CN102947273A

CN102947273A - 茚并喹啉酮类化合物及其制备方法和用途

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Publication number: CN102947273A
Application number: CN2011800245357A
Authority: CN
Inventors: 宋云龙; 付小旦; 亓云鹏
Original assignee: Second Military Medical University SMMU
Current assignee: Second Military Medical University SMMU
Priority date: 2010-05-17
Filing date: 2011-05-17
Publication date: 2013-02-27
Anticipated expiration: 2031-05-17
Also published as: WO2011144020A1; CN102250000A; CN102947273B; EP2573072A1; EP2573072A4; US20130102598A1; US9181193B2

Abstract

一类式(A)所示的茚并喹啉酮类化合物，式中各基团定义如说明书所述。这些化合物可以特异性的抑制拓扑异构酶I，对人肺癌、结肠癌、乳腺癌、肝癌等多种肿瘤细胞均有良好的活性，可以用于制备抗肿瘤药物。还公开了所述式(A)化合物的制法，含所述化合物的药物组合物及其在制备抗肿瘤等药物中的应用。

Description

茚并喹啉酮类化合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及医药技术领域，更具体而言，本发明涉及一类茚并喹啉酮类化合物，本发明还涉及该类化合物的组合物、制备方法及其在制备抗肿瘤药、抗真菌药和抗病毒药物中的用途。背景技术

恶性肿瘤是严重威胁人类生命和生活质量的主要疾病之一。近年来，肿瘤化疗取得了相当大的进步，肿瘤患者生存时间明显延长，特别是对白血病、恶性淋巴瘤等的治疗有了较大突破，但对危害人类生命健康最严重的、占恶性肿瘤 90%以上的实体瘤 (包括肺癌、肝癌、膀胱癌及结肠癌等)的治疗依然未能达到满意效果。

随着生命科学研究的飞速进展，肿瘤机制被逐步阐明，相继出现了抑制肿瘤生长因子、干预肿瘤信号传导、抑制肿瘤血管生成以及诱导肿瘤细胞凋亡等新方向；但是，由于恶性肿瘤的发病机制非常复杂，近年的临床实践表明它们只有和细胞毒药物联合应用才能取得较好的临床疗效。因此，以肿瘤细胞中与分化增殖相关的关键酶作为药物靶标，发现选择性作用于特定靶点的高效、低毒、特异性强的新型抗癌药物仍然具有重要意义。

拓扑异构酶 I (Topi) 已成为设计新型抗癌药物的关键靶酶之一。它是细胞生存的必需酶，参与 DNA复制、转录、重组、修复的全过程；而且多种肿瘤细胞中尤其是肺癌、胃癌、结肠癌、卵巢癌等 Topi的含量明显高于正常细胞。这些都使得 Topi抑制剂类药物不仅疗效高、抗瘤谱广，而且对肿瘤细胞还具有很好的选择性，现已被美国国家癌症研究所列为重点研究的六大类抗肿瘤药物之一。

在各类 Topi抑制剂中，喜树碱 (CPT)类化合物研究最为深入，也是最经典的 Topi特异性的抑制剂，已成为近年来抗肿瘤药物研究的一个亮点。该类化合物中，伊诺替康 (CPT-11)和拓扑替康已成功上市，被用于转移性的结直肠癌和顽固性的卵巢癌等的治疗，取得了良好的疗效。因此，喜树碱衍生物与紫杉醇和维甲酸类化合物已被誉为二十世纪 90年代抗癌药物的三大发现。然而，该类化合物还存在如下突出问题： 1) 体内代谢不稳定，活性必需的 E环内酯结构在人体内过快地水解成羧酸盐形式，羧酸盐形式不仅对 Topi 无效，而且更易与人血清白蛋白结合； 2)Topl 切割复合物 (Toplcc)需要维持一定长的时间才能转化为 DNA损伤，然而喜树碱易于从 Toplcc解离，因此临床上使用喜树碱类药物时必须延长静滴时间； 3)水溶性差，喜树碱独特的五环共轭平面结构具有较强的疏水性，导致其水溶性较差； 4)喜树碱类药物存在一定的毒副作用，比如白细胞减少、恶心、呕吐等，限制了安全剂量并进而限制了药物疗效； 5)耐药性，现在已有数个 Topi的喜树碱耐药突变株报道，最常见的有 Asn722， Arg364等的突变均可导致喜树碱耐药性的产生。

非喜树碱类 Topi抑制剂已经成为近年来抗癌药研究热点。 Indolocarbazole类化合物是目前研究较为深入的一类，该类化合物中的 J-107088 (Edotecarin)已进入临床研究，然而有研究表明该类化合物并不是 Topi特异性的抑制剂，还有抑制蛋白激酶 C或检查点激酶 Chk-1的活性。此外， Luotonine A、 Lamellarin D也是近年来从自然界分离得到的 Topi抑制剂，但它们大都存在结构复杂、特异性差、毒副作用较大等问题，目前临床广为使用的仍然只有喜树碱类抗肿瘤药物。

在非喜树碱类 Topi抑制剂中，茚并异喹啉类化合物日益引起人们的关注。该类化合物中， NSC 314622在 1978年被美国普渡大学 Cushman课题组首次合成得到，发现具有较强的抗肿瘤活性。但其作用机制一直都不清楚。直到 1998年 NCI的 Pommier等发现 Topi是茚并异喹啉类抗肿瘤化合物的作用靶点。这一结果的阐明推动了对该类化合物的深入研究。 Cushman课题组和 NCI合作，迄今已合成了四、五百个茚并异喹啉类化合物，进行了系统的 Topi抑制作用以及抗肿瘤活性研究，阐明了该类化合物的构效关系，获得了该类化合物与 Topl-DNA共价复合物的晶体结构。茚并异喹啉类化合物中， NSC 706744， NSC 725776和 NSC 724998显示了突出的体外、体内抗肿瘤活性和 Topi抑制活性，其中后二者已进入 NCI的临床研究。

NSC 706744 NSC725776 NSC724998

茚并异喹啉类化合物与喜树碱类化合物相比，具有数个独特的优点： 1) 该类结构化学上非常稳定，不象喜树碱分子中含有易水解的羟基内酯环； 2) NSC 314622能引起 Topi介导的 DNA 断裂，但是其造成的断裂位点不同于 CPT, 这可能有助于其靶向基因组上不同的作用位点，有可能发现与喜树碱类药物治疗谱不同的高效抗肿瘤药物； 3) 该类化合物与 Topl-DNA复合物形成的三元复合物更稳定。喜树碱类化合物形成的可切割复合物具有可逆性，为了更好地发挥其抗肿瘤活性，通常需要长时间的静滴，而该类化合物的这一优势就可以克服这方面的问题； 4). 该类化合物有助于克服喜树碱类药物的易耐药、水溶性差等缺点。

拓扑异构酶 Π和微管蛋白抑制剂的研究经验表明，作用机制相同但结构类型不同的抗肿瘤药物，具有不同的抗肿瘤谱。因此，本领域迫切需要开发全新结构类型的高效、低毒的非喜树碱类 Topi抑制剂。发明内容

本发明目的是为了提供一类新型茚并喹啉酮类化合物或其药学上可接受的盐。本发明同时公开了该类化合物的制备方法、医疗用途和组合物。

本发明根据目前已经进入 NCI临床研究阶段的茚并异喹啉酮类 Topi抑制剂，采用骨架跃迁技术和计算机辅助药物设计技术，设计、合成了一类全新结构的茚并喹啉酮类 Topi抑制剂，对多种肿瘤细胞的活性测试表明，该类化合物显示了良好的广谱抗肿瘤活性，特别是对肝癌等多种实体瘤显示了显著的抗瘤活性，有望开发成为一类全新结构的抗肿瘤新药。在本发明的第一方面，提供了一种通式 (A)所示的茚并喹啉酮类化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前体药物或多

式中，

Ri的取代位置可位于 1至 4位，可以是单、双或多取代； R₂的取代位置可位于 7至 10位，可以是单、双或多取代；所述的、 R₂取代基为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷氧基； c) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷基； d) 取代或未取代的 C2-6的直链或支链的烯基； e) 取代或未取代的 C2-6的直链或支链的块基； f) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷酰胺基； g) 取代或未取代的芳基或 5-6元杂环芳基； h) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷酰基； i) 取代或未取代的 Cl-8的直链或支链烷酰氧基； j) 硝基； k) 氨基； 1) 羟基； m) 卤素； n) 亚甲二氧基； ₀) 亚乙二氧基； p) 氰基；

R₃和 R₃' 中一个为无，另一个为 -(CH₂)_mR4，其中 m为 1-8，可为饱和或不饱和的含氮杂环、卤素或 NR₅R6，其中 R₅、为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8 的直链与支链的烷基； c) 取代或未取代的芳基或 3-8元杂环芳基；且当 R₃为无时， 0与 6位的 C之间为双键且 N与 6位的 C之间为单键；当 R₃'为无时， 0与 6位的 C之间为单键且 N 与 6位的 C之间为双键；

所述的取代是指被下列一个或多个取代基所取代： C1-5烷基、 C2-5烯基、 C2-5块基、 C1-5 烷氧基、卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基和氧代。

在另一优选例中，所述化合物具有通式 (I)或 (II):

(I) (ll)

其中，、 R₂和 R₃的定义如上所述。

在另一优选例中，是位于 2和 3位的单取代或双取代。

在另一优选例中， R₂是位于 8和 9位的单取代或双取代。

在另一优选例中，的取代位置可位于 2和 3位中的任一个或两个；和 /或 R₂的取代位置可位于 8和 9位中的任一个或两个。

在另一优选例中，为下列基团中的任一类： a) 氢； b) C1-8的直链或支链烷氧基； c) 卤素；和 /或 R₂为下列基团中的任一类： a) 氢； b) C1-8的直链或支链烷氧基； c) 卤素；和 /或

R₃为 -(CH₂)_mR4，其中 m为 1-4，可为饱和或不饱和的 4-7元含氮杂环、卤素或 NR₅R6，其中 R₅、为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8的直链与支链的烷基。

在另一优选例中， m为 2-5，更佳地为 2-3。

在另一优选例中， R₃的 m为 2-3， R4可为饱和或不饱和的 5-6元含氮杂环、卤素或 NR₅R6，其中 R₅、为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8的直链与支链的烷基。

在另一优选例中，为单取代时，取代位置在 2位，其取代基为 C1-8的直链或支链烷氧基；为双取代时；取代位置在 2、 3位，其取代基为 C1-8的直链或支链烷氧基。

在另一优选例中， R₂的取代位置在 9位，其取代基为氢、卤素、 C1-8的直链或支链烷氧基。

在另一优选例中， R₃为卤代乙基、二甲胺基乙基、二乙胺基乙基、哌啶基乙基、吗啉基乙基、吡咯烷基乙基、咪唑基乙基、二甲胺基丙基、二乙胺基丙基、哌啶基丙基、吗啉基丙基、吡咯烷基丙基、咪唑基丙基。

在另一优选例中， R₃为 -CH₂CH₂Br。

在另一优选例中，所述化合物为化合物 1-50，更佳地为化合物 1、 6、 12、 14、 15、 20、 31、 44和 46。

在本发明的第二方面，提供了一种组合物，它含有本发明第一方面所述的化合物或其药学上可接受的盐及药学上接受的载体。

在另一优选例中，所述的组合物为药物组合物。

在本发明的第三方面，提供了第一方面所述的化合物或其药学上可接受的盐的用途，它被 (a)用于制备抗肿瘤药、抗真菌药、抗病毒药物；（b)用于制备抑制拓扑异构酶 I的药物组合物；和 /或 (c)用作拓扑异构酶 I抑制剂。

在另一优选例中，所述的肿瘤为非小细胞肺癌、结肠癌、乳腺癌或肝癌。

在本发明的第四方面，提供了第一方面所述的化合物的制备方法，包括下列步骤：在惰性溶剂中，碱性条件下，将式 VII化合物与 R₃X或其盐进行反应，从而形成式 I和式 II化合物

(I) (ll) 式中，、 R₂、 R₃的定义如上所述， X为离去基团，并且所述的 R₃X的盐为无机酸盐或有机酸盐。

较佳地，所述的离去基团包括卤素或其它大的负电性基团，如苯磺酸基、对甲苯磺酸基、三氟甲磺酸基等基团。

在另一优选例中，所述反应在碱性条件 (例如，在碳酸钠、碳酸钾、和 /或氢化钠等碱存在 )下进行。

在另一优选例中，反应时间为 0.5-24小时。

在另一优选例中，所述的惰性溶剂包括： DMF、 DMSO或其组合。

在另

(') (ID

其中，、 R₂、 R₃、 X以及 R₃X的盐如上所述。

在另一优选例中，所述的中间体 (IV)的合成中使用的无机酸为盐酸。

在另一优选例中，所述的中间体 (V)的合成中使用的有机酸为浓硫酸或甲磺酸。

在另一优选例中，所述的中间体 (VI)的合成中使用的有机酸钠为乙酸钠。

在另一优选例中，所述的目标化合物 (I)或 (II)的合成中使用的有机溶剂为无水 DMF。在本发明的第五方面，提供了一种体外非治疗性地抑制拓扑异构酶 I的方法，包括步骤：将拓扑异构酶 I与第一方面所述的化合物接触。

在本发明的第六方面，提供了一种抑制拓扑异构酶 I的方法，包括步骤：给需要的对象施用第一方面所述的化合物或第二方面所述的药物组合物。

在本发明的第七方面，提供了一种治疗拓扑异构酶 I相关疾病的方法，包括步骤：给需要的对象施用第一方面所述的化合物或第二方面所述的药物组合物。

在另一优选例中，所述的拓扑异构酶 I相关疾病包括肿瘤 (如非小细胞肺癌、结肠癌、乳腺癌或肝癌）。

在另一优选例中，所述的对象包括哺乳动物 (如人)。

在另一优选例中，施用剂量为安全有效量。

在本发明的第八方面，提供了制备药物组合物的方法，包括步骤：将第一方面所述的化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体混合，从而形成药物组合物。应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文 (如实施例）中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。发明详述

本发明人经过广泛而深入的研究，基于目前发现的代表性的茚并异喹啉酮类 Topi抑制剂，采用骨架跃迁技术，将 B环跃迁为环内酰胺反转后的产物，首次设计、合成了一类结构新颖的茚并喹啉酮类化合物。本发明的化合物化学结构稳定，水溶性好。实验结果表明，该化合物具有显著的 Topi 抑制活性和广谱的抗肿瘤活性，尤其对肝癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌等多种实体瘤具有显著的活性。在此基础上完成了本发明。在本发明中，式 I和式 Π化合物可视为同分异构体，在制备该类化合物时，碱性环境中脱去酰胺的氢质子后，形成的活泼中间体存在两种主要的共振式，即 N上带负电荷的酰胺负离子和 0上带负电荷的酚氧负离子，二者都可以与亲电试剂 (如卤代烃、磺酸酯等)反应，从而同时生成两种烷基化的目标化合物。

本发明所述的芳基是芳香烃分子中去掉一个氢原子后所剩下的原子团称为芳基。芳香烃是一类具有芳香性的化合物，其化学性质稳定，不易加成，不易氧化，容易取代和碳环异常稳定的特性，不同于一般的饱和化合物的性质，包括： 1) 单环芳烃，分子中只含有一个苯环，如苯、甲苯、乙苯、苯乙烯等； 2) 多环芳烃，分子中含有 2个或 2个以上的苯环，如联苯、萘、蒽、菲等； 3) 非苯芳烃，分子中不含苯环，但含有结构及性质与苯环相似的芳烃，并具有芳香族化合物的特性，如环戊二烯负离子等。

所述的取代芳基是指芳基上的氢原子被其它取代基所取代得到的基团。

本发明中，所述的杂环芳基除非有特别说明，代表稳定的 5或 6元单环芳香环体系，也可以代表 9或 10元苯稠芳杂环体系或二环稠芳杂环体系，它们由碳原子和由 1至 4个从 N、 0、 S中选的 1至 3个杂原子组成，其中 N、 S杂原子可以被随意氧化， N杂原子还可以被随意季铵化。

本发明的进一步较佳实施例中，的取代位置可位于 2和 3位中的任一个或两个， Ri为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8 的直链或支链烷氧基； c) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷基； d) 取代或未取代的 C2-6的直链或支链的烯基； e) 取代或未取代的 C2-6的直链或支链的块基； f) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷酰胺基； g) 取代或未取代的芳基或 5-6元杂环芳基； h) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷酰氧基； i) 硝基; j) 氨基； k) 羟基； 1) 卤素； m) 亚甲二氧基； n) 亚乙二氧基； R₂的取代位置可位于 8和 9位中的任一个或两个， R₂为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷氧基； c) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷基； d) 取代或未取代的 C2-6的直链或支链的烯基； e) 取代或未取代的 C2-6的直链或支链的块基； f) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷酰胺基； g) 取代或未取代的芳基或 5-6元杂环芳基； h) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷酰氧基； i) 硝基； j) 氨基； k) 羟基； 1) 卤素； m) 亚甲二氧基； n) 亚乙二氧基； R₃为- (CH₂)_mR4，其中 m为 1-8， R4可为饱和或不饱和的含氮杂环、卤素或 NR₅R6，其中 R₅、为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8 的直链与支链的烷基； c) 取代或未取代的芳基或 5-6元杂环芳基；所述的取代是指被下列一个或多个取代基所取代： C1-5烷基、 C2-5烯基、 C2-5 块基、 C1-5烷氧基、卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基和氧代。

本发明的一较佳实施例中，的取代位置可位于 2和 3位中的任一个或两个， Ri为下列基团中的任一类： a. 氢； b. C1-8的直链或支链烷氧基； R₂的取代位置可位于 8和 9位中的任一个或两个， R₂为下列基团中的任一类： a. 氢； b. C1-8 的直链或支链烷氧基； c. 卤素； R₃为 -(CH₂)_mR4 , 其中 m为 1-4， R4可为饱和或不饱和的 4-7元含氮杂环、卤素或 NR₅R6，其中 R₅、 R6为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8的直链与支链的烷基。

本发明的一较佳实施例中，的取代位置可位于 2和 3位中的任一个或两个， Ri为下列基团中的任一类： a. 氢； b. C1-8的直链或支链烷氧基； R₂的取代位置可位于 8和 9位中的任一个或两个， R₂为下列基团中的任一类： a. 氢； b. C1-8 的直链或支链烷氧基； c. 卤素； R₃为 -(CH₂)_mR4 , 其中 m为 1-4， R4可为饱和或不饱和的 5-6元含氮杂环、卤素或 NR₅R6，其中 R₅、 R6为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8的直链与支链的烷基。

更佳地， R₃的 m为 2-3， R4可为饱和或不饱和的 5-6元含氮杂环、卤素或 NR₅R6，其中 R₅、 R6为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8的直链与支链的烷基。

更佳地，本发明所述的茚并喹啉酮类化合物中，为单取代时，取代位置在 2位，其取代基为 C1-8的直链或支链烷氧基；为双取代时；取代位置在 2、 3位，其取代基为 C1-8的直链或支链烷氧基。

更佳地，本发明所述的茚并喹啉酮类化合物中， R₂的取代位置在 9位，其取代基为氢、卤素、 C1-8的直链或支链烷氧基。

更佳地，本发明所述的茚并喹啉酮类化合物中， R₃为卤代乙基、二甲胺基乙基、二乙胺基乙基、哌啶基乙基、吗啉基乙基、吡咯烷基乙基、咪唑基乙基、二甲胺基丙基、二乙胺基丙基、哌啶基丙基、吗啉基丙基、吡咯烷基丙基、咪唑基丙基。

在本发明的实施例中，如通式 (I)所述的茚并喹啉酮类化合物，各取代基团组合包含并不限于下表：

在本发明的实施例中，如通式 (II)所述的茚并喹啉酮类化合物，各取代基团组合包含并不限于下表：

本发明的另一目的是提供了上述茚并喹啉酮类化合物的制备方法。

本发明式 A化合物可通过如下的方法制得，然而该方法的条件，例如反应物、溶剂、碱、所用化合物的量、反应温度、反应所需时间等不限于下面的解释。本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述的或本领域已知的各种合成方法组合起来而方便的制得，这样的组合可由本发明所属领域的技术人员容易的进行。

在本发明的制备方法中，各反应通常在惰性溶剂中，在 -20°C至回流温度 (较佳地优选 -10 °C〜100°C，更佳地 0°C〜80°C)下进行。反应时间通常为 0.1 小时〜 24小时，较佳地 0.5〜12 小时，更佳地 1〜5小时。

在一优选

(II) 其中，、 R₂、 R₃的定义如上所述， X为离去基团 (如卤素或其它带负电荷的易离去基团，如磺酸基)，；

(1) 中间体 (IV)的合成

将水合氯醛、盐酸羟胺和各种取代的苯胺 (III)加入稀的无机酸中搅拌，后加热到 40-70 °C 加热反应得到中间体 (IV)。使用的无机酸优选为盐酸。

(2) 中间体 (V)的合成

中间体 (IV)在有机酸中加热 80-100 °0反应生成中间体 (V)。所用的有机酸优选为浓硫酸或甲磺酸

(3) 中间体 (VI)的合成

将中间体 (V)、有机酸钠和各种取代的苯乙酸混合，加热 150-200 V，得到中间体 (VI)。使用的有机酸钠优选为乙酸钠

(4) 中间体 (VII)的合成通法

将中间体 (VI)加入到多聚磷酸 (PPA)中，加热到 80-130 °C得到中间体 (VII) ;

(5) 目标化合物 (I)或 (II)的合成通法

将中间体 (VII)溶解在有机溶剂中，加入碱搅拌，并加入各种卤代烃或其盐，加热搅拌，反应得到目标化合物 (I)或 (II)。使用的有机溶剂优选为无水 DMF。

所述的 ^代烃的盐，包括其无机酸盐 (如盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐等)和有机酸盐 (如乙酸盐、甲磺酸盐、苹果酸盐等)。

更具体地，本发明涉及到的茚并喹啉酮类化合物的合成步骤为：

(1) 各种苯环取代的苯胺 (III)在水溶剂中，与三氯水合乙醛、盐酸羟胺、无水硫酸钠，加热至 40-100 °C反应生成苯环取代的肟基乙酰苯胺 (IV);

(2)各种苯环取代的肟基乙酰苯胺 (IV)在甲基磺酸加热条件下反应生成苯环取代的靛红 (V);

(3)各种苯环取代的靛红 (V)在乙酸钠催化条件下与各种取代的苯乙酸加热至 150-200 °〇反应生成苯环取代的中间体 (VI);

(4)各种苯环取代的中间体 (VI)在多聚磷酸中，加热至 80-130 °C反应生成各种苯环取代的中间体 (VII);

(5)各种苯环取代的中间体 (VII)在 DMF溶剂中，与各种氯代烃或其盐在氢化钠条件下反应得到各种苯环取代的的通式 (I)或 (Π)中化合物。

本发明的某些茚并喹啉酮类化合物可按照常规方法制备为其药学接受的盐的形式。包括其无机酸盐和有机酸盐：无机酸包括 (但不限于)盐酸、硫酸、磷酸、二磷酸、氢溴酸、硝酸等；有机酸包括 (但不限于)乙酸、马来酸、富马酸、酒石酸、琥珀酸、乳酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、草酸等。或其他常规的 "前体药物"的形式 (当以这种形式给药时，在体内可转化成活性部分)。此外，本发明化合物还包括其他常规的 "前体药物" 的形式 (当以这种形式给药时，在体内可转化成活性部分)。

本发明的式 (A)化合物具有抑制 Topi 的作用，并具有抗肿瘤活性。由于 Topi超家族蛋白序列比较保守，现有技术也暗示本发明的化合物具有抗病毒活性 (Journal of Biological Chemistry, 1994， 269:7051)及抗真菌活性 (FEMS Microbiology Letters, 1996, 138:105), 因此本发明的化合物可以用于制备相应的治疗药物。

本发明的化合物具有良好的抗肿瘤活性，它们可以用于治疗肿瘤，包括但不限于食道、胃、肠、直肠、口腔、咽、喉、肺、结肠、乳腺、子宫、子宫内膜、卵巢、前列腺、睾丸、膀胱、肾、肝、胰腺、骨、结缔组织、皮肤、眼、脑和中枢神经系统等部位发生的癌症，以及甲状腺癌、白血病、霍杰金式病、淋巴瘤和骨髓瘤等。药物组合物和施用方法

本发明的茚并喹啉酮类化合物的药理活性使其可以用于制备抗肿瘤、抗真菌及抗病毒药物，因此本发明还包括以这些化合物或其药学可接受的盐作为活性成分的药物组合物，该药物组合物中还含有药学上接受的载体，可以是固体形式或是液体形式，所述的药物剂型可以是片剂、胶囊、粉末剂、颗粒剂、混悬剂、或注射剂。

本发明还包括治疗方法，它包括给哺乳动物施用药物有效量的式 A化合物或其药学上可接受的盐。

当本发明化合物用于上述用途时，可与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合，如溶剂、稀释剂等，而且可以用如下形式口服给药：片剂、丸剂、胶囊、可分散的粉末、颗粒或悬浮液 (；含有如约 0.05-5%悬浮剂)、糖浆 (；含有如约 10-50%糖)、和酏剂 (；含有约 20-50%乙醇)，或以外用方式给药：软膏剂、凝胶、含药胶布等，或者以无菌可注射溶液或悬浮液形式 (在等渗介质中含有约 0.05-5%悬浮剂)进行非肠胃给药。例如，这些药物制剂可含有与载体混合的约 0.01-99%, 更佳地约为 0.1%-90% (；重量)的活性成分。

所用的活性成分的有效剂量可随所用的化合物、给药的模式和待治疗的疾病的严重程度而变化。然而，通常当本发明的化合物每天以约 0.25-1000mg/kg动物体重的剂量给予时，能得到令人满意的效果，较佳地每天以 2-4次分开的剂量给予，或以缓释形式给药。对大部分大型哺乳动物而言，每天的总剂量约为 l-100mg/kg，较佳地约为 2-80mg/kg。适用于内服的剂量形式，包含与固态或液态药学上可接受的载体密切混合的约 0.25-500mg的活性化合物。可调节此剂量方案以提供最佳治疗应答。例如，由治疗状况的迫切要求，可每天给予若干次分开的剂量，或将剂量按比例地减少。

这些活性化合物可通过口服以及瘤内、静脉内、肌内或皮下等途径给药。固态载体包括：淀粉、乳糖、磷酸二钙、微晶纤维素、蔗糖和白陶土，而液态载体包括：无菌水、聚乙二醇、非离子型表面活性剂和食用油 (如玉米油、花生油和芝麻油)，只要适合活性成分的特性和所需的特定给药方式。在制备药物组合物中通常使用的佐剂也可有利地被包括，例如调味剂、色素、防腐剂和抗氧化剂如维生素 E、维生素 C、 BHT和 BHA。

从易于制备和给药的立场看，优选的药物组合物是固态组合物，尤其是片剂和固体填充或液体填充的胶囊。化合物的瘤内和口服给药是优选的。

这些活性化合物也可肠胃外或腹腔内给药。也可在适当混合有表面活性剂 (如羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮)的水中制备这些活性化合物 (作为游离碱或药学上可接受的盐)的溶液或悬浮液。还可在甘油、液体、聚乙二醇及其在油中的混合物中制备分散液。在常规储存和使用条件下，这些制剂中含有防腐剂以防止微生物生长。

适应于注射的药物形式包括：无菌水溶液或分散液和无菌粉 (用于临时制备无菌注射溶液或分散液)。在所有情况中，这些形式必须是无菌的且必须是流体以易于注射器排出流体。在制造和储存条件下必须是稳定的，且必须能防止微生物 (如细菌和真菌)的污染影响。载体可以是溶剂或分散介质，其中含有如水、醇 (如甘油、丙二醇和液态聚乙二醇)、它们的适当混合物和植物油。

此外，本发明化合物还可与其他一种（或多种）抗癌活性成分特别是抗癌化合物联用，例如烷基化试剂，如烷基磺酸酯（白消安）、氮烯咪胺、甲基苄肼、氮芥类化合物（氯甲川、苯丙氨酸氮芥、瘤可宁）、环磷酰胺或异环磷酰胺；亚硝基脲类，如卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀或链脲菌素；抗肿瘤生物碱，如长春新碱或长春碱；紫杉烷类，如紫杉醇或泰素帝 (taxotere), 抗肿瘤抗生素类，如放线菌素；插入试剂、抗肿瘤代谢物、叶酸拮抗剂或甲氨蝶呤；嘌呤合成抑制剂；嘌呤类似物，如 6-巯鸟嘌呤；嘧啶合成抑制剂、芳香化酶抑制剂、卡培它滨或嘧啶类似物，如氟尿嘧啶、吉西他滨、阿糖胞苷和胞嘧啶阿拉伯糖苷；布喹那 (brequinar), 拓扑异构酶抑制剂，如喜树碱或依托泊甙；抗癌激素激动剂和拮抗剂，包括它莫西芬；激酶抑制剂、甲磺酸伊马替尼 (imatinib)、生长因子抑制剂、抗癌金属复合物、蒽环类抗生素等、抗血管生成药等。

"安全有效量 "指的是：化合物的量足以改善病情，而不至于产生严重的副作用。安全有效量根据治疗对象的年龄、病情、疗程等来确定。

"药学上可接受的载体"指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。 "相容性"在此指代是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的疗效。药学上可接受的载体部分例子有糖（如葡萄糖、蔗糖、乳糖等），淀粉（如玉米淀粉、马铃薯淀粉等），纤维素及其衍生物（如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等），明胶，滑石粉，固体润滑剂 (如硬脂酸钠、硬脂酸镁），硫酸钙，植物油（如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等），多元醇 (如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等），乳化剂（如吐温类）、润湿剂（如十二烷基磺酸钠），着色剂，调味剂，稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水等。本发明的主要优点在于：

(a) 提供了一类结构新颖、 Topi抑制活性强的化合物。

(b) 具有广谱的抗肿瘤活性，对多种实体瘤有显著的抑制生长的作用。

(c) 水溶性好、化学结构稳定，有望开发成为创新抗肿瘤药物。具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。实施例 1: 6-(2 物 1)的合成:

1. 肟基乙酰苯胺的合成

取水合氯醛 1.49 g(9 mmol)和无水硫酸钠 7.62 g(54 mmol)加水 25 mL，迅速搅拌至澄清；称取盐酸羟胺 6.84 g(42 mmol)加入稀盐酸溶解 C9 mL水： 1 mL浓 HC1)后，加入苯胺 1.23 g(8 mmol),搅拌形成悬浊液，将此悬浊液加入到水合氯醛的水溶液中，搅拌 5 min后，转移至 45 油浴，加热反应 2 h， TLC检测反应完全后，冰浴中搅拌冷却后，过滤烘干，得到肟基乙酰苯胺固体。

2. 靛红的合成

取 5 mL甲基磺酸加热至 50 V , 分批缓慢加入肟基乙酰苯胺，在加的过程中保持温度在 60-70 °C，投料完毕升温至 70-80 °C反应 15 min， TLC检测反应完毕，反应液倒入碎冰中，析出红色固体，低温 (0 °C)静置 lO min, 过滤烘干，得到靛红粗品。

进一步提纯方法： 25 g靛红粗品加入到 125 mL热水中，称 11 g 的氢氧化钠溶于 25 mL水配成溶液，加入到热水中搅拌溶解；配成 1 M的稀盐酸溶液缓慢滴加到靛红水溶液中，边加边搅拌至有少量固体析出，过滤，母液加浓盐酸酸化至 pH=2〜3，快速冷却后过滤，得到靛红纯

Π

ΡΠ。

3. 3-(4-甲氧基苯基) -2-氧代 -1,2-二氢喹啉 -4-羧酸的合成

将 7.5 mmol靛红 (III)和 1.875 mmol乙酸钠， 13.125 mmol对甲氧基苯乙酸混合后，加热至

150-200 °C回流 1-5 h， TLC检测反应完成，依次用石油醚、丙酮洗涤后，柱层析分离，得到标题化合物。

4. 9-甲氧基 -5H-茚并 [l，2-c]喹啉 -6,11-二酮的合成

将 12.3 mmol3-(4-甲氧基苯基) -2-氧代 -1,2-二氢喹啉 -4-羧酸加入到 27 g 多聚磷酸中，加热到 130 °C反应 l h， TLC检测反应完成，倒入冰水中，静置后过滤，用甲醇洗涤，烘干，得到标题化合物。 Mp: 294-296 °C; 1H NMR (300 MHz, OMSO-d₆) δ 3.81 (s, 3H, OCH₃)， 6.79 (s, 1H, Ar-H), 6.90-7.12 (m， 3H, Ar-H), 7.35-7.39 (m， 2H, Ar-H), 7.42 (d, 1H, J = 8.1 Hz, Ar-H), 12.31-12.32 (br， 1H, NH); ESI-MS m/z (rel intensity) 278.2 [MH+， 100].

5. 6- (二甲胺基乙基) -9-甲氧基 -11H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -11-酮 (表 1中化合物 1)的合成

将l mmol的9-甲氧基-5H-茚并[l，2-c]喹啉-6，l l-二酮溶解在15 mL的DMF中，冷却至0 °C，分批缓慢加入 6 mmol的 NaH (；含 40%的矿物油)，加完后除去冰浴，加入 1.2 mmol的二甲胺基氯乙烷盐酸盐。室温搅拌 l h后，放入预先升温至 40-80 的油浴锅中反应 1 - 8 h。 TLC检测反应完毕，减压蒸除去溶剂，柱层析得到化合物 1纯品 (Rf=0.059，石油醚：丙酮 =3:1)。实施例 2-30

重复实施例 1，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物 2-30。具体如下：

(1)将 9-甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与二乙胺基氯乙烷盐酸盐、吡咯烷基氯乙烷盐酸盐、 1H-咪唑基氯乙烷盐酸盐、吗啉基氯乙烷盐酸盐、二甲胺基氯丙烷盐酸盐、 1，2-二溴乙烷反应可分别合成表 1中化合物 2、 3、 4、 5、 6、 30。

(2)将 9-氯 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与二甲胺基氯乙烷盐酸盐、二乙胺基氯乙烷盐酸盐、吡咯烷基氯乙烷盐酸盐、 1H-咪唑基氯乙烷盐酸盐、哌啶基氯乙烷盐酸盐、二甲胺基氯丙烷盐酸盐反应可分别合成表 1中化合物 7、 8、 9、 10、 11、 12。

(3)将 2，9-二甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与二甲胺基氯乙烷盐酸盐、二乙胺基氯乙烷盐酸盐、哌啶基氯乙烷盐酸盐、二甲胺基氯丙烷盐酸盐反应可分别合成表 1中化合物 13、 14、 15、 16。

(4)将 2，8-二甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与二甲胺基氯乙烷盐酸盐、可合成表 1中化合物 17

(5)将 2-甲氧基 -9-溴 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与吡咯烷基氯乙烷盐酸盐、 1H-咪唑基氯乙烷盐酸盐反应可分别合成表 1中化合物 18、 19。

(6)将 2，3，9-三甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与二甲胺基氯乙烷盐酸盐、二乙胺基氯乙烷盐酸盐、吡咯烷基氯乙烷盐酸盐、吗啉基氯乙烷盐酸盐、哌啶基氯乙烷盐酸盐、二甲胺基氯丙烷盐酸盐反应可分别合成表 1中化合物 20、 21、 22、 23、 24、 25。

(7) 将 2，3-二甲氧基 -9-氯 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与二甲胺基氯乙烷盐酸盐、 1H-咪唑基氯乙烷盐酸盐、吗啉基氯乙烷盐酸盐、二甲胺基氯丙烷盐酸盐反应可分别合成表 1 中化合物 26、 27、 28、 29。实施例 31

5- (二甲胺基乙基) -9-甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-酮 (表 3中化合物 31)的合成：

步骤 1-4. 同实施例 1

步骤 5. 5-(2-二甲胺基乙基 )-9-甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮 (表 3中化合物 31)的合成将 1 mmol的 9-甲氧基 -5H-茚并 [l，2-c]喹啉 -6,11-二酮溶解在 15 mL的 DMF中，冷却至 0 。C，分批缓慢加入 6 mmol的 NaH (；含 40%的矿物油)，加完后除去冰浴，加入 1.2 mmol的二甲胺基氯乙烷盐酸盐。室温搅拌 1 h后，放入预先升温至 40-80 的油浴锅中反应 1 - 8 h。 TLC 检测反应完毕，减压蒸除去溶剂，柱层析得到化合物 31纯品 (Rf=0.017，石油醚：丙酮 =3: 1)。

化合物 1和化合物 31为同一反应制备得到的两个目标化合物，可通过柱层析进行分离纯化。实施例 32-50

重复实施例 31，不同点在于：使用不同的原料，从而制得化合物 32-50。具体如下：

(1)将 9-甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与吡咯烷基氯乙烷盐酸盐、吗啉基氯乙烷盐酸盐、二甲胺基氯丙烷盐酸盐反应可分别合成表 3中化合物 32、 33、 34。

(2)将 9-氯 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与二甲胺基氯乙烷盐酸盐、二乙胺基氯乙烷盐酸盐、吡咯烷基氯乙烷盐酸盐、 1H-咪唑基氯乙烷盐酸盐、哌啶基氯乙烷盐酸盐、二甲胺基氯丙烷盐酸盐反应可分别合成表 3中化合物 35、 36、 37、 38、 39、 40。

(3)将 2，9-二甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮与二甲胺基氯乙烷盐酸盐可合成表 3中化合物 41。

(4)将 2，8-二甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮与二甲胺基氯乙烷盐酸盐可合成表 3中化合物 42。

(5)将 2-甲氧基 9-溴 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮与 1H-咪唑基氯乙烷盐酸盐可合成表 3中化合物 43。

(6)将 2，3，9-三甲氧基 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与吡咯烷基氯乙烷盐酸盐、吗啉基氯乙烷盐酸盐、二甲胺基氯丙烷盐酸盐反应可分别合成表 3中化合物 44、 45、 46。

(7) 将 2，3-二甲氧基 -9-氯 -5H-茚并 [1，2-_C]喹啉 -6,11-二酮分别与二甲胺基氯乙烷盐酸盐、 1H-咪唑基氯乙烷盐酸盐、吗啉基氯乙烷盐酸盐、二甲胺基氯丙烷盐酸盐反应可分别合成表 3 中化合物 47、 48、 49、 50。本发明合成的通式 (I)中目标产物的化学结构见表 1。核磁氢谱、质谱、红外和熔点系统表征了目标产物的化学结构，其具体数据见表 1、 2。

表 1 通式（la)中目标化合物结构

22 OCH₃ OCH3 OCH3 H CH₂CH₂N|^ 181-183 435.54[M+H]⁺

23 OCH3 OCH3 OCH3 H CH₂CH₂I^ 209-211 451.35[M+H]⁺

24 OCH3 OCH3 OCH3 H CH₂CH₂I^ ^ 180-182 449.63 [M+H]⁺

25 OCH3 OCH3 OCH3 H CH₂CH₂CH₂N(CH₃)₂ 208-210 423.77[M+H]⁺

26 OCH3 OCH3 CI H CH₂CH₂N(CH₃)₂ 143-145 413.35[M+H]⁺

27 OCH3 OCH3 CI H 〇Η₂〇Η₂Ν^^ 203-205 437.85[M+H]⁺

28 OCH3 OCH3 CI H CH₂CH₂I^ 206-208 456.75[M+H]⁺

29 OCH3 OCH3 CI H CH₂CH₂CH₂N(CH₃)₂ 260(dec) 427.60[M+H]⁺

30 H H OCH3 H CH₂CH₂Br NT 384.92[M+H]⁺

NT =未测定； dec =分解

化合物 1-30分别为实施例 1-30中制备的化合物。表 2 通式 (la)中目标化合物的氢谱、质谱数据

8.49 (s， 1H, Ar-H), 8.68 (d， 1H, J= 9.0 Hz, Ar-H); (CDC1₃) 1291, 1210,

1055

2.68 (s， 6H， N(CH₃)₂)， 3.28 (t， 2H, CH₂)， 3.88 (s， 3H, OCH₃)， 3.96 (s， 2924, 1707,

3H, OCH₃), 4.91 (t， 2H, CH₂)， 6.94 (dd， 1H, J_; = 8.1 Hz, J₂ = 2.7 Hz, 1474, 1432,

Ar-H), 7.20 (d， 1H， J = 2.4 Hz, Ar-H), 7.23 (dd， 1H, J_; = 9.3 Hz, J₂ = 1384, 1274,

3.0 Hz, Ar-H), 7.66 (d， 1H， J = 8.1 Hz, Ar-H), 7.68 (d， 1H， J = 9.3 Hz, 1212, 1054

Ar-H), 8.01 (d, 1H, J= 2.7 Hz, Ar-H); (CDC1₃)

1.21 (t， 6H， N(CH₃)₂)， 2.88 (d, 4H， J= 7.2 Hz, CH₂)， 3.20(d, 2H, J= 4.2 2960, 2920,

Hz, CH₂)， 3.87 (s, 3H, OCH₃), 3.95 (s, 3H, OCH₃), 4.82 (t， 2H, CH₂)， 1709, 1485,

6.92 (dd， 1H， J_; = 8.4 Hz, J₂ = 2.7 Hz, Ar-H), 7.19 (d, 1H， J = 2.4 Hz, 1462, 1373,

Ar-H), 7.30 (d， 1H, J = 2.7 Hz, Ar-H), 7.66 (d， 1H， J = 9.3 Hz, Ar-H), 1277, 1213,

7.68 (d, 1H, J= 8.1 Hz, Ar-H), 7.99 (d， 1H, J= 2.7 Hz, Ar-H); (CDC1₃) 1024

1.55-1.59 (m,2H,CH₂), 1.78-1.80 (m， 4H， CH₂)， 2.82-2.87 (m， 4H， 2923, 1710,

CH₂)， 3.18 (t, 2H, CH₂)， 3.88 (s, 3H, OCH₃), 3.96 (s, 3H, OCH₃), 4.90 1475, 1428,

(t， 2H, CH₂)， 6.93 (dd， 1H， = 8.1 Hz, J₂ = 2.4 Hz, Ar-H), 7.18 (d， 1H, 1371, 1219,

J= 2.4 Hz, Ar-H), 7.22 (dd， 1H, J! = 9.3 Hz, J₂ = 3.0 Hz, Ar-H), 7.67 (d， 1024

2H, J= 9.0 Hz, Ar-H), 8.00 (d， 1H, J= 3.0 Hz, Ar-H); (CDC1₃)

2.58 (t， 2H, CH₂)， 2.87 (s， 6H， N(CH₃)₂)， 3.28 (t， 2H, CH₂)， 3.87 (s， 3H, 2922, 1713,

OCH3), 3.95 (s， 3H, OCH3), 4.71 (t， 2H, CH₂)， 6.97 (dd， 1H, J_; = 8.4 1466, 1384,

Hz, J 2 = 2.4 Hz, Ar-H), 7.19 (dd， 1H， J_; = 6.0 Hz, J₂ = 2.7 Hz, Ar-H), 1275, 1216,

7.23 (d, 1H， J = 2.7 Hz, Ar-H), 7.65 (d, 2H, J = 9.3 Hz, Ar-H), 7.98 (d, 1026

1H, J= 5.7 Hz, Ar-H); (CDC1₃)

2.45 (s, 6H， N(CH₃)₂)， 2.93 (t, 2H, CH₂)， 3.95 (s, 3H, OCH₃), 3.98 (s, 2925, 1699,

3H, OCH3), 4.75 (t， 2H, CH₂)， 6.71 (dd， 1H, J_; = 8.4 Hz, J₂ = 2.4 Hz, 1487, 1432,

Ar-H), 7.25 (d， 1H， J = 3.0 Hz, Ar-H), 7.45 (d， 1H， J = 2.4 Hz, Ar-H), 1384, 1289,

7.60 (d, 1H, J = 8.1 Hz, Ar-H), 7.72 (d, 1H, J = 9.0 Hz, Ar-H), 8.10 (d, 1225, 1044

1H, J= 2.7 Hz, Ar-H); (CDC1₃)

1.83-1.87 (m， 4H， CH₂)， 2.74 (s, 4H， CH₂)， 3.09 (t, 2H, CH₂)， 3.97 (s, 2960, 2922,

3H, OCH3), 4.79 (t， 2H, CH₂)， 7.28 (t， 1H, Ar-H), 7.60 (dd， 1H, = 7.8 1714, 1459,

Hz, J 2 = 1.8 Hz, Ar-H), 7.70 (d， 1H, J = 1.2 Hz, Ar-H), 7.72 (d， 2H, J = 1384, 1293,

1.5 Hz, Ar-H), 8.00 (d， 1H，J= 3.0 Hz, Ar-H); (CDC1₃) 1211, 1026

3.86 (s, 3H, OCH3), 4.54 (t, 2H, CH₂), 4.78 (t, 2H, CH₂), 6.92 (s, 1H, 2956, 2924,

Ar-H), 7.32 (dd， 2H, J_; = 9.0 Hz, J₂ = 2.1 Hz, Ar-H), 7.49 (d， 1H， J = 1716, 1449,

7.8 Hz, Ar-H), 7.62 (d， 2H, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.74 (d， 1H, J = 7.8 Hz, 1384, 1286 Ar-H), 7.81 (d, 1H， J= 2.7 Hz, Ar-H), 7.83 (s， 1H， Ar-H); (OMSO-d₆)

2.80 (s， 6H， N(CH₃)₂)， 3.40 (t， 2H, CH₂)， 3.87 (s， 3H, OCH₃), 4.02 (s， 2937, 1707,

3H, OCH3), 4.05 (s, 3H, OCH₃), 5.00 (t， 2H, CH₂),6.91-6.95 (m， 1H, 1463, 1426,

Ar-H), 7.12 (s, 1H, Ar-H), 7.17 (d, 1H, J= 2.4 Hz, Ar-H), 7.58 (d, 1H, J 1384, 1276,

= 7.5 Hz, Ar-H), 7.96 (s， 1H, Ar-H); (CDC1₃) 1213, 1031 2.7 Hz, Ar-H), 7.30-7.35 (m， 2H, Ar-H), 7.48 (d, 1H, J= 7.8 Hz, Ar-H), 1362, 1255, 7.74 (d, 1H, J= 2.7 Hz, Ar-H); (CDC1₃+1滴 CH₃OH) 1057

3.87 (s, 3H, OCH3), 4.97 (t, 2H, CH₂), 5.35 (t, 2H, CH₂), 6.92-6.96 (m, 2941, 1719, 1H, Ar-H), 7.19 (d, 1H， J = 2.7 Hz, Ar-H), 7.31-7.34 (m， 2H, Ar-H), 1477, 1433,

30

7.51 (d, 1H, J= 5.7 Hz, Ar-H), 8.00 (dd， 1H, = 8.1 Hz, J₂ = 0.3 Hz, 1384, 1032 Ar-H), 8.67-8.70 (m， 1H, Ar-H); (CDC1₃) 本发明合成的通式 (II)中目标目标产物的化学结构见表 3。核磁氢谱、质谱、红外和熔点系统表征了目标产物的化学结构，其具体数据见表 3、 4。

49 OCH₃ OCH3 CI H CH₂CH₂I^ 258-260 455.4(MH+， 100)

50 OCH3 OCH3 CI H CH₂CH₂CH₂N(CH₃)₂ 201-203 427.5(MH⁺, 100) dec =分解

化合物 31-50分别为实施例 31-50中制备的化合物。

实施例 51: 体外抗肿瘤活性测试试验

1. 实验菌株：

本实验采用肿瘤细胞株系分别为： A549(人肺癌细胞）、 Colo205(人结肠癌细胞）、 MDA-MB-435(人乳腺癌细胞)、 HepG2(人肝癌细胞 )(购自上海医药工业研究院)。

2. 样品配制：

用 DMSO(Merck)溶解后，加入 PBS (-)配成 100(^g/mL的溶液或均匀的混悬液，然后用含 DMSO的 PBSO稀释。阳性对照药为 10-羟基喜树碱 CHCPT)。

3. 试验方法

MTT法： 96孔板每孔加入浓度为 4〜5 X 10⁴个 /mL的细胞悬液 100 \iL, 置 37 °C， 5% C0₂ 培养箱内。 24 h后，加入样品液， 10 μΙ7孔，设双复孔， 37 ， 5% C0₂作用 72 h。每孔加入 5 mg/mL的 MTT溶液 20 μL,作用 4 h后加入溶解液， 100 μΙ7孔，置培养箱内，溶解后用 ΜΚ-2 全自动酶标仪测 570 nm OD值。（体外抗肿瘤活性见表 5、表 6) 表 5.通式 (la)中部分样品对人体肿瘤细胞的体外增殖抑制作用

A549 Colo205 MDA-MB-435 HepG2 化合物

IC50 lOO g/mL IC₅₀ lOO g/mL IC₅₀ lOO g/mL IC₅₀ lOO g/mL 编号

^g/mL) IC% ^g/mL) IC% ^g/mL) IC% ^g/mL) IC%

1 0.983 100 0.621 100 1.00 95.81 0.721 99.40

2 1.53 100 0.427 100 1.99 100 2.50 100

3 14.39 99.90 10.97 92.33 26.55 100 24.99 80.79

4 16.61 78.34 13.51 60.32 >100 48.21 >100 34.87

5 >100 48.72 >100 43.88 >100 19.75 >100 13.97

6 1.14 100 0.719 100 3.64 100 2.17 98.33

7 15.12 90.29 6.46 100 4.91 100 22.95 100

8 28.56 84.24 15.16 99.01 31.62 100 28.84 73.57

9 5.78 100 7.10 71.11 12.28 100 15.99 82.92

10 14.48 97.57 31.06 80.16 15.02 99.70 34.93 92.06

11 32.73 69.84 39.33 69.24 44.76 69.43 55.62 63.27

12 3.04 88.18 1.16 100 0.585 100 3.19 100

13 17.27 100 1.79 96.52 4.34 100 2.47 100

14 6.11 100 0.580 97.47 1.29 99.95 0.552 100

15 6.95 100 3.13 100 6.88 99.08 5.02 100

16 2.91 100 3.49 100 4.09 100 3.48 100

17 18.26 85.30 6.70 100 4.98 100 10.31 100

18 >100 35.69 >100 43.88 24.86 67.72 >100 35.48

19 >100 17.66 18.70 80.89 42.24 59.37 >100 37.50

20 13.78 100 0.606 93.79 0.99 99.28 1.28 99.17

21 1.68 100 2.56 88.97 1.17 93.41 0.700 93.16

22 1.43 97.05 1.30 93.84 1.85 100 8.61 81.69

24 10.32 93.92 5.15 98.38 8.92 90.85 10.78 98.55

25 2.02 100 1.15 90.36 2.66 85.38 1.58 89.70

26 6.89 100 1.45 100 10.51 100 11.27 97.91

27 >100 35.12 25.50 66.27 91.52 51.23 56.61 57.51

29 1.04 100 1.47 98.69 1.45 100 3.71 91.20

30 >100 19.48 >100 21.11 >100 31.90 >100 0

HCPT 0.00364 84.68 0.00490 88.14 0.00127 96.71 0.147 100 表 6.通式 (Ila)中部分样品对人体肿瘤细胞的体外增殖抑制作用

A549 Colo205 MDA-MB-435 HepG2 化合物

IC₅₀ lOO g/mL IC₅₀ lOO g/mL IC₅₀ lOO g/mL IC₅₀ lOO g/mL 编号

^g/mL) IC% ^g/mL) IC% ^g/mL) IC% ^g/mL) IC%

31 1.72 93.62 1.20 88.35 1.83 86.09 0.746 90.60

32 8.58 92.32 7.45 92.85 10.73 96.48 6.92 70.03

33 >100 40.55 >100 29.31 >100 27.19 >100 4.57

34 6.58 100 6.82 99.54 19.78 100 ^ 100 49.68

35 19.04 72.15 3.89 100 3.88 100 20.09 100

36 78.22 61.01 28.58 79.84 28.86 83.69 61.69 59.74

37 58.58 61.64 36.76 69.37 41.01 70.26 >100 24.95

38 13.16 100 18.77 95.16 9.37 100 22.97 88.62

39 >100 47.81 >100 13.12 >100 14.88 >100 22.39

40 3.25 86.70 3.16 100 1.52 100 11.51 100

41 ^ 100 49.27 0.632 83.62 0.703 77.77 3.36 85.01

42 8.03 87.75 1.27 100 3.12 100 3.77 100

43 >100 4.26 34.21 87.42 83.60 53.07 >100 9.73 bo

o

44 1.42 94.74 0.346 92.66 0.014 78.20 1.93 84.59

45 37.85 62.84 16.76 66.89 7.86 72.95 6.27 84.31

46 12.52 68.78 22.18 87.44 0.267 85.86 12.02 90.77

47 10.60 87.20 1.66 88.74 5.30 100 8.33 64.50

48 23.76 79.61 11.75 89.59 12.36 100 60.46 62.67

49 >100 28.48 69.03 50.06 >100 48.01 21.05 59.34

50 3.59 85.91 15.89 76.93 1.12 3.71 36.98

HCPT 0.00364 84.68 0.00490 88.14 0.00127 96.71 0.147 100 从表 5、表 6可知，本发明的茚并喹啉酮类化合物对人肺癌、结肠癌、乳腺癌和肝癌显示了较好的广谱抗肿瘤活性，特别是部分化合物对人肝癌细胞系显示了更好的细胞毒活性，预示着本发明的化合物可望有良好的开发前景。实施例 52: 拓扑异构酶 I抑制活性试验

运用文献方法 (Dexheimer TS, Pommier Y. DNA cleavage assay for the identification of topoisomerase I inhibitors. Nature Protocols. 2008， 3 : 1736-50.)，对合成的实施例化合物进行了拓扑异构酶 I抑制活性试验，发现它们在 0.01-100 uM范围内具有良好的抑制 Topi的活性，其中，阳性对照药喜树碱的抑酶活性为 ++++，本发明的部分化合物，比如 15为 ++++，与喜树碱相当；本发明的部分化合物比如 5、 7、 11、 13、 14、 42、 46为 +++，其它化合物也显示了不同程度的抑酶活性。实施例 53: 体内抗肿瘤活性试验

运用文献方法 (魏泓. 医学实验动物学. 第 2版. 成都：四川科学技术出版社，2001 : 595-596) 对部分化合物在人肺癌细胞 A549裸鼠模型进行体内活性测试实验，发现在 l-200mg/kg体重剂量下，本发明化合物 1、 6、 14、 20、 31和 46等具有良好的体内抗肿瘤活性。实施例 54

药物组合物

处方：

实施例中化合物 7 20.0g

淀粉 80.0g

乳糖 60.0g

微晶纤维素 35.0g

10%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液

硬脂酸镁

共制 1000粒

将化合物 7及各种辅料过 80 目筛，按处方量取，以 10%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液为粘合剂，用 16目筛制成适宜的颗粒， 65 °C干燥， 14目筛整粒，加入硬脂酸镁混合均匀，测颗粒含量，计算装量，装入胶囊，即得。本发明化合物具有广谱抗肿瘤活性活性，特别是部分化合物对肝癌、肺癌、结肠癌、乳腺癌具有较强的抗肿瘤活性，具有很好的开发价值。本发明的茚并喹啉酮类化合物代表着一类全新结构的具有抗肿瘤活性的化合物，这为深入研究和开发新的抗肿瘤药物开辟了新的途径和方向。在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims

权利要求一种通式 (A)所示的茚并喹啉酮类化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前体药物型物：

式中，

Ri的取代位置可位于 1至 4位，可以是单、双或多取代； R₂的取代位置可位于 7至 10位，可以是单、双或多取代；所述的、 R₂取代基为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷氧基； c) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷基； d) 取代或未取代的 C2-6的直链或支链的烯基； e) 取代或未取代的 C2-6的直链或支链的块基； f) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷酰胺基； g) 取代或未取代的芳基或 5-6元杂环芳基； h) 取代或未取代的 C1-8的直链或支链烷酰基； i) 取代或未取代的 Cl-8的直链或支链烷酰氧基； j) 硝基； k) 氨基； 1) 羟基； m) 卤素； n) 亚甲二氧基； ₀) 亚乙二氧基； p) 氰基；

R₃和 R₃' 中一个为无，另一个为 -(CH₂)_mR4，其中 m为 1-8，可为饱和或不饱和的含氮杂环、卤素或 NR₅R6，其中 R₅、为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8 的直链与支链的烷基； c) 取代或未取代的芳基或 3-8元杂环芳基；且当 R₃为无时， 0与 6位的 C之间为双键且 N与 6位的 C之间为单键；当 R₃'为无时， 0与 6位的 C之间为单键且 N 与 6位的 C之间为双键；

所述的取代是指被下列一个或多个取代基所取代： C1-5烷基、 C2-5烯基、 C2-5块基、 C1-5 烷氧基、卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基和氧代。
2. 如权利要求 1所述的化合物，其特征在于，所述化合物具有通式 (I)或 (II):

其中，、 R₂和 R₃的定义如权利要求 1中所述。
3. 如权利要求 1所述的化合物，其特征在于，的取代位置可位于 2和 3位中的任一个或两个；和 /或 R2的取代位置可位于 8和 9位中的任一个或两个。
4. 如权利要求 1所述的化合物，其特征在于，为下列基团中的任一类： a) 氢； b) Cl-8 的直链或支链烷氧基； C) 卤素；和 /或

R₂为下列基团中的任一类： a) 氢； b) C1-8的直链或支链烷氧基； c) 卤素；和 /或

R₃为 -(CH₂)_mR4，其中 m为 1-4，可为饱和或不饱和的 4-7元含氮杂环、卤素或 NR₅R6，其中 R₅、为下列基团中的任一类： a) 氢； b) 取代或未取代的 C1-8的直链与支链的烷基。
5. 如权利要求 1至 4中任一所述的化合物，其特征在于， R3的 m为 2-3，可为饱和或不饱和的 5-6元含氮杂环、卤素或 NR5R6，其中 R5、 R6为下列基团中的任一类： a) 氢； b)取代或未取代的 C1-8的直链与支链的烷基。
6. 如权利要求 1至 5中任一所述的化合物，其特征在于， R3为卤代乙基、二甲胺基乙基、二乙胺基乙基、哌啶基乙基、吗啉基乙基、吡咯烷基乙基、咪唑基乙基、二甲胺基丙基、二乙胺基丙基、哌啶基丙基、吗啉基丙基、吡咯烷基丙基、咪唑基丙基。
7. 如权利要求 1所述的化合物，其特征在于，所述化合物为化合物 1-50。
8. —种组合物，含有权利要求 1 所述的化合物或其药学上可接受的盐及药学上接受的载体。
9. 一种如权利要求 1所述的化合物或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，（a)用于制备抗肿瘤药、抗真菌药、抗病毒药物；（b)用于制备抑制拓扑异构酶 I的药物组合物；或 (c)用作拓扑异构酶 I抑制剂。
10. —种如权利要求 1所述的化合物的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：在惰性溶剂中，碱性条件下，将式 VII化合物与 R3X或其盐进行反应，从而形成式 I和式 II化合物

(I) (ll) 式中，、 R₂、 R₃的定义如权利要求 1所示， X为离去基团，且所述的 R₃X的盐可为无机酸盐或有机酸盐。