CN102068573A - 用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法 - Google Patents
用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法，质量标准中设置以辛弗林、橙皮苷为对照品，薄层色谱法鉴别橘半枳术丸处方中是否含有枳实、陈皮成分，可更加准确地检验出绝假药和劣药，提高了使用中的安全性；高效液相色谱法检测橘半枳术丸处方中黄芩苷的含量，每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于4.0mg的定量指标及检验方法，提高了健胃宽胸丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，使质量标准较为完善，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
Description
技术领域
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法。
背景技术
橘半枳术丸是《卫生部药品标准》中药成方制剂收载的制剂，WS3-B-3728-98第九册第一百九十二页收载的制剂，记载处方及质量标准：
处方：枳实(麸炒) 100g 白术(麸炒) 100g 陈皮 100g
清半夏 100g 桔梗 50g 黄芩 50g
制法；以上六味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水泛丸，干燥，即得。
目前与橘半枳术丸标准记载处方相似，功效相似的产品文献很多，但是未见记载处方相同，功效相同的产品文献，但是上述标准存在如下问题：橘半枳术丸原质量标准中无鉴别项，存在定性分析差；另外没有反映药物内在质量的指标成分的含量测定项，对于质量控制标准而言，还是有所欠缺，为提高中药的产品质量，需要完善产品质量标准。
发明内容
本发明的目的是本发明的目的在于克服现有技术的健胃宽胸丸标准不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物成分的健胃宽胸丸的质量控制方法。
为了达到本发明的目的采用的技术方案是：种用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材：
枳实(麸炒) 100g 白术(麸炒) 100g 陈皮 100g
清半夏 100g 桔梗 50g 黄芩 50g
以上共计六味500g组成，制法：以上六味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水制丸，干燥，即得，其特征在于：其方法的步骤是：
(1)以辛弗林、橙皮苷为对照品，薄层色谱法鉴别橘半枳术丸处方中是否含有枳实、陈皮成分；
(2)以黄芩苷为对照品，高效液相色谱法检测橘半枳术丸处方中黄芩苷的含量。
所述的用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法，其特征在于：所述的薄层色谱法鉴别橘半枳术丸处方中否含有枳实的方法为：取本品粉末0.5g，加甲醇10mL，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取辛弗林对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一以含1％氢氧化钠的羧甲基基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
所述的薄层色谱法鉴别橘半枳术丸处方中是否含有陈皮成分的方法为：取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加乙醚20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水为展开剂，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰乙酸∶水＝100∶11∶11∶26，展开，取出，晾干，喷以对甲氧基苯甲醛溶液，在105摄氏度加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
所述的用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法，其特征在于：以黄芩苷为对照品，液相色谱法检测橘半枳术丸处方中黄芩苷的含量的方法为：
(1)色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝47∶53∶0.2为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；
(2)对照品溶液的制备：称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含80μg的溶液，即得；
(3)供试品溶液的制备：取本品粉末1g，精密称定，置50mL具塞三角瓶中，加70％乙醇25mL，称定重量，超声处理30分钟，放置至室温，称重补足超声处理过程中的损失量，经0.45μm微孔滤膜滤过后，即得；
(4)测定法：分别吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于4.0mg。
发明有益效果：质量标准中设置以辛弗林、橙皮苷为对照品，薄层色谱法鉴别橘半枳术丸处方中是否含有枳实、陈皮成分，可更加准确地检验出绝假药和劣药，提高了使用中的安全性；高效液相色谱法检测橘半枳术丸处方中黄芩苷的含量，每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于4.0mg的定量指标及检验方法，提高了健胃宽胸丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，使质量标准较为完善，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
附图说明
图1橘半枳术丸中陈皮的薄层色谱图。
图1-1橘半枳术丸中枳实的薄层色谱图。
图2黄芩苷标准曲线图。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明进一步说明，实施例1改进后的橘半枳术丸质量标准：
处方：枳实(麸炒) 100g 白术(麸炒) 100g 陈皮 100g
清半夏 100g 桔梗 50g 黄芩 50g
以上共计六味 500g；
制法：以上六味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水制丸，干燥，即得。
性状：本品为淡黄色的水丸；味甘苦。
鉴别：薄层色谱鉴别
1.枳实的鉴别：取本品粉末0.5g，加甲醇10mL，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。另取辛弗林对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一以含1％氢氧化钠的羧甲基基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.陈皮的鉴别：取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加乙醚20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水(100∶11∶11∶26)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对甲氧基苯甲醛溶液，在105摄氏度加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查：本品应符合中国药典2005年版第一部附录(附录I A)丸剂项下有关的各项规定。
含量测定：照高效液相色谱法(附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。
对照品溶液的制备 称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含80μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末1g，精密称定，置50mL具塞三角瓶中，加70％乙醇25mL，称定重量，超声处理30分钟，放置至室温，称重补足超声处理过程中的损失量，经0.45μm微孔滤膜滤过后，即得。
测定法 分别吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于4.0mg。
功能与主治：健胃消食，利湿化痰。用于脾虚食滞，不思饮食，消化不良，呕吐痰饮。
用法与用量：口服，一次6g，1日1～2次；规格：每瓶装6g贮藏：密闭，防潮。
实施例2橘半枳术丸质量标准起草说明：橘半枳术丸原质量标准中没有鉴别、含量测定项，此次提高标准增加了苍术、厚朴的薄层鉴别和黄芩苷的含量测定对原标准进行了修订。
薄层色谱鉴别
(1)枳实的薄层色谱鉴别
供试品溶液的制备取本品粉末0.5g，加甲醇10mL，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。
枳实药材供试品溶液的制备取本品粉末0.5g，加甲醇10mL，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备另取辛弗林对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照溶液的制备 除枳实外，按处方配制诸药，照供试品制备工艺操作，取0.5g研匀，照供试品溶液的制备方法项下操作作为枳实阴性对照溶液。
双阴性对照溶液的制备除枳实、陈皮外，按处方配制诸药，照供试品制备工艺操作，取0.5g研匀，照供试品溶液的制备方法项下操作作为枳实、陈皮双阴性对照溶液。
照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述五种溶液各5-10μL，分别点于同一以含1％氢氧化钠的羧甲基基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。而双阴性对照色谱中则无此斑点。说明该方法专属，可靠。 (结果见图1-1。图1-1：[从左→右：1.辛弗林对照品(110727-200105)、2.枳实药材、
3.橘半枳术丸(20060101)、4.阴性、5.双阴性]
(2)陈皮的定性鉴别：
供试品溶液的制备 取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加乙醚20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。
陈皮药材溶液的制备取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加乙醚20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照溶液的制备 除陈皮外，按处方配制诸药，照供试品制备工艺操作，取1g研匀，照供试品溶液的制备方法项下操作作为陈皮阴性对照溶液。
双阴性对照溶液的制备除枳实、陈皮外，按处方配制诸药，照供试品制备工艺操作，取1g研匀，照供试品溶液的制备方法项下操作作为枳实、陈皮双阴性对照溶液。
照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述五种溶液各5-10μL，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水(100∶11∶11∶26)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对甲氧基苯甲醛溶液，在105摄氏度加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。而双阴性对照色谱中则无此斑点。说明该方法专属，可靠。由于按药典法操作，橙皮苷对照品的展程较短(见图1)，故用改以上方法操作。图1：[从左→右：1.橙皮苷对照品(110721-200211)、2.阴性、3.橘半枳术丸(20060101)、4.陈皮药材、]
【含量测定】
照高效液相色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI D)测定
一、仪器与试药
1.仪器条件
仪器：岛津LC-2010AHT型高效液相色谱仪
检测器：uV/VIS
检测波长：280nm
流速：1.0mL/min
柱温：40℃
2.色谱条件：
色谱柱：Diamonsil(TM) 钻石 C18 5μm 250×4.6mm
流动相：甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)
进样量：5μl
3.试剂与试药
黄芩苷对照品：购自中国药品生物制品检定所(供含量测定用)
批号：110715-200514
试剂：甲醇为色谱纯，其它为分析纯，水为去离子水。
二、实验方法的考察
1.色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相，检测波长为280nm，柱温为40℃。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于7000。
2.提取条件的考察
2.1提取溶媒的考察
2.1.1超声法：本实验对30％、50％、70％、95％乙醇四种不同的提取溶媒利用超声方法进行考察，结果见表1
表1不同浓度的黄芩苷含量
经考察，选择70％乙醇为最佳提取溶媒。
2.1.2热回流法：本实验对30％、50％、70％、95％乙醇四种不同的提取溶媒利用热回流方法进行考察，结果见表2选择70％乙醇为最佳提取溶媒。
表2 不同浓度的黄芩苷含量
2.3提取时间的考察：以70％乙醇为提取溶媒，超声处理10、20、30、40分钟，结果见表3经考察，选择30分钟为超声提取时间。
表3提取时间的考察结果
3.测定条件的选择
3.1波长的选择
照中国药典2005年版第一部第211页黄芩苷含量测定项下选择280nm为检测波长。
3.2流动相的选择
照中国药典2005年版第一部第211页黄芩苷含量测定项下选择流动相为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)。
4.空白实验
按样品处方称取除黄芩的药味适量，按供试品制备方法制成空白对照，用与样品相同的色谱条件测定，同时测定样品，结果表明阴性样品在黄芩苷出峰处无峰。见附图
5.线性关系考察
黄芩苷对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品适量，用甲醇制成每1mL含黄芩苷78.04μg的对照品溶液。吸取上述溶液1.0、2.0、5.0、8.0、10、15、20μL，依次进样分析，测定峰面积，结果见表4。
表4 线性关系考察结果
以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，见下图2黄芩苷标准曲线图。经统计学计算得回归方程：Y＝3.590×106X-1.732×103r＝0.999978699
6.精密度实验：精密吸取黄芩苷对照品溶液5μL(浓度为0.07804mg/mL)，重复进样7次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为0.39％。结果见表5
表5精密度实验结果
7.纯度实验
精密吸取黄芩苷对照品储备液5μl(浓度为0.7804mg/mL)进样，数据采集时间为30分钟(大于黄芩苷保留时间两倍)，结果见附图
8.重现性实验：取同一批号的样品(批号：20060101)，称取6份，按拟定的含量测定方法，进行提取，分析，测得峰面积积分值，计算相对标准偏差为1.50％，结果见表6
9.回收实验
9.1加样回收实验一
称取样品0.25g，3份，精密称定，置50mL具塞三角瓶中，分别加入对照品适量，按供试品制备与测定项下操作，计算回收率，结果见表7
经实验考察，回收率实验结果为103.1％，RSD为1.28％，符合要求。
9.2加样回收实验二
称取样品0.25g，3份，精密称定，置50mL具塞三角瓶中，分别加入对照品适量，按供试品制备与测定项下操作，计算回收率，结果见表8
表6 重现性实验结果
表7 回收率实验结果
表8 回收率实验结果
经实验考察，回收率实验结果为96.79％，RSD为0.39％符合要求。
10.稳定性实验
将制备好的供试品溶液进样分析，每隔1小时进样，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为0.18％。结果见表9
表8 稳定性实验结果
经实验考察，表明供试品在4小时内稳定，相对标准偏差为0.18％。
11.橘半枳术丸中黄芩苷含量测定
对照品溶液的制备：称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含80μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取本品粉末1g，精密称定，置50mL具塞三角瓶中，加70％乙醇25mL，称定重量，超声处理30分钟，放置至室温，称重补足超声处理过程中的损失量，经0.45μm微孔滤膜滤过后，注入液相色谱仪，测定，即得。
依照拟定方法，吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL，进样，分析。共测定了3批橘半枳术丸黄芩苷含量，结果见表9。
表9供试品中黄芩苷含量测定结果
限度：本品每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于4.0mg。
Claims (3)
1.一种用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材：
枳实(麸炒) 100g 白术(麸炒) 100g 陈皮 100g
清半夏 100g 桔梗 50g 黄芩 50g
以上共计六味500g组成，制法：以上六味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水制丸，干燥，即得，其特征在于：其方法的步骤是：
(1)以辛弗林、橙皮苷为对照品，薄层色谱法鉴别橘半枳术丸处方中是否含有枳实、陈皮成分；
(2)以黄芩苷为对照品，高效液相色谱法检测橘半枳术丸处方中黄芩苷的含量。
2.根据权利要求1所述的用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法，其特征在于：所述的薄层色谱法鉴别橘半枳术丸处方中否含有枳实的方法为：
取本品粉末0.5g，加甲醇10mL，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取辛弗林对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一以含1％氢氧化钠的羧甲基基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
所述的薄层色谱法鉴别橘半枳术丸处方中是否含有陈皮成分的方法为：
取本品粉末1g，加水30mL，超声处理15分钟，加乙醚20mL萃取，弃去醚层，水层加正丁醇20mL萃取，弃去水层，醇层蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水为展开剂，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰乙酸∶水＝100∶11∶11∶26，展开，取出，晾干，喷以对甲氧基苯甲醛溶液，在105摄氏度加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求1所述的用于健胃消食橘半枳术丸的质量控制方法，其特征在于：以黄芩苷为对照品，液相色谱法检测橘半枳术丸处方中黄芩苷的含量的方法为：
(1)色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝47∶53∶0.2为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；
(2)对照品溶液的制备：称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含80μg的溶液，即得；
(3)供试品溶液的制备：取本品粉末1g，精密称定，置50mL具塞三角瓶中，加70％乙醇25mL，称定重量，超声处理30分钟，放置至室温，称重补足超声处理过程中的损失量，经0.45μm微孔滤膜滤过后，即得；
(4)测定法：分别吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于4.0mg。
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-
2009
- 2009-11-20 CN CN2009102286286A patent/CN102068573B/zh active Active
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