CN102846735A - 一种防治脑血管疾病的有效组分配伍中药制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药研究开发领域，具体涉及一种防治脑血管疾病的有效组分配伍中药制剂。该中药制剂是根据中医药配伍理论结合现代药效学筛选，运用“组效关系、组分配伍、优化设计”和现代制药工艺技术，由赤芍中有效组分赤芍总苷、灯盏细辛中有效组分总黄酮和总咖啡酸酯配伍组方，具有协同增效作用特点与优势。药效学实验结果表明，该中药制剂能改善脑缺血、增加脑血流量、抑制血小板聚集，对脑缺血的保护作用优于市售同类品种。

Description

一种防治脑血管疾病的有效组分配伍中药制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于中药研究开发领域，具体涉及一种防治脑血管疾病的有效组分配伍中药制剂，所述的中药制剂由赤芍中有效组分赤芍总苷、灯盏细辛中有效组分总黄酮和总咖啡酸酯配伍组方，并提供了该中药制剂的制备方法及其在治疗脑血管疾病中的应用。

背景技术

脑血管疾病是严重危害人类健康的常见病和多发病，在全球已成为第一致残和第三致死原因。与中风的高发病率、高致死率及高致残率相比，目前用于预防治疗中风的药物品种较少，不能满足临床需要；西医学对于脑梗塞的临床治疗仍停留于对症处理，主要有溶栓、抗凝、抗血小板聚集、脑保护、血管扩张、钙拮抗治疗。常用的抗血栓治疗有溶栓剂(尿激酶，链激酶等)、抗凝剂(肝素、双香豆素、华法令、新抗凝片等)、钙离子拮抗剂(氟桂嗪、尼莫地平、尼卡地平、脑益嗪、硝苯地平、利多氟嗪等)，大多具有见效快的特点，但易出现出血性疾病、胃肠道反应以及过敏、头痛、头晕、恶心、低血压、皮疹等不良反应，并常常受到并发症的影响而应用受限，故临床应用非常谨慎，急性脑中风的治疗仍然是人类面临的最大挑战之一。

中医中药治疗中风病历史渊远，积累了丰富的临床应用经验，并具有疗效确切、毒副作用低的明显优势，尤其是在改善临床症状、提高生活质量方面均有较好的疗效，可使患者的症状明显好转，减少并发症，已成为临床上普遍采用的常规治疗方法。

当前，中药的多成分、多靶点和整合效应已逐步成为国内外学者的基本共识。因此，在现代中药系统研究中，既不能采用单一成分的西药模式(因其不能反映中药的整体观)，也不能采用不经任何去粗存精且缺乏对药效物质的微观分析和质量控制的粗放式传统模式。以组分配伍的现代组分中药是创新中药研究较理想的模式，以中药组分配伍研究为切入点，阐明中药效应物质基础及作用的本质，进而建立科学的质量控制方法，以体现多成分、多靶点和整合作用的优势，提高制剂质控水平和临床疗效，促进中药走向国内外市场。

现代研究表明，灯盏细辛具有舒张血管、改善微循环、增加脑血流量、抗氧化的功能，对脑缺血所致神经细胞调亡有明显的抑制作用。而赤芍则具有抗动脉粥样硬化、改善血液流变学，抗血栓形成，降低血液黏度及促进纤溶活性等多种药理作用。可以看出这两味药在防治缺血性脑血管疾病方面各有所长，有着广阔的开发应用前景。

尽管目前在临床上以赤芍或灯盏细辛组方的相关制剂已用于心脑血管疾病的治疗。但这些制剂大多存在有效成分不清、制备工艺落后、作用机理不明确、临床疗效不确切、使用安全性不高等问题，现有品种也远未能满足市场需要，特别是未见以赤芍和灯盏细辛两味药组方的上市制剂应用于临床。因此，借鉴现代药学研究方法，以组效关系为基础筛选赤芍和灯盏细辛中的有效组分，研制具有自主知识产权、药效物质和作用机理相对清楚的脑血管疾病创新中药，填补市场空白，具有重大的现实意义和应用价值。

目前未见有关以赤芍和灯盏细辛药材中——赤芍总苷、灯盏细辛总黄酮和总咖啡酸酯配伍组成的复方组分中药用于治疗脑血管疾病的文献报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种防治脑血管疾病的有效组分配伍中药制剂，该中药制剂由赤芍和灯盏细辛药材中有效组分——赤芍总苷、灯盏细辛总黄酮和总咖啡酸酯配伍组成，具有协同增效作用，既保留中药多层次、多靶点的协同作用特点，又克服中药作用物质基础不明确、质量标准不易控制的缺点，能够更好地发挥中医药的特点与优势，提高了中药的科技含量。

为解决上述技术问题，本发明研究制定了以下技术方案：

本发明所述的一种防治脑血管疾病的有效组分配伍中药制剂，是由下述重量配比的中药有效组分制成：赤芍总苷1～20份；灯盏细辛总黄酮1～20份；灯盏细辛总咖啡酸酯1～20份。

根据药效学试验结果，确定较好的配比为：赤芍总苷1～5份；灯盏细辛总黄酮1～5份；灯盏细辛总咖啡酸酯1～5份。

进一步确定最优的配比为：赤芍总苷2份；灯盏细辛总黄酮1份；灯盏细辛总咖啡酸酯2份。

所述的赤芍中有效组分赤芍总苷的制备方法：赤芍加5～12倍量水煎煮1～5次，每次0.5～2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达40～80％，搅拌均匀，静置6～24小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩，加适量水稀释，上大孔吸附树脂柱或聚酰胺柱，用水洗，弃去水洗液，继用10～90％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，干燥，得赤芍总苷。

所述的灯盏细辛中有效组分总黄酮和总咖啡酸酯的制备方法：灯盏细辛加5～12倍量水煎煮1～5次，每次0.5～2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达30～80％，不断搅拌，静置6～24小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩，用盐酸调节pH值至1～4，保温，过滤，沉淀用水洗，收集沉淀物，干燥，得灯盏细辛总黄酮。滤液上大孔吸附树脂柱，用水洗脱，弃去水洗液，继用10～90％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，干燥，得灯盏细辛总咖啡酸酯。

所述的赤芍中有效组分赤芍总苷的制备方法优选为：赤芍加8倍量水煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.06～1.08(50℃)，加乙醇使含醇量达60％，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇至无醇味。加适量水稀释。上D₁₀₁大孔吸附树脂柱，用2BV水洗，弃去水洗液，继用3BV的20％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，50℃微波真空干燥，得赤芍总苷。

所述的灯盏细辛中有效组分总黄酮和总咖啡酸酯制备方法优选为：灯盏细辛加10倍量水煎煮3次，每次0.5小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度1.09～1.11(50℃)，加乙醇使含醇量达55％，不断搅拌，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.10～1.12(50℃)，用盐酸调节pH值至2，55℃保温6小时，过滤，沉淀用水洗至pH值3～4，收集沉淀物，50℃微波真空干燥，得灯盏细辛总黄酮；滤液上D₁₀₁大孔吸附树脂柱，用1BV水洗脱，弃去水洗液，继用3BV70％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，50℃微波真空干燥，得灯盏细辛总咖啡酸酯。

所述的赤芍有效组分中赤芍总苷含量达80％以上；所述的灯盏细辛有效组分中灯盏细辛总黄酮含量达50％以上，灯盏细辛总咖啡酸酯含量达30％以上。

所述的赤芍有效组分中赤芍总苷主要含有没食子酸、芍药苷、苯甲酸、没食子酰芍药苷、没食子酸乙酯、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷等成分；灯盏细辛有效组分中灯盏细辛总黄酮主要含有野黄芩苷、灯盏甲素等成分；灯盏细辛总咖啡酸酯主要含有原儿茶酸、咖啡酸、绿原酸、飞蓬苷、丁香酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯、3，5-二咖啡酰基奎宁酸、1，5-二咖啡酰基奎宁酸、3，4-二咖啡酰基奎宁酸、4，5-二咖啡酰基奎宁酸等成分。

所述的赤芍有效组分中赤芍总苷含芍药内酯苷(C₂₃H₂₈O₁₁)和芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)分别不得少于3.0％和58.0％；灯盏细辛有效组分中灯盏细辛总黄酮含野黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₂)不得少于40.0％；灯盏细辛总咖啡酸酯含3，5-二咖啡酰基奎宁酸(C₂₅H₂₄O₁₂)和4，5-二咖啡酰基奎宁酸(C₂₅H₂₄O₁₂)分别不得少于7.5％和3.5％。

所述的防治脑血管疾病的有效组分配伍中药制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、糖浆、滴丸剂、注射液、冻干粉针、缓释片剂或微丸。

所述的防治脑血管疾病的有效组分配伍中药制剂主要用于脑卒中、脑梗塞、脑缺血、脑血栓形成及其由脑缺血引起的其他各种疾病的预防与治疗。

本申请人在研制过程中，根据中医药配伍理论结合现代药效学筛选，运用“组效关系、组分配伍、优化设计”和现代制剂工艺技术，对每个环节都进行了详细研究，与现有技术相比，具有基础研究工作扎实，有效组分药效物质基础清楚、提取分离技术成熟、质量控制技术先进，新技术和新工艺应用程度高等特点。

提取纯化工艺研究：采用现代制剂提取分离技术，以药效学试验和化学成分的动态变化为评价指标，在保证药用活性成分充分提取的前提下，建立了适宜于大生产的高效提取、精制方法，灯盏细辛采用水煮醇沉、酸化沉淀的方法精制总黄酮，分离总黄酮后的酸沉液上大孔吸附树脂纯化精制总咖啡酸酯，赤芍采用水煮醇沉、大孔树脂纯化精制赤芍总苷，并将本品制成起效迅速的滴丸剂或注射剂，改变了传统中药的“粗大黑”形象，提高了中药的科技含量(见图1)。

有效组分配伍研究：采用多种药理学模型(“小鼠急性脑缺血的保护作用”、“抗血小板聚集作用”、“大鼠中动脉缺血再灌注损伤模型”、“大鼠动静脉旁路血栓形成”)和多种评价分析方法(组分剔除法、正交设计及方差分析方法)，确定了组方中的赤芍总苷和灯盏细辛总黄酮、总咖啡酸酯为本品抗脑缺血的有效组分最佳配伍，具有协同增效作用且药效优于上市同类品种。

质量控制研究：结合产品的安全性、有效性及均一性，进行相关质量控制方法的研究。建立了以指纹图谱为特征的多指标质量控制方法，实现对物质群整体的控制，并着重对其中多个活性成分(野黄芩苷、灯盏甲素、绿原酸、3，5-二咖啡酰氧基奎宁酸、4，5-二咖啡酰氧基奎宁酸等、芍药苷、苯甲酰芍药苷、芍药苷内酯等)进行含量测定(见图2)，尽量做到本品所含成份基本清楚。

附图说明

图1：赤芍和灯盏细辛有效组分配伍中药剂制备工艺流程图。

图2：赤芍和灯盏细辛有效组分配伍中药剂制HPLC特征图谱(250nm检测)。色谱峰分别对应：1.没食子酸；2.原儿茶酸；3.飞蓬苷；4.咖啡酸、5.绿原酸；6.芍药内酯苷；7.芍药苷；8.苯甲酸；9.没食子酰芍药苷；10.丁香酸；11.野黄芩苷；12.苯甲酰芍药苷；13.灯盏甲素；14.3，5-二咖啡酰基奎宁酸；15.3，4-二咖啡酰基奎宁酸；16.1，5-二咖啡酰基奎宁酸；17.4，5-二咖啡酰基奎宁酸；18.3，5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯。

具体实施方式

申请人进行了一系列实验，可以证明本发明提供的中药制剂对治疗脑血管疾病具有明确的效果。

实验例1：灯盏细辛与赤芍有效组分筛选研究

根据处方药材所含化学成分性质和药理活性，采用现代提取分离技术，从灯盏细辛中分离得到总黄酮和总咖啡酸酯，从赤芍中分离得到赤芍总苷和总酚酸，并以急性脑缺血、抗血小板聚集作用为评价指标，采用组分剔除法实验设计，对上述灯盏细辛及赤芍中的四类组分进行组效及配伍关系研究。

(1)对小鼠急性脑缺血的保护作用：

取昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄兼用，随机分组，每组10只(雌雄各半)。各组按下表给药；模型组给予等容积的生理盐水。各组均灌胃给药，给药容积为20ml/kg。连续给药5d，末次给药1h后，仰卧位固定，用0号手术缝线两端结扎双侧颈总动脉(合并迷走神经)后中间剪断。记录小鼠的呼吸维持时间。结果见表1。

(2)抗血小板聚集作用

SD雄性大鼠，体重250～350g，随机分组。各组均灌胃给药，给药容积为10ml/kg。连续给药5d，末次给药1h后，以10％水合氯醛麻醉(300mg/kg，ip)，仰位固定，腹主动脉取血，3.8％枸橼酸钠与全血按1∶9混合抗凝，1000rpm离心7min制备富血小板血浆，3000rpm离心10min制备贫血小板血浆，应用PPP自动平衡血小板聚集仪，将诱导剂ADP诱导的生理盐水组血小板聚集百分数调至60％左右，ADP终浓度为4umol/L。观察对给药组大鼠血小板聚集作用的影响。结果见表2。

表1 对急性脑缺血小鼠呼吸维持时间的影响(

n＝10)

注：“+”表示各组中含有的组分；与对照组比较¹⁾P＜0.05；与全方配伍组比较²⁾P＜0.05。

表2 对血小板聚集功能的影响(

n＝10)

注：“+”表示各组中含有的组分；与对照组比较¹⁾P＜0.05；与全方配伍组比较²⁾P＜0.05。

结果表明：根据组分剔除法的评判标准，从表1中发现灯盏细辛总黄酮、灯盏细辛总咖啡酸酯为延长小鼠呼吸时间的有效组分，而赤芍总苷对全方的贡献不显著，赤芍总酚酸是无关成分。从表2中发现灯盏细辛总黄酮、灯盏细辛总咖啡酸酯和赤芍总苷为抗血小板聚集的有效组分，而赤芍总酚酸对全方的贡献不显著。

实验例2：灯盏细辛与赤芍有效组分配伍优化

为寻找灯盏细辛与赤芍的有效组分最佳配伍，进一步采用正交t值法实验设计，以急性脑缺血、ADP诱导的血小板聚集作用为评价指标，对上述灯盏细辛及赤芍中的四类组分进行配伍研究。

(1)对小鼠急性脑缺血的保护作用：结果见表3。

表3 L₈(2⁷)正交t值法实验表及结果(n＝10)

注：1、2水平分别代表不用药和用药。M₁、M₂、是该列1、2水平的药效之和，D是极差，Se是实际实验误差，fe实验误差自由度，P表示该药味对药效影响的显著性水平，^**示P＜0.01，^*示P＜0.05。

试验结果表明，各组分对药效影响顺序为灯盏细辛总黄酮＞赤芍总苷＞总咖啡酸酯＞总酚酸，其中总黄酮、赤芍总苷有极显著性影响(P＜0.01)，总咖啡酸酯和赤芍总酚酸影响不显著(P＞0.05)。对药效影响显著的组分为灯盏细辛总黄酮和赤芍总苷，不显著者(可能为辅助组分)为总咖啡酸酯和赤芍总酚酸，但其与主药之间可能存在交互作用，不能随意舍去，尚需进一步作主、辅组分的交互作用分析。根据前述试验，将灯盏细辛总黄酮、赤芍总苷配合使用作为基础组分，加入总咖啡酸酯或芍总酚酸(即咖啡酸酯、总酚酸设置不用药、用药两个水平)，共4个配比组进行试验，结果见表4。

表4 L₄(2³)正交t值法实验表及结果(n＝10)

M₁、M₂、是该列1、2水平的药效之和，D是级差，Se是实际实验误差，fe实验误差自由度，P表示该药味对药效影响的显著性水平，^**表示P＜0.01^*表示0.01＜P＜0.05，下同。

试验结果表明，咖啡酸酯对药效提高作用显著(P＜0.05)，赤芍总酚酸合并使用则药效提高作用不显著(P＞0.05)，说明咖啡酸酯是灯盏细辛总黄酮、赤芍总苷配伍组分发挥作用的重要辅助性成分。

(2)抗血小板聚集作用：结果见表5。

表5 L₈(2⁷)正交t值法实验表及结果(n＝10)

注：1、2水平分别代表不用药和用药。M₁、M₂、是该列1、2水平的药效之和，D是极差，Se是实际实验误差，fe实验误差自由度，P表示该药味对药效影响的显著性水平，^**表示P＜0.01，^*表示P＜0.05。

试验结果表明，各组分对药效影响顺序为总咖啡酸酯＞赤芍总苷＞灯盏细辛总黄酮＞总酚酸，其中赤芍总苷、总咖啡酸酯有极显著性影响(P＜0.01)，总黄酮有显著性影响(P＜0.05)，和赤芍总酚酸影响不显著(P＞0.05)。对药效影响不显著者(可能为辅助组分)为赤芍总酚酸，但其与主药之间可能存在交互作用，不能随意舍去，尚需进一步作主、辅组分的交互作用分析。根据前述试验，将灯盏细辛总黄酮、总咖啡酸酯和赤芍总苷配合使用作为基础组分，加入或不加入芍总酚酸(即基础组分、总酚酸设置不用药、用药两个水平)，共4个配比组进行试验，结果见表6。

表6 L₄(2³)正交t值法实验表及结果(n＝10)

M₁、M₂、是该列1、2水平的药效之和，D是级差，Se是实际实验误差，fe实验误差自由度，P表示该药味对药效影响的显著性水平，^**表示P＜0.01^*表示0.01＜P＜0.05，下同。

试验结果表明，合并使赤芍总酚酸药效提高作用不显著(P＞0.05)，说明赤芍总酚酸为发挥血小板聚集的非必要性组分。

通过上述正交实验的交互作用和方差分析，探讨药味中组分的相互关系。试验结果表明，各组分对药效影响顺序为灯盏细辛总黄酮＞赤芍总苷＞总咖啡酸酯＞总酚酸，其中总黄酮、赤芍总苷有极显著性影响(P＜0.01)；交互作用分析表明，咖啡酸酯对药效提高作用显著(P＜0.05)，赤芍总酚酸合并使用则药效提高作用不显著(P＞0.05)，提示了组方中的赤芍总苷和灯盏细辛总黄酮、总咖啡酸酯为本品抗脑缺血的有效组分最佳配伍。

实验例3：本发明灯盏细辛与赤芍有效组分配伍中药对大鼠中动脉缺血再灌注损伤的影响

在已经证实灯盏细辛中总黄酮与总咖啡酸酯组分同赤芍中赤芍总苷配伍使用具有较好的脑血管及活血化瘀方面药理活性的基础上，将试验筛选出的最佳配伍组分与已上市的同类药物制剂(灯盏花滴丸、华佗再造丸)疗效进行比较。使用SPSS13.0软件进行方差分析(One-way ANOVA)和多重比较(LSD法)比较药物干预下组间的差异，评价灯盏细辛与赤芍有效组分配伍制剂对对大鼠中动脉缺血再灌注损伤的影响。

(1)对神经行为学评分、脑指数、脑含水量和脑梗塞率的影响：结果见表7，试验结果表明，各给药组均能不同程度改善大鼠造模后神经行为学体征、脑水肿以及脑梗塞指标，与模型组比较差异显著(P＜0.05，P＜0.01)。从给各药组的两两比较结果可见，灯盏细辛与赤芍有效组分配伍组对脑含水量、脑梗塞率、神经行为学的改善作用明显优于灯盏花滴丸、华佗再造丸，组间两两比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；对脑指数的改善作用组间比较无显著性差异(P＞0.05)。

表7 对大鼠MCAO再灌注神经行为学脑指数、脑含水量和梗塞率的影响(

n＝8)

注：与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01；与有效组分配伍组比较：△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

(2)对脑匀浆SOD、NOS活性及MDA含量的影响：结果见表8，试验结果表明，各给药组均能不同程度改善大鼠造模以后SOD、NOS和MDA指标，与模型组比较差异显著(P＜0.05，P＜0.01)。从各给药组两两比较结果可见，灯盏细辛与赤芍有效组分配伍组对SOD的改善作用明显优于灯盏花滴丸，对MDA的改善作用明显优于华佗再造丸，其差异具有显著意义(P＜0.05)，对NOS的改善作用组间比较差异不显著(P＞0.05)。

表8 对大鼠MCAO再灌注脑匀浆SOD、NOS及MDA的影响(

n＝8)

实验例4：本发明灯盏细辛与赤芍有效组分配伍中药对大鼠动静脉旁路血栓重量及抑制率的影响

取SD雄性大鼠，体重250～350g，随机分为4组，每组10只；给药容积为10ml/kg。以10％水合氯醛麻醉(300mg/kg，ip)，仰位固定，分离右颈总动脉及左颈外静脉。取3段聚乙烯管，其中两段管内径为1mm，长约6cm，中间段内径为2mm，长约6.5cm。在三段管的中段放入一根长约5cm的4号手术线。用充满肝素(50u/ml)生理盐水的聚乙烯管的一端插入左颈外静脉，再将聚乙烯管的另一端插入右颈总动脉。手术完成立即静脉给药，30min后，打开动脉夹开放血流，持续15min中断，迅速取出丝线，除掉浮血，精密电子天平称重，血栓重为总重量减去丝线重。结果见表9。

表9 对大鼠动静脉血栓干、湿重的影响

注：与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01；与有效组分配伍组比较：△P＜0.05。

实验结果表明：灯盏细辛与赤芍有效组分配伍组对大鼠动静脉旁路血栓形成的抑制作用与模型组比较具有统计学意义，且和已上市的同类品种(灯盏花滴丸、华佗再造丸)比较差异具有统计学意义。

综上所述，本发明的灯盏细辛与赤芍有效组分配伍中药对大鼠中动脉缺血再灌注损伤的神经行为学体征、脑水肿、脑梗塞等关键生物学指标的改善作用；能抑制大鼠动静脉旁路血栓的形成，且经统计学的多重比较分析结果表明，大多数关键模型的生物学治疗指标优于已上市的同类品种(灯盏花滴丸、华佗再造丸)，差异具有统计学意义。

以下通过实施例进一步阐述本发明所述的有效组分配伍中药及其制剂制备方法，但本发明并不限于下列实施例包含的内容。

实施例1：

滴丸的制备

赤芍加8倍量水煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.06～1.08(50℃)，加乙醇使含醇量达60％，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇至无醇味。加适量水稀释。上D₁₀₁大孔吸附树脂柱，用2BV水洗，弃去水洗液，继用3BV的20％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，50℃微波真空干燥，得赤芍总苷。

灯盏细辛加10倍量水煎煮3次，每次0.5小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度1.09～1.11(50℃)，加乙醇使含醇量达55％，不断搅拌，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.10～1.12(50℃)，用盐酸调节pH值至2，55℃保温6小时，过滤，沉淀用水洗至pH值3～4，收集沉淀物，50℃微波真空干燥，得灯盏细辛总黄酮；滤液上D₁₀₁大孔吸附树脂柱，用1BV水洗脱，弃去水洗液，继用3BV70％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，50℃微波真空干燥，得灯盏细辛总咖啡酸酯。

取赤芍总苷200g、灯盏细辛总黄酮100g、灯盏细辛总咖啡酸酯100g、聚乙二醇600g，加热使熔融，充分混匀，移至滴丸机贮液器中，保温90℃，滴入冷却的二甲硅油中，制成1000g滴丸，即得。

实施例2：

注射液的制备

赤芍加8倍量水煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.06～1.08(50℃)，加乙醇使含醇量达60％，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇至无醇味。加适量水稀释。上D₁₀₁大孔吸附树脂柱，用2BV水洗，弃去水洗液，继用3BV的20％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，50℃微波真空干燥，得赤芍总苷。

灯盏细辛加10倍量水煎煮3次，每次0.5小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度1.09～1.11(50℃)，加乙醇使含醇量达55％，不断搅拌，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.10～1.12(50℃)，用盐酸调节pH值至2，55℃保温6小时，过滤，沉淀用水洗至pH值3～4，收集沉淀物，50℃微波真空干燥，得灯盏细辛总黄酮；滤液上D₁₀₁大孔吸附树脂柱，用1BV水洗脱，弃去水洗液，继用3BV70％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，50℃微波真空干燥，得灯盏细辛总咖啡酸酯。

取赤芍总苷200g、灯盏细辛总黄酮100g、灯盏细辛总咖啡酸酯100g，加1800ml注射用水，搅拌使溶解，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至7.0～7.5，加10g针用活性炭，补加注射用水至2000ml，混匀，煮沸30分钟，冷藏，滤过，加注射用水至5000ml，分别用0.45μm和0.22μm微孔滤膜滤过，分装，每支5ml，充氮，封口，流通蒸汽灭菌30分钟，即得1000支注射用浓溶液。

Claims (10)

1.一种防治脑血管疾病的有效组分配伍中药制剂及其制备方法，其特征在于：该中药制剂是由赤芍中有效组分赤芍总苷、灯盏细辛中有效组分总黄酮和总咖啡酸酯配伍组成，且以下述重量配比组方：赤芍总苷1～20份；灯盏细辛总黄酮1～20份；灯盏细辛总咖啡酸酯1～20份。

2.根据权利要求1所述的有效组分配伍中药制剂的制备方法，其特征在于：所述的中药有效组分重量配比为：赤芍总苷1～5份；灯盏细辛总黄酮1～5份；灯盏细辛总咖啡酸酯1～5份。

3.根据权利要求1所述的有效组分配伍中药制剂的制备方法，其特征在于：所述的中药有效组分重量配比为：赤芍总苷2份；灯盏细辛总黄酮1份；灯盏细辛总咖啡酸酯2份。

4.根据权利要求1所述的有效组分配伍中药制剂的制备方法，其特征在于：所述的赤芍中有效组分赤芍总苷经以下方法制备：赤芍加5～12倍量水煎煮1～5次，每次0.5～2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达40～80％，搅拌均匀，静置6～24小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩，加适量水稀释，上大孔吸附树脂柱或聚酰胺柱，用水洗，弃去水洗液，继用10～90％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，干燥，得赤芍总苷。

5.根据权利要求1所述的有效组分配伍中药制剂的制备方法，其特征在于：所述的灯盏细辛中有效组分总黄酮和总咖啡酸酯经以下方法制备：灯盏细辛加5～12倍量水煎煮1～5次，每次0.5～2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达30～80％，不断搅拌，静置6～24小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩，用盐酸调节pH值至1～4，保温，过滤，沉淀用水洗，收集沉淀物，干燥，得灯盏细辛总黄酮。滤液上大孔吸附树脂柱，用水洗脱，弃去水洗液，继用10～90％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，干燥，得灯盏细辛总咖啡酸酯。

6.根据权利要求4所述的赤芍中有效组分赤芍总苷制备方法，其特征在于：赤芍加8倍量水煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.06～1.08(50℃)，加乙醇使含醇量达60％，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇至无醇味。加适量水稀释。上D₁₀₁大孔吸附树脂柱，用2BV水洗，弃去水洗液，继用3BV的20％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，50℃微波真空干燥，得赤芍总苷。

7.根据权利要求5所述的灯盏细辛中有效组分总黄酮和总咖啡酸酯制备方法，其特征在于：灯盏细辛加10倍量水煎煮3次，每次0.5小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度1.09～1.11(50℃)，加乙醇使含醇量达55％，不断搅拌，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.10～1.12(50℃)，用盐酸调节pH值至2，55℃保温6小时，过滤，沉淀用水洗至pH值3～4，收集沉淀物，50℃微波真空干燥，得灯盏细辛总黄酮；滤液上D₁₀₁大孔吸附树脂柱，用1BV水洗脱，弃去水洗液，继用3BV70％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，50℃微波真空干燥，得灯盏细辛总咖啡酸酯。

8.根据权利要求1所述的有效组分配伍中药制剂，其特征在于：所述的赤芍有效组分中赤芍总苷主要含有没食子酸、芍药苷、苯甲酸、没食子酰芍药苷、没食子酸乙酯、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷等成分；灯盏细辛有效组分中灯盏细辛总黄酮主要含有野黄芩苷、灯盏甲素等成分；灯盏细辛总咖啡酸酯主要含有原儿茶酸、咖啡酸、绿原酸、飞蓬苷、丁香酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯、3，5-二咖啡酰基奎宁酸、1，5-二咖啡酰基奎宁酸、3，4-二咖啡酰基奎宁酸、4，5-二咖啡酰基奎宁酸等成分；

9.根据权利要求1所述的有效组分配伍中药制剂，其特征在于：所述的赤芍有效组分中赤芍总苷含量达80％以上，且含芍药内酯苷(C₂₃H₂₈O₁₁)和芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)分别不得少于3.0％和58.0％；所述的灯盏细辛有效组分中灯盏细辛总黄酮含量达50％以上，且含野黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₂)不得少于40.0％，灯盏细辛总咖啡酸酯含量达30％以上，且含3，5-二咖啡酰基奎宁酸(C₂₅H₂₄O₁₂)和4，5-二咖啡酰基奎宁酸(C₂₅H₂₄O₁₂)分别不得少于7.5％和3.5％。

10.根据权利要求1所述的有效组分配伍中药制剂，其特征在于：所述的制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、糖浆、滴丸剂、注射液、冻干粉针、缓释片剂或微丸。

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