CN102908304B - 一种富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水及其制备方法。该化妆水由活性组分和添加剂组成，所述的活性组分由以下质量百分比的组分组成：芦芭油3%~5%、透明质酸0.1%~0.5%、左旋维生素C1%~4%、D-泛醇0.2%~2%、水溶性维生素E0.1%~1%、柠檬酸0.1%~0.5%、牛磺酸0.15%~1.5%、羟乙基脲3%~10%、当归提取物1%~6%、竹叶提取物1%~6%、灵芝提取物1%~6%、甲鱼活性多肽1%~6%、鱼鳞胶原蛋白肽3%~5%和水余量；具有优良抗衰祛皱和保湿补水功效。该化妆水制备时只需要将各组分混合均匀即可，操作简单，适于工业化生产。

Description

一种富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水及其制备方法

技术领域

本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水及其制备方法。

背景技术

皮肤是人体面积最大的器官，覆盖全身，由表皮、真皮和皮下组织构成。皮肤是人体对体外不利环境的第一道“防火墙”，它使体内各种组织和器官免受物理性、机械性、化学性和病原微生物性的侵袭，具有两个方面的屏障作用：一方面防止体内水份、电解质、其他物质丢失；另一方面阻止外界有害物质的侵入。婴儿的皮肤，真皮中胶原蛋白的含量高达80%，所以娇嫩水润、细腻无暇、富有弹性；随着年龄的增长，18~22岁时胶原蛋白开始流失，两颊出现细小毛孔；25岁女性皮肤真皮中胶原蛋白含量为65%，眼角嘴角出现细纹，弹性下降，皮肤干燥；30~35岁时，胶原蛋白流失近20%，眼角出现皱纹，毛孔更粗大，色斑、干涩、晦暗等皮肤问题都可能出现；40~45岁时，嘴角两侧、额头已出现很深的皱纹，皮肤开始塌陷下催，甚至脸型轮廓都发生改变，此时真皮中胶原蛋白的流失已达到近40%。可以说，皮肤的衰老过程，就是胶原蛋白逐渐流失的过程。随着胶原蛋白等保湿因子会逐渐流失，皮肤组织细胞和细胞间的水分含量减少，导致细胞排列紧密，支撑皮肤的胶原肽键和弹力网断裂，其螺旋网状结构随即被破坏，皮肤组织被氧化、萎缩、塌陷，肌肤就会出现干燥、皱纹、松弛无弹性等衰老现象。并且，根据衰老的自由基学说，体内许多物质代谢过程中会产生自由基，过量的自由基就会引起机体损伤，从而导致和加速衰老。“爱美之心人皆有之”，尤其是女性更为注重，自古以来，人们便对美化自身的化妆品就有不断的追求。

随着现代科学技术的飞速发展和广泛应用，随着生活水平的不断提高，化妆品已从奢侈品成为人们生活中不可或缺的生活用品。对化妆品的要求也在提高，日益趋向天然、营养、安全无刺激性等，化妆品已从洁肤、润肤的基础护肤品向延缓衰老、祛皱、美化肌肤的功能型化妆品方向发展。皮肤的基础护理主要包括洁肤、活肤、护肤三个步骤，而化妆水作为基础护理三步曲中“承前启后”的关键角色，是日常美容护肤必不可少的用品。它可用来清洁洁面产品在肌肤的残留，能够调节肌肤的酸碱平衡，使皮肤处于吸收营养的最佳状态，迅速为肌肤补充水分和营养，并且扫除油光收敛毛孔。

目前关于化妆水的研究已有很多报道，如公开号为CN101966135A的中国专利申请公开了一种含有纳米润肤成分的化妆水，包含：表面活性剂0.1%~20%、多元醇0.1%~30%、润肤剂0.1%~20%、保湿剂0.1%~30%、防腐剂0.001~3%、其它添加剂0.01%~15%和水50~98%；上述化妆水的润肤剂的粒径均为小于200nm；所述表面活性剂为非离子表面活性剂，包括但不限于聚甘油-2-油酸酯、失水山梨醇硬脂酸酯、山梨醇月桂酸酯、聚二甲基硅氧烷共聚醇、十六十八烷基葡糖酯、聚山梨酸酯、失水山梨醇脂肪酸酯中的一种或一种以上的混合物；所述润肤剂为具有滋润皮肤功效的成分，包括但不限于卵磷脂、氢化卵磷脂、乳木果油、碳酸二辛脂、霍霍巴油、二甲基硅油、辛酸/癸酸三甘油酯、异辛酸十六醇酯、天然角鲨烷、甲氧基肉桂酸辛酯中的一种或一种以上的混合物；所述防腐剂为具有延迟微生物生长或化学变化引起的腐败功效的成分，包括但并不限于尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、DMDM乙内酰脲、咪唑烷基脲、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸酯钠盐中的一种或一种以上混合物；该化妆水既能弥补普通化妆水无法有效润肤的不足，又能实现普通润肤乳、润肤霜无法迅速补水的缺点，并且具有制备工艺简单，肤感清爽等特点，可为使用者简化护肤步骤。

公开号为CN101234132A的中国专利申请公开了一种当归或其提取物制备护肤品的用途，当归或其提取物具有调节皮肤分泌功能、保湿功能、预防治疗色斑、促进皮肤新成代谢的作用，以当归或其提取物为护肤品中的主要活性成分，用于改善皮肤的肤色和健康状态有明显的作用。

因此，如能开发安全环保、功能完善的化妆水将具有广阔的市场前景。

发明内容

本发明提供了一种富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水，该化妆水配方中添加了中草药天然植物活性成分，能够达到清除自由基、抗衰祛皱的中药美容效果，并加入甲鱼活性多肽和小分子鱼鳞胶原蛋白肽（分子量小于1000道尔顿），对肌肤进行深层保湿，紧肤平皱，营养肌肤，延缓衰老，利用各组分的协同增效，得到天然、营养、安全，具有多重功效的功能化妆水。

本发明还提供了一种富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水的制备方法，易于操作和控制，适于工业化生产。

一种富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水，由活性组分和添加剂组成，所述的活性组分由以下质量百分比的组分组成：

所述的添加剂可选用化妆品领域常用的添加剂，如防腐剂和香精，其用量为适量，可采用化妆品领域常用的防腐剂和香精。

所述的富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水的制备方法，包括步骤：

（1）将透明质酸、甲鱼活性多肽和鱼鳞胶原蛋白肽在水中充分溶解，并混合均匀，制得水相；

（2）将芦芭油、左旋维生素C、D-泛醇、水溶性维生素E、柠檬酸、牛磺酸、羟乙基脲、当归提取物、竹叶提取物和灵芝提取物加入水相，均质后冷却，加入香精和防腐剂并混合均匀，制得富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水。

步骤（1）中，为了便于将透明质酸、甲鱼活性多肽和鱼鳞胶原蛋白肽溶解、混合均匀且不破坏各组分的活性，优选将透明质酸、甲鱼活性多肽和鱼鳞胶原蛋白肽在水中加热至30℃~55℃充分溶解。

步骤（2）中，优选将芦芭油、左旋维生素C、D-泛醇、水溶性维生素E、柠檬酸、牛磺酸、羟乙基脲、当归提取物、竹叶提取物和灵芝提取物在搅拌下加入水相，以更好地得到均匀的均质乳化液。

步骤（2）中，优选均质后冷却至30℃~40℃，加入香精和防腐剂并混合均匀，更利于香精和防腐剂与其他组分混合均匀。

所述的鱼鳞胶原蛋白肽选用小分子鱼鳞胶原蛋白肽，优选分子量（数均分子量）小于1000道尔顿的鱼鳞胶原蛋白肽，进一步优选分子量为500道尔顿~1000道尔顿的鱼鳞胶原蛋白肽。

本发明中所用的原料均可采用市售产品或现有制备方法制备的产品。如所述的鱼鳞胶原蛋白肽可选用湖北瑞邦生物技术有限公司生产的鱼鳞胶原蛋白肽。所述的甲鱼活性多肽（又称甲鱼多肽）可选用市售产品，也可采用殷金莲在《甲鱼多肽提取分离及功能特性研究》（殷金莲.甲鱼多肽提取分离及功能特性研究.硕士学位论文：西北农林科技大学，2007，6）一文中记载的甲鱼多肽的制备方法制备的甲鱼多肽。

为了进一步保留当归、竹叶、灵芝和甲鱼中适用于化妆水的活性物质，优选：

所述的当归提取物的制备方法包括步骤：将当归粉碎，用石油醚脱脂后加入水中，经浸泡、微波提取和超声振荡提取，过滤，滤液经脱色、浓缩和真空干燥，得到当归提取物。

所述的竹叶提取物的制备方法包括步骤：将竹叶粉碎，用石油醚脱脂后加入水中，经浸泡、微波提取和超声振荡提取，过滤，滤液经脱色、浓缩和真空干燥，得到竹叶提取物。

所述的灵芝提取物的制备方法包括步骤：将灵芝粉碎，用石油醚脱脂后加入水中，经浸泡、微波提取和超声振荡提取，过滤，滤液经脱色、浓缩和真空干燥，得到灵芝提取物。

所述的当归提取物、竹叶提取物和灵芝提取物的制备方法中，浸泡是为了润湿物料，微波提取和超声振荡提取可重复多次，以更好地提高原料当归、竹叶和灵芝的利用率。

经过优化，进一步优选：

所述的当归、竹叶或灵芝的克数与水的毫升数之比为1:8~12，最好为1:10。

所述的浸泡的时间为至少30min，以润湿物料，利于后续活性成分的提取。

所述的微波提取的条件为：400W~500W微波提取5min~10min，优选为450W微波提取5min。

所述的微波提取最好为间隔提取，包括：400W~500W微波提取1min~2min，停止，间隔1min~2min后再在400W~500W微波提取1min~2min，如此重复间隔提取直至微波提取的总时间为5min~10min；最好为：450W微波提取1min，停止，间隔1min后再在450W微波提取1min，如此重复间隔提取直至微波提取的总时间为5min。

所述的超声振荡提取的条件为：60W~80W超声振荡提取至少40min，最好为70W超声振荡提取40min。

所述的甲鱼活性多肽的制备方法包括步骤：将甲鱼去除脂肪和皮膜，得到甲鱼肉骨，加入占甲鱼肉骨质量10倍量~13倍量的水，将甲鱼肉骨煮熟后取汤汁，加水将汤汁调整到甲鱼肉骨原质量的10倍量~13倍量，酶解，灭酶，离心，过滤，滤液透析，凝胶层析分离，得到甲鱼活性多肽。

所述的酶可采用枯草芽孢杆菌。

本发明中，组分芦芭油具有独特的笼形结构，将水分子通过氢键和范德华力结合于聚甲基丙烯酸甘油酯形成的笼形结构中。当芦芭油接触皮肤时，由于盐的存在pH值变化，强电解质或皮肤温度改变造成笼形结构的缓慢破坏，导致水分释放，从而提供皮肤以光泽和保湿效果，是极佳的皮肤保湿剂和润滑剂，可以改善产品的使用感觉，增加滋润肤感和皮肤润滑性。同时芦芭油水溶性好，可以很方便地加入水相溶解。

本发明中，组分透明质酸是一种理想的天然保湿因子，可达到增湿保湿、嫩肤、抗衰老和抗皱消炎等功效。透明质酸还能改善皮肤生理条件，为真皮胶原蛋白和弹性纤维的合成提供优越的外部环境，加强营养供给，有着护肤养颜之功效。

本发明中，组分左旋维生素C具有促进胶原蛋白增生，修复紫外线对肌肤的伤害，淡化黑色素，促进胶原蛋白合成减少细纹，抗氧化与抗老化，防护皮肤功能，以及促进皮肤之新陈代谢等功效。

本发明中，组分D-泛醇可促进人体蛋白质、脂肪、糖类的代谢，保护皮肤和粘膜，防治小皱纹、炎症、日晒、糜烂，是不粘腻的保湿成分，具强效保湿效果，且与肌肤皮脂膜相近，易于吸收渗透及浸润肌肤表面的角质层，使肌肤柔软，有效预防肌肤粗糙现象，达到肌肤保湿与组织修复的功效，给予肌肤光泽。

本发明中，组分维生素E，具有软化皮肤角质层，加速表皮细胞新陈代谢，淡化表皮色素细胞和减少酯质过氧反应的明显功效。是一种常见的抗皱、营养、润肤、淡化色斑的美容添加剂。维生素E还有助于使松弛皮肤变得光滑、白皙，迅速恢复健康状态。减少皮肤皱纹、疤痕，紫外线损害以及皮肤裂口，修复皮肤弹性。它被广泛应用于化妆品、护肤品，尤其适用于水基透明产品，使功效更好发挥，吸收更加迅速。

本发明中，组分柠檬酸属于果酸的一种，主要作用是加快角质更新，角质的更新有助于皮肤的中黑色素的剥落，毛孔的收细，黑头的溶解，祛除油脂污垢等，令皮肤柔软、舒适，肤色白净、清新。

本发明中，组分牛磺酸具有极佳的活肤作用，可促进皮肤对各种养分的透皮吸收作用，同时大幅度提高肌肤的持水保湿能力，同时对损伤肌肤有良好的修复作用。牛磺酸同时也具有提高肌肤免疫力，抵抗外界环境对肌肤的侵袭的功效。

本发明中，组分羟乙基脲是一种能给护肤产品提供高效保湿效果同时又无粘腻手感的产品，羟乙基脲能够赋予产品优异的肤感与极佳的滋润效果。羟乙基脲保湿剂能渗透进入角质层中，增加皮肤含水量，缓解干燥，填补细纹；增加皮肤弹性，并提供愉快的使用感觉。

与市场上现有化妆品相比，本发明具有以下优势：

1．多种中草药天然植物活性成分。

（1）当归[Angelica sinensis(Oliv.)Diels]提取物，主要作用：抗氧化，补充营养和微量元素，改善人体皮肤颜色，增加皮肤白皙、透明效果。

（2）竹叶（Bamboo Leaves,Bl）提取物，主要作用：抗氧化，抗菌消炎，补充营养和微量元素，促进表皮细胞生长，修复皮肤损伤；去角质、嫩肤、祛皱、消斑美白。

竹叶的主要成分：竹叶中含有大量的黄酮、酚酸、蒽醌类化合物、生物活性多糖、香豆素类内酯、特种氨基酸、芳香成分和锰、锌、硒等微量元素。竹叶提取物中保留的众多的活性成分协同增效，而使竹叶提取物具有神奇的嫩肤美容效果：使皮肤明显鲜嫩，有透明感；具有卓越的抗衰老抗氧化能力，恢复皮肤年轻态；具有惊人的还原力，最大程度减退色斑，美白肌肤；改造皮肤干燥状况；收紧粗大毛孔，促进皮肤光滑细腻；杀菌、消炎、去除多余油脂、祛痘。

（3）灵芝（Ganoderma Lucidum）提取物，主要作用：免疫调节，抗氧化，延缓衰老。

灵芝的生物活性成分十分丰富，主要成分可分为多糖类、核苷类、呋喃类、生物碱类、氨基酸蛋白质类、三萜类、油脂类、甾醇类、有机锗、矿质元素等10大类。

灵芝所含的多糖、多肽等有着明显的延缓衰老功效。灵芝提取物中保留的众多的活性成分的功效主要基于以下机理：

①促进和调整免疫功能。灵芝多糖主要是通过对淋巴细胞、巨噬细胞、网状内皮系统等免疫细胞的作用来调节机体的免疫功能，其增强免疫应答机制之一，就是通过对多种细胞因子进行诱生或促诱生作用。作为生物反应调节剂，它不仅能够激活T、B淋巴细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞（NK)等免疫细胞，还能活化补体，促进细胞因子的生成，全面发挥对机体的调节作用。这种促进和调整可明显延缓衰老。

②调节代谢平衡，促进核酸和蛋白质的合成，还能促进肝脏和骨髓细胞合成蛋白质和RNA、促进骨髓细胞合成DNA，并可增加细胞的分裂代数，增强机体的免疫能力，提高机体的生命力，因此可以有效地抗病防衰老。

③抗自由基作用。生物体所产生的内原性防卫自由基损伤的抗氧化剂或抗氧化剂化酶类物质（如超氧化物歧化酶，SOD）的降低，是人体衰老的一个原因。灵芝多糖、有机酸等，能促进新陈代谢，使SOD活性明显提高；丰富的微量元素，如铜、锌、铁、锰以及维生素等都能对提高SOD活性起到一定的作用，从而可抑制超氧自由基的产生及细胞膜的脂质过氧化作用，并有清除超氧自由基的作用，从而保护细胞膜免受损伤以及酶、蛋白质、核酸等免受氧化变性，保持活性，达到延缓了细胞衰老的效果。

2．甲鱼（Amyda Sincnsis）活性多肽，主要作用：抗氧化，延缓衰老，营养肌肤，可被皮肤快速、完全的吸收和消化，发挥其重要的生物活性功能。

3．“肌肤软黄金”-胶原蛋白（collagen）。

鱼鳞胶原蛋白（小分子分子量小于1000道尔顿），主要作用：紧肤平皱、保湿润白、营养肌肤、延缓衰老。

鱼鳞为真皮细胞骨化所生成的骨质板，不含血管，完全没有血清污染风险，可避免抗生素和避孕药污染，也避免少数人群对血清蛋白过敏。鱼鳞中胶原蛋白寡肽具有营养性、修复性、保温性、配伍性、亲和性等特性，与人皮肤胶原的结构相似，兼容性好，存在着离子键、氢键等相互作用，可以扩散到皮肤的深层，对人的皮肤有很好的营养作用；同时由于其分子中含有大量的羟基，因此它有着相当好的保温作用；其分子中的氨基和羧基又赋予它一定的表面活性，这使它与其它材料的兼容性很好，且对皮肤无刺激性。

大分子胶原蛋白进入人体后需要降解为分子量小于1000道尔顿的胶原蛋白肽、氨基酸才能被人体吸收。分子量越小的胶原蛋白越容易吸收，但太小变为游离氨基酸，其占的比例太大也不是最理想的产品。最易被吸收的是500-1000道尔顿的胶原蛋白，这个分子量范围的胶原蛋白活性最强，使用后吸收效果也是最好的。小分子胶原蛋白可迅速融入真皮层，补充身体急需的胶原蛋白，能真正进入真皮层帮助修护肌肤，重建胶原蛋白层。

本发明工艺简单、成本较低、质量稳定，在化妆水的功能性原料的选材上，选用资源丰富且现今化妆水产品少有应用的天然原料，当归、竹叶、灵芝三种中草药植物的活性成分，加入了特殊营养添加剂左旋维生素C、D-泛醇、水溶性维生素E，同时还添加了化妆水产品未曾报道过具有丰富功能性营养原料的甲鱼活性多肽和鱼鳞胶原蛋白肽。本发明化妆水能迅速地被皮肤吸收，能深层滋养肌肤，恢复自然弹性，并伴随一种丝绒般柔软光滑而绝无油腻的感觉，有效地利用原料中的活性物质和营养元素，将多种有效成分有机结合、协同增效，直接作用于引起皮肤衰老的真皮层，迅速补充皮肤所需的各种营养和水分，增加肌肤细胞活力，增进表皮细胞再生功能，修补皮肤细纹，使肌肤紧致亮丽，实现肌肤的保湿润白、除皱祛斑、延缓衰老，再现肌肤的弹性润泽、细腻光滑的健康自然莹采。

附图说明

图1为Vc标准曲线。

具体实施方式

下面结合部分具体实施例对本发明内容进行进一步阐明，但本发明的内容并不仅限于下面的实施例。

当归提取物的制备方法：将当归粉碎，用石油醚脱脂后，晾干，按样品质量（克）:提取溶剂蒸馏水体积（毫升）=1:10的比例，加入蒸馏水中，静置30min以润湿物料，微波450W辐射1min，间隔1min后再辐射1min，如此间隔辐射直至微波提取总时间达到5min，70W超声振荡提取40min，浸提温度75℃，过滤，得滤液和滤渣。将滤渣加入蒸馏水中按同样条件重复提取1次。合并滤液，加入3g活性炭，搅拌15min以脱色，过滤所得滤液用旋转蒸发仪真空浓缩至膏状后，用冷冻干燥器0℃低温真空冷冻干燥制成干粉，即得到当归提取物。

竹叶提取物的制备方法：除了将当归替换为竹叶，其余操作同当归提取物的制备方法，得到竹叶提取物。

灵芝提取物的制备方法：除了将当归替换为灵芝，其余操作同当归提取物的制备方法，得到灵芝提取物。

鱼鳞胶原蛋白肽购于湖北瑞邦生物技术有限公司，数均分子量小于1000道尔顿。

甲鱼活性多肽的制备方法采用殷金莲在《甲鱼多肽提取分离及功能特性研究》一文中记载的甲鱼活性多肽的制备方法制得（殷金莲.甲鱼多肽提取分离及功能特性研究.硕士学位论文：西北农林科技大学，2007，6），该文中记载的制备方法所得的甲鱼活性多肽均适用于本发明，以下采用的甲鱼活性多肽的制备方法包括：将甲鱼去除脂肪，热烫（95℃、10～15s）去皮膜，得到甲鱼肉骨，加入占甲鱼肉骨质量10倍量的水，将甲鱼肉骨煮熟后取汤汁，加水将汤汁调整到甲鱼肉骨原质量的10倍量，接种枯草芽孢杆菌，在37℃、120r/min摇瓶条件下酶解72h，加热到90℃、15min灭酶，离心，过滤，滤液透析，凝胶层析分离，得到甲鱼活性多肽。

其它原料采用化妆品级的市售产品。

实施例1

富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水，由活性组分和添加剂组成，添加剂为适量G-2防腐剂（重氮烷基咪唑脲）和适量茶树精油，活性组分由以下质量百分比的组分组成：

操作步骤：

（1）将透明质酸、甲鱼活性多肽和鱼鳞胶原蛋白肽在适量去离子水中加热至55℃，使其充分溶解，并搅拌均匀，制得水相。

（2）将芦芭油、左旋维生素C、D-泛醇、水溶性维生素E、柠檬酸、牛磺酸、羟乙基脲、当归提取物、竹叶提取物和灵芝提取物在搅拌下慢加入水相，均质数分钟，冷却至40℃时，加入茶树精油和G-2防腐剂（重氮烷基咪唑脲）并搅拌均匀，静置至室温，即得富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水成品。

实施例2：

富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水，由活性组分和添加剂组成，添加剂为适量G-2防腐剂（重氮烷基咪唑脲）和适量茶树精油，活性组分由以下质量百分比的组分组成：

操作步骤同实施例1。

实施例3：

富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水，由活性组分和添加剂组成，添加剂为适量G-2防腐剂（重氮烷基咪唑脲）和适量茶树精油，活性组分由以下质量百分比的组分组成：

操作步骤同实施例1。

实施例4：

富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水，由活性组分和添加剂组成，添加剂为适量G-2防腐剂（重氮烷基咪唑脲）和适量茶树精油，活性组分由以下质量百分比的组分组成：

操作步骤同实施例1。

实施例5：

富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水，由活性组分和添加剂组成，添加剂为适量G-2防腐剂（重氮烷基咪唑脲）和适量茶树精油，活性组分由以下质量百分比的组分组成：

操作步骤同实施例1。

对比例1

除了将实施例1中的甲鱼活性多肽用水替代之外，其余操作同实施例1，制得化妆水。

对比例2

除了将实施例1中的甲鱼活性多肽和竹叶提取物用水替代之外，其余操作同实施例1，制得化妆水。

对比例3

除了将实施例1中的甲鱼活性多肽、当归提取物和竹叶提取物用水替代之外，其余操作同实施例1，制得化妆水。

对比例4

除了将实施例1中的甲鱼活性多肽、竹叶提取物和鱼鳞胶原蛋白肽用水替代之外，其余操作同实施例1，制得化妆水。

对比例5

除了将实施例1中的甲鱼活性多肽、鱼鳞胶原蛋白肽和当归提取物用水替代之外，其余操作同实施例1，制得化妆水。

一、皮肤肤质测定

分别采用本发明实施例1~5及对比例1~5制备的化妆水进行皮肤肤质测定。首先，选择30位皮肤健康的女性受测者，受测者左半脸涂抹本发明制备的化妆水为实验组，另半脸不涂抹任何物质为空白组。实验为期8周，分别于第1周、第4周及第8周由各项仪器进行受测者皮肤的检测分析，评估化妆水对于皮肤水分含量、皮肤弹性、细纹、皮肤粗糙度、皮脂分泌量及粗大毛孔数的改善功效，第1周、第4周及第8周三次测试的平均值见表1。

表1皮肤肤质改善功效

注：“+”为增加，“-”为减少。

结果显示（见表1），本发明化妆水对皮肤的细纹、粗糙度、皮脂分泌量、粗大毛孔数均有不同程度的减少，而对皮肤水分含量及皮肤弹性有显著提高的作用，显示本发明产品具有改善皮肤肤质的效果。

对比例1~5制备的化妆水的改善皮肤肤质的效果明显低于本发明产品，显示本发明复配产品的组分之间具有很好的协同增效作用。

二、抗自由基能力测定

分别采用本发明实施例1~5及对比例1~5制备的化妆水进行抗DPPH·自由基能力的测定。首先，准确称取20mg DPPH(1,1-二甲基苄基苯肼，C₁₈H₁₂N₅O₆)，用无水乙醇定溶于250mL容量瓶，DPPH浓度为2×10^-4mol/L。取数支试管编号，参照表2添加试剂。充分混匀，室温黑暗静置30min后，在517nm波长下测定吸光度值。同一测定重复3次。

DPPH·自由基清除率（%）=[（1-A_样品-A_空白）/A_对照]×100%

A_样品：样品在517nm波长下的吸光度值。

A_空白：空白在517nm波长下的吸光度值。

A_对照：对照在517nm波长下的吸光度值。

表2试剂添加量（mL）

组别	DPPH	样品	无水乙醇
				实施例1溶液	2.0	2.0	0
实施例2溶液	2.0	2.0	0
				实施例3溶液	2.0	2.0	0
实施例4溶液	2.0	2.0	0
				实施例5溶液	2.0	2.0	0
对比例1溶液	2.0	2.0	0
				对比例2溶液	2.0	2.0	0
对比例3溶液	2.0	2.0	0
				对比例4溶液	2.0	2.0	0
对比例5溶液	2.0	2.0	0
				空白	0	2.0	2.0
对照	2.0	0	2.0

维生素C（Vc）标准曲线测定：将Vc溶于去离子水配制1g/mL Vc溶液，参照表3配制标准溶液，并按上述样品测定方法测定各浓度Vc标准溶液的DPPH·自由基清除率，以DPPH·自由基清除率为纵坐标（y），Vc浓度为横坐标（x）制作标准曲线，得到线性关系式：y＝135.67x+2.9167。

表3Vc标准溶液的配置

最终浓度（mg/mL）	0.05	0.1	0.2	0.25	0.40	0.50
							1g/mL Vc溶液（mL）	0.1	0.2	0.4	0.5	0.8	1.0
去离子水（mL）	1.9	1.8	1.6	1.5	1.2	1.0

活性检测发现：本发明化妆水具有优良的抗自由基能力，对DPPH·自由基具有良好的清除效果，见表4。

表4

组别	DPPH·的清除率（%）	当量Vc浓度（mg/mL）
			实施例1	98.23	0.703

实施例2	95.66	0.684
			实施例3	99.34	0.711
实施例4	96.78	0.692
			实施例5	96.96	0.693
对比例1	82.35	0.585
			对比例2	81.96	0.583
对比例3	80.22	0.570
			对比例4	80.31	0.570
对比例5	80.25	0.570

对比例1~5制备的化妆水的抗自由基能力明显低于本发明产品，显示本发明复配产品的组分之间具有很好的协同增效作用。

三、抗衰老能力测定

分别采用本发明实施例1~5及对比例1~5制备的化妆水，以SOD活力为指标，进行抗衰老能力测定。

实验动物分组及给药：

昆明种清洁级小鼠20只，雌雄各半，体重(20±2)g，由浙江大学实验动物中心提供，随机分为2组(对照组、样品组)，每组10只。从第一天早上8:00开始，每日给样品组分别灌胃本发明实施例1~5及对比例1~5中的化妆水进行实验干预，每隔1天小鼠称重1次，灌胃量（10gg）根据体重作相应调整。对照组也灌胃等量的生理盐水。连续1个月后断头处死，取大脑用冷生理盐水冲洗，剥取大脑皮层备用。

指标测定：

取大脑皮层制成10%（质量百分比）的匀浆，各指标测定均按SOD测试盒说明进行。

检测结果

SOD活力检测结果发现（见表5）：本发明制备的化妆水能够显著提高小鼠脑皮层的SOD活力，通过提高脑皮层的SOD活性，增强了机体清除自由基的能力，减轻自由基对生物膜大分子的攻击，从而减弱过多自由基对生物膜损害，保证了细胞膜结构和功能的完整，延缓了细胞凋亡的发生，显示本发明制备的化妆水具有优良的抗衰老作用。

表5脑皮层中SOD活力

组别	SOD活力（U/mL）
		对照组	170.23±39.21
实施例1	201.44±10.53
		实施例2	192.74±14.31
实施例3	265.85±11.19
		实施例4	263.23±15.04
实施例5	220.12±25.19
		对比例1	182±15.19
对比例2	176±12.02
		对比例3	175±10.38
对比例4	172±16.51
		对比例5	171±15.27

对比例1~5制备的化妆水虽然也具有一定的抗衰老作用但明显低于本发明产品，显示本发明复配产品的组分之间具有很好的协同增效作用。

本发明中，各组分在本发明限定的用量范围内的任意组合均可得到具有优良抗衰祛皱和保湿补水功效的化妆水，制备过程中参数如温度、时间、搅拌的速度均没有严格的限制，温度、时间、搅拌的速度均以便于各组混合均匀且不破坏各组分活性为宜。原料甲鱼活性多肽、当归提取物、竹叶提取物和灵芝提取物的制备工艺参数的合适变化不会影响最终提取物中活性成分的存在，进而也不会从本质上影响化妆水的功效，因此，采用工艺参数合适变化的任意组合制备的提取物均适用于本发明。在此不再赘述。

Claims (5)

1.一种富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水，由活性组分和添加剂组成，其特征在于，所述的活性组分由以下质量百分比的组分组成：

所述的当归提取物、竹叶提取物或灵芝提取物的制备方法包括步骤：将当归、竹叶或灵芝粉碎，用石油醚脱脂后加入水中，经浸泡、微波提取和超声振荡提取，过滤，滤液经脱色、浓缩和真空干燥，分别得到当归提取物、竹叶提取物或灵芝提取物；

所述的当归、竹叶或灵芝的克数与水的毫升数之比为1:8～12；

所述的微波提取的条件为：400W～500W微波提取5min～10min；

所述的微波提取为间隔提取，包括：400W～500W微波提取1min～2min，停止，间隔1min～2min后再在400W～500W微波提取1min～2min，如此重复间隔提取直至微波提取的总时间为5min～10min；

所述的超声振荡提取的条件为：60W～80W超声振荡提取至少40min。

2.根据权利要求1所述的富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水，其特征在于，所述的甲鱼活性多肽的制备方法包括步骤：将甲鱼去除脂肪和皮膜，得到甲鱼肉骨，加入占甲鱼肉骨质量10倍量～13倍量的水，将甲鱼肉骨煮熟后取汤汁，加水将汤汁调整到甲鱼肉骨原质量的10倍量～13倍量，酶解，灭酶，离心，过滤，滤液透析，凝胶层析分离，得到甲鱼活性多肽。

3.根据权利要求1～2任一项所述的富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水的制备方法，包括步骤：

（1）将透明质酸、甲鱼活性多肽和鱼鳞胶原蛋白肽在水中充分溶解，并混合均匀，制得水相；

（2）将芦芭油、左旋维生素C、D-泛醇、水溶性维生素E、柠檬酸、牛磺酸、羟乙基脲、当归提取物、竹叶提取物和灵芝提取物加入水相，均质后冷却，加入香精和防腐剂并混合均匀，制得富含活性多肽的抗衰祛皱化妆水。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，将透明质酸、甲鱼活性多肽和鱼鳞胶原蛋白肽在水中加热至30℃～55℃充分溶解。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，将芦芭油、左旋维生素C、D-泛醇、水溶性维生素E、柠檬酸、牛磺酸、羟乙基脲、当归提取物、竹叶提取物和灵芝提取物在搅拌下加入水相。

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