CN102870994B - 一种预防奶牛隐性乳房炎、降低体细胞数的功能性奶牛饲料添加剂 - Google Patents
一种预防奶牛隐性乳房炎、降低体细胞数的功能性奶牛饲料添加剂 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种含富硒酵母、富铁酵母、富锌酵母的奶牛饲料添加剂。根据本发明的奶牛饲料添加剂，包含富硒酵母菌粉、富铁酵母菌粉、富锌酵母菌粉、霉菌毒素吸附剂、复合维生素、复合微生态制剂、生物抗氧化剂。本发明的奶牛饲料添加剂配方合理，包含多种有机微量元素和益生菌，营养均衡，未添加抗生素，可有效降低牛奶中体细胞数，降低奶牛隐性乳房炎的发生率，维护乳腺系统的良好发育机制，提高奶牛产奶量和乳品质，还可以预防奶牛白肌病的发生，能满足目前广大养殖户的需求，且适合用于发展绿色健康养殖，生产无公害反刍动物产品。
Description
技术领域
本发明涉及一种含富硒酵母、富铁酵母、富锌酵母的奶牛饲料添加剂，属于饲料添加剂领域。
背景技术
乳房炎是奶牛最普遍的疾病，依其表现形式可分为临床型乳房炎和亚临床型乳房炎。亚临床型乳房炎又称隐性乳房炎，是指乳房和乳汁均无肉眼可见的变化，但乳汁导电率、体细胞、pH值等理化性质发生变化，必须用特殊的理化方法才能检出的乳房炎。有资料表明，全世界约有2.2亿头奶牛，33%患有各种类型的乳房炎，其中隐性奶牛乳房炎的发病率高达50%左右，我国奶牛乳房炎的发生率更高。
奶牛乳房炎为乳房实质、间质的炎症。病因多由机械刺激、病原微生物侵入及化学、物理性损伤所致。乳房炎是对奶牛场危害最大、投入药费最多、防治最难的疾病，被列为奶牛的四大疾病之一。特别是隐性乳房炎，在临床上无明显的症状，需要用特殊的检测方法，根据乳汁的性状变化才能检测出来。隐性奶牛乳房炎在我国的发病率在40%～80%之间。这种病使奶产量降低15%的同时，还会降低牛奶的营养成分和品质、影响人体健康。此病不仅给养殖业造成的损失严重，而且给人类的健康也带来不小的危害。乳房炎给奶牛生产所造成的损失相当大，由于奶中含有大量的体细胞和抗生素，使鲜奶受到一定程度的污染，严重影响乳品的质量和风味，降低鲜奶收购价，同时乳房炎还可引起产奶量的降低，影响整个胎次甚至终生产奶量。
对临床乳房炎的检测、预防和治疗各种文献中报道很多，取得了一定的成效，但对隐性乳房炎除检测方法外，相关的预防和治疗报道较少。奶牛饲料添加剂目前国内外研究和生产的种类较多，但多数饲 料添加剂的动物饲喂效果不理想，且大多添加有抗生素，其弊端日益显著，也不符合人类绿色、安全的需要。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供一种含富硒酵母、富铁酵母、富锌酵母的奶牛饲料添加剂。
本发明所述的奶牛饲料添加剂的主要成分为下述重量配比的原料，每千克添加剂中有：富硒酵母菌粉20～60g、富铁酵母菌粉20～60g、富锌酵母菌粉20～60g、霉菌毒素吸附剂80～120g、维生素A5～8g、维生素D30.7～1.2g、维生素E20～30g、维生素K38～12g、维生素B10.3～0.6g、维生素B22～3g、维生素B61.0～1.5g、维生素B120.4～0.7g、复合微生态制剂100～200g、生物抗氧化剂60g、余量为载体；所述的复合微生态制剂主要由嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC NO.5093菌粉、酿酒酵母（Saccharomycecerevisine）CGMCC NO.2388菌粉、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CGMCC NO.4628菌粉及玉米芯粉组成。
在本发明一个实施方案中，所述的奶牛饲料添加剂的主要成分为下述重量配比的原料，每千克添加剂中有：富硒酵母菌粉40g、富铁酵母菌粉40g、富锌酵母菌粉40g、霉菌毒素吸附剂100g、维生素A6.7g、维生素D30.98g、维生素E26.8g、维生素K310g、维生素B10.49g、维生素B22.5g、维生素B61.3g、维生素B120.56g、复合微生态制剂150g、生物抗氧化剂60g、余量为载体；所述的复合微生态制剂主要由嗜酸乳杆菌CGMCC NO.5093菌粉、酿酒酵母CGMCCNO.2388菌粉、枯草芽孢杆菌CGMCC NO.4628菌粉及玉米芯粉组成。
在本发明一个实施方案中，每克所述富硒酵母菌粉含有机硒1.8~2.4mg；每克所述富铁酵母菌粉含有机铁23~28mg；每克所述富锌酵母菌粉含有机锌18~25mg。
进一步的，所述富硒酵母为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CGMCCNo.0539；所述富铁酵母为酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae）CGMCC No.0895；所述富锌酵母为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CGMCC No.0896。
在本发明另一个实施方案中，所述的复合微生态制剂中嗜酸乳杆菌CGMCCNO.5093菌粉、酿酒酵母CGMCC NO.2388菌粉、枯草芽孢杆菌CGMCC NO.4628菌粉及玉米芯粉的重量配比为1:2:1:20。
本发明中的嗜酸乳杆菌CGMCC NO.5093已在CN201110396544.0中公布；酿酒酵母CGMCC NO.2388已于CN200810106520.5中公布；枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628已于CN200810106520.5中公布。
在本发明另一个实施方案中，所述的霉菌毒素吸附剂优选为酿酒酵母CGMCCNo.2388细胞壁多糖。
本发明预混料添加了富硒酵母菌粉、富铁酵母菌粉和富锌酵母菌粉，在制备时采用高密度发酵技术，风干和粉碎机粉碎酵母一系列的后处理加工工艺技术制备菌粉，制剂中含有丰富的蛋白质、核酸、维生素及机体必需的十几种微量元素，是一种高营养价值的饲料添加剂。本发明的预混料添加了富硒酵母菌粉、富铁酵母菌粉和富锌酵母菌粉，它们能清除机体内重金属的积累，具有解除重金属中毒的能力，是部分重金属元素天然的解毒剂；能预防和治疗动物缺铁性贫血及其它一些缺铁性疾病；可以避免金属元素之间在吸收过程中的互相抵抗，从而提高生物学利用率。
本发明饲料添加剂的复合微生态制剂菌种多样，嗜酸乳杆菌CGMCC NO.5093、酿酒酵母CGMCC NO.2388、枯草芽孢杆菌CGMCC NO.4628在制备中采用液体深层高密度发酵技术和喷干或者冻干一系列的后处理加工工艺技术制成菌粉，制剂中的活菌含量高、水分含量低，具有耐胃酸、耐胆盐、耐高温、耐受常用抗生素 等抗逆性能和产酸、产酶及抑制病原菌等益生功能，可以替代抗生素，可以耐抗生素，可以提高奶牛机体免疫力、提高饲料转化率、稳定性好，从而保证了动物的肠道健康，降低动物肠道的发病率，又能促进动物生长。
本发明中的霉菌毒素吸附剂是一种酵母细胞壁多糖，它由酿酒酵母菌粉CGMCCNo.2388经碱制备法制备而成，此产品富含β-葡聚糖和功能性的寡糖等生物免疫因子，可显著增强吞噬细胞的活性及吞噬能力，强化动物免疫系统的功能，改善动物体内微生物环境，识别粘附和消除饲料中霉菌毒素，提高饲料转化率。它通过对霉菌毒素的有效吸收，能有效降低霉菌毒素对动物体的损害，增强动物免疫机能，有效降低奶牛流产、死胎的发生率，提高产奶量和乳品质，并且在酸性和中性pH条件下都能有效地吸附霉菌毒素。
本发明的功能性奶牛饲料添加剂以其独特的配比组合，更加强化了各种物质的营养作用和功效。本发明为了解决目前奶牛存在的多发性隐性乳房炎问题从而提供一种奶牛的功能性饲料添加剂的配方组成，其优点是：
1.添加了富硒酵母、富铁酵母、富锌酵母，这种有机微量元素解决了无机微量元素吸收利用率低的问题，由于微量元素提高了吸收利用率，增强了乳头管角质蛋白的功能，促进了乳头管的封闭，减少了乳房致病菌的侵入，降低了隐性乳房炎的发生率和牛奶中体细胞数。
2.维生素和硒的添加有效促进乳腺的发育和乳腺组织的恢复，有利于乳腺机能的增强，提高乳腺组织抗感染的能力。
3.能有效降低霉菌毒素对动物体的损害，增强动物免疫机能，提高产奶量，并且在酸性和中性pH条件下都能有效地吸附霉菌毒素。
4.提高奶牛的产奶量，降低奶牛隐性乳房炎的发病率，对于临床型乳房炎具有较好的治疗效果，无药残，对牛体无应激，安全可靠。
综上所述，本发明提供了一种预防奶牛隐性乳房炎、降低体细胞数的功能性奶牛饲料添加剂，其配比合理，营养均衡，可有效的降低牛奶中体细胞数，降低奶牛隐性乳房炎的发生率，维护乳腺系统的良好发育机制，提高奶牛产奶量和乳品质。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1富硒酵母菌粉制备
（1）斜面菌种：将富硒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CGMCCNo.0539（购自中国科学院微生物所）菌种接种于含有糖含量为15%、亚硒酸钠浓度500微克/毫升的麦芽汁固体斜面上，在28℃的条件下，培养36小时后，放入4℃冰箱保存。
（2）一级液体菌种培养：将保存的富硒酵母菌种活化后，接一环细胞于装有150毫升总糖含量为15%、亚硒酸盐浓度500微克/毫升的麦芽汁培养基的三角瓶中，于28℃的条件下，摇床的转速为180rpm，培养20小时，即为一级液体种子培养物。
（3）二级液体菌种培养：将一级种子培养液按10%的接种量接入3000ml总糖含量为15%、亚硒酸盐浓度500微克/毫升的麦芽汁培养基的三角瓶中，于28℃的条件下，摇床的转速为180rpm，培养20小时，即为二级液体种子培养物。
（4）发酵罐发酵培养：将二级种子培养液按30%的接种量接入装有15升总糖含量为15%的淀粉水解糖和甜菜糖蜜，其重量份数比为1:3，1.0%的玉米水解液，0.8%硫酸铵，0.1%磷酸，亚硒酸钠浓度为500微克/毫升的发酵罐中，培养基的pH为6.0，在28℃的条件下，搅拌培养28小时。
（5）收集酵母细胞及干燥：采用板框压榨或离心收集富硒酵母 细胞，在60℃条件下风干，水分小于5%。
（6）粉碎：用粉碎机将风干的富硒酵母细胞粉碎。
（7）包装：用不透气的包装袋包装，即为高生物量的高富硒含量的富硒酵母，每克干富硒酵母细胞含有机硒达2毫克。
实施例2富铁酵母菌粉制备
（1）斜面菌种：将富铁酵母（Saccharomyces cerevisiae）CGMCCNo.0895（购自中国科学院微生物所）菌种接种于含有糖含量为8%、硫酸亚铁浓度400微克/毫升的麦芽汁固体斜面上，在28℃的条件下，培养48小时后，放入4℃冰箱保存。
（2）一级液体菌种培养：将保存的富铁酵母菌种活化后，接一环细胞于装有150毫升总糖含量为10%、硫酸亚铁浓度400微克/毫升的麦芽汁培养基的三角瓶中，于28℃的条件下，摇床的转速为180rpm，培养18小时，即为一级液体种子培养物。
（3）二级液体菌种培养：将一级种子培养液按15%的接种量接入3000ml总糖含量为20%、硫酸亚铁浓度600微克/毫升的麦芽汁培养基的三角瓶中，于28℃的条件下，摇床的转速为180rpm，培养16小时，即为二级液体种子培养物。
（4）发酵罐发酵培养：将二级种子培养液按40%的接种量接入装有15升总糖含量为15%的淀粉水解糖和甜菜糖蜜，其重量份数比为1:3，1.0%的玉米水解液，0.8%硫酸铵，0.1%磷酸，硫酸亚铁浓度为600微克/毫升的麦芽汁培养基的发酵罐中，培养基的pH为6.0，在26℃～28℃的条件下，搅拌培养28小时。
（5）收集酵母细胞及干燥：采用板框压榨或离心收集富铁酵母细胞，在60℃条件下风干，水分小于5%。
（6）粉碎：用粉碎机将风干的富铁酵母细胞粉碎。
（7）包装：用不透气的包装袋包装，即为高生物量的高富铁含量的富铁酵母，每克干富铁酵母细胞含有机铁达25毫克。
实施例3富锌酵母菌粉制备
（1）斜面菌种：将富锌酵母（Saccharomyces cerevisiae）CGMCCNo.0896（购自中国科学院微生物所）菌种接种于含有糖含量为10%、硫酸锌浓度400微克/毫升的麦芽汁固体斜面上，在28℃的条件下，培养48小时后，放入4℃冰箱保存。
（2）一级液体菌种培养：将保存的富锌酵母菌种活化后，接一环细胞于装有150毫升总糖含量为10%、硫酸锌浓度400微克/毫升的麦芽汁培养基的三角瓶中，于28℃的条件下，摇床的转速为180rpm，培养16小时，即为一级液体种子培养物。
（3）二级液体菌种培养：将一级种子培养液按15%的接种量接入3000ml总糖含量为12%、硫酸锌浓度600微克/毫升的麦芽汁培养基的三角瓶中，于28℃的条件下，摇床的转速为180rpm，培养16小时，即为二级液体种子培养物。
（4）发酵罐发酵培养：将二级种子培养液按40%的接种量接入装有15升总糖含量为14%的淀粉水解糖和甜菜糖蜜，其重量份数比为1:3，1.0%的玉米水解液，0.8%硫酸铵，0.1%磷酸，硫酸锌浓度为600微克/毫升的麦芽汁培养基的发酵罐中，培养基的pH为6.0，在26℃～28℃的条件下，搅拌培养28小时。
（5）收集酵母细胞及干燥：采用板框压榨或离心收集富锌酵母细胞，在60℃条件下风干，水分小于5%。
（6）粉碎：用粉碎机将风干的富锌酵母细胞粉碎。
（7）包装：用不透气的包装袋包装，即为高生物量的高富锌含量的富锌酵母，每克干富锌酵母细胞含有机锌达20毫克。
实施例4复合微生态制剂的制备
1.嗜酸乳杆菌CGMCC No.5093菌粉的制备
1）平板培养复壮：将嗜酸乳杆菌菌种用接种环划线于MRS平板培养基上，于37℃培养24h，使嗜酸乳杆菌复壮，并形成单菌落， 挑取单菌落接种于斜面培养基上，于37℃培养24h；
2）一级种子的制备：将步骤1）培养的嗜酸乳杆菌菌种转接到装有300mlMRS培养基的500mL三角瓶中，于37℃培养12h，转速100rpm，使其处于对数中后期，得一级种子；
3）二级种子的制备：将步骤2）培养的嗜酸乳杆菌一级种子转接到装有1.6L MRS培养基的2.0L三角瓶中,于37℃静止培养12h，为二级种子液；
4）嗜酸乳杆菌发酵液的制备：将骤3）制备的二级种子液按照10%的接种量接种到装有16M3发酵培养基的发酵罐中，温度37℃，转速120rpm，罐压0.05Mpa，培养16h，至活菌数为2×109cfu/ml，则终止发酵，得嗜酸乳杆菌发酵液；所述的发酵培养基为：葡萄糖2%，大豆蛋白胨1%，硫酸铵0.5%，氯化钠0.2%，硫酸镁0.05%。
5）嗜酸乳杆菌菌粉的制备：在步骤4）制备的发酵液，5000rpm离心，得到菌泥，加入与菌泥的重量/体积百分比为20%的冻干保护剂，混匀，于－45℃冷冻干燥，得到水分含量＜5%，活菌数≥109cfu/g的嗜酸乳杆菌菌粉；所述的冻干保护剂为：脱脂奶粉、甘油、蔗糖、麦芽糊精和谷氨酸钠的混合物，按照脱脂奶粉：甘油：蔗糖：麦芽糊精：谷氨酸钠=2:1.0:1.0:1.5:1.0的比例混合而成。
2.酿酒酵母CGMCC NO.2388菌粉的制备
1）平板培养复壮：将酿酒酵母菌种用接种环划线于YPD平板培养基上，于29℃培养36h，使酿酒酵母复壮，并形成单菌落，挑取单菌落接种于YPD斜面培养基上，于37℃培养24～36h，放置冰箱备用；
2）一级种子的制备：将步骤1）培养好的酿酒酵母菌种转接到装有250ml的YPD培养基的500ml三角瓶中，于29℃培养24h，转速180rpm，使其处于对数中后期，为一级种子；
3）二级种子的制备：将步骤2）制备的一级种子液转接到装有 1.2L YPD培养基的2.0L三角瓶中，于温度29℃培养16h，转速150rpm，为二级种子液；
4）酿酒酵母发酵液的制备：将骤3）制备的二级种子液按照10%的接种量接种到装有16M3发酵培养基的发酵罐中，温度29℃，转速400rpm，罐压0.05Mpa，通风量14.4～19.2M3/h，培养20h终止发酵，此时活菌数为2×109cfu/ml，得枯草芽孢杆菌发酵液；所述的发酵培养基为：红糖2%，大豆蛋白胨1%，酵母膏0.2%，氯化钠0.8%，硫酸镁0.01%，磷酸氢二钾0.2%。
5）酿酒酵母菌粉的制备：在步骤4）制备的发酵液，3000rpm离心，得到菌泥，加入与菌泥的重量/体积百分比为15%的冻干保护剂，混匀后于－25℃～－45℃冷冻干燥，得到水分含量<5%的酿酒酵母菌粉；所述的冻干保护剂为脱脂奶粉、甘油、麦芽糊精按照：2:1:1比例混合而成。
3.枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628菌粉的制备
1）平板培养复壮：将枯草芽孢杆菌菌种用接种环划线于含有5～200微克/毫升溶菌酶的BPY平板培养基上，于37℃培养12～24h，使枯草芽孢杆菌复壮，并形成单菌落，挑取单菌落接种于斜面培养基上，于37℃培养24～36h；
2）一级种子的制备：将步骤1）培养的枯草芽孢杆菌菌种转接茄子瓶斜面培养基上，于37℃培养12～16h，使其处于对数中后期，得一级种子；所述的斜面培养基为BPY固体培养基；
3）二级种子的制备：将步骤2）制备的一级种子用无菌水制成菌悬液，接种到装有1.6M3BPY种子培养基的2M3种子罐中，温度37℃，转速200rpm，罐压0.05Mpa，通风量14.4～19.2M3/h，培养10～14h，为二级种子液；
4）枯草芽孢杆菌发酵液的制备：将骤3）制备的二级种子液按照10%的接种量接种到装有16M3发酵培养基的发酵罐中，温度37 ℃，转速220rpm，罐压0.05Mpa，通风量14.4～19.2M3/h，培养20h，至芽孢形成率90%以上，活菌数为2×1010cfu/ml，则终止发酵，得枯草芽孢杆菌发酵液；所述的发酵培养基为：麸皮2%，豆粕1%，氯化钠0.8%，硫酸镁0.01%。
5）枯草芽孢杆菌菌粉的制备：在步骤4）制备的发酵液中加入25%的填充物米糠，混匀，进行喷雾干燥，进风温度120～130℃，排风温度40～50℃，雾化器转速15000～18000rpm，得到水分含量<5%的枯草芽孢杆菌菌粉，活菌数≥109cfu/g的枯草芽孢杆菌菌粉。
4.复合微生态制剂制备
将制备的嗜酸乳杆菌CGMCC NO.5093菌粉、酿酒酵母CGMCCNO.2388菌粉、枯草芽孢杆菌CGMCC NO.4628菌粉及玉米芯粉按重量配比1:2:1:20进行混合，即得本发明的复合微生态制剂。
实施例5霉菌毒素吸附剂的制备
制备方法参照申请号为：201110324123.7的中国发明专利：
1）取酿酒酵母菌粉1000g，加入5L氢氧化钠溶液（1mol/L），在100℃下加热水解4h，等冷却至室温后，离心（1000g，10min），进行固液分离；
2)弃去上清液后，加1L水于剩余不溶物中，搅拌均匀，再离心（1000g，10min），如此重复两次；
3）向不溶物中加入1.5L醋酸溶液（10%，V/V）搅拌均匀，然后在85℃水浴中保温2h；
4）如方法1）所述方法进行固液分离，并洗涤两次；
5）剩余不溶物用丙酮洗涤三次后，干燥，得到酵母细胞壁多糖产品：粗蛋白质含量为35%，β-葡聚糖含量为30%，甘露寡糖含量为20%的酿酒酵母细胞壁多糖。
实施例6奶牛饲料添加剂的制备
每千克奶牛饲料添加剂中含有富硒酵母菌粉30g、富铁酵母菌粉 30g、富锌酵母菌粉30g、实施例5制备的霉菌毒素吸附剂80g、维生素A5g、维生素D30.7g、维生素E20g、维生素K38g、维生素B10.3g、维生素B22g、维生素B61.0g、维生素B120.4g、实施例4制备的复合微生态制剂100g、生物抗氧化剂60g、余量为沸石粉。
实施例7奶牛饲料添加剂的制备
每千克奶牛饲料添加剂中含有富硒酵母菌粉40g富铁酵母菌粉40g、富锌酵母菌粉40g、实施例5制备的霉菌毒素吸附剂100g、维生素A6.7g、维生素D30.98g、维生素E26.8g、维生素K310g、维生素B10.49g、维生素B22.5g、维生素B61.3g、维生素B120.56g、实施例4制备的复合微生态制剂150g、生物抗氧化剂60g、余量为沸石粉。
实施例8奶牛饲料添加剂的制备
每千克奶牛饲料添加剂中含有富硒酵母菌粉50g富铁酵母菌粉50g、富锌酵母菌粉50g、实施例5制备的霉菌毒素吸附剂120g、维生素A8g、维生素D31.2g、维生素E30g、维生素K312g、维生素B10.6g、维生素B23g、维生素B61.5g、维生素B120.7g、实施例4制备的复合微生态制剂200g、生物抗氧化剂60g、余量为沸石粉。
对比例1
每千克奶牛饲料添加剂中含有霉菌毒素吸附剂100g、维生素A6.7g、维生素D30.98g、维生素E26.8g、维生素K310g、维生素B10.49g、维生素B22.5g、维生素B61.3g、维生素B12 0.56g、复合微生态制剂150g、生物抗氧化剂60g、余量为沸石粉。
试验例1奶牛饲料添加剂的饲喂效果试验
1.试验目的
本试验旨在探讨本发明的奶牛饲料添加剂对预防隐性乳房炎的降低体细胞的作用。
2.材料和方法
2.1试验动物与分组
试验选择优良中国荷斯坦奶牛100头，按照体细胞数、胎次、产奶日龄、泌乳量、体重等相似的原则，随机分组5组，一个对照组，四个实验组，每组20头产奶牛。
2.2试验产品
试验日粮分组：A：普通奶牛饲用日粮；B：对比例1奶牛饲料添加剂(30 g/d·头)+普通奶牛饲用日粮；C：实施例6奶牛饲料添加剂(30 g/d·头)+普通奶牛饲用日粮；D：实施例7奶牛饲料添加剂(30 g/d·头)+普通奶牛饲用日粮；E：实施例8奶牛饲料添加剂(30g/d·头)+普通奶牛饲用日粮。
2.3试验处理
各组基础日粮维持原有日粮水平不变，管理水平一致，B、C、D、E组的日粮中分别添加四种功能性添加剂，对照组A不添加。试验期60天。
2.4 测定指标及检测方法
2.4.1产奶量测定
采用奶厅式集中挤奶，计量杯计数；一天三次挤奶，累计早、中、晚之和为一天产奶量。连续测定两天个体产奶量取平均值即为一次个体奶牛产奶量。
2.4.2乳常规成分分析
每隔10天采奶样一次，按4:3:3比例取早、中、晚三次挤奶混合样。现场加防腐剂1～2滴，4℃保存。采用乳成分自动分析仪测定乳脂率（Fat）、乳蛋白（Pro）、乳糖（Lac）、乳干物质（DM）等乳常规成分。
2.4.3体细胞检测
采用体细胞记数仪（Somacout 150），在测乳常规同时对上述乳样进行体细胞记数。
2.5 统计分析
应用SPSS 10软件对获得的数据进行处理，oneway-ANOVA方差分析，差异显著则用LSD进行多重比较。
3.实验结果与分析
3.1试验前牛群的基础数据
在实验开始前，首先对实验牛群的基础数据进行了调查，记
录了每头牛的产奶日龄、胎次、每日产奶量及其乳品质如乳脂率、乳蛋白、乳糖、乳干物质等指标，特别是测定了牛奶中体细胞数量，结果显示在对照组和试验各组之间，上述指标无显著性差异。
表1 试验前牛群基础数据统计表
3.2本发明的奶牛饲料添加剂对奶牛产奶量的影响
试验期间，各组试验奶牛饲喂各种功能性添加剂后，结果显示各试验组日产奶量与对照组相比都有提高；试验组D与对照组A相比试验期间平均提高2.22kg/d·头；试验组B与对照组A相比试验期间平均提高0.47 kg/d·头；试验组C与对照组A相比试验期间平均提高1.19kg/d·头；试验组E与对照组A相比试验期间平均提高1.60kg/d·头；试验组D提高最为显著。详见表2。
试验组D产品从试验开始到第30d间，奶牛平均日产奶量呈明显的上升趋势，平均日增奶1.67kg；后期随产奶日龄的增加各实验组牛群均呈现自然下降趋势，但试验组D同对照组A相比，下降速度缓慢，整个试验周期日平均产奶量呈显著增加趋势。
（2）试验组C和试验组E在试验前期基本保持缓慢上升趋势，试验后期开始下降，但总体平均高于对照组，日平均产奶量都有增加。不同试验组整个试验期日平均产奶量上升趋势详见表2。
（3）试验组B从试验开始到第20d间，奶牛日平均产奶量前后保持平稳，第30d后产奶量随产奶日龄也呈现正常的下降趋势。
表2 不同试验日期各组产奶量统计表（kg/d·头）
| 组别 | A组 | B组 | C组 | D组 | E组 |
| 0d | 15.8±4.2 | 15.7±3.8 | 15.4±3.6 | 15.5*±3.4* | 15.6±3.2 |
| 10d | 14.8±3.6 | 15.2±3.7 | 15.7±3.5 | 17.1*±4.2* | 16.5±4.0 |
| 20d | 14.6±3.5 | 15.4±4.2 | 16.1±3.7 | 17.3*±4.6* | 16.8±4.5 |
| 30d | 13.5±4.0 | 14.5±4.1 | 15.9±4.3 | 17.1*±3.7* | 16.1±4.3 |
| 40d | 12.8±3.4 | 13.2±3.6 | 14.2±3.8 | 15.8±3.5 | 14.4±4.1 |
| 50d | 12.2±3.1 | 12.8±3.5 | 13.8±3.6 | 14.5±3.6 | 14.0±3.4 |
| 60d | 12.3±3.2 | 12.5±3.5 | 13.2±3.4 | 14.2±3.2 | 13.8±3.1 |
注：上标有*号表示差异显著
3.3本发明的奶牛饲料添加剂对牛奶中体细胞数的影响
奶牛日粮中添加预防隐性乳房炎的功能性添加剂后，均有不同效果。其中试验组D牛奶中体细胞平均数比试验前下降了19.03万个/mL；试验组E牛奶中体细胞平均数比试验前下降了9.92万个/mL；试验组C牛奶中体细胞平均数比试验前下降了13.11万个/mL；试验组B牛奶中体细胞平均数比试验前下降了3.48万个/mL。从整个试验期变化趋势来看，试验组D牛奶中体细胞下降趋势与其他试验组相比差异显著，按照牛奶中体细胞数量与隐性乳房炎发生的间接对应关系，体细胞数降低就相应说明奶牛隐性乳房炎患病率降低。各试验组牛奶中体细胞数量统计分析见表3。
表3 不同试验日期各组牛奶中体细胞数统计表（104个/mL）
| 组别 | A组 | B组 | C组 | D组 | E组 |
| 0d | 66.5±25 | 74.5a±26 | 80.1a±27 | 75.5a±28 | 75.2a±30 |
| 10d | 65.1±21 | 73.5a±30 | 67.6a±35 | 69.2a±26 | 68.1a±36 |
| 20d | 80.2±31 | 70.4b±24 | 57.0b±28 | 55.1b±23 | 54.5b±30 |
| 30d | 98.4±21 | 67.8b±30 | 66.5b±33 | 54.6b±25 | 65.4b±29 |
| 40d | 101.3±25 | 73.4b±27 | 72.1b±38 | 54.2b±24 | 69.1b±23 |
| 50d | 106.5±24 | 71.2b±25 | 70.2b±36 | 53.1b±27 | 68.5b±26 |
| 60d | 105.3±27 | 69.8b±35 | 68.5b±34 | 52.6b±22 | 66.1b±31 |
注：上表标有不同之母的表示差异显著
3.4本发明的奶牛饲料添加剂对乳脂、乳蛋白和乳中干物质的影响
表4 试验前后各组牛奶常规指标统计表（%）
从表4中可以看出，奶牛日粮中添加了预防隐性乳房炎的功能性添加剂，在降低牛奶中体细胞数量和增加产奶量的同时，没有降低牛奶中乳脂率、乳蛋白、乳糖和干物质的含量，而且实验组D的各项指标均有不同程度的提高。
3.5本发明的奶牛饲料添加剂对奶牛适口性的影响
试验设计中本发明的饲料添加剂的饲喂是在原有日粮的基础上另外添加，因本发明的饲料添加剂产品有其特有气味，试验组奶牛初期出现适口性不好，奶牛干物质采食量下降情况，但试验中没有对采食量做统计，3～5天奶牛逐渐适应后，采食恢复正常，统计显示有90%的牛不再有拒食现象，因此，将本发明的饲料添加剂搅拌混匀在精料中，不会影响奶牛的适口性。
乳房炎给奶牛生产所造成的损失相当大，由于奶中含有大量的体细胞和细菌，使鲜奶受到一定程度的污染，严重影响乳品的质量和风味，降低鲜奶收购价，同时乳房炎还可导致产奶量的降低，影响整个胎次甚至终生产奶量，因此，在生产实践中采用积极的预防手段降低隐性乳房炎的发生显得尤为重要。本发明探索在奶牛日粮中添加富硒酵母、富铁酵母、富锌酵母等预防隐性乳房炎，取得了较好的试验效果。
上述试验证明，奶牛日粮中添加本发明的饲料添加剂产品，可以不同程度的降低奶牛隐性乳房炎的发生率，间接的提高了奶牛产奶量。其中，饲喂本发明的饲料添加剂组D与对照组A相比，试验期间产奶量平均提高2.22 kg/d·头，牛奶中体细胞平均数比试验前下降了19.03万个/mL，效果显著优于其他试验产品，因此，本发明的饲料添加剂预防隐性乳房炎、降低体细胞数的效果显著，值得在实践中推广。本发明的饲料添加剂是一种绿色饲料添加剂，能够有效预防细菌性乳房炎，增强奶牛机体免疫能力，显著降低体细胞和提高产奶量。
Claims (6)
1.一种预防奶牛隐性乳房炎、降低体细胞数的功能性奶牛饲料添加剂，其特征在于，其由下述重量配比的原料制成，每千克添加剂中有：富硒酵母菌粉20～60g、富铁酵母菌粉20～60g、富锌酵母菌粉20～60g、霉菌毒素吸附剂80～120g、维生素A 5～8g、维生素D3 0.7～1.2g、维生素E 20～30g、维生素K3 8～12g、维生素B1 0.3～0.6g、维生素B2 2～3g、维生素B6 1.0～1.5g、维生素B12 0.4～0.7g、复合微生态制剂100～200g、生物抗氧化剂60g、余量为载体；所述的复合微生态制剂由嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCCNO.5093菌粉、酿酒酵母（Saccharomyce cerevisine）CGMCC NO.2388菌粉、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CGMCC NO.4628菌粉及玉米芯粉组成，所述的霉菌毒素吸附剂为酿酒酵母CGMCC No.2388细胞壁多糖。
2.如权利要求1所述的奶牛饲料添加剂，其特征在于，其由下述重量配比的原料制成，每千克添加剂中有：富硒酵母菌粉40g、富铁酵母菌粉40g、富锌酵母菌粉40g、霉菌毒素吸附剂100g、维生素A 6.7g、维生素D3 0.98g、维生素E 26.8g、维生素K3 10g、维生素B1 0.49g、维生素B2 2.5g、维生素B6 1.3g、维生素B12 0.56g、复合微生态制剂150g、生物抗氧化剂60g、余量为载体；所述的复合微生态制剂由嗜酸乳杆菌CGMCC NO.5093菌粉、酿酒酵母CGMCC NO.2388菌粉、枯草芽孢杆菌CGMCC NO.4628菌粉及玉米芯粉组成。
3.如权利要求1或2所述的奶牛饲料添加剂，其特征在于，每克所述富硒酵母菌粉含有机硒1.8~2.4mg；每克所述富铁酵母菌粉含有机铁23~28mg；每克所述富锌酵母菌粉含有机锌18~25mg。
4.如权利要求1或2所述的奶牛饲料添加剂，其特征在于，所述的复合微生态制剂中嗜酸乳杆菌CGMCC NO.5093菌粉、酿酒酵母CGMCC NO.2388菌粉、枯草芽孢杆菌CGMCC NO.4628菌粉及玉米芯粉的重量配比为1:2:1:20。
5.含有权利要求1~4任一项所述的饲料添加剂的奶牛预混料。
6.含有权利要求5所述的预混料的奶牛配合料。
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