CN102879515A - 一种肝炎用药组合物的质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种肝炎用药组合物的质量控制方法，特指九味肝泰中药的质量控制方法。本发明是采用如下技术方案实现的：一种肝炎用药组合物的质量控制方法，其步骤包括对三七、大黄、黄芩的薄层色谱鉴别，通过高效液相色谱法测定大黄素（C₁₅H₁₀O₅）和大黄酚（C₁₅H₁₀O₄）的总量，每粒或每片中不得低于70μg；其中还包括对姜黄进行鉴别，测定姜黄素含量。采用本发明的方法，新增姜黄素的薄层鉴别控制方法及姜黄素的含量限度控制方法，提高了产品质量。

Description

一种肝炎用药组合物的质量控制方法

技术领域

本发明涉及一种肝炎用药组合物的质量控制方法，特指九味肝泰中药的质量控制方法。 

背景技术

九味肝泰是采用九味纯天然中药制成的用于治疗乙型肝炎的药品，其功能主治是化淤通络，疏肝健脾。用于气滞血瘀兼肝郁脾虚所致的胁肋痛或刺痛，抑郁烦闷，食欲不振，食后腹胀脘痞，大便不调，或胁下痞块等乙肝症状。该产品是一种纯天然治疗乙肝的中成药制剂，在治疗乙肝诸多药方中独树一帜，市场前景广阔。 

而本品现行使用的质量标准不能有效地控制产品质量，仅仅对九味药材中三味药材进行了鉴别（三七、大黄、黄芩），只对其中一味药材进行含量测定（大黄中的大黄素），其他六味药材未有鉴定或含量限制，如成品中是否能检测出姜黄素等有效含量不得而知。如通过抽检市场上销售的九味肝泰，进行姜黄薄层鉴别研究及姜黄素含量测定，其含量结果几乎为0，其薄层鉴别未检出，而现行质量控制方法中未有这些指标，严重不利于产品质量和疗效，严重不利于老百姓健康。 

发明内容

为了克服现有技术中存在的对姜黄素等不进行鉴别的缺陷，本发明提供一种新的肝炎用药组合物的质量检测方法，采用本发明的质量 检测方法，能够清楚的鉴别组分是否存在，含量多少。 

本发明是采用如下技术方案实现的： 

一种肝炎用药组合物的质量控制方法，其步骤包括对三七、大黄、黄芩的薄层色谱鉴别，通过高效液相色谱法测定大黄素（C₁₅H₁₀O₅）和大黄酚（C₁₅H₁₀O₄）的总量，每粒或每片中不得低于70μg；其中还包括对姜黄进行鉴别，测定姜黄素含量。 

上述的肝炎用药组合物的质量控制方法，其中所述的对姜黄进行鉴别是指对姜黄进行薄层色谱鉴别，具体步骤为：取本品内容物适量，加入甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取姜黄素对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂，三氯甲烷:甲醇:甲酸的重量比为96:4:0.7,展开，取出，晾干，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或是荧光斑点。 

上述的肝炎用药组合物的质量控制方法，其中所述的测定姜黄素的含量是指采用高效液相色谱法测定，具体步骤为： 

（1）色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈－4％冰醋酸溶液为流动相，乙腈：4％冰醋酸的重量比为48：52；检测波长430nm，理论板数按姜黄素计算应不低于4000。 

（2）对照品溶液的制备：取姜黄素对照品适量，精密称定，加 甲醇制成每1ml含姜黄素10μg的溶液,即得。 

（3）供试品溶液的制备：取装量差异项下的内容物，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，精密称定，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取继滤液，即得。 

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪中，测定，即得。 

采用本发明的方法，新增姜黄素的薄层鉴别控制方法及姜黄素的含量限度控制方法。提高了产品质量，临床观察结果表明，含有姜黄素的九味肝泰治疗慢性乙肝疗效显著，该药能明显改善慢性乙肝病人的临床症状，临床总显效率和总有效率分别为55.0％和93.0％，HBsAg阴转率为31.58％、HBeAg阴转率为47.83％、抗-HBc阳转率为39.62％、抗-HBe阳转率为37.14％，高于对照组，有抑制乙肝病毒的作用和增强机体对乙肝病毒感染的免疫作用。 

附图说明

1、图1为本发明所述的肝炎用药组合物的质量控制方法中实施例1的姜黄素薄层鉴别图，其中1、3为姜黄素对照品，2为阴性样品，4为样品（120303）。 

2、图2为本发明所述的肝炎用药组合物的质量控制方法中实施例1的姜黄素线性关系图。 

具体实施方式

实施例1 

1、新增姜黄的薄层鉴别控制方法 

姜黄素薄层鉴别方法学考察研究取本品内容物适量，加入甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取姜黄素对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（96:4:0.7）为展开剂，展开，取出，晾干，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或是荧光斑点（见图1）。 

2、新增姜黄素的含量限度控制方法 

姜黄素含量限度控制方法学研究如下： 

a、对照品溶液的制备精密称取姜黄素对照品，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得。 

b、供试品溶液的制备取装量差异项下的本品20粒，取内容物，研细，精密称重，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，精密称定，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取继滤液，即得。 

c 线性关系考查精密吸取浓度为9.56μg /ml的姜黄素对照品溶液2、4、8、10、15μl注入液相色谱仪,测定其峰面积积分值，以进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为：Y＝83417X+28476   r＝0.9996。结果表明，姜黄素在0.01912～0.143mg范围内具有良好的线性关系。数据见表1，标准曲线图见图2。 

表6线性关系考察结果 

d精密度试验精密吸取同一对照品溶液10μl，重复进样6次，测定其峰面积积分值，结果见表2。 

表2精密度试验结果 

结果表明：本方法精密度较好。 

e稳定性试验精密吸取同一供试品溶液10μl，分别于0、2、4、8、12小时进样，测定其峰面积积分值，结果见表3。 

表3稳定性试验结果 

结果表明，峰面积积分值平均为1567408.4，RSD为2.2％，供试品溶液在12小时内峰面积值基本稳定。 

f重复性试验取同一批号(120301)样品6份，按供试品制备方法制备供试品溶液，同上述条件测定，结果见表4。 

表4重复性试验结果 

结果表明，本方法重复性较好。 

g回收率试验精密称取已知含量为1.25mg/g的样品约0.5g，分别精密加入姜黄素对照品溶液(0.058mg/ml)10ml，即0.58mg，按含量测定项下的方法测定含量，结果见表5。 

表5  回收率测定结果 

结果表明，本方法加样回收率在95％以上，RSD值为1.45，回收率较高。 

h样品测定结果  按质量标准正文中的含量测定方法测定3批样品及对照品中姜黄素含量，结果见表6。 

表6三批样品与其对照品中姜黄素含量测定结果 

三批样品的姜黄素含量测定结果平均值为0.46mg/粒。 

Claims (3)

1.一种肝炎用药组合物的质量控制方法，其步骤包括对三七、大黄、黄芩的薄层色谱鉴别，通过高效液相色谱法测定大黄素（C₁₅H₁₀O₅）和大黄酚（C₁₅H₁₀O₄）的总量，每粒或每片中不得低于70μg；其特征在于还包括对姜黄进行鉴别，测定姜黄素含量。

2.如权利要求1所述的肝炎用药组合物的质量控制方法，其特征在于所述的对姜黄进行鉴别是指对姜黄进行薄层色谱鉴别，具体步骤为：取本品内容物适量，加入甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取姜黄素对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂，三氯甲烷:甲醇:甲酸的重量比为96:4:0.7展开，取出，晾干，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或是荧光斑点。

3.如权利要求1所述的肝炎用药组合物的质量控制方法，其特征在于所述的测定姜黄素的含量是指采用高效液相色谱法测定，具体步骤为：

（1）色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈－4％冰醋酸溶液为流动相,乙腈:4％冰醋酸的重量比为48：52；检测波长430nm；理论板数按姜黄素计算应不低于4000。

（2）对照品溶液的制备：取姜黄素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含姜黄素10μg的溶液,即得；

（3）供试品溶液的制备：取装量差异项下的内容物，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，精密称定，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取继滤液，即得；

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪中，测定，即得。

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