CN102901787A - 一种液态奶中总单甘油酯含量的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种液态奶中总单甘油酯含量的检测方法。首先向液态奶中加入正十四烷溶液，再依次加入氨水、95%乙醇、乙醚、石油醚制得提取混合液，待提取混合液分层后，分离有机相并挥发去除有机相中的乙醚及石油醚，浓缩至干后与吡啶混合制得待检测液。将待检测液及制备的标样用硅烷化试剂衍生后，进行气相色谱检测。将仪器输出结果带入特定公式，可得出液态奶中总单甘油酯的含量。本发明的检测方法操作简便，能够快速、准确地检测液态奶中总单甘油酯的含量。
Description
技术领域
本发明涉及一种食品中总单甘油酯含量的检测方法，尤其适用于检测液态奶中总单甘油酯的含量。
背景技术
单甘油酯作为一种最常用的食品乳化剂，被广泛应用于多种食品加工中。在乳制品中加入单甘油酯可以促使乳脂肪在水中分散得更均匀、更稳定，防止出现脂肪上浮等品质问题，同时由于其良好的抗氧化效果，还可使得乳制品的储存期显著延长。但是，国家规定禁止在超高温灭菌的纯牛奶中人为添加单甘油酯。
现在普遍使用的检测方法都集中在单甘油酯原料中单甘油酯含量的检测，如GB1986-2007《食品添加剂—单、双硬脂酸甘油酯》中，通过气相色谱法检测单、双硬脂酸甘油酯原料中1-硬脂酸甘油酯和1-棕榈酸甘油酯的含量，并将其相加得到原料中总单甘油酯的含量。目前还缺乏统一的专门针对液态奶中总单甘油酯含量的检测方法。
发明内容
本发明的目的是发明一种液态奶中总单甘油酯含量的检测方法，将样本进行前处理后，用于总单甘油酯的气相色谱检测，可以准确且快速地检测出液态奶中总单甘油酯的含量。
本发明提供了一种液态奶中总单甘油酯含量的检测方法，包括如下步骤：a、取液态奶，加入正十四烷溶液，得到含内标液态奶，向含内标液态奶中依次加入氨水，充分混合，加入乙醇，缓和但彻底地进行混合，加入乙醚，振摇，加入石油醚，振摇，制得提取混合液；b、待提取混合液分层后，分离提取混合液中的有机相，挥发除去有机相中的乙醚和石油醚并将剩余的部分浓缩至干，得到浓缩物，向浓缩物中加入吡啶并混匀，得到待检测液；c、取1-棕榈酸甘油酯和1-硬脂酸甘油酯，加入吡啶溶解，再加入正十四烷溶液并混匀，得到标样；d、用硅烷化试剂衍生化处理待检测液和标样后，进行气相色谱检测；e、将步骤d得到的检测结果带入以下公式，分别计算得出液态奶中1-棕榈酸甘油酯和1-硬脂酸甘油酯的含量，相加得出液态奶中总单甘油酯的含量。
式中：Mx为液态奶中1-棕榈酸甘油酯或1-硬脂酸甘油酯的含量，单位为mg/100g；Rx为反应因子；m`is为液态奶中正十四烷的质量，单位为mg；m`x为液态奶的质量，单位为g；A`x为液态奶中1-棕榈酸甘油酯或1-硬脂酸甘油酯的峰面积；A`is为液态奶中正十四烷的峰面积。
公式中
；
式中：Rx为反应因子；mis为标样中正十四烷的质量，单位为mg；ms为标样中1-棕榈酸甘油酯或1-硬脂酸甘油酯的质量，单位为mg；As为标样中1-棕榈酸甘油酯或1-硬脂酸甘油酯的峰面积；Ais为标样中正十四烷的峰面积。
在检测方法的一种示意性实施方式中，处理每克液态奶需要的氨水的量为0.2mL；乙醇的浓度为95%，且其添加量为1mL；乙醚的量为2.5mL；石油醚的量为2.5mL。
在检测方法的一种示意性实施方式中，硅烷化试剂为将N-甲基，N-三甲基硅烷基-三氟乙酰胺和三甲基氯硅烷按体积比2:1混合所得的混合物。
在检测方法的一种示意性实施方式中，气相色谱检测的条件为：色谱柱为VF-5毛细管柱，规格为柱长30m，内径0.25mm，涂抹厚度0.25μm；检测器为氢火焰离子化检测器；进样口温度为300℃；进样量为1μL，不分流进样；柱箱温度为：初温120℃，维持1min，以10℃/min的速度升温至290℃并维持15min；检测器温度为320℃；载气为氮气，毛细管内流速为1.5mL/min。
本发明的一种液态奶中总单甘油酯含量的检测方法，先向液态奶中加入正十四烷溶液，再用简化的罗兹法提取其中的脂肪并最终与吡啶混合。将处理后的样本用于总单甘油酯的气相色谱检测，再将仪器检测结果带入特定公式，可计算出液态奶中总单甘油酯的准确含量。
具体实施方式
为了对发明的技术特征、目的和效果有更加清楚的理解，现结合实施例具体说明本发明。
1. 仪器设备。
毛氏抽酯瓶，真空旋转蒸发仪，气相色谱仪，VF-5毛细管柱（规格为柱长30m，内径0.25mm，涂抹厚度0.25μm），氢火焰离子化检测器。
2. 色谱条件。
进样口温度为300℃；进样量为1μL，不分流进样；柱箱温度为：初温120℃，维持1min，以10℃/min的速度升温至290℃并维持15min；检测器温度为320℃；载气为氮气，毛细管内流速为1.5mL/min。
3. 试剂。
10mg/mL的正十四烷溶液：准确称取1.0g正十四烷，置于100mL容量瓶中，用吡啶定容到刻度。
100μg/mL的正十四烷溶液：取10mg/mL的正十四烷溶液1mL于100mL容量瓶中，用吡啶定容到刻度。
硅烷化试剂：将N-甲基，N-三甲基硅烷基-三氟乙酰胺和三甲基氯硅烷按体积比2:1混合。
4. 操作步骤。
1） 取10.0g液态奶，加入毛氏抽酯瓶中，向其中加入0.1mL 10mg/mL的正十四烷溶液，得到含内标液态奶，向含内标液态奶中加入2mL氨水，充分混合；加入10mL 95%乙醇，缓和但彻底地进行混合；加入25mL乙醚，振摇100次；加入25mL石油醚，振摇100次，制得提取混合液。
2） 待提取混合液分层后，分离出有机相，挥发除去有机相中的乙醚、石油醚并将剩余的部分在真空旋转蒸发仪上于50℃水浴中真空旋转蒸干，得到浓缩物。向浓缩物中加入吡啶定容至20mL并混匀，得到待检测液。
3） 取0.1g 1-棕榈酸甘油酯和0.1g 1-硬脂酸甘油酯，置于10mL容量瓶中，用吡啶定容到刻度后，得到定容液，移取1mL定容液用吡啶稀释100倍得到稀释液，将稀释液与100μg/mL的正十四烷溶液等体积混合，得到标样。
4） 移取待检测液和标样各0.3mL分别置于两个进样小瓶中，再各自加入0.45mL硅烷化试剂，盖好小瓶，用力摇匀，然后在70℃恒温烘箱中衍生20分钟，待冷却后，进行气相色谱检测。
5） 将步骤4）得到的检测结果带入以下公式，分别计算得出液态奶中1-棕榈酸甘油酯和1-硬脂酸甘油酯的含量，相加得出总单甘油酯的含量。
其中液态奶中1-棕榈酸甘油酯含量的计算方法为：
式中：
Mx为液态奶中1-棕榈酸甘油酯的含量，单位为mg/100g；
Rx为反应因子；
m`is为液态奶中加入的10mg/mL的正十四烷溶液中正十四烷的质量，单位为mg；
m`x为液态奶的质量，单位为g；
A`x为液态奶中1-棕榈酸甘油酯色谱曲线特征峰的峰面积；
A`is为液态奶中正十四烷色谱曲线特征峰的峰面积。
其中：
。
式中：
Rx为反应因子；
mis为标样中加入的100μg/mL的正十四烷溶液中正十四烷的质量，单位为mg；
ms为标样中1-棕榈酸甘油酯的质量，单位为mg；
As为标样中1-棕榈酸甘油酯色谱曲线特征峰的峰面积；
Ais为标样中正十四烷色谱曲线特征峰的峰面积。
液态奶中1-硬脂酸甘油酯含量的计算方法为：
式中：
Mx为液态奶中1-硬脂酸甘油酯的含量，单位为mg/100g；
Rx为反应因子；
m`is为液态奶中加入的10mg/mL的正十四烷溶液中正十四烷的质量，单位为mg；
m`x为液态奶的质量，单位为g；
A`x为液态奶中1-硬脂酸甘油酯色谱曲线特征峰的峰面积；
A`is为液态奶中正十四烷色谱曲线特征峰的峰面积。
其中：
。
式中：
Rx为反应因子；
mis为标样中加入的100μg/mL的正十四烷溶液中正十四烷的质量，单位为mg；
ms为标样中1-硬脂酸甘油酯的质量，单位为mg；
As为标样中1-硬脂酸甘油酯色谱曲线特征峰的峰面积；
Ais为标样中正十四烷色谱曲线特征峰的峰面积。
5. 回收率试验。
取未添加单甘油酯的生鲜牛奶作为未加标样本，向其中中分别加入不同量的1-棕榈酸甘油酯和/或1-硬脂酸甘油酯，制成加标样本，使得加标样本中添加的总单甘油酯的含量分别达到0.50mg/g、1.00mg/g和2.00mg/g。将加标样本和未加标样本同时按照本实施例所述检测方法进行总单甘油酯含量的检测，每个含量水平分别进行6次试验，试验结果及计算所得回收率如下表所示。
| 测定次数 | 未加标样本 | 0.50mg/g加标样本检测结果 | 1.00mg/g加标样本检测结果 | 2.00mg/g加标样本检测结果 |
| 1 | 0.070 mg/g | 0.550 mg/g | 0.948 mg/g | 2.072 mg/g |
| 2 | 0.065 mg/g | 0.593 mg/g | 1.044 mg/g | 1.974 mg/g |
| 3 | 0.067 mg/g | 0.566 mg/g | 1.029 mg/g | 1.981 mg/g |
| 4 | 0.074 mg/g | 0.527 mg/g | 0.998 mg/g | 2.011 mg/g |
| 5 | 0.069 mg/g | 0.573 mg/g | 0.961 mg/g | 2.071 mg/g |
| 6 | 0.077 mg/g | 0.581 mg/g | 1.021 mg/g | 2.009 mg/g |
| 平均值 | 0.070 mg/g | 0.565 mg/g | 1.000 mg/g | 2.020 mg/g |
| 平均回收率 | / | 98.9% | 93.0% | 97.5% |
| 样本检测结果的相对标准偏差 | / | 4.17% | 3.86% | 2.11% |
如上表所示，不同单甘油酯含量的加标样本的平均回收率为93.0%-98.9%，样本检测结果的相对标准偏差为2.11%-4.17%。说明该方法能够满足准确度和方法重现性的要求，能够快速、准确地检测液态奶中总单甘油酯的含量。
在本文中，限定性的数字并非严格的数学意义上的限制，它也可以包含本领域技术人员可以理解的且制造或使用该方法时允许的误差。
应当理解，虽然本说明书是按照各个实施例描述的，但并非每个实施例仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
上文所列出的一系列的详细说明仅仅是针对本发明的可行性实施例的具体说明，它们并非用以限制本发明的保护范围，凡未脱离本发明技艺精神所作的等效实施例或变更均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种液态奶中总单甘油酯含量的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
a、取液态奶，加入正十四烷溶液，得到含内标液态奶，向所述含内标液态奶中依次加入氨水，充分混合，加入乙醇，缓和但彻底地进行混合，加入乙醚，振摇，加入石油醚，振摇，制得提取混合液；
b、待所述提取混合液分层后，分离所述提取混合液中的有机相，挥发除去所述有机相中的所述乙醚和所述石油醚并将剩余的部分浓缩至干，得到浓缩物，向所述浓缩物中加入吡啶并混匀，得到待检测液；
c、取1-棕榈酸甘油酯和1-硬脂酸甘油酯，加入所述吡啶溶解，再加入正十四烷溶液并混匀，得到标样；
d、用硅烷化试剂衍生化处理所述待检测液和所述标样后，进行气相色谱检测；和
e、将步骤d得到的检测结果带入以下公式，分别计算得出所述液态奶中1-棕榈酸甘油酯和1-硬脂酸甘油酯的含量，相加得出所述液态奶中总单甘油酯的含量；
式中：
Mx为所述液态奶中1-棕榈酸甘油酯或1-硬脂酸甘油酯的含量，单位为mg/100g；
Rx为反应因子；
m`is为所述液态奶中正十四烷的质量，单位为mg；
m`x为所述液态奶的质量，单位为g；
A`x为所述液态奶中所述1-棕榈酸甘油酯或所述1-硬脂酸甘油酯的峰面积；
A`is为所述液态奶中所述正十四烷的峰面积；
所述公式中
；
式中：
Rx为所述反应因子；
mis为所述标样中所述正十四烷的质量，单位为mg；
ms为所述标样中所述1-棕榈酸甘油酯或所述1-硬脂酸甘油酯的质量，单位为mg；
As为所述标样中所述1-棕榈酸甘油酯或所述1-硬脂酸甘油酯的峰面积；和
Ais为所述标样中所述正十四烷的峰面积。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，处理每克所述液态奶需要的所述氨水的量为0.2mL；所述乙醇的浓度为95%，且其添加量为1mL；所述乙醚的量为2.5mL；所述石油醚的量为2.5mL。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述硅烷化试剂为将N-甲基，N-三甲基硅烷基-三氟乙酰胺和三甲基氯硅烷按体积比2:1混合所得的混合物。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述气相色谱检测的条件为：
色谱柱为VF-5毛细管柱，规格为柱长30m，内径0.25mm，涂抹厚度0.25μm；
检测器为氢火焰离子化检测器；
进样口温度为300℃；
进样量为1μL，不分流进样；
柱箱温度为：初温120℃，维持1min，以10℃/min的速度升温至290℃并维持15min；
检测器温度为320℃；和
载气为氮气，毛细管内流速为1.5mL/min。
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|---|
| ARMIN BARETH ET AL.: "Gas chromatographic determination of mono- and diglycerides in milk and milk products", 《EUROPEAN FOOD RESEARCH AND TECHNOLOGY》, vol. 216, no. 4, 30 April 2003 (2003-04-30), pages 365 - 368 * |
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| 王世平 等: "《食品安全检测技术》", 31 August 2009, article "食品中甘油脂肪酸酯的检测技术", pages: 169-171 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102901787B (zh) | 2014-06-11 |
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