CN106588416A - 一种蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法 - Google Patents

一种蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法，主要包括三个步骤；一是以貂粪和玉米秸秆为主要原料，建立静态好氧堆肥体系；二是地衣芽孢杆菌ABTNL‑1号、枯草芽孢杆菌ABTNL‑2号、土壤芽孢杆菌和环状芽孢杆菌四种菌剂的复合发酵，旨在提高堆肥发酵效率，延长堆肥高温持续时间，缩短了堆肥腐熟周期；三是生防菌剂苏云金芽孢杆菌ABTNL‑4号的接入，用于提高肥料的抗虫效果。本发明利用貂粪和玉米秸秆，并结合复合微生物发酵菌剂和生防菌剂，采用二次发酵工艺成功制备蓝莓专用抗虫生物有机肥，一方面实现了貂粪和玉米秸秆的无害化处理和资源化利用、降低了农药和化肥的使用，另一方面大大降低了生物有机肥的生产成本。

Description

一种蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法
技术领域
本发明涉及一种蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法，属于农业生物技术领域。
背景技术
半个世纪以来，我国化肥施用量大幅度增长，在保证粮食安全方面发挥了重要作用。但由于化肥的过量施用引起肥料利用率低、生态环境恶化等一系列的社会问题。化学肥料的不合理施用使得农作物品质降低，引起土壤板结、有机质下降、土壤及作物根系微生态结构被破坏，并导致土传作物病害泛滥。为了减少化肥施用量，提高肥料利用率和缓解化肥对环境的污染，迫切需要研制一种新型肥料来替代部分化肥。生物有机肥是多种有益微生物菌群与有机肥结合形成的新型、高效、安全的微生物-有机复合肥料。它综合了有机肥和复合微生物肥料的优点，能够有效地提高肥料利用率，调节植株代谢，增强根系活力和养分吸收能力。因此，研究、开发并合理施用生物有机肥料不仅是获得作物优质高产和提高土壤肥力的重要措施之一，也是保护生态环境、促进农业可持续发展的必然趋势。
蓝莓也叫越橘，属牡丹花科植物，果实酸中带甜，不仅可以直接食用，还可以加工成果汁、饮料、果酒等。因为蓝莓的营养价值非常的高，还具有医药保健的功能，所以推动了蓝莓种植产业的发展。蓝莓虫害是严重影响蓝莓产业经济效益与可持续发展的主要病害之一，以往使用化学杀菌剂控制蓝莓虫害，但化学杀菌剂的大面积使用易带来环境污染、生态失衡、药物残留、食品安全等问题，所以利用低成本、高效率、环境友好和无药物残留的生物学方法防控蓝莓虫害倍受关注。
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种广泛分布于自然界的革兰氏阳性细菌，在生长代谢过程中能够产生杀虫晶体蛋白、α-外毒素、β-外毒素等，对多种昆虫有很强的毒性作用，对人畜及环境无污染。近年来，随着对苏云金芽孢杆菌研究的不断深入，发现其不仅对鳞翅目、鞘翅目等多种昆虫具有杀灭作用，此外对植物根结线虫、蜱螨等节肢动物都有毒杀活性，这为具有抗虫性能的生物有机肥的制备提供了条件。利用苏云金芽孢杆菌制备具有抗虫功能的生物有机肥，将是未来生物防治蓝莓虫害最具有应用前景的一种技术手段。
发明内容
本发明的目的是通过建立静态好氧堆肥体系，实现农业废物的无害化处理和资源化利用，通过接入对蓝莓虫害有明显抑制作用的苏云金芽孢杆菌和二次发酵工艺，从而制备一种蓝莓专用抗虫生物有机肥，优化生物有机肥的生产工艺从而降低生产成本。
为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：
将经过预处理的新鲜貂粪及玉米秸秆作为堆料，在堆肥建立初期接种由地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌和环状芽孢杆菌组成的复合微生物发酵菌剂，当堆肥体系进入到降温期，再接入生防菌剂苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号，经二次发酵工艺，即得具有抗蓝莓虫害功能的生物有机肥。
优选方式下，本发明一种蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法，具体包括如下步骤：
S1、堆肥原材料的预处理
将貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按(3～4.5):(1～1.5)的质量比混合均匀，使其C/N在20-25之间，平摊在地面晾晒至含水率达50～60％；
S2、复合微生物发酵菌剂和生防菌剂的制备
将地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号分别单独利用发酵罐进行发酵生产，使菌液浓度达到108～109CFU·ml-1，发酵后的地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌菌液按体积百分比(1～2):(1～2)：(0.5～1):(0.5～1)混合作为复合微生物发酵菌剂，苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号发酵菌液作为生防菌剂；
S3、静态好氧堆肥体系的建立
将步骤S2所制备的复合微生物发酵菌剂按菌液体积与堆料质量比2.0～5.0％的接种量，接种到经步骤S1预处理过的堆料中，从而建立静态好氧堆肥体系；
S4、生物有机肥的制备
当S3所建立的静态好氧堆肥体系进入到降温期，将步骤S2所制备的生防菌剂按菌液体积与堆料质量比2.0～5.0％的接种量，接入到堆肥体系中，通过二次发酵工艺即得蓝莓专用抗虫生物有机肥。
优选方式下，步骤S3的过程为：当堆料温度首次出现明显下降时进行翻堆，并补充水分，堆料温度再一次升高，同样，温度明显下降时，再次翻堆，如此反复2-3次，等到堆料温度接近或稍高于室温且无异味，测定发芽指数大于80％、含水率为30％时，即得到复合发酵产物。此时，测定发芽指数大于80％时，表明堆肥已腐熟，堆料含水率约为30％；堆料作为生物有机肥前期产品，保存备用。
进一步的，所述的复合微生物发酵菌剂的制备所需培养基成分为蛋白胨10.0g/L、牛肉浸出粉3.0g/L、氯化钠5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.4；生防菌剂的制备所需培养基成分为氯化钠10.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、酵母粉提取物5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.0。
本发明方法主要包括三个步骤：
一是以貂粪和玉米秸秆为主要原料，建立静态好氧堆肥体系；
二是地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌和环状芽孢杆菌四种菌剂的复合发酵，旨在提高堆肥发酵效率，延长堆肥高温持续时间，缩短了堆肥腐熟周期；
三是生防菌剂苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号的接入，用于提高肥料的抗虫效果。
综上，与现有技术相比，本发明具有的优点是：利用新鲜貂粪和玉米秸秆作为生产生物有机肥的原材料，可以同步实现农业废弃物的无害化处理和资源化利用，避免其处理不当对环境造成的二次污染；同时在堆肥初期同时接种自制的复合微生物发酵菌剂和生防菌剂，不仅能够加快静态好氧堆肥体系的腐熟进程、缩短生物有机肥的制备周期，而且生防菌所产生的次级代谢产物，可以有效对蓝莓虫害进行生物防治，避免了使用化学杀菌剂所带来的环境问题和食品安全问题；通过二次发酵工艺制备生物有机肥，相比传统制备工艺，生产工艺更加简单，将大大降低生物有机肥的生产成本。
堆肥腐熟后所制得的蓝莓专用抗虫生物有机肥，其具有改良土壤、增进肥效、改善蓝莓根际微生态和蓝莓品质、增强蓝莓抗逆性等优点，对蓝莓种植产业的可持续发展提供有力的保障。
保藏说明
本发明涉及的生物材料样品的保藏信息：参据的微生物(株)为ABTNL-1，分类命名为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)，于2014年11月21日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)保藏，保藏编号CGMCC NO.10037。CGMCC地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
本发明涉及的生物材料样品的保藏信息：参据的微生物(株)为ABTNL-2，分类命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，于2014年11月21日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)保藏，保藏编号CGMCC NO.10038。CGMCC地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
本发明涉及的生物材料样品的保藏信息：参据的微生物(株)为ABTNL-4，分类命名为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)，于2014年11月21日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)保藏，保藏编号CGMCC NO.10036。CGMCC地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
具体实施方式
下面结合具体实施例和对比例，进一步阐明本发明的具体效果。
实施例1：
一种蓝莓专用抗虫生物有机肥，通过包括以下步骤的生产方法制得：
(1)堆肥原材料的预处理
将新鲜貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按3～4.5:1～1.5的质量比混合均匀，使其C/N在20-25之间，平摊在地面晾晒至含水率达50～60％备用。
(2)复合微生物发酵菌剂和生防菌剂的制备
将地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号分别单独利用发酵罐进行发酵生产，使菌液浓度达到108～109CFU·ml-1，发酵后的地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌菌液按体积百分比2：2：1:1混合作为复合微生物发酵菌剂，苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号发酵菌液作为生防菌剂。
复合微生物发酵菌剂的制备所需培养基成分为蛋白胨10.0g/L、牛肉浸出粉3.0g/L、氯化钠5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.4；生防菌剂的制备所需培养基成分为氯化钠10.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、酵母粉提取物5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.0。
(3)静态好氧堆肥体系的建立
将(1)预处理的堆肥原料人工充分混匀，装入放有通气管的堆肥反应箱中(100cm×80cm×80cm)建立静态好氧堆肥体系，接种(2)所制备的液态菌剂，复合微生物发酵菌剂按菌液体积与堆料质量比2.0％的接种量接种到静态好氧堆肥体系中，具体方法如下：在堆肥反应器中分层放置物料，并均匀喷洒液态菌剂后充分混合进行微生物好氧发酵，温度随之上升，达到并维持60～75℃的高温；当堆料温度首次出现明显下降时进行翻堆，并补充一定的水分，堆料温度再一次升高，同样，温度明显下降时，再次翻堆，如此反复2-3次。
(4)生物有机肥的制备
当(3)所建立的静态好氧堆肥体系进入到降温期，将(2)所制备的生防菌剂按菌液体积与堆料质量比5.0％的接种量，接入到堆肥体系中，通过二次发酵工艺即得蓝莓专用抗虫生物有机肥。等到堆料温度接近或稍高于室温且无异味，测定发芽指数大于80％、虫卵含量为0％时，表明生物有机肥前期产品已制备成功，将堆料进行粉碎、过筛，制成粉料，可根据商业需要进行造粒等，制得一种蓝莓专用抗虫生物有机肥。
生产得到的成品蓝莓专用抗虫生物有机肥的成分指标如下：
实施例2:
步骤1：堆肥原材料的预处理
将新鲜貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按3～4.5:1～1.5的质量比混合均匀，使其C/N在20-25之间，平摊在地面晾晒至含水率达50～60％备用。
步骤2：复合微生物发酵菌剂和生防菌剂的制备
将地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号分别单独利用发酵罐进行发酵生产，使菌液浓度达到108～109CFU·ml-1，发酵后的地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌菌液按体积百分比2：2：1:1混合作为复合微生物发酵菌剂，苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号发酵菌液作为生防菌剂。
复合微生物发酵菌剂的制备所需培养基成分为蛋白胨10.0g/L、牛肉浸出粉3.0g/L、氯化钠5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.4；生防菌剂的制备所需培养基成分为氯化钠10.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、酵母粉提取物5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.0。
步骤3：静态好氧堆肥体系的建立
将预处理过的新鲜貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按3～4.5:1～1.5的质量比加入到带有搅拌功能的固态发酵仓中，通过机械搅拌使其充分混匀，在机械搅拌混匀的同时往固态发酵仓中接种5％(体积质量比)复合微生物发酵菌剂，进行半封闭好氧发酵。堆肥第3d温度即达到55℃以上，并在第5d达到最高的62.54℃，温度55℃以上持续12d，达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55℃以上持续3d以上)。
步骤4：生物有机肥的制备
当固态发酵仓中的温度低于45℃时，将制备的生防菌剂按菌液体积与堆料质量比4.0％的接种量，接入到堆肥体系中，通过二次发酵工艺即得蓝莓专用抗虫生物有机肥。22d左右有机肥完全腐熟。测定发芽指数大于80％、虫卵含量为0％时，表明生物有机肥前期产品已制备成功，将堆料进行粉碎、过筛，制成粉料，可根据商业需要进行造粒等，制得一种蓝莓专用抗虫生物有机肥。
生产得到的成品蓝莓专用抗虫生物有机肥的成分指标如下：
对比例3：
步骤1：堆肥原材料的预处理
将新鲜貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按3～4.5:1～1.5的质量比混合均匀，使其C/N在20-25之间，平摊在地面晾晒至含水率达50～60％备用。
步骤2：复合微生物发酵菌剂和生防菌剂的制备
将枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号分别单独利用发酵罐进行发酵生产，使菌液浓度达到108～109CFU·ml-1，发酵后的枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌菌液按体积百分比1：0.5:0.5混合作为复合微生物发酵菌剂，苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号发酵菌液作为生防菌剂。
复合微生物发酵菌剂的制备所需培养基成分为蛋白胨10.0g/L、牛肉浸出粉3.0g/L、氯化钠5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.4；生防菌剂的制备所需培养基成分为氯化钠10.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、酵母粉提取物5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.0。
步骤3：静态好氧堆肥体系的建立
将预处理过的新鲜貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按3～4.5:1～1.5的质量比加入到带有搅拌功能的固态发酵仓中，通过机械搅拌使其充分混匀，在机械搅拌混匀的同时往固态发酵仓中接种5％(体积质量比)复合微生物发酵菌剂，进行半封闭好氧发酵。堆肥第5d温度即达到55℃以上，并在第6d达到最高的61.98℃，温度55℃以上持续8d，达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55℃以上持续3d以上)。
步骤4：生物有机肥的制备
当固态发酵仓中的温度低于45℃时，将制备的生防菌剂按菌液体积与堆料质量比4.0％的接种量，接入到堆肥体系中，通过二次发酵工艺即得蓝莓专用抗虫生物有机肥。26d左右有机肥完全腐熟。测定发芽指数大于80％、虫卵含量为0％时，表明生物有机肥前期产品已制备成功，将堆料进行粉碎、过筛，制成粉料，可根据商业需要进行造粒等，制得一种蓝莓专用抗虫生物有机肥。
总结：通过上述对比可知：缺少枯草芽孢杆菌ABTNL-2号菌的复合菌剂使堆肥的高温持续时间缩短了4d，腐熟时间延长了4d，说明其在复合菌剂中发挥重要作用。
对比例4
步骤1：堆肥原材料的预处理
将新鲜貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按3～4.5:1～1.5的质量比混合均匀，使其C/N在20-25之间，平摊在地面晾晒至含水率达50～60％备用。
步骤2：复合微生物发酵菌剂和生防菌剂的制备
将地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号分别单独利用发酵罐进行发酵生产，使菌液浓度达到108～109CFU·ml-1，发酵后的地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌菌液按体积百分比1：0.5:0.5混合作为复合微生物发酵菌剂，苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号发酵菌液作为生防菌剂。
复合微生物发酵菌剂的制备所需培养基成分为蛋白胨10.0g/L、牛肉浸出粉3.0g/L、氯化钠5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.4；生防菌剂的制备所需培养基成分为氯化钠10.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、酵母粉提取物5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.0。
步骤3：静态好氧堆肥体系的建立
将预处理过的新鲜貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按3～4.5:1～1.5的质量比加入到带有搅拌功能的固态发酵仓中，通过机械搅拌使其充分混匀，在机械搅拌混匀的同时往固态发酵仓中接种5％(体积质量比)复合微生物发酵菌剂，进行半封闭好氧发酵。堆肥第4d温度即达到55℃以上，并在第7d达到最高的60.17℃，温度55℃以上持续7d，达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55℃以上持续3d以上)。
步骤4：生物有机肥的制备
当固态发酵仓中的温度低于45℃时，将制备的生防菌剂按菌液体积与堆料质量比4.0％的接种量，接入到堆肥体系中，通过二次发酵工艺即得蓝莓专用抗虫生物有机肥。27d左右有机肥完全腐熟。测定发芽指数大于80％、虫卵含量为0％时，表明生物有机肥前期产品已制备成功，将堆料进行粉碎、过筛，制成粉料，可根据商业需要进行造粒等，制得一种蓝莓专用抗虫生物有机肥。
总结：通过上述对比可知：缺少苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号的复合菌剂使堆肥的高温持续时间缩短了5d，腐熟时间延长了5d，说明其在复合菌剂中发挥重要作用。
对比例5：
步骤1：堆肥原材料的预处理
将新鲜貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按3～4.5:1～1.5的质量比混合均匀，使其C/N在20-25之间，平摊在地面晾晒至含水率达50～60％备用。
步骤2：复合微生物发酵菌剂和生防菌剂的制备
将地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌和普通苏云金芽孢杆菌分别单独利用发酵罐进行发酵生产，使菌液浓度达到108～109CFU·ml-1，发酵后的地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌菌液按体积百分比1：1：0.5:0.5混合作为复合微生物发酵菌剂，普通苏云金芽孢杆菌发酵菌液作为生防菌剂。
复合微生物发酵菌剂的制备所需培养基成分为蛋白胨10.0g/L、牛肉浸出粉3.0g/L、氯化钠5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.4；生防菌剂的制备所需培养基成分为氯化钠10.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、酵母粉提取物5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.0。
步骤3：静态好氧堆肥体系的建立
将预处理过的新鲜貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按3～4.5:1～1.5的质量比加入到带有搅拌功能的固态发酵仓中，通过机械搅拌使其充分混匀，在机械搅拌混匀的同时往固态发酵仓中接种5％(体积质量比)复合微生物发酵菌剂，进行半封闭好氧发酵。堆肥第3d温度即达到55℃以上，并在第5d达到最高的61.04℃，温度55℃以上持续11d，达到了我国《粪便无害化卫生标准(GB7959-87)》的标准(55℃以上持续3d以上)。
步骤4：生物有机肥的制备
当固态发酵仓中的温度低于45℃时，将制备的生防菌剂按菌液体积与堆料质量比4.0％的接种量，接入到堆肥体系中，通过二次发酵工艺即得蓝莓专用抗虫生物有机肥。24d左右有机肥完全腐熟。测定发芽指数大于80％、虫卵含量为0％时，表明生物有机肥前期产品已制备成功，将堆料进行粉碎、过筛，制成粉料，可根据商业需要进行造粒等，制得一种蓝莓专用抗虫生物有机肥。
总结：之后与含有相同量的苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号的本发明生物有机肥分别对蓝莓进行施肥，观察蓝莓生长状况和生物防治效果，发现施用本发明有机肥的蓝莓没有呈现虫害发病症状，而施用含有对比例5普通苏云金芽孢杆菌的生物有机肥的蓝莓，60％蓝莓植株的嫩叶、嫩芽以及蓝莓的花蕾被蚜虫破坏，植物失去绿色，改变颜色，整颗蓝莓苗缩小，严重的会导致枝叶枯萎；发现施用本发明有机肥的植物根部均观察不到蛴螬的幼虫等病虫害的存在，而施用含有对比例5普通苏云金芽孢杆菌的有机肥的植物的根部则依然可以发现少量的蛴螬的幼虫，对病虫害的杀灭率为65％左右。
本对比例普通苏云金芽孢杆菌通过自行提取获得，通过多次提取，进行多次试验，效果均类似，与本发明使用的苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号，在效果上有显著区别。

Claims (5)

1.一种蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法，其特征在于，以新鲜貂粪和粒径≤1cm玉米秸秆为主要堆肥原料，调节C/N在20-25之间，晾晒2-3天，直至堆料含水率降至50～60％再建立静态好氧堆肥体系。
2.根据权利要求1所述蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法，其特征在于，复合微生物发酵菌剂在建堆初期接入堆肥体系中，而生防菌剂在堆肥体系的降温期接入，采用二次发酵工艺即得具有抗虫功效的蓝莓专用生物有机肥，其中：所述复合微生物发酵菌剂是由地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌和环状芽孢杆菌组成，生防菌剂是由苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号构成。
所述地衣芽孢杆菌ABTNL-1号保藏编号：CGMCC NO.10037、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号保藏编号：CGMCC NO.10038、苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号保藏编号：CGMCC NO.10036。
3.根据权利要求2所述蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、堆肥原材料的预处理
将貂粪与粒径≤1cm玉米秸秆按(3～4.5):(1～1.5)的质量比混合均匀，使其C/N在20-25之间，平摊在地面晾晒至含水率达50～60％；
S2、复合微生物发酵菌剂和生防菌剂的制备
将地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号分别单独利用发酵罐进行发酵生产，使菌液浓度达到108～109CFU·ml-1，发酵后的地衣芽孢杆菌ABTNL-1号、枯草芽孢杆菌ABTNL-2号、土壤芽孢杆菌、环状芽孢杆菌菌液按体积百分比(1～2):(1～2)：(0.5～1):(0.5～1)混合作为复合微生物发酵菌剂，苏云金芽孢杆菌ABTNL-4号发酵菌液作为生防菌剂；
S3、静态好氧堆肥体系的建立
将步骤S2所制备的复合微生物发酵菌剂按菌液体积与堆料质量比2.0～5.0％的接种量，接种到经步骤S1预处理过的堆料中，从而建立静态好氧堆肥体系；
S4、生物有机肥的制备
当S3所建立的静态好氧堆肥体系进入到降温期，将步骤S2所制备的生防菌剂按菌液体积与堆料质量比2.0～5.0％的接种量，接入到堆肥体系中，通过二次发酵工艺即得蓝莓专用抗虫生物有机肥。
4.根据权利要求3所述蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法，其特征在于，当静态好氧堆肥体系温度首次出现下降时进行翻堆处理，并及时补充水分，让静态好氧堆肥体系中的功能微生物继续进行好氧发酵，加速生物有机肥的腐熟进程。
5.根据权利要求3所述蓝莓专用抗虫生物有机肥的制备方法，其特征在于，复合微生物发酵菌剂的制备所需培养基成分为蛋白胨10.0g/L、牛肉浸出粉3.0g/L、氯化钠5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.4；生防菌剂的制备所需培养基成分为氯化钠10.0g/L、胰蛋白胨10.0g/L、酵母粉提取物5.0g/L，用5mol/L NaOH调pH至7.0。
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