CN102942699A - 一种自增强双交联透明质酸水凝胶及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物医用材料及组织工程技术领域,公开了一种自增强双交联透明质酸水凝胶及其制备方法。制备方法分为以下步骤:双键活化的透明质酸制备、透明质酸微球制备、双键活化的透明质酸微球的制备、自增强双交联透明质酸水凝胶的制备。通过该制备方法制备得到的自增强双交联透明质酸水凝胶由双肩活化的透明质酸微球作为增强颗粒与双键活化的透明质酸分子反应制得,具有双交联网络结构。其中,双键活化的透明质酸微球的直径大小为1μm~10μm,双交联透明质酸水凝胶的孔径大小为10μm~70μm;双键取代度为2.8%~65%。与一次性交联透明质酸水凝胶相比,其胶弹性能良好,而且较好地延长对牛血清白蛋白的持续控制释放时间。
Description
技术领域
本发明属于生物医用材料及组织工程技术领域,具体涉及一种自增强双交联透明质酸水凝胶及其制备方法。
背景技术
由于年龄老化或者意外事故发生而导致人体组织缺损与功能衰退已经严重地影响了人类的健康与生活质量,目前全世界每年耗资上千亿美元用于病患者的组织修复,并且由于组织供体不足而使得很多病患者无法得到及时治疗。近年来,组织工程的发展为组织再生以及功能恢复提供了重要途径。透明质酸水凝胶由于具有内在的生物相容性、高吸水性、可注射性以及与天然细胞外基质结构相似等优异性质,在药物释放以及软骨、神经、血管、皮肤、喉管等组织工程中表现出良好的应用前景,近年来已在生物医用领域受到广泛关注。水凝胶材料由于具有内在的生物相容性、高吸水性、可注射性以及与天然细胞外基质结构相似等优异性质近年来在生物医用领域受到广泛关注。透明质酸,一种由D-葡糖醛酸和N-乙酰-D-氨基葡糖为双糖单位组成的直链高分子多糖,具有良好的生物相容性、生物可降解性、生物活性以及流变学特性,并且含有自由羧基和羟基,可在温和条件下进行改性,一直以来备受青睐,同时透明质酸又是人体组织细胞外基质的主要成分之一,能与细胞多种受体(如CD44,CD54,CD168)作用调节细胞的黏附、迁移与生长,在体内可被透明质酸酶降解为氨基葡萄糖被人体吸收,从而使透明质酸及其衍生物在药物释放以及软骨、神经、血管、皮肤、喉管等组织工程中表现出广泛的应用前景。
但传统的透明质酸水凝胶是由透明质酸大分子无规交联形成的本体胶,存在力学性能低、不能对生物活性分子进行控制释放等缺点,在组织工程应用中受到了很大的限制。为了克服这些缺点,近年来人们通过掺杂无机微米/纳米颗粒(如粘土)、疏水性聚合物微米/纳米粒子(如聚N,N-二甲基丙烯酰胺)等方法来提高透明质酸水凝胶的力学性能。无机纳米颗粒和疏水性聚合物微纳米颗粒可有效增强透明质酸水凝胶,但在人体中不能降解或降解性能差,同时存在生物相容性问题,对细胞有一定的毒害作用。此外,该体系也缺乏结合以及控制释放生长因子的功能。若将具有表面活性基团的透明质酸微米/纳米粒子作为增强颗粒引入到透明质酸水凝胶体系中制备具有双交联网络结构的透明质酸水凝胶,则透明质酸微米/纳米粒子不仅可以自增强透明质酸水凝胶的力学性能,还可用于药物、生长因子、基因等生物活性物质的控制释放。由于自增强双交联透明质酸水凝胶体系中的水凝胶基体和增强颗粒均采用相同的透明质酸组分,因而将更有利于提高体系的稳定性。
为此,本发明采用与水凝胶基体成分相同的的透明质酸微米/纳米微球作为增强颗粒,通过构建增强颗粒与基体之间的交联网络来制备自增强的双交联透明质酸水凝胶,以达到增强和控制释放生物活性分子的目的。本发明中的双交联透明质酸水凝胶制备工艺简单,重复性好,性能优异,适合于批量生产,在生物医用领域适用性广,潜在市场巨大,有很好的经济效益和社会效益,产业化前景良好。
发明内容
为了解决上述现有技术中存在的不足之处,本发明的首要目的在于提供一种自增强双交联透明质酸水凝胶。该水凝胶采用了与水凝胶基体成分相同的透明质酸微米微球作为增强颗粒,通过构建增强颗粒与基体之间的交联网络来制备自增强的双交联透明质酸水凝胶,以达到增强和控制释放生物活性分子的目的。
本发明的另一个目的在于提供一种自增强双交联透明质酸水凝胶的制备方法。该制备方法制备工艺简单,重复性好,适合批量生产。
本发明通过以下技术方案实现:
一种自增强双交联透明质酸水凝胶的制备方法,包括以下操作步骤:
(1)双键活化的透明质酸的制备:配制透明质酸水溶液,在磁力搅拌条件下,加入摩尔量相当于透明质酸的所有羟基摩尔量的20%的三乙胺,反应1h后,加入摩尔量相当于透明质酸的所有羟基摩尔量的20%的四丁基溴化铵,反应1h后,加入摩尔量为透明质酸的所有羧基摩尔量的10~100倍的甲基丙烯酸缩水甘油酯,20~30℃反应2d,60℃保温1h,然后依次在的氯化钠溶液和去离子水中分别透析,最后干燥,得到双键活化的透明质酸;
(2)透明质酸微球的制备:将水相溶液与油相溶液按体积1:14~1:56混合,涡旋至澄清,随后加入摩尔量为透明质酸结构单元上羧基的摩尔量0.5~15倍的二乙烯基砜交联剂,涡旋混合后磁搅拌反应,最后将反应液在丙酮中沉淀,并依次用丙酮、乙醇、水、乙醇和丙酮洗涤,干燥,得到透明质酸微球;
(3)双键活化的透明质酸微球的制备:将透明质酸微球用去离子水配制成微球悬液,在磁力搅拌下,依次加入摩尔量相当于透明质酸的所有羟基摩尔量的20%的三乙胺,反应1h后加入摩尔量相当于透明质酸的所有羟基摩尔量的20%的四丁基溴化铵,反应1h后,加入摩尔量为透明质酸的所有羧基摩尔量的10~100倍的甲基丙烯酸缩水甘油酯,反应2d后,离心,并用丙酮洗涤5次,干燥,得到双键活化的透明质酸微球;
(4)自增强双交联透明质酸水凝胶的制备:将步骤(1)得到的双键活化的透明质酸溶于去离子水中配置成双键活化的透明质酸水溶液,加入步骤(3)制得的双键活化的透明质酸微球,混合均匀后加入光敏剂,使光敏剂在溶液中的质量浓度为0.001g/mL,在15KJ的紫外光下辐射15min,得到水凝胶;所得水凝胶在去离子水中浸泡,去除残留杂质,干燥,得到自增强双交联透明质酸水凝胶。
步骤(1)中所述的透明质酸水溶液是将透明质酸加入去离子水中,透明质酸水溶液的质量浓度为0.002g/mL;所述的氯化钠溶液摩尔浓度为0.1mol/L;所述的透析时间为7天;所述的干燥为冷冻干燥,时间为12h~24h。
步骤(2)中所述的水相溶液是将透明质酸溶解于氢氧化钠溶液中配置成透明质酸水溶液;
所述的油相溶液是加有2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠和1-庚醇的异辛烷;
所述的磁搅拌反应是在1000rpm~3000rpm下反应10min~50min;
所述的干燥为常温真空干燥,时间为24h~48h。
所述氢氧化钠溶液的摩尔浓度为0.2mol/L,透明质酸水溶液的质量浓度为0.004g/mL;
所述的2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠在油相溶液中的摩尔浓度为0.2mol/L,1-庚醇在油相溶液中的摩尔浓度为0.04mol/L。
步骤(3)中所述的微球悬液的质量浓度为0.002g/mL;所述的离心是在8000rpm~20000rpm下离心10min~30min;所述的干燥为常温真空干燥,时间为24h~48h;所述双键活化的透明质酸微球的直径大小为1μm~10μm。
更加优选的,所述双键活化的透明质酸微球的直径大小为1μm~2μm。
步骤(4)中所述的双键活化的透明质酸水溶液的质量浓度为0.03g/mL;
所述的双键活化的透明质酸微球与双键活化的透明质酸水溶液的质量比为1:1;
所述的光敏剂为2-羟基-4′-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮、2-氧化戊二酸或1-羟基环己基苯基丙酮;
所述的在去离子水中浸泡的时间为1d~4d;
所述的干燥为常温真空干燥,时间为24h~48h。
一种由上述的制备方法制备得到的自增强双交联透明质酸水凝胶,该水凝胶具有双交联网络结构,所述水凝胶的孔径大小为10μm~70μm;双键取代度为2.8%~65%。
更加优选的,所述水凝胶的孔径大小为10μm~30μm;双键取代度为32.86%。
本发明的原理在于:本发明的出发点是透明质酸水凝胶具有内在的生物相容性、高吸水性、可注射性以及与天然细胞外基质结构相似等优异性质,近年来在生物医用领域受到广泛关注。但传统的透明质酸水凝胶是由透明质酸大分子无规交联形成的本体胶,存在力学性能低、不能对生物活性分子进行控制释放等缺点,在组织工程应用中受到了很大的限制。为此,本发明采用与水凝胶基体成分相同的的透明质酸微米微球作为增强颗粒,通过构建增强颗粒与基体之间的交联网络来制备自增强的双交联透明质酸水凝胶,以达到增强和控制释放生物活性分子的目的。
本发明与现有技术相比,具有以下优点:本发明方法制备的自增强双交联透明质酸水凝胶,是通过将表面具有活性双键的透明质酸微球作为增强颗粒与双键活化的透明质酸分子反应制。水凝胶具有双交联的网络结构,通过控制微球内部的交联密度以及微球与基体之间的交联密度,既可以实现透明质酸水凝的自增强,提高力学性能,又能对生物活性分子进行控制释放,有利于软组织的再生修复,具有良好的应用前景。
附图说明
图1是实施例1所得的双键活化的透明质酸的核磁共振氢谱图。
图2是实施例1所得的透明质酸微球在扫描电镜下的形貌图。
图3是实施例1所得的一次交联透明质酸水凝胶在扫描电镜下的形貌图。
图4是实施例1所得的双交联透明质酸水凝胶在扫描电镜下的形貌。
图5是实施例1所得的双交联透明质酸水凝胶在扫描电镜下的形貌图(图4的放大图)。
图6是实施例1所得的一次交联水凝胶和双交联水凝胶的压缩性能对比图。
图7是实施例1所得的一次交联水凝胶和双交联水凝胶的流变曲线对比图。
图8是实施例1所得的一次交联水凝胶和双交联水凝胶对牛血清白蛋白的控制释放曲线图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
实施例1:
(1)将透明质酸加入去离子水中,配置质量浓度为0.002g/mL的透明质酸水溶液。在磁力搅拌下,加入三乙胺(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后加入四丁基溴化铵(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后,向体系中加入甲基丙烯酸缩水甘油酯(加入的摩尔量为透明质酸的羧基摩尔数的50倍),20℃下反应2d后,60℃下保温1h,然后依次在摩尔浓度为0.1mol/L的氯化钠溶液和去离子水中分别透析7d,最后冷冻干燥16h,得到双键取代度为32.86%的双键活化透明质酸。如图1所示为透明质酸和双键活化的透明质酸的1H NMR谱图。如图1中A谱线所示,透明质酸的各质子峰归属如下:1.9ppm(COCH3,Hd),3.3~3.9ppm(H-2,3,4,5,6),4.4~4.6ppm(H-1)。双键活化的透明质酸在6.1,5.6和1.85ppm处均出现了新的共振吸收峰,分别对应于甲基丙烯酸缩水甘油酯的CH2=C的Hb和Hc以及C-CH3的Ha(图1中B谱线),由此说明甲基丙烯酸缩水甘油酯已成功键合到透明质酸分子链上。
(2)将透明质酸溶解于0.2mol/L氢氧化钠溶液中配置成质量浓度为0.004g/mL的透明质酸水溶液,作为水相溶液。在异辛烷中分别加入摩尔浓度为0.2mol/L的2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠和摩尔浓度为0.04mol/L的1-庚醇,制备成有机相溶液。然后油相溶液和水相溶液按体积比28:1混合,涡旋至澄清,随后加入二乙烯基砜交联剂,二乙烯基砜与透明质酸结构单元上羧基的摩尔比为6,涡旋混合后3000rpm磁搅拌反应10min。最后将反应液在丙酮中沉淀,并依次用丙酮、乙醇、水、乙醇、丙酮洗涤,常温下真空干燥24h得到透明质酸微球,其形态如图2所示。从图中可以看出透明质酸微球表面光滑,直径大小为1~2μm,分布均匀。将制得的透明质酸微球用去离子水配置成质量浓度为0.002g/mL的微球悬液。磁力搅拌下依次加入三乙胺(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后加入四丁基溴化铵(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后再加入50倍于羧基摩尔数的甲基丙烯酸缩水甘油酯,反应2d后20000rpm下离心10min,并用丙酮洗涤5次,常温下真空干燥24h得到表面双键活化的透明质酸微球,直径大小为1~2μm。
(3)将(1)步骤得到的双键活化透明质酸溶于去离子水中配置成质量浓度为0.03g/mL的透明质酸水溶液,加入(2)步骤制得的双键活化透明质酸微球(微球与透明质酸的质量比为1:1),混合均匀后加入光敏剂1-羟基环己基苯基丙酮,使其质量浓度为0.001g/mL,在15KJ的紫外光下辐射15min制得双交联透明质酸水凝胶。所得水凝胶在去离子水中浸泡2d去除残留杂质,常温真空干燥48h,得到自增强双交联透明质酸水凝胶。作为参照对比,不加入透明质酸微球,由浓度为0.06g/mL的双键活化透明质酸水溶液在其他相同条件下制得的水凝胶为一次交联透明质酸水凝胶。
一次交联透明质酸水凝胶的断面扫描电镜形貌照片如图3所示。从图中可看出水凝胶的截面呈多孔结构,孔径大小为10~100μm。双交联透明质酸水凝胶断面扫描电镜形貌照片如图4和图5(图4的放大图)所示。从图中可看出,双交联透明质酸水凝胶的孔径大小均匀,孔径10~30μm,在水凝胶的网孔中均匀的分布着透明质酸微球,且微球表面与基体之间具有明显的共价键连接,说明微球中的双键与透明质酸基体的双键在紫外光照下发生了交联作用,形成具有双交联网络结构的水凝胶体系。压缩性能测试如图6所示,由图可见,双交联透明质酸水凝胶的压缩模量比一次交联透明质酸水凝胶约提高一倍,说明双交联透明质酸水凝胶能够起到自增强的作用。低频(0.1~10Hz)下的流变学性能如图7所示,从图中可以看出双交联透明质酸水凝胶的储存模量G′和损耗模量G″均明显高于一次交联透明质酸水凝胶,说明双交联透明质酸水凝胶具有更好的粘弹性。通过对牛血清白蛋白进行负载释放的试验研究,得到的释放曲线图如图8所示。从图中可看出,双交联透明质酸水凝胶与一次交联透明质酸水凝胶相比,在牛血清白蛋白的释放前期能更好的避免爆释现象的发生,且在整个释放期间表现出慢得多的释放速度,说明双交联透明质酸水凝胶能较好地延长对牛血清白蛋白的持续控制释放时间。
实施例2:
(1)将透明质酸加入去离子水中,配置质量浓度为0.002g/mL的透明质酸水溶液。在磁力搅拌下,加入三乙胺(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后加入四丁基溴化铵(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后,向体系中加入甲基丙烯酸缩水甘油酯(加入的摩尔量为透明质酸的羧基摩尔数的10倍),30℃下反应2d后,60℃下保温1h,然后依次在摩尔浓度为0.1mol/L的氯化钠溶液和去离子水中分别透析7d,最后冷冻干燥12h,得到双键取代度为2.8%的双键活化透明质酸。
(2)将透明质酸溶解于0.2mol/L氢氧化钠溶液中配置成质量浓度为0.004g/mL的透明质酸水溶液,作为水相溶液。在异辛烷中分别加入质量浓度为0.2mol/L的2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠和质量浓度为0.04mol/L的1-庚醇,制备成有机相溶液。然后油相溶液和水相溶液按体积比14:1混合,涡旋至澄清,随后加入二乙烯基砜交联剂,二乙烯基砜与透明质酸结构单元上羧基的摩尔比为0.5,涡旋混合后2000rpm磁搅拌反应30min。最后将反应液在过量丙酮中沉淀,并依次用丙酮、乙醇、水、乙醇、丙酮洗涤,常温下真空干燥36h得到透明质酸微球,直径大小为2~5μm。将制得的透明质酸微球用去离子水配置成质量浓度为0.002g/mL的微球悬液。磁力搅拌下依次加入三乙胺(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后加入四丁基溴化铵(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后再加入10倍于羧基摩尔数的甲基丙烯酸缩水甘油酯,反应2d后8000rpm下离心30min,并用丙酮洗涤5次,常温下真空干燥36h得到表面双键活化的透明质酸微球,直径大小为2~5μm。
(3)将(1)步骤得到的双键活化透明质酸溶于去离子水中配置成质量浓度为0.03g/mL的透明质酸水溶液,加入(2)步骤制得的双键活化透明质酸微球(微球与透明质酸的质量比为1:1),混合均匀后加入光敏剂2-羟基-4′-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮,使其质量浓度为0.001g/mL,在15KJ的紫外光下辐射15min制得双交联透明质酸水凝胶。所得水凝胶在去离子水中浸泡1d去除残留杂质,常温真空干燥36h,得到自增强双交联透明质酸水凝胶,孔径50~70μm。
实施例3:
(1)将透明质酸加入去离子水中,配置质量浓度为0.002g/mL的透明质酸水溶液。在磁力搅拌下,加入三乙胺(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后加入四丁基溴化铵(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后,向体系中加入甲基丙烯酸缩水甘油酯(加入的摩尔量为透明质酸的羧基摩尔数的100倍),25℃下反应2d后,60℃下保温1h,然后依次在摩尔浓度为0.1mol/L的氯化钠溶液和去离子水中分别透析7d,最后冷冻干燥24h,得到双键取代度为65.0%的双键活化透明质酸。
(2)将透明质酸溶解于0.2mol/L氢氧化钠溶液中配置成质量浓度为0.004g/mL的透明质酸水溶液,作为水相溶液。在异辛烷中分别加入质量浓度为0.2mol/L的2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠和质量浓度为0.04mol/L的1-庚醇,制备成有机相溶液。然后油相溶液和水相溶液按体积比56:1混合,涡旋至澄清,随后加入二乙烯基砜交联剂,二乙烯基砜与透明质酸结构单元上羧基的摩尔比为15,涡旋混合后1000rpm磁搅拌反应50min。最后将反应液在过量丙酮中沉淀,并依次用丙酮、乙醇、水、乙醇、丙酮洗涤,常温下真空干燥48h得到透明质酸微球,直径大小为5~10μm。将制得的透明质酸微球用去离子水配置成质量浓度为0.002g/mL的微球悬液。磁力搅拌下依次加入三乙胺(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后加入四丁基溴化铵(加入的摩尔量为透明质酸的所有羟基摩尔数的20%),反应1h后再加入100倍于羧基摩尔数的甲基丙烯酸缩水甘油酯,反应2d后12000rpm下离心20min,并用丙酮洗涤5次,常温下真空干燥48h得到表面双键活化的透明质酸微球,直径大小为5~10μm。
(3)将(1)步骤得到的双键活化透明质酸溶于去离子水中配置成质量浓度为0.03g/mL的透明质酸水溶液,加入(2)步骤制得的双键活化透明质酸微球(微球与透明质酸的质量比为1:1),混合均匀后加入光敏剂2-氧化戊二酸,使其质量浓度为0.001g/mL,在15KJ的紫外光下辐射15min制得双交联透明质酸水凝胶。所得水凝胶在去离子水中浸泡4d去除残留杂质,常温真空干燥24h,得到自增强双交联透明质酸水凝胶,孔径30~50μm。
其中,透明质酸购买于阿拉丁试剂(上海)有限公司;三乙胺、甲基丙烯酸缩水甘油酯、四丁基溴化铵、2-羟基-4′-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮、2-氧化戊二酸、1-羟基环己基苯基丙酮、2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠购买于sigma-aldrich公司;其中异辛烷、1-庚醇购买于天津化学试剂公司;二乙烯基砜购买于北京化学试剂公司。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种自增强双交联透明质酸水凝胶的制备方法,其特征在于包括以下操作步骤:
(1)双键活化的透明质酸的制备:配制透明质酸水溶液,在磁力搅拌条件下,加入摩尔量相当于透明质酸的所有羟基摩尔量的20%的三乙胺,反应1h后,加入摩尔量相当于透明质酸的所有羟基摩尔量的20%的四丁基溴化铵,反应1h后,加入摩尔量为透明质酸的所有羧基摩尔量的10~100倍的甲基丙烯酸缩水甘油酯,20~30℃反应2d,60℃保温1h,然后依次在的氯化钠溶液和去离子水中分别透析,最后干燥,得到双键活化的透明质酸;
(2)透明质酸微球的制备:将水相溶液与油相溶液按体积1:14~1:56混合,涡旋至澄清,随后加入摩尔量为透明质酸结构单元上羧基的摩尔量0.5~15倍的二乙烯基砜交联剂,涡旋混合后磁搅拌反应,最后将反应液在丙酮中沉淀,并依次用丙酮、乙醇、水、乙醇和丙酮洗涤,干燥,得到透明质酸微球;
(3)双键活化的透明质酸微球的制备:将透明质酸微球用去离子水配制成微球悬液,在磁力搅拌下,依次加入摩尔量相当于透明质酸的所有羟基摩尔量的20%的三乙胺,反应1h后加入摩尔量相当于透明质酸的所有羟基摩尔量的20%的四丁基溴化铵,反应1h后,加入摩尔量为透明质酸的所有羧基摩尔量的10~100倍的甲基丙烯酸缩水甘油酯,反应2d后,离心,并用丙酮洗涤5次,干燥,得到双键活化的透明质酸微球;
(4)自增强双交联透明质酸水凝胶的制备:将步骤(1)得到的双键活化的透明质酸溶于去离子水中配置成双键活化的透明质酸水溶液,加入步骤(3)制得的双键活化的透明质酸微球,混合均匀后加入光敏剂,使光敏剂在溶液中的质量浓度为0.001g/mL,在15KJ的紫外光下辐射15min,得到水凝胶;所得水凝胶在去离子水中浸泡,去除残留杂质,干燥,得到自增强双交联透明质酸水凝胶。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述的透明质酸水溶液是将透明质酸加入去离子水中,透明质酸水溶液的质量浓度为0.002g/mL;所述的氯化钠溶液摩尔浓度为0.1mol/L;所述的透析时间为7天;所述的干燥为冷冻干燥,时间为12h~24h。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中所述的水相溶液是将透明质酸溶解于氢氧化钠溶液中配置成透明质酸水溶液;
所述的油相溶液是加有2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠和1-庚醇的异辛烷;
所述的磁搅拌反应是在1000rpm~3000rpm下反应10min~50min;
所述的干燥为常温真空干燥,时间为24h~48h。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述氢氧化钠溶液的摩尔浓度为0.2mol/L,透明质酸水溶液的质量浓度为0.004g/mL;
所述的2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠在油相溶液中的摩尔浓度为0.2mol/L,1-庚醇在油相溶液中的摩尔浓度为0.04mol/L。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中所述的微球悬液的质量浓度为0.002g/mL;所述的离心是在8000rpm~20000rpm下离心10min~30min;所述的干燥为常温真空干燥,时间为24h~48h;所述双键活化的透明质酸微球的直径大小为1μm~10μm。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述双键活化的透明质酸微球的直径大小为1μm~2μm。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(4)中所述的双键活化的透明质酸水溶液的质量浓度为0.03g/mL;
所述的双键活化的透明质酸微球与双键活化的透明质酸水溶液的质量比为1:1;
所述的光敏剂为2-羟基-4′-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮、2-氧化戊二酸或1-羟基环己基苯基丙酮;
所述的在去离子水中浸泡的时间为1d~4d;
所述的干燥为常温真空干燥,时间为24h~48h。
8.一种由权利要求1~7任一项所述的制备方法制备得到的自增强双交联透明质酸水凝胶,其特征在于:该水凝胶具有双交联网络结构,所述水凝胶的孔径大小为10μm~70μm;双键取代度为2.8%~65%。
9.根据权利要求8所述的一种自增强双交联透明质酸水凝胶,其特征在于:所述水凝胶的孔径大小为10μm~30μm;双键取代度为32.86%。
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