CN102920746B - 一种虫草斑蝥组合物、肠溶制剂及其应用和制法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种虫草斑蝥组合物、肠溶制剂及其应用和制法,该组合物主要由下列重量份的原料组成:5-20份冬虫夏草、0.1-10份斑蝥酸钠、5-15份维生素B6;其肠溶制剂包括片芯和肠溶包衣层,选取上述组合物和辅料制成片芯,包肠溶衣,即得本发明肠溶制剂。本发明的虫草斑蝥组合物及其制成的肠溶制剂治疗癌症的同时提高免疫力,应用于肝癌、肺癌以及卵巢癌等各种癌症的治疗取得了良好的治疗效果,肠溶制剂使药物在肠道中释放,避免胃部刺激性和毒性,提高吸收率。
Description
技术领域
本发明涉及一种虫草斑蝥组合物、肠溶制剂及其应用和制备方法,属于药物技术领域。
背景技术
近年来,肺癌、原发性肝癌、结直肠癌、妇科恶性肿瘤等的发病率逐年上升,已成为严重危害人类健康的最常见的恶性肿瘤,给我们的社会、经济、生活带来诸多不变。到2000年,依据卫生部信息中心数据,城市恶性肿瘤死亡率较大幅度上升,比十年前增幅为30.24%。从年龄上来看,目前肿瘤病人的总体增加趋势和肿瘤发病者呈年轻化趋势。但由于治疗肿瘤的费用非常昂贵,且病死率很高,许多欠发达国家和地区的患者会放弃治疗,故全球肿瘤患者的实际数量要大于以上数字。抗肿瘤主要采用手术治疗、冷冻治疗、放疗、药物等方法,其中药物治疗为最常见的治疗方法。抗肿瘤药物市场近年来呈逐年增长的势头,临床上对于新型肿瘤治疗药的需求量急剧上升。抗肿瘤药的平均增长率高于12%,大大高于其他大类药物年平均8%的增长率。
冬虫夏草有“软黄金”之誉。传统医学认为,冬虫夏草性味甘、平,归肾、肺经,具有补肾阳,益肾精,补肺气,祛痰止咳平喘的功效。现代医学研究,本品含蛋白质,多种氨基酸、糖类、醇类、核苷类、维生素、有机酸、虫胶原、虫草素、虫草酸、微量元素等。试验证实虫草具有平喘、镇咳、祛痰、抑菌、抗病毒、消炎、镇静、抗惊厥等功能,对结核杆菌有明显的抑制作用;增强肾上腺皮质激素的合成与分泌,改善肾衰患者的肾功能状态,可防治药物性肾损伤,为肾毒性抗生素的安全应用提供了途径;冬虫夏草还可以提高细胞免疫功能,对治疗乙肝及肝纤维化的早期有一定疗效;有减慢心率,降血压,降血脂,抑制血栓形成,抗应激,抗衰老,抗癌等作用。
现有技术中,贵州神奇集团柏强制药有限公司生产的斑蝥酸钠维生素B6注射液收载于化学药品地标升国标1册,并于2011年进行修订,标准号为WS-10001-(HD-0046)-2002-2011,是由斑蝥酸钠和维生素B6配制而成的抗肿瘤注射剂,主要用于晚期原发性肝癌及晚期肺癌的治疗。其中的斑蝥酸钠(NatriiCantharidas)由斑蝥素经过氧化钠水解而得,可降低肿瘤细胞cAMP磷酸二酯酶活性,提高过氧化氢酶活力,还能刺激骨髓造血系统,升高白细胞。故临床用于原发性肝癌等肿瘤和白细胞低下症,也可用于肝炎、肝硬化及乙型肝炎病毒携带者。斑蝥酸钠不仅保持了斑蝥素特有的抗癌活性,且毒副作用比斑蝥素小,是一种较为理想的抗癌药物。
本发明人员通过长期对抗癌药物研究,意外发现将冬虫夏草和现有的斑蝥酸钠维生素B6合用,治疗癌症的同时提高免疫力,对肝癌、肺癌等癌症具有更好的疗效,比两者间单独作用强,且对骨髓细胞无抑制作用。同时,由于斑蝥酸钠对对消化道、肾脏具有一定的毒性和刺激性,且在胃内部分还原为斑蝥素,加强了对胃部的刺激,故选择将其制备成肠溶制剂,提高产品的生物利用度和稳定性,更能发挥其抗癌、提高免疫作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种虫草斑蝥组合物,所述组合物按重量份计,包含5-20份冬虫夏草、0.1-10份斑蝥酸钠、5-15份维生素B6。
具体地说,本发明提供的虫草斑蝥组合物,按重量份计,包含8-16份冬虫夏草、2-8份斑蝥酸钠、8-12份维生素B6。
更加具体地,本发明提供的虫草斑蝥组合物,按重量份计,包含12份冬虫夏草、5份斑蝥酸钠、10份维生素B6。
本发明的另一个目的在于提供一种虫草斑蝥组合物肠溶制剂,所述肠溶制剂包括片芯和肠溶衣层,所述片芯由前述虫草斑蝥组合物和辅料制成;所述肠溶衣层是由肠溶型薄膜包衣预混悬剂和纯化水制成。
本发明所述肠溶制剂,其剂型为肠溶片、肠溶胶囊或肠溶颗粒,优选肠溶片。
本发明肠溶制剂中,片芯包含主药5-20份冬虫夏草、0.1-10份斑蝥酸钠、5-15份维生素B,辅料54-126份羧甲基淀粉钠、66-154份微晶纤维素、3684份羟丙纤维素、5-10份硬脂酸镁和5-10份滑石粉;还包括粘合剂,所述粘合剂为羟丙甲纤维素的乙醇水溶液,是由4%羟丙甲纤维素和15%乙醇水溶液配制而成。
所述粘合剂的用量为本领域技术人员公知的常规用量,即能够达到常用片剂、颗粒剂、胶囊剂的工艺中制粒的用量即可。
所述肠溶衣层包含肠溶型薄膜包衣预混悬剂肠溶型欧巴代250-350份和纯化水1000-1500份。
本发明的另一个目的是提供这种肠溶制剂的制备方法,包括以下步骤:
1)冬虫夏草经粉碎后过60—80目筛,灭菌备用;斑蝥酸钠、维生素B6、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素、硬脂酸镁、滑石粉过80目筛,备用;配制4%羟丙甲纤维素15%乙醇溶液,备用;
2)取处方量的冬虫夏草、斑蝥酸钠、维生素B6,和一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素放入湿法混合颗粒机中干混5-10min,再加入适量的粘合剂制成湿颗粒;将湿颗粒置干燥机中沸腾干燥,使颗粒水分达到规定要求;干颗粒用3号筛于整粒机中整粒;
3)加入处方量比例的硬脂酸镁、滑石粉以及另一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素,置总混机中混合均匀;
4)测定颗粒含量,计算片重,压片;或颗粒整粒、抛光;
5)配制肠溶衣液:取处方量肠溶型薄膜包衣预混悬剂肠溶型欧巴代在搅拌下缓慢加入到纯化水中,搅拌15-30分钟后过80目筛,备用;
6)包肠溶衣,增重3~5%;
7)包装,得肠溶片;或装入胶囊,得肠溶胶囊;或装袋,得肠溶颗粒。
本发明所述虫草斑蝥组合物及其肠溶制剂中,冬虫夏草具有抑菌、抗病毒、消炎、镇静、抗惊厥等作用,能够提高细胞免疫功能,对治疗乙肝及肝纤维化的早期有一定疗效;还具有减慢心率,降血压,降血脂,抑制血栓形成,抗应激,抗衰老,抗癌等作用。斑蝥酸钠可降低肿瘤细胞cAMP磷酸二酯酶活性,提高过氧化氢酶活力,还能刺激骨髓造血系统,升高白细胞;维生素B6为B族维生素,可补充人体所需营养。三者合用后,作用协同相加,增强了其在抗肿瘤、提高免疫力方面的功效,且对骨髓细胞无抑制作用。
本发明的又一目的是提供上述虫草斑蝥组合物或其肠溶制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。
以下采用效果实验来进一步阐述本发明所述虫草斑蝥组合物及其肠溶制剂的有益效果:
试验1对实验小鼠移植性肿瘤S180、肝癌H22的抑制作用
1.1材料
实验动物:昆明种小鼠,体重20-30g,雌雄各半。
药物:A:虫草斑蝥肠溶制剂,本发明实施例1—3方法制得;B:市售斑蝥酸钠VB6注射液,规格10ml/支,批号20100513,柏强制药有限公司生产。
试剂与阳性对照药:注射用环磷酰胺;氟脲嘧啶注射液;其余试剂均为市售国产分析纯。
瘤株:小鼠移植性肿瘤S180、H22引自贵州省肿瘤研究所,每7日无菌条件下传代一次保种。
1.2方法与结果
1.2.1对小鼠移植性肿瘤S180的影响:
取传代后生长良好的S180小鼠,无菌条件下抽取腹水,用无菌生理盐水按1∶3稀释,显微镜下计数,调瘤细胞数为1.0×107个/ml(置冰浴中)。然后取正常小鼠60只,于每只小鼠腋部皮下接种0.2ml,24小时后随机分为6组,每组10只,雌、雄各半。分为对照组(生理盐水)、市售斑蝥酸钠VB6注射液组、本发明肠溶制剂组(3种剂型各一组)、阳性药环磷酰胺组。给药剂量及给药方式为:对照组:生理盐水20ml/kg,皮下注射给药;市售斑蝥酸钠VB6注射液:2.0g/kg,皮下注射给药;本发明肠溶制剂组:给药剂量2.0g/kg,片剂、胶囊剂直接灌胃给药,颗粒剂冲入开水成溶液后灌胃给药;阳性药环磷酰胺组:50mg/kg,皮下注射给药。连续给药十四天,末次给药后24小时,取小鼠按常规方法处死解剖肿瘤,称重。按下列公式计算抑制率,比较用药组同对照组差异。
抑制率(%)=(对照组平均瘤重-用药组平均瘤重)/对照组平均瘤重。结果见下表1。
由上表可以看出,市售斑蝥酸钠VB6注射液可明显抑制小鼠抑制性肿瘤S180的生长,降低瘤重,且本发明药物与市售斑蝥酸钠VB6注射液比较抑制率增加,有显著性差异P<0.05。
1.2.2对小鼠移植性肿瘤H22的影响:
取传代后生长良好的H22小鼠,无菌条件下抽取腹水,用无菌生理盐水按1∶3稀释,显微镜下计数,调瘤细胞数为1.0×107个/ml(置冰浴中)。然后取正常小鼠60只,于每只小鼠腋部皮下接种0.2ml,24小时后随机分为6组,每组10只,雌、雄各半。分为对照组(生理盐水)、市售斑蝥酸钠VB6注射液组、本发明肠溶制剂组(3种剂型各一组)、阳性药氟脲嘧啶组。给药剂量及给药方式同前。阳性药氟脲嘧啶为:10mg/kg ip,隔两日一次,共4次;连续给药十四天,末次给药后逐日记录各组小鼠死亡情况,计算各组小鼠平均生存天数,按下列公式计算生命延长率。比较用药组同对照组差异。
生命延长率(%)=(用药组平均生存天数-对照组平均生存天数)/对照组平均生存天数。结果见下表2。
由上表可以看出,市售斑蝥酸钠VB6注射液组对小鼠接种肝癌H22瘤后的生存期有一定的延长作用,本发明药物与市售斑蝥酸钠VB6注射液比较抑制率增加,有显著性差异P<0.05。
试验2本发明的药物组合物对淋巴细胞亚群的影响。
2.1实验材料:
药物:A:虫草斑蝥肠溶制剂,本发明实施例1—3方法制得;B:市售斑蝥酸钠VB6注射液,规格10ml/支,批号20100513,柏强制药有限公司生产。
瘤株:大肠癌细胞(人大肠癌细胞株L0V0株,购至中国科学院广州生物医药与健康研究院,第5~7代)
动物:4-5周龄SD大鼠150只,体重112.7±15.7g,雌雄兼用。
2.2方法与结果:SD大鼠腹腔常规接种大肠癌L0V0细胞悬液(大肠癌L0V0细胞和该细胞的营养液1640)0.2ml(约1×106瘤细胞),一周后随机分为3组,每组10只,实验组腹腔或灌胃给药,对照组腹腔注射灭菌生理盐水,每天一次,连续两周。停药后次日采外周血并处死大鼠,用流式细胞仪(美国BECTONDICKINSON(BD)公司出售,分选型流式细胞仪,型号:FACS AriaⅡTM)测定外周血中CD3+、CD4+、CD8+,计算CD4+/CD8+比值。
以上实验中,斑蝥酸钠VB6注射液B给药剂量为15ml/kg,给药方法为腹腔注射;本发明肠溶制剂组:给药剂量1.5g/kg,片剂、胶囊剂直接灌胃给药,颗粒剂冲入开水成溶液后灌胃给药。
结果:T淋巴细胞亚群测定结果:由下表可见,本发明制剂组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于生理盐水组,CD8+均低于生理盐水组,两者比较差异有极显著性P<0.01。
表3对T淋巴细胞亚群的影响
本发明药物与生理盐水组比较,#P<0.01;与斑蝥酸钠VB6注射液比较,*P<0.05。
2.3结论:T淋巴细胞浸润程度直接反映机体抗肿瘤的状态。根据以上实验结果显示,本发明药物增强机体免疫功能的作用比斑蝥酸钠VB6注射液强。表明采用本发明所述的用量范围,增强机体免疫功能的作用良好,使机体细胞免疫功能失调得到调节,机体抗肿瘤免疫力增强。
试验例3本发明肠溶制剂释放度、生物利用度实验研究
3.1释放度研究
为了考察本发明的肠溶效果,根据中国药典2010年版二部附录XD第二法(二)释放度测定法进行研究。
取本发明药物和按照本发明实施例1方法制备的不进行肠溶包衣的普通片,照中国药典规定的操作方法,以0.1mol/L的盐酸溶液900ml为溶剂,转速为每分钟100转,依法操作,于120分钟时,将样品转入另一盛有磷酸盐缓冲溶液(pH6.8)900ml的容器中,同法测定。分别于在盐酸溶液中60分钟、120分钟及转入磷酸盐缓冲溶液后45分钟(总计165分钟)和60分钟(总计180分钟)时取溶液适量,滤过,取续滤液作为供试品溶液;另取本发明药物10片/粒/袋和普通片10片,分别研细,精密称取适量,约相当于平均片重或平均装量,加甲醇适量使溶解后,用磷酸盐缓冲溶液(pH6.8)制成每1ml中约含斑蝥酸钠0.4mg的溶液,作为对照溶液;精密量取上述溶液各2ml,分别置25ml量瓶中,加磷酸盐缓冲溶液(pH6.8)8ml,摇匀,再加硫酸溶液(75→100)10ml,混匀,放置30分钟,冷却后,用磷酸盐缓冲溶液(pH6.8)稀释至刻度,摇匀,照分光光度法分别测定吸收度,按两者吸收度的比值,计算各药物的溶出量。
表4本发明药物和普通片在盐酸及磷酸盐缓冲溶液中溶出量(%)
实验结果表明,本发明肠溶制剂,具有显著的肠溶特点:在0.1mol/L盐酸溶液中,2小时内几乎没有释放,在磷酸盐缓冲溶液(pH6.8)中,45分钟时溶出已达到90%以上,从而避免了酸性环境对本发明药物的破坏,而又能在小肠中快速释放,可以更好的发挥药效。
3.2生物利用度实验
采用Beagle犬法。将6只健康Beagle犬分成两组,采用单剂量双周期交叉给药法,给予实施例1制备的虫草斑蝥肠溶片及不包肠溶衣的虫草斑蝥普通片各0.4g,采用高相液相色谱法测定给药后不同时刻血浆中斑蝥酸钠的浓度,绘制血药浓度-时间曲线,计算曲线下面积(AUC)值。结果如下:
表5肠溶片与普通片AUC(h.μg/ml)比较
结果表明,按照本发明实施例制备的肠溶片,其AUC和普通片相比,存在显著性差异(P<0.05),从而证明了本发明肠溶制剂的优势所在。
具体实施方式
下面结合实施例进一步解释本发明,但本发明内容不局限于以下所述。
实施例1
处方:12g冬虫夏草、5g斑蝥酸钠、10g维生素B6,90g羧甲基淀粉钠、110g微晶纤维素、60g羟丙纤维素、10g硬脂酸镁、5g滑石粉、肠溶型欧巴代300g和纯化水1200g
制法:
1)冬虫夏草经粉碎后过60-80目筛,灭菌备用;斑蝥酸钠、维生素B6、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素、硬脂酸镁、滑石粉过80目筛,备用;配制4%羟丙甲纤维素15%乙醇溶液,备用;
2)取处方量的冬虫夏草、斑蝥酸钠、维生素B6和一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素放入湿法混合颗粒机中干混5-10min,再加入适量的粘合剂制成湿颗粒;将湿颗粒置干燥机中沸腾干燥,使颗粒水分达到规定要求;干颗粒用3号筛于整粒机中整粒;
3)加入处方量比例的硬脂酸镁、滑石粉以及另一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素,置总混机中混合均匀;
4)测定颗粒含量,计算片重,压片;或颗粒整粒、抛光;
5)配制肠溶衣液:取处方量肠溶型薄膜包衣预混悬剂肠溶型欧巴代在搅拌下缓慢加入到纯化水中,搅拌15-30分钟后过80目筛,备用;
6)包肠溶衣,增重3~5%;
7)包装,得肠溶片。
用法用量:每次1片,一日1次。
实施例2
处方:5g冬虫夏草、0.1g斑蝥酸钠、5g维生素B6,54g羧甲基淀粉钠、154g微晶纤维素、84g羟丙纤维素、5g硬脂酸镁、5g滑石粉、肠溶型欧巴代250g和纯化水1000g
制法:
1)冬虫夏草经粉碎后过60—80目筛,灭菌备用;斑蝥酸钠、维生素B6、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素、硬脂酸镁、滑石粉过80目筛,备用;配制4%羟丙甲纤维素15%乙醇溶液,备用;
2)取处方量的冬虫夏草、斑蝥酸钠、维生素B6和一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素放入湿法混合颗粒机中干混5-10min,再加入适量的粘合剂制成湿颗粒;将湿颗粒置干燥机中沸腾干燥,使颗粒水分达到规定要求;干颗粒用3号筛于整粒机中整粒;
3)加入处方量比例的硬脂酸镁、滑石粉以及另一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素,置总混机中混合均匀;
4)测定颗粒含量,计算片重,压片;或颗粒整粒、抛光;
5)配制肠溶衣液:取处方量肠溶型薄膜包衣预混悬剂肠溶型欧巴代在搅拌下缓慢加入到纯化水中,搅拌15-30分钟后过80目筛,备用;
6)包肠溶衣,增重3~5%;
7)装入胶囊,得肠溶胶囊。
用法用量:每次1粒,一日1次。
实施例3
处方:20g冬虫夏草、10g斑蝥酸钠、15g维生素B6,100g羧甲基淀粉钠、66g微晶纤维素、36g羟丙纤维素、10g硬脂酸镁、10g滑石粉、肠溶型欧巴代350g和纯化水1500g
制法:
1)冬虫夏草经粉碎后过60—80目筛,灭菌备用;斑蝥酸钠、维生素B6、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素、硬脂酸镁、滑石粉过80目筛,备用;配制4%羟丙甲纤维素15%乙醇溶液,备用;
2)取处方量的冬虫夏草、斑蝥酸钠、维生素B6和一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素放入湿法混合颗粒机中干混5-10min,再加入适量的粘合剂制成湿颗粒;将湿颗粒置干燥机中沸腾干燥,使颗粒水分达到规定要求;干颗粒用3号筛于整粒机中整粒;
3)加入处方量比例的硬脂酸镁、滑石粉以及另一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素,置总混机中混合均匀;
4)测定颗粒含量,计算片重,压片;或颗粒整粒、抛光;
5)配制肠溶衣液:取处方量肠溶型薄膜包衣预混悬剂肠溶型欧巴代在搅拌下缓慢加入到纯化水中,搅拌15-30分钟后过80目筛,备用;
6)包肠溶衣,增重3~5%;
7)装袋,得肠溶颗粒。
用法用量:每次1袋,每日1次。
Claims (5)
1.一种具有抗肿瘤作用的虫草斑蝥肠溶制剂,包括片芯和肠溶衣层,其特征在于,按重量份计,所述片芯由5-20份冬虫夏草、0.1-10份斑蝥酸钠、5-15份维生素B6、54-126份羧甲基淀粉钠、66-154份微晶纤维素、36-84份羟丙纤维素、5-10份硬脂酸镁、5-10份滑石粉和粘合剂制成,所述粘合剂为羟丙甲纤维素的乙醇水溶液,是由4%羟丙甲纤维素和15%乙醇水溶液配制而成;所述肠溶衣层是由肠溶型薄膜包衣预混悬剂肠溶型欧巴代250-350份和纯化水1000-1500份制成。
2.如权利要求1所述虫草斑蝥肠溶制剂,其特征在于,按重量份计,所述片芯中原料药为8-16份冬虫夏草、2-8份斑蝥酸钠、8-12份维生素B6。
3.如权利要求1所述虫草斑蝥肠溶制剂,其特征在于,按重量份计,所述片芯中原料药为12份冬虫夏草、5份斑蝥酸钠、10份维生素B6。
4.如权利要求1-3任一所述的肠溶制剂,其特征在于,所述剂型为肠溶片、肠溶胶囊或肠溶颗粒。
5.如权利要求4所述的虫草斑蝥肠溶制剂的制备方法,步骤如下:
1)冬虫夏草经粉碎后过60—80目筛,灭菌备用;斑蝥酸钠、维生素B6、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素、硬脂酸镁、滑石粉过80目筛,备用;配制4%羟丙甲纤维素15%乙醇溶液,备用;
2)取处方量的冬虫夏草、斑蝥酸钠、维生素B6和一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素放入湿法混合颗粒机中干混5-10min,再加入适量的粘合剂制成湿颗粒;将湿颗粒置干燥机中沸腾干燥,使颗粒水分达到规定要求;干颗粒用3号筛于整粒机中整粒;
3)加入处方量比例的硬脂酸镁、滑石粉以及另一半处方量的羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、羟丙纤维素,置总混机中混合均匀;
4)测定颗粒含量,计算片重,压片;或颗粒整粒、抛光;
5)配制肠溶衣液:取处方量肠溶型薄膜包衣预混悬剂肠溶型欧巴代在搅拌下缓慢加入到纯化水中,搅拌15-30分钟后过80目筛,备用;
6)包肠溶衣,增重3~5%;
7)包装,得肠溶片;或装入胶囊,得肠溶胶囊;或装袋,得肠溶颗粒。
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斑蝥酸维生素B6注射液的临床应用;马春玉;《现代医药卫生》;20081231;第24卷(第23期);3617-3618 * |
林璐璐等.抗癌药用昆虫研究进展.《时珍国医国药》.2009,第20卷(第3期),620-622. |
马春玉.斑蝥酸维生素B6注射液的临床应用.《现代医药卫生》.2008,第24卷(第23期),3617-3618. |
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CN102920746A (zh) | 2013-02-13 |
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