酵,旨在提高发酵效率;前四种菌为嗜热功能菌,通过协同 作用,能够提高温度峰值并且延长堆肥高温持续时间,缺少任何一种都会使高温持续时间 缩短;后四种菌为嗜温功能菌,能够在充分降解有机质的基础上加快温度的上升,使堆肥提 前进入高温期。
[0027]二是苏云金芽孢杆菌ABTNL-4的混入,用于提高肥料的抗虫效果。
[0028]综上,本发明的有益效果是:添加自制的微生物菌剂,加快畜禽粪便堆肥的腐熟进 程,即能够缩短生物有机肥的制备周期;添加微生物菌剂的堆料能够快速升温,并与传统方 法相比有更高的温度峰值,能够更有效地杀灭和降解畜禽粪便中的病原菌、寄生虫卵、杂草 种子以及其他具有植物毒性的物质。除此之外,在肥料发酵过程中接种和在后期额外添加 的具有生物杀虫作用的苏云金芽孢杆菌,使该生物有机肥具备了提高作物根部防虫的能 力,尤其是堆肥腐熟后再次添加了苏云金芽孢杆菌,使得产品对鳞翅目、鞘翅目等多种昆虫 具有杀灭作用,对土壤根结线虫防治效果突出,发病率可降低80%,可杀灭90%以上的根结 线虫,为我国农业防虫工程提供了基础和保障。此外对植物根结线虫、蜱螨等节肢动物有毒 杀活性。另外,本发明产品的生产工艺相对简单,原料来源广泛,生产成本低,适合大规模生 产。本发明的菌剂产品适于动物粪便的快速堆肥处理,处理后的腐熟堆肥产品可用做生物 有机肥,其具有改良土壤、增进肥效、调节作物生长、提高作物的抗逆性和改善作物品质等 优点。
[0029] 保藏说明
[0030]本发明涉及的生物材料样品的保藏信息:参据的微生物(株)为ABTNL-1,分类命名 为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),于2014年11月21日由中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)保藏,保藏编号CGMCC NO. 10037XGMCC地址为北京 市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0031]本发明涉及的生物材料样品的保藏信息:参据的微生物(株)为ABTNL-2,分类命名 为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),于2014年11月21日由中国微生物菌种保藏管理委 员会普通微生物中心(简称CGMCC)保藏,保藏编号CGMCC NO. 10038XGMCC地址为北京市朝 阳区北辰西路1号院3号。
[0032]本发明涉及的生物材料样品的保藏信息:参据的微生物(株)为ABTNL-3,分类命名 为热球状尿素芽抱杆菌(1^6;^8(3;[11118 1:1161'11103口11861';[(3118),于2014年11月21日由中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)保藏,保藏编号CGMCC NO. 10039。 CGMCC地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0033]本发明涉及的生物材料样品的保藏信息:参据的微生物(株)为ABTNL-4,分类命名 为苏z?金芽抱杆菌(Bacillus thuringiensis),于2014年11月21日由中国微生物菌种保藏 管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)保藏,保藏编号CGMCC NO. 10036.CGMCC地址为北 京市朝阳区北辰西路1号院3号。
具体实施方式
[0034] 制备菌液
[0035]本发明首先需要分别制备八种菌液,菌液的制备采用现有技术的方法即可。
[0036]八种菌液分别为地衣芽孢杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、热球状尿素芽孢杆菌菌 液、苏云金芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液、苍白芽孢杆菌菌液、假单胞菌菌液、蜡样芽 孢杆菌菌液;优选方式下,上述菌液的浓度需要达到108〜109CFU • ml_1。
[0037]其中,前四种地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、热球状尿素芽孢杆菌和苏云金芽孢杆 菌均为嗜热功能菌,为本发明发明人由动物粪便中自主筛选并经过鉴定所得(已申请专利 菌种保藏),菌株分别为ABTNL-1〜ABTNL-4,保藏编号分比为CGMCC N0.10037、CGMCC NO. 10038、CGMCC NO. 10039,以及CGMCC NO. 10036;具体保藏信息参见上文保藏说明部分, 本发明简写为:
[0038]地衣芽孢杆菌ABTNL-1CGMCC NO. 10037、枯草芽孢杆菌ABTNL-2CGMCC NO. 10038、 热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3CGMCC NO. 10039和苏云金芽孢杆菌ABTNL-4CGMCC NO. 10036。 [OO39]其余四种可从中国普通微生物菌种保藏管理中心获得,也可以通过自行分离得 到,除特殊菌株情况外,普遍的这四种菌剂都适用于本发明。
[0040]基于上述菌液,本发明提供如下实施例和对比例,以便说明本发明的具体效果。 [0041] 实施例1:
[0042] —种具有抗虫功能的有机肥,通过包括以下步骤的生产方法制得:
[0043] (1)制备堆料
[0044]将新鲜鸡粪与枯草(或树枝、秸杆等)按3〜4.5:1〜1.5的重量比混合均匀后晾晒 至含水率达55 %-60 %后备用。
[0045] ⑵发酵液态菌剂的制备
[0046]按体积百分比自主配制复合发酵液态菌剂,由下述组分组成:地衣芽孢杆菌 ABTNL-1号菌液I5〜20% (菌液浓度108〜109CFU • mr1),枯草芽孢杆菌ABTNL-2号菌液10〜 15% (菌液浓度108〜l〇9CFU • ml—1),热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号菌液10〜15% (菌液浓 度108〜109CFU • ml—1),苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液15〜20% (菌液浓度108〜l〇9CFU • mr1,解淀粉芽孢杆菌菌液10〜15% (菌液浓度108〜109CFU • mr1),苍白芽孢杆菌菌液5〜 10% (菌液浓度108〜109CFU • ml-1),假单胞菌菌液6〜12% (菌液浓度108〜109CFU • ml _1),蜡样芽孢杆菌菌液3〜8% (菌液浓度108〜109CFU • ml—1。
[0047]地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、热球状尿素芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌为本实验 室由动物粪便中自主筛选并经过鉴定所得(己申请专利菌种保藏),其余四种可从中国普通 微生物菌种保藏管理中心获得,也可以通过自行分离得到,除特殊菌株情况外,普遍的这四 种菌剂都适用于本发明。
[0048] ⑶堆料进行好氧堆肥发酵
[0049]将上述混合物料建立好氧发酵堆肥,并接种以上液态菌剂,菌剂添加比例为〇. 73 〜2% (体积质量比)具体方法如下:在堆肥容器中分层放置物料,并均匀泼洒液态菌剂后充 分混合进行微生物好氧发酵,温度随之上升,达到并维持60〜75°C的高温;当堆料温度首次 出现明显下降时进行翻堆,并补充一定的水分,堆料温度再一次升高,同样,温度明显下降 时,再次翻堆,如此反复2_3次,等到堆料温度接近或稍高于室温且无异味,测定发芽指数大 于80%时,表明堆肥己腐熟,此时堆料含水率约为30 %。堆料作为有机肥前期产品,保存备 用。
[0050] 制备具有抗虫功能的生物有机肥
[0051]向腐熟的堆料中以3〜5ml/kg的比例加入培养好的苏云金芽孢杆菌液(菌液浓度 108〜109CFU • ml-1),混匀后保持30%的含水量,随后将堆料进行粉碎、过筛,制成粉料,可 根据商业需要进行造粒等,制得具有抗虫功能的生物有机肥(有效活菌数多0.2亿/克)。 [0052] 实施例2:
[0053] 步骤1:建造鸡粪静态堆肥。方法是先将预处理过的玉米秸秆、枯草和新鲜鸡粪使 用铁锹按一定比例人工混合均匀(调节原料C/N在20〜30之间),调整其含水率(55 %〜 60%)控制在至用手紧握一团鸡粪原料,无液体流出,且松手后不散为宜。
[0054] 步骤2:菌液的选取
[0055] 地衣芽孢杆菌ABTNL-1号菌液36.5ml (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),枯草芽孢杆菌 八8丁1-2号菌液36.51111(菌液浓度10%?1].1111-1),热球状尿素芽孢杆菌4811-3号菌液361111 (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1), 解淀粉芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度109CFU • ml-1),苍白芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度 108CFU • ml-1),假单胞菌菌液25ml (菌液浓度108CFU • ml-1),蜡样芽孢杆菌菌液20ml (菌液 浓度 108CFU • ml-1),共240ml。
[0056]步骤3:复合发酵:
[0057]将步骤S2的复合发酵液态菌剂添加(0.8%体积质量比)至鸡粪堆肥中并混合均 匀。将混合后的鸡粪装入放有通气管的塑料箱子中(100cmX80cmX80cm),塑料堆肥发酵箱 外周及顶部包裹棉被,以减少热量散失,利于保温(阴雨天时顶部覆盖塑料薄膜,隔绝雨水 直接进入鸡粪堆肥中,改变堆肥的含水率)。堆肥第2d温度即达到55°C以上,并在第6d达到 最高的61 •3 °C,温度55°C以上持续12d,达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的 标准(55°C以上持续3d以上),期间每10d左右翻堆一次,20d左右堆肥完全腐熟。
[0058] 步骤4:向腐熟的堆料中以3-5ml/kg的比例加入培养好的苏云金芽孢杆菌ABTNL-4 号菌液,混匀后保持30%的含水量,即为具有抗虫功能的生物有机肥。
[0059]之后与普通有机肥分别施入有根际线虫病虫害污染的土壤进行了多次实验并进 行比较,经过一段时间后(4d左右)发现施用具有抗虫效果的有机肥的植物根部均观察不到 根际线虫等病虫害的存在,而施用普通有机肥的几组植物的根部则依然可以发现一定量的 根际线虫。
[0060]对比例3 (其他苏云金芽孢杆菌代替苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液):
[0061]步骤1:建造鸡粪静态堆肥。方法是先将预处理过的玉米秸杆、枯草和新鲜鸡粪使 用铁锹按一定比例人工混合均匀(调节原料C/N在20〜30之间),调整其含水率(55 %〜 60%)控制在至用手紧握一团鸡粪原料,无液体流出,且松手后不散为宜。
[0062] 步骤2:菌液的选取
[0063]地衣芽孢杆菌481肌-1号菌液36.51111(菌液浓度1〇9〇?1]-1111-1),枯草芽孢杆菌 ABTNL-2号菌液36.5ml (菌液浓度109CFU • ml-1),热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1),普通苏云金芽孢杆菌菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1),解淀粉 芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度109CFU • ml-1),苍白芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度108CFU • ml-1),假单胞菌菌液25ml (菌液浓度108CFU • ml-1),蜡样芽孢杆菌菌液20ml (菌液浓度 108CFU* ml-1),共240ml。
[0064] 步骤3:复合发酵:
[0065]将步骤S2的复合发酵液态菌剂添加(0.8%体积质量比)至鸡粪堆肥中并混合均 匀。将混合后的鸡粪装入放有通气管的塑料箱子中(l〇〇cmX80cmX80cm),塑料堆肥发酵箱 外周及顶部包裹棉被,以减少热量散失,利于保温(阴雨天时顶部覆盖塑料薄膜,隔绝雨水 直接进入鸡粪堆肥中,改变堆肥的含水率)。堆肥第2d温度即达到55。(:以上,并在第6d达到 最高的61.3°C,温度55°C以上持续12d,达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的 标准(55°C以上持续3d以上),期间每10d左右翻堆一次,20d左右堆肥完全腐熟。
[0066] 步骤4:向腐熟的堆料中以3-5ml/kg的比例加入培养好的普通苏云金芽孢杆菌菌 液,混匀后保持3〇%的含水量,即为普通的具有抗虫功能生物有机肥。
[0067]总结:之后与含有相同量的苏云金芽孢杆菌ABTNL-4的本发明生物有机肥分别施 入有根际线虫病虫害污染的土壤进行了多次实验并进行比较,经过一段时间后(4d左右)发 现施用本发明有机肥的植物根部均观察不到根际线虫等病虫害的存在说明对病虫害的杀 灭率可达100%,而施用含有对比例3普通苏云金芽孢杆菌的有机肥的几组植物的根部则依 然可以发现少量的根际线虫,对病虫害的杀灭率为70%左右。
[0068]本实施例普通苏云金芽孢杆菌通过自行提取获得,通过多次提取,进行多次试验, 效果均类似,与本发明使用的苏云金芽孢杆菌ABTNL-4,在效果上有显著区别。
[0069] 对比例4(缺少地衣芽孢杆菌ABTNL-1):
[0070]步骤1:建造鸡粪静态堆肥。方法是先将预处理过的玉米秸秆、枯草和新鲜鸡粪使 用铁锹按一定比例人工混合均匀(调节原料C/N在20〜30之间),调整其含水率(55 %〜 60%)控制在至用手紧握一团鸡獎原料,无液体流出,且松手后不散为宜。
[0071] 步骤2:菌液的选取
[0072] 空白培养基36.51111,枯草芽孢杆菌六31见-2号菌液36.51111(菌液浓度10!^1].1111- 1),热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1),苏云金芽孢杆菌 ABTNL-4号菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1),解淀粉芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度 109CRJ • ml-1),苍白芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度l〇8CFU • ml-1),假单胞菌菌液25ml (菌液 浓度108CFU • ml-1),蜡样芽孢杆菌菌液20ml (菌液浓度108CFU • ml-1),共240ml。
[0073] 步骤3:复合发酵:
[0074] 将步骤S2的复合菌剂添加(0.8%体积质量比)至鸡粪堆肥中并混合均匀。将混合 后的鸡粪装入放有通气管的塑料箱子中(lOOcmXSOcmXSOcm),塑料堆肥发酵箱外周及顶 部包裹棉被,以减少热量散失,利于保温(阴雨天时顶部覆盖塑料薄膜,隔绝雨水直接进入 鸡粪堆肥中,改变堆肥的含水率)。堆肥第2d进入温度大于50°C的高温期,堆肥高温持续 8d,。最高温度达到70°C,达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55°C以上 持续3d以上),期间每10d翻堆一次,20d左右堆肥结束。
[0075] 步骤4:腐熟堆肥中以3-5ml/kg的比例加入培养好的苏云金芽孢杆菌菌液,混匀后 保持30%的含水量,制得具有抗虫功能的生物有机肥。
[0076]总结:通过上述对比可知:缺少地衣芽孢杆菌ABTNL-1号菌的复合菌剂使堆肥的高 温持续时间缩短了 4d,说明其在复合菌剂中发挥重要作用。
[0077] 对比例5(缺少枯草芽孢杆菌ABTNL-2):
[0078] 步骤1:建造鸡粪静态堆肥。方法是先将预处理过的玉米秸秆、枯草和新鲜鸡粪使 用铁锹按一定比例人工混合均匀(调节原料C/N在20〜30之间),调整其含水率(55 %〜 60%)控制在至用手紧握一团鸡粪原料,无液体流出,且松手后不散为宜。
[0079] 步骤2:菌液的选取
[0080] 地衣芽孢杆菌ABTNL-1号菌液36.5ml (菌液浓度109CFU • ml-1),空白培养基 36.51111,热球状尿素芽孢杆菌481见-3号菌液361111(菌液浓度10;^1]*1111-1),苏云金芽孢杆 菌ABTNL-4号菌液36ml (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),解淀粉芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度 109CFU • ml-1),苍白芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度108CFU • ml-1),假单胞菌菌液25ml (菌液 浓度108CFU • ml-1),蜡样芽孢杆菌菌液20ml (菌液浓度108CFU • ml-1),共240ml。
[0081] 步骤3:复合发酵:
[0082] 将步骤S2的复合发酵菌剂添加(0.8%体积质量比)至鸡粪堆肥中并混合均匀。将 混合后的鸡粪装入放有通气管的塑料箱子中(10〇CmX8〇CmX8〇Cm),塑料堆肥发酵箱外周 及顶部包裹棉被,以减少热量散失,利于保温(阴雨天时顶部覆盖塑料薄膜,隔绝雨水直接 进入鸡粪堆肥中,改变堆肥的含水率)。堆肥第2d进入温度大于50°C的高温期,堆肥高温持 续8d。最高温度达到7〇°C,达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55°C以 上持续3d以上),期间每10d翻堆一次,20d左右堆肥结束。
[0083]步骤4:腐熟堆肥中以3-5ml/kg的比例加入培养好的苏云金芽孢杆菌菌液,混匀后 保持30%的含水量,制得具有抗虫功能的生物有机肥。
[0084] 总结:通过上述对比可知:缺少枯草芽孢杆菌ABTNL-2号的复合菌剂使堆肥的高温 持续时间缩短了 4d。
[0085]对比例6(缺少热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3):
[0086]步骤1:建造鸡粪静态堆肥。方法是先将预处理过的玉米秸杆、枯草和新鲜鸡粪使 用铁锹按一定比例人工混合均匀(调节原料C/N在20〜30之间),调整其含水率(55 %〜 60%)控制在至用手紧握一团鸡粪原料,无液体流出,且松手后不散为宜。
[0087] 步骤2:菌液的选取
[0088] 地衣芽孢杆菌ABTNL-1号菌液36.5ml (菌液浓度109CFU • ml-1),枯草芽孢杆菌 ABTNL-2号菌液36.5ml (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),空白培养基36ml,苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1),解淀粉芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),苍白芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度108CFU • ml-1),假单胞菌菌液25ml (菌液浓度 108CFU • ml-1),蜡样芽孢杆菌菌液20ml (菌液浓度l〇8CFU • ml-1),共240ml。
[0089] 步骤3:复合发酵:
[0090]将步骤S2的复合发酵菌剂添加(0.8%体积质量比)至鸡粪堆肥中并混合均匀。将 混合后的鸡粪装入放有通气管的塑料箱子中(100cmX80CmX80Cm),塑料堆肥发酵箱外周 及顶部包裹棉被,以减少热量散失,利于保温(阴雨天时顶部覆盖塑料薄膜,隔绝雨水直接 进入鸡粪堆肥中,改变堆肥的含水率)。堆肥第2d进入温度大于50°C的高温期,堆肥高温持 续7d。最高温度达到70°C,达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55°C以 上持续3d以上),期间每10d翻堆一次,20d左右堆肥结束。
[0091] 步骤4:腐熟堆肥中以3-5ml/kg的比例加入培养好的苏云金芽孢杆菌菌液,混匀后 保持30%的含水量,制得具有抗虫功能的生物有机肥。
[0092]总结:通过上述对比可知,缺少热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号的复合菌剂使堆肥 高温持续时间缩短了 5d。
[0093] 对比例7 (缺少解淀粉芽孢杆菌):
[0094] 步骤1:建造鸡粪静态堆肥。方法是先将预处理过的玉米秸杆、枯草和新鲜鸡粪使 用铁锹按一定比例人工混合均匀(调节原料C/N在20〜30之间),调整其含水率(55%〜 60%)控制在至用手紧握一团鸡粪原料,无液体流出,且松手后不散为宜。
[0095] 步骤2:菌液的选取
[0096] 地衣芽孢杆菌々81肌-1号菌液36.51111(菌液浓度10!^?1]*1111-1),枯草芽孢杆菌 八8丁既-2号菌液36.51111(菌液浓度10;^1]*1111-1),热球状尿素芽孢杆菌々311-3号菌液361111 (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1), 空白培养基25ml,苍白芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度108CFU • ml-1),假单胞菌菌液25ml (菌 液浓度108CFU • ml-1),蜡样芽孢杆菌菌液20ml (菌液浓度108CFU • ml-1),共240ml。
[0097] 步骤3:复合发酵:
[0098] 将步骤S2的发酵菌剂添加(0.8%体积质量比)至鸡粪堆肥中并混合均匀。将混合 后的鸡粪装入放有通气管的塑料箱子中(l〇〇cmX80cmX80cm),塑料堆肥发酵箱外周及顶 部包裹棉被,以减少热量散失,利于保温(阴雨天时顶部覆盖塑料薄膜,隔绝雨水直接进入 鸡粪堆肥中,改变堆肥的含水率)。发现堆肥第4d进入温度大于50°C的高温期,高温持续 12d,最高温度达到70°C,达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55°C以上 持续3d以上),期间每l〇d翻堆一次,20d左右堆肥结束。
[0099] 步骤4:腐熟堆肥中以3-5ml/kg的比例加入培养好的苏云金芽孢杆菌菌液,混匀后 保持30 %的含水量,制得具有抗虫功能的生物有机肥。
[0100] 总结:通过上述对比可知:缺少解淀粉芽孢杆菌的复合菌剂使堆肥推迟2d进入高 温期。
[0101] 对比例8 (缺少苍白芽孢杆菌):
[0102]步骤1:建造鸡粪静态堆肥。方法是先将预处理过的玉米秸秆、枯草和新鲜鸡粪使 用铁锹按一定比例人工混合均匀(调节原料C/N在20〜30之间),调整其含水率(55 %〜 60%)控制在至用手紧握一团鸡粪原料,无液体流出,且松手后不散为宜。
[0103] 步骤2:菌液的选取
[0104] 地衣芽孢杆菌ABTNL-1号菌液36.5ml (菌液浓度109CFU • ml-1),枯草芽孢杆菌 ABTNL-2号菌液36.5ml (菌液浓度109CFU • ml-1),热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号菌液36ml (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1), 解淀粉芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),空白培养基25ml,假单胞菌菌液25ml (菌液浓度l〇8CFU • ml-1),蜡样芽孢杆菌菌液20ml (菌液浓度108CFU • ml-1),共240ml。 [0105] 步骤3:复合发酵:
[0106] 将步骤S2的复合发酵菌剂添加(0.8%体积质量比)至鸡粪堆肥中并混合均匀。将 混合后的鸡粪装入放有通气管的塑料箱子中(lOOcmXSOcmXSOcm),塑料堆肥发酵箱外周 及顶部包裹棉被,以减少热量散失,利于保温(阴雨天时顶部覆盖塑料薄膜,隔绝雨水直接 进入鸡粪堆肥中,改变堆肥的含水率)。发现堆肥第4d进入温度大于50°C的高温期,高温持 续12d,最高温度达到70°C,达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55°C以 上持续3d以上),期间每10d翻堆一次,20d左右堆肥结束。
[0107] 步骤4:腐熟堆肥中以3-5ml/kg的比例加入培养好的苏云金芽孢杆菌菌液,混匀后 保持30 %的含水重,制得具有抗虫功能的生物有机肥。
[0108]总结:通过对比可知:缺少苍白芽孢杆菌的复合菌剂使堆肥推迟2d进入高温期。 [0109] 对比例9 (缺少假单胞菌):
[0110] 步骤1:建造鸡粪静态堆肥。方法是先将预处理过的玉米秸秆、枯草和新鲜鸡粪使 用铁锹按一定比例人工混合均匀(调节原料C/N在20〜30之间),调整其含水率(55 %〜 60%)控制在至用手紧握一团鸡类原料,无液体流出,且松手后不散为宜。
[0111] 步骤2:菌液的选取
[0112] 地衣芽孢杆菌ABTNL-1号菌液36.5ml (菌液浓度109CFU • ml-1),枯草芽孢杆菌 ABTNL-2号菌液36.5ml (菌液浓度109CFU • ml-1),热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号菌液36ml (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1), 解淀粉芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),苍白芽孢杆菌菌液25ral (菌液浓度 108CFU • ml-1),空白培养基25ml,蜡样芽孢杆菌菌液20ml (菌液浓度108CFU • ml-1),共 240ml〇
[0113] 步骤 3:
[0114] 将步骤S2的发酵菌剂添加(0.8%体积质量比)至鸡粪堆肥中并混合均匀。将混合 后的鸡粪装入放有通气管的塑料箱子中(l〇〇cmX80cmX80cm),塑料堆肥发酵箱外周及顶 部包裹棉被,以减少热量散失,利于保温(阴雨天时顶部覆盖塑料薄膜,隔绝雨水直接进入 鸡粪堆肥中,改变堆肥的含水率)。发现堆肥第4d进入温度大于50°C的高温期,高温持续 12d,最高温度达到70°C,达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55。(:以上 持续3d以上),期间每l〇d翻堆一次,20d左右堆肥结束。
[0115] 步骤4:腐熟堆肥中以3-5ml/kg的比例加入培养好的苏云金芽孢杆菌菌液,混匀后 保持30%的含水量,制得具有抗虫功能的生物有机肥。
[0116]总结:通过上述对比可知:缺少假单胞菌的复合菌剂使堆肥推迟2d进入高温期。 [0117]对比例10 (缺少蜡样芽孢杆菌):
[0118] 步骤1:建造鸡粪静态堆肥。方法是先将预处理过的玉米秸秆、枯草和新鲜鸡粪使 用铁锹按一定比例人工混合均匀(调节原料C/N在20〜30之间),调整其含水率(55 %〜 60%)控制在至用手紧握一团鸡粪原料,无液体流出,且松手后不散为宜。
[0119] 步骤2:菌液的选取
[0120] 地衣芽孢杆菌ABTNL-1号菌液36.5ml (菌液浓度109CFU • ml-1),枯草芽孢杆菌 八8丁1-2号菌液36.51!11(菌液浓度1090?1]*1111-1),热球状尿素芽孢杆菌八8了1-3号菌液361111 (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液36ml (菌液浓度109CFU • ml-1), 解淀粉芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度l〇9CFU • ml-1),苍白芽孢杆菌菌液25ml (菌液浓度 108CFU • ml-1),假单胞菌菌液25ml (菌液浓度108CFU • ml-1),空白培养基20ml,共240ml。 [0121] 步骤3:复合发酵:
[0122] 将步骤S2的发酵菌剂添加(0.8%体积质量比)至鸡粪堆肥中并混合均匀。将混合 后的鸡粪装入放有通气管的塑料箱子中(lOOcmX80cmX80cm),塑料堆肥发酵箱外周及顶 部包裹棉被,以减少热量散失,利于保温(阴雨天时顶部覆盖塑料薄膜,隔绝雨水直接进入 鸡粪堆肥中,改变堆肥的含水率)。发现堆肥第4d进入温度大于50°C的高温期,高温持续 12d,最高温度达到7〇°C,达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55°C以上 持续3d以上),期间每10d翻堆一次,20d左右堆肥结束。
[0123] 步骤4:腐熟堆肥中以3-5ml/kg的比例加入培养好的苏云金芽孢杆菌菌液,混匀后 保持30%的含水量,制得具有抗虫功能的生物有机肥。
[0124]总结:通过上述对比可知:缺少蜡样芽孢杆菌的复合菌剂使堆肥推迟2d进入高温 期。
[0125]本发明的实施例及对比例均是多次试验的平均效果,而同类实施方式的试验效果 差别不大。
[0126]以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此, 任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其 发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种具有抗虫功能的生物有机肥的制备方法,其特征在于,动物粪便及植物物料制 成的堆料,通过地衣芽孢杆菌ABTNL-1号CGMCC NO. 10037、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号CGMCC NO. 10038、热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号CGMCC N0_ 10039和苏云金芽孢杆菌ABTNL—4号 CGMCC N0 • 100:36,以及解淀粉芽孢杆菌、苍白芽孢杆菌、假单胞菌和蜡样芽孢杆菌复合发酵 制得复合发酵产物; 所述复合发酵产物再次加入苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号,即得抗虫功能的生物有机肥。
2.根据权利要求1所述具有抗虫功能的生物有机肥的制备方法,其特征在于,包括如下 步骤: 51、 制备堆料 将猪粪、鸡異或牛类与枯草、树枝或稻杆按3〜4_5:1〜1.5的重量比混合均勾后,瞭晒 至含水率达55 % -60 %备用; 52、 获取或制备发酵液态菌剂:按体积百分比复合发酵液态菌剂,组分如下: 地衣牙抱杆菌ABTNL-1号菌液15〜20% ; 枯草芽孢杆菌ABTNL-2号菌液10〜15% ; 热球状尿素芽孢杆菌ABTNL-3号菌液10〜15% ; 苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌液15〜20% ; 解淀粉芽孢杆菌菌液10〜15% ; 苍白芽孢杆菌菌液5〜10 %; 假单胞菌菌液6〜12 %; 蜡样芽孢杆菌菌液3〜8 % ; 上述菌液的浓度1〇8〜109CFU • ml、 53、 好氧堆肥发酵:将步骤S1的堆料接种步骤S2的液态菌剂,菌剂按菌液体积与堆料质 量比0 • 73〜2%添加到堆料中,进行发酵得到复合发酵产物; 54、 制备生物有机肥 向步骤S3所得复合发酵产物中以3〜5ml/kg的比例加入苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号菌 液,菌液的浓度1〇8〜l〇9CFU • mr1;混匀后保持30%的含水量,即得到具有抗虫功能的生物 有机肥。
3.根据权利要求2所述具有抗虫功能的生物有机肥的制备方法,其特征在于, 步骤S3的过程为:在堆肥容器中分层放置物料,并均匀泼洒液态菌剂后充分混合进行 微生物好氧发酵,温度随之上升,达到并维持㈤〜75。(:的高温;当堆料温度首次出现明显下 降时进行翻堆,并补充水分,堆料温度再一次升高,同样,温度明显下降时,再次翻堆,如此 反复2_3次,等到堆料温度接近或稍高于室温且无异味,测定发芽指数大于80%、含水率为 30%时,即得到复合发酵产物。
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