CN102914512A - 以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法 - Google Patents

以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102914512A
CN102914512A CN2012104250948A CN201210425094A CN102914512A CN 102914512 A CN102914512 A CN 102914512A CN 2012104250948 A CN2012104250948 A CN 2012104250948A CN 201210425094 A CN201210425094 A CN 201210425094A CN 102914512 A CN102914512 A CN 102914512A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alpha
fetoprotein
naked
gold
take
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2012104250948A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102914512B (zh
Inventor
陈伟
林新华
刘爱林
王胜
邓豪华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fujian Medical University
Original Assignee
Fujian Medical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujian Medical University filed Critical Fujian Medical University
Priority to CN201210425094.8A priority Critical patent/CN102914512B/zh
Publication of CN102914512A publication Critical patent/CN102914512A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102914512B publication Critical patent/CN102914512B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

本发明公开一种以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，是以裸纳米金标记甲胎蛋白抗体，采用双夹心抗体法，利用裸纳米金的模拟过氧化物酶特性，催化过氧化氢和3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色体系，根据显色产物吸光度特征检测甲胎蛋白。在5~100ng/mL范围内显色产物吸光度与甲胎蛋白浓度呈线性关系，检测限为1.4ng/mL。

Description

以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法
技术领域
本发明涉及以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，属于分析化学和纳米技术领域。
背景技术
肝癌一直被认为是全球最常见的恶性肿瘤之一，治愈率非常低。尽可能及早发现并进行手术切除是目前治疗肝癌最有效手段。甲胎蛋白是一种典型的肿瘤标志物，主要存在于肝癌细胞、卵黄囊细胞和其它恶性肿瘤患者的血清当中。正常情况下甲胎蛋白存在于胎儿发育的早期肝脏和卵黄囊中，出生后几个月至一年内降至正常水平。因此，除了孕妇和新生儿，人体内仅能检测到微量的甲胎蛋白，正常人血清中甲胎蛋白的含量尚不到20ng/mL。当肝细胞发生癌变时，恢复了产生这种蛋白质的功能。在肝癌病人的血清样本检测中，甲胎蛋白的阳性率为75-80％。因此血清中甲胎蛋白含量不仅可作为原发性肝癌和畸胎瘤的早期诊断指标之一，也可作为疗效观察和愈后判断的指标。
目前，甲胎蛋白的临床检测多采用基于过氧化物酶的酶联免疫分析方法，由于过氧化物酶价格昂贵，容易失活，标记过程复杂。因此，寻找能够替代天然过氧化物酶的模拟酶和催化体系，并探寻优良的氢供体底物以提高模拟酶催化反应灵敏度是体外免疫诊断试剂和方法研发的新途径。纳米材料具有制备简单、经济、快捷、耐高温和耐酸碱、性质稳定等诸多优势，在模拟生物酶方面显示出极其诱人的应用前景。用纳米人工模拟酶替代在体外免疫诊断试剂中广泛使用的辣根过氧化物酶，不但能解决目前体外免疫诊断试剂的稳定性和检测准确性的问题，还能降低体外免疫诊断试剂的生产成本，提高检测灵敏度。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用裸纳米金为模拟过氧化物酶，标记抗体，采用双抗体夹心法建立了的新型的甲胎蛋白测定方法。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：所述的一种以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是以裸纳米金标记甲胎蛋白抗体，利用双夹心抗体法测定甲胎蛋白，裸纳米金催化过氧化氢氧化3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐，根据显色溶液的紫外吸收特征，来测定甲胎蛋白浓度。
所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是所使用的裸纳米金采用硼氢化钠还原氯金酸的方法制备，将500μL浓度为0.1g/L氯金酸水溶液用39.5毫升的水稀释，在剧烈搅拌下加入1.0毫升浓度为0.1g/L的硼氢化钠水溶液，反应溶液颜色从浅黄色变成酒红色，暗处继续快速搅拌而形成裸纳米金。
所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是以裸纳米金标记甲胎蛋白抗体，取22μg鼠抗人甲胎蛋白抗体加入1.0mL裸纳米金溶液，振荡反应30min，高速离心1h，除去上清，沉淀用1％BSA的PBS溶液洗涤两次后重新定容到1.0mL。
所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是双夹心抗体法测定甲胎蛋白是以过氧化氢和3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐为底物。
所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是利用裸纳米金催化过氧化氢氧化3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐的产物吸光度值A450以判断甲胎蛋白的浓度。
所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是过氧化氢和3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐的体积比为1∶1，过氧化氢和3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐的体积优选为50μL。
所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是过氧化氢浓度为6.0mol/L。
所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐的浓度为2.4mmol/L。
所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是显色反应为恒温45℃避光反应25min。
所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是将甲胎蛋白抗体包被于96孔酶标板板底，4℃封闭过夜；用PBS/T溶液洗涤3次；加入100μL不同浓度的甲胎蛋白标准品，37℃孵育2h后用PBS/T溶液洗涤5次，分别加入50μL的裸纳米金标记甲胎蛋白抗体，37℃孵育2h；用PBS/T溶液洗涤5次，加2.4mmol/L 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐和6.0mol/L H2O2各50μL，恒温45℃避光反应25min后，在每孔中加入2mol/L硫酸终止液50μL终止反应，并用酶标仪测定450nm处的吸光度值；随着甲胎蛋白浓度的增大，吸光度逐渐增大，在5～100ng/mL范围内吸光度与甲胎蛋白浓度呈线性关系，检测限为1.4ng/mL。
本发明所述的一种以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其具体步骤如下：
(一)裸纳米金的制备：
以下过程中使用的所有玻璃器皿均经过王水浸泡，并用双蒸水彻底清洗，晾干。裸纳米金的制备：首先，500μL浓度为0.1g/L氯金酸水溶液用39.5毫升的水稀释，在剧烈搅拌下加入1.0毫升浓度为0.1g/L的硼氢化钠水溶液(加入时间控制在5分钟内)，反应溶液颜色从浅黄色变成酒红色，暗处继续快速搅拌1小时。
(二)抗体标记：
取22μg鼠抗人甲胎蛋白抗体加入1.0mL步骤(一)制备的裸纳米金溶液，振荡反应30min，高速离心1h，除去上清，沉淀用1％BSA的PBS溶液洗涤两次后重新定容到1.0mL。
(三)甲胎蛋白的测定
将抗体包被于96孔酶标板板底，4℃封闭过夜。用PBS/T溶液洗涤3次。加入100μL不同浓度的甲胎蛋白标准品(5-100ng/mL)，37℃孵育2h后用PBS/T溶液洗涤5次，加入步骤(二)制备的裸纳米金标记抗体，每孔50μL，37℃孵育2h。用PBS/T溶液洗涤5次。加3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐和H2O2各50μL，45℃避光反应25min后每孔加2mol/L硫酸终止液50μL，终止反应并用酶标仪测定450nm处的吸光度值。
本发明的优点：(1)本方法所使用的纳米金直接由硼氢化钠还原氯金酸得到，无需进行进一步的修饰，制备过程简单快速。(2)裸纳米金标记抗体过程简单。(3)裸纳米金催化底物活性稳定。
附图说明
图1为裸纳米金的紫外吸收光谱图。
图2为裸纳米金标记抗体的紫外吸收光谱图。
图3为裸纳米金标记抗体用量对甲胎蛋白检测信号的影响图。
图4为显色反应温度对甲胎蛋白检测信号的影响图。
图5为过氧化氢浓度对甲胎蛋白检测信号的影响图。
图6为3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐浓度对甲胎蛋白检测信号的影响图。
图7为显色反应时间对甲胎蛋白检测信号的影响图。
图8为不同浓度甲胎蛋白的检测信号图。
具体实施方式
实施例1：
裸纳米金的制备：首先，将500μL浓度为0.1g/L氯金酸水溶液用39.5毫升的水稀释，在剧烈搅拌下加入1.0毫升浓度为0.1g/L的硼氢化钠水溶液(加入时间控制在5分钟内)，反应溶液颜色从浅黄色变成酒红色，暗处继续快速搅拌1小时得到裸纳米金。裸纳米金溶液为酒红色，最大吸收波长为516nm(见图1)。以上过程中使用的所有玻璃器皿均经过王水浸泡，并用双蒸水彻底清洗，晾干。
实施例2：
裸纳米金标记抗体：取22μg鼠抗人甲胎蛋白抗体加入1.0mL实施例1制备的裸纳米金溶液，振荡反应30min，高速离心1h，除去上清，沉淀用1％BSA的PBS溶液洗涤两次后重新定容到1.0mL，获得裸纳米金标记抗体。裸纳米金最大吸收波长红移至522nm(见图2)。
实施例3：
甲胎蛋白测定：将甲胎蛋白抗体包被于96孔酶标板板底，4℃封闭过夜。用PBS/T溶液洗涤3次。加入100μL浓度为100ng/mL的甲胎蛋白标准品，37℃孵育2h后用PBS/T溶液洗涤5次，分别加入实施例2制备的裸纳米金标记抗体(5-200μL)，37℃孵育2h。用PBS/T溶液洗涤5次。加2.4mmol/L 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐和6.0mol/L H2O2各50μL，45℃避光反应25min后在每孔中加入2mol/L硫酸终止液50μL终止反应，并用酶标仪测定450nm处的吸光度值。如图3所示，吸光度在裸纳米金标记抗体用量为50μL时达到最大。
实施例4：
甲胎蛋白测定：将甲胎蛋白抗体包被于96孔酶标板板底，4℃封闭过夜。用PBS/T溶液洗涤3次。加入100μL浓度为100ng/mL的甲胎蛋白标准品，37℃孵育2h后用PBS/T溶液洗涤5次，分别加入实施例2制备的裸纳米金标记抗体50μL，37℃孵育2h。用PBS/T溶液洗涤5次。加2.4mmol/L 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐和6.0mol/L H2O2各50μL，恒温(25-65℃)避光反应25min后每孔加2mol/L硫酸终止液50μL终止反应，并用酶标仪测定450nm处的吸光度值。如图4所示，显色反应温度为45℃时吸光度达到最大。
实施例5：
甲胎蛋白测定：将甲胎蛋白抗体包被于96孔酶标板板底，4℃封闭过夜。用PBS/T溶液洗涤3次。加入100μL浓度为100ng/mL的甲胎蛋白标准品，37℃孵育2h后用PBS/T溶液洗涤5次，分别加入实施例2制备的裸纳米金标记抗体50μL，37℃孵育2h。用PBS/T溶液洗涤5次。加2.4mmol/L 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐和不同浓度H2O2(0.1-6.0mol/L)各50μL，恒温45℃避光反应25min后每孔加2mol/L硫酸终止液50μL终止反应，并用酶标仪测定450nm处的吸光度值。如图5所示，过氧化氢浓度为6.0mol/L时吸光度达到最大。
实施例6：
甲胎蛋白测定：将甲胎蛋白抗体包被于96孔酶标板板底，4℃封闭过夜。用PBS/T溶液洗涤3次。加入100μL浓度为100ng/mL的甲胎蛋白标准品，37℃孵育2h后用PBS/T溶液洗涤5次，分别加入实施例2制备的裸纳米金标记抗体50μL，37℃孵育2h。用PBS/T溶液洗涤5次。加不同浓度3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐(0.4-4.0mmol/L)和6.0mol/LH2O2各50μL，恒温45℃避光反应25min后每孔加2mol/L硫酸终止液50μL终止反应，并用酶标仪测定450nm处的吸光度值。如图6所示，3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐浓度为2.4mmol/L时吸光度达到最大。
实施例7：
甲胎蛋白测定：将甲胎蛋白抗体包被于96孔酶标板板底，4℃封闭过夜。用PBS/T溶液洗涤3次。加入100μL浓度为100ng/mL的甲胎蛋白标准品，37℃孵育2h后用PBS/T溶液洗涤5次，分别加入实施例2制备的裸纳米金标记抗体50μL，37℃孵育2h。用PBS/T溶液洗涤5次。加2.4mmol/L 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐和6.0mol/L H2O2各50μL，恒温45℃避光反应2.5-30min后每孔加2mol/L硫酸终止液50μL终止反应，并用酶标仪测定450nm处的吸光度值。如图7所示，显色反应时间达到25分钟后吸光度达到最大。
实施例8：
甲胎蛋白测定：将甲胎蛋白抗体包被于96孔酶标板板底，4℃封闭过夜。用PBS/T溶液洗涤3次。加入100μL不同浓度的甲胎蛋白标准品(5-100ng/mL)，37℃孵育2h后用PBS/T溶液洗涤5次，分别加入实施例2制备的裸纳米金标记抗体50μL，37℃孵育2h。用PBS/T溶液洗涤5次。加2.4mmol/L 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐和6.0mol/L H2O2各50μL，恒温45℃避光反应25min后每孔加2mol/L硫酸终止液50μL，终止反应并用酶标仪测定450nm处的吸光度值。如图8所示，随着甲胎蛋白浓度的增大，吸光度逐渐增大，在5～100ng/mL范围内吸光度与甲胎蛋白浓度呈线性关系，检测限为1.4ng/mL。
实施例9：
血清中甲胎蛋白测定：将甲胎蛋白抗体包被于96孔酶标板板底，4℃封闭过夜。用PBS/T溶液洗涤3次。加入100μL血清，37℃孵育2h后用PBS/T溶液洗涤5次，分别加入实施例2制备的裸纳米金标记抗体50μL，37℃孵育2h。用PBS/T溶液洗涤5次。加2.4mmol/L 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺盐酸盐和6.0mol/L H2O2各50μL，恒温45℃避光反应25min后每孔加2mol/L硫酸终止液50μL终止反应，并用酶标仪测定450nm处的吸光度值。结合实施例8计算血清中甲胎蛋白浓度。

Claims (10)

1.一种以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，以裸纳米金标记甲胎蛋白抗体，利用双夹心抗体法测定甲胎蛋白，裸纳米金催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，根据显色溶液的紫外吸收特征，来测定甲胎蛋白浓度。
2.根据权利要求1所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是所使用的裸纳米金采用硼氢化钠还原氯金酸的方法制备，将500 μL浓度为 0.1 g/L 氯金酸水溶液用39.5毫升的水稀释，在剧烈搅拌下加入1.0毫升浓度为0.1 g/L的硼氢化钠水溶液，反应溶液颜色从浅黄色变成酒红色，暗处继续快速搅拌而形成裸纳米金。
3.根据权利要求1或2所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是以裸纳米金标记甲胎蛋白抗体，取22 μg鼠抗人甲胎蛋白抗体加入1.0 mL裸纳米金溶液，振荡反应30 min，高速离心1 h，除去上清，沉淀用1% BSA的PBS溶液洗涤两次后重新定容到1.0 mL。
4.根据权利要求3所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是双夹心抗体法测定甲胎蛋白是以过氧化氢和3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐为底物。
5.根据权利要求1或4所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是利用裸纳米金催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐的产物吸光度值A450以判断甲胎蛋白的浓度。
6.根据权利要求5所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是过氧化氢和3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐的体积比为1:1，过氧化氢和3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐的体积优选为50 μL，三者混合后进入流动池反应，产生的化学发光强度经光电倍增管检测以测定奶粉中胆固醇。
7.根据权利要求5所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是过氧化氢浓度为6.0 mol/L。
8.根据权利要求5所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐的浓度为2.4 mmol/L。
9.根据权利要求5所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是显色反应为恒温45℃避光反应25 min。
10.根据权利要求3所述的以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法，其特征是将甲胎蛋白抗体包被于96孔酶标板板底，4 ℃封闭过夜；用PBS/T溶液洗涤3次；加入100 μL不同浓度的甲胎蛋白标准品，37℃孵育2 h后用PBS/T溶液洗涤5次，分别加入50 μL的裸纳米金标记甲胎蛋白抗体，37℃孵育2 h；用PBS/T溶液洗涤5次，加2.4 mmol/L 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐和6.0 mol/L H2O2各50 μL，恒温45℃避光反应25 min后，在每孔中加入2 mol/L硫酸终止液50 μL终止反应，并用酶标仪测定450 nm处的吸光度值；随着甲胎蛋白浓度的增大，吸光度逐渐增大，在5~100 ng/mL 范围内吸光度与甲胎蛋白浓度呈线性关系，检测限为1.4 ng/mL。
CN201210425094.8A 2012-10-29 2012-10-29 以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法 Expired - Fee Related CN102914512B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210425094.8A CN102914512B (zh) 2012-10-29 2012-10-29 以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210425094.8A CN102914512B (zh) 2012-10-29 2012-10-29 以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102914512A true CN102914512A (zh) 2013-02-06
CN102914512B CN102914512B (zh) 2015-04-08

Family

ID=47612974

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201210425094.8A Expired - Fee Related CN102914512B (zh) 2012-10-29 2012-10-29 以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102914512B (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103433484A (zh) * 2013-08-22 2013-12-11 福建医科大学 牛血清白蛋白-铂复合纳米材料模拟过氧化物酶
CN103645315A (zh) * 2013-12-18 2014-03-19 国家纳米科学中心 一种铂基合金结构的纳米棒模拟酶溶液及在elisa中的应用
CN107255720A (zh) * 2017-05-10 2017-10-17 深圳大学 一种基于钴纳米颗粒检测蛋白浓度的方法
CN107607527A (zh) * 2017-08-15 2018-01-19 江苏大学 一种基于纳米金模拟酶的农药残留快速检测方法
CN107764763A (zh) * 2017-10-03 2018-03-06 云南师范大学 碘离子信号增强的双氧水比色检测方法
CN111215141A (zh) * 2020-01-14 2020-06-02 深圳大学 一种纳米酶及其制备方法和应用
CN113376374A (zh) * 2020-04-03 2021-09-10 上海桀蒙生物技术有限公司 病毒蛋白抗原检测工具的制备和使用方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102706814A (zh) * 2012-05-11 2012-10-03 福建医科大学 以裸纳米金为显色探针的三聚氰胺快速测定方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102706814A (zh) * 2012-05-11 2012-10-03 福建医科大学 以裸纳米金为显色探针的三聚氰胺快速测定方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HAIJUAN JIN等: "signal amplification of electrochemical elisa for the detection of alpha fetoprotein using core-shell Fe3O4@Au nanoparticles as labels", 《SENSOR LETTERS》 *
SHENG WANG 等: "Comparison of the Peroxidase-Liked Activity of Unmodified, Amino-Modified, and Citrate-Capped Gold Nanoparticles", 《CHEMPHYSCHEM》 *
YI JUAN LONG 等: "Visual observation of the mercury-stimulated peroxidase mimetic activity of gold nanoparticles", 《CHEMICAL COMMUNICATION》 *
YONGMEI YIN等: "Colorimetric Immunoassay for Detection of Tumor Markers", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES》 *
梁敏敏、阎锡蕴: "纳米材料模拟酶性质及其应用", 《东南大学学报（医学版）》 *
魏永锋、闫宏涛: "催化荧光光度法测定辣根过氧化物酶及甲胎蛋白", 《分析化学研究简报》 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103433484A (zh) * 2013-08-22 2013-12-11 福建医科大学 牛血清白蛋白-铂复合纳米材料模拟过氧化物酶
CN103433484B (zh) * 2013-08-22 2015-06-17 福建医科大学 牛血清白蛋白-铂复合纳米材料模拟过氧化物酶及其制备方法和应用
CN103645315A (zh) * 2013-12-18 2014-03-19 国家纳米科学中心 一种铂基合金结构的纳米棒模拟酶溶液及在elisa中的应用
CN103645315B (zh) * 2013-12-18 2015-07-01 国家纳米科学中心 一种铂基合金结构的纳米棒模拟酶溶液及在elisa中的应用
CN107255720A (zh) * 2017-05-10 2017-10-17 深圳大学 一种基于钴纳米颗粒检测蛋白浓度的方法
CN107607527A (zh) * 2017-08-15 2018-01-19 江苏大学 一种基于纳米金模拟酶的农药残留快速检测方法
CN107764763A (zh) * 2017-10-03 2018-03-06 云南师范大学 碘离子信号增强的双氧水比色检测方法
CN111215141A (zh) * 2020-01-14 2020-06-02 深圳大学 一种纳米酶及其制备方法和应用
CN113376374A (zh) * 2020-04-03 2021-09-10 上海桀蒙生物技术有限公司 病毒蛋白抗原检测工具的制备和使用方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN102914512B (zh) 2015-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102914512B (zh) 以裸纳米金为模拟过氧化物酶的甲胎蛋白测定方法
Xiang et al. Aptamer-based biosensor for detecting carcinoembryonic antigen
Sun et al. Fluorescence immunoassay system via enzyme-enabled in situ synthesis of fluorescent silicon nanoparticles
CN103245656B (zh) 甲胎蛋白和癌胚抗原电致化学发光传感器的制备及应用
Liu et al. Enzyme-induced in situ generation of polymer carbon dots for fluorescence immunoassay
CN102768207B (zh) 基于纳米金模拟过氧化物酶的三聚氰胺测定方法
CN103969436B (zh) 一种超灵敏碱性磷酸酶检测的新方法
Sun et al. A fluorescent ELISA based on the enzyme-triggered synthesis of poly (thymine)-templated copper nanoparticles
CN102072954A (zh) 检测肿瘤标志物的电致化学发光免疫传感器的研究及应用
CN103728287A (zh) 纳米氧化铜模拟过氧化物酶测定葡萄糖的荧光分析方法
CN104634779A (zh) 基于纳米金模拟过氧化物酶的脲酶及其抑制剂的测定方法
CN201477101U (zh) 一种转铁蛋白、血红蛋白联合检测板
CN105372236A (zh) 一种高灵敏度检测癌细胞的方法
CN110187109A (zh) 一种用于贲门腺癌早期筛查的自身抗体联合检测elisa试剂盒
Tao et al. The determination of cystatin C in serum based on label-free and near-infrared light emitted PbS@ BSA QDs
CN104459157A (zh) 一种基于二茂铁-氧化亚铜立方纳米框架标记的免疫传感器的制备方法及应用
Ni et al. A simple and sensitive fluorescent assay for hemin detection based on artemisinin-thiamine
CN104330563A (zh) 一种基于核酸适体来检测目标分子的酶联分析新策略
CN107462725B (zh) 抗FNDC4的IgG抗体作为胃癌血清标志物的应用及其试剂盒
CN111257290B (zh) 近红外荧光探针及其在检测谷胱甘肽硫转移酶中的应用
CN105785019B (zh) 一种针对前列腺特异抗原的检测方法
CN108445213A (zh) 一种高灵敏度荧光定量检测血清肿瘤标志物的纳米复合探针、组合物及荧光定量试剂盒
CN106872430B (zh) 半胱氨酸荧光分析方法
CN102798717B (zh) 一种o6-甲基鸟嘌呤-dna甲基转移酶活性检测方法
CN105403706A (zh) 热休克蛋白90(hsp90)化学发光检测试剂盒

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20150408

Termination date: 20211029