CN102836277B - 一种治疗牙周病的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种治疗牙周病的药物组合物，它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：金银花15-45份、野菊花15-45份、玄参15-45份、板蓝根15-45份、骨碎补7.5-22.5份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物组合物用于治疗牙龈炎、牙周炎、口腔溃疡，药效明确。

Description

一种治疗牙周病的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种治疗牙周病的药物组合物，属药物领域。

背景技术

牙周病是口腔的常见病多发病，可导致牙龈出血、牙周溢脓、牙齿松动乃至牙齿脱落,严重影响咀嚼及消化功能。同时它还是心血管疾病、糖尿病、新生儿早产等的高危因素。关于牙周病的病因，现代医学认为菌斑细菌及其产物是其始动因素,因此注重针对细菌性病因进行治疗，但在增强机体全身调控能力方面缺乏有效措施。药物治疗是某些条件下牙周病的辅助预防和治疗方法。目前临床常用的有甲硝唑、替硝唑、螺旋霉素、四环素及氯已定等。这些药物针对的目标是微生物．但要清除牙周所有细菌，尚难以成功，也无必要。牙周病的药物防治可通过减弱细菌的侵袭力，或增强宿主的防御力，重建有利于牙周健康的微生态系。不仅如此，目前临床常用的这些药物均属化学合成药，虽有一定的疗效，但长期应用可破坏口腔的生态平衡，并且易使细菌产生耐药性，如许多患者的口腔菌株对甲硝唑耐药。因此，在中药或天然物质中寻找新的控制牙周病牙菌斑微生物的药物，是近年的研究重点之一。

祖国传统医学注重内因与外因、全身与局部的关系，认为牙周炎属于“牙宣”“齿衄”“齿挺”“齿动摇”“齿豁”范畴，引起牙周炎的病因是胃肠积热、气血虚弱、肾元亏损以及口腔不洁等，并采用辨证施治的方法，可取得良好的疗效。中医认为牙周炎大致分为胃火上蒸型、肾阴亏虚型和气血两虚型，并分别采用不同方式治疗。牙周病是多因素疾病，中医注重对全身因素的调节，弥补了西医主要针对细菌因素治疗的局限性,许多研究也表明中医辨证施治牙周炎的确有着良好的疗效（刘媛，等，中医药治疗牙周炎的进展，现代临床医学，2007年6月第33卷第3期）。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种治疗牙周病的药物组合物。本发明的另一技术方案是提供了该药物组合物的制备方法和用途。

本发明提供了一种治疗牙周病的药物组合物，它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

金银花15-45份、野菊花15-45份、玄参15-45份、板蓝根15-45份、骨碎补7.5-22.5份。

进一步优选地，它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

金银花30份、野菊花30份、玄参30份、板蓝根30份、骨碎补15份。

所述的药物是由金银花、野菊花、玄参、板蓝根、骨碎补的水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

其中，所述的制剂是口服制剂、口含制剂。

其中，所述的口含制剂是口含片、口腔贴片、含漱剂、口腔凝胶剂、膜剂。

本发明提供了一种制备所述的治疗牙周病的药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、称取原料药；

b、加水或有机溶剂提取，过滤，浓缩，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的制剂。

本发明还提供了所述的药物组合物在制备治疗牙周炎的药物中的用途。进一步优选地，所述的药物是治疗慢性牙周炎的药物。

本发明还提供了所述的药物组合物在制备治疗急、慢性牙龈炎的药物中的用途。

本发明还提供了所述的药物组合物在制备治疗口腔溃疡的药物中的用途。

本发明原料组方中以金银花宣散上焦风热，清热解毒，为君药；野菊花与板蓝根共用，加强清热解毒作用，玄参养阴清热，骨碎补引药性入肾经，补肾固齿。诸药合用，共奏滋阴泄火，消肿止痛之效。本发明药物组合物用于治疗牙龈炎、牙周炎、口腔溃疡，药效明确。

附图说明

图1本发明药物含漱剂对人牙龈成纤维细胞增殖的作用（MTT法）

图2本发明药物含漱剂多次刺激性试验

具体实施方式

实施例1本发明药物的制备

原料组方：金银花30g，野菊花30g，玄参30g，板蓝根30g，骨碎补15g，制成1000ml液体制剂。

具体制备工艺：称取原料，用药材20、16、12倍水提取3次，每次45分钟，收集滤液，在70℃，120mbar的压力下浓缩；浓缩液冷却至30℃，调节pH值到3.5-4，加入8%-10%的1%壳聚糖（用1%的醋酸溶液配置）溶液，搅拌至有大量絮状沉淀产生，静止2小时，过滤，滤液即为本发明药物含漱剂。

具体使用方法和剂量：10-20ml含漱1分钟，每日2-4次，3-7天一个疗程。优选地，具体使用剂量为15ml含漱1分钟，每日2-4次，3-7天一个疗程。

其中，本发明药物原料药来源分别为：金银花：本品为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.、红腺忍冬L.hypoglauca Miq.或华南忍冬L.confusa DC.的干燥花蕾。主要含绿原酸、木犀草素、肌醇及挥发油。药理作用有抗菌、抗真菌、抗病毒、抗内毒素等。野菊花：本品为菊花科植物野菊Dendranthema indicum(L.)Des Moul(Chrysanthemum indicum L).的头状花序。主要含蒙花苷、野菊花内酯、挥发油等。药理作用有抗菌、抗病毒、降血压等。玄参：本品为玄参科植物玄参（浙玄参）Scrophularianingpoensis Hemsl.的根。主要含玄参素、植物甾醇、糖类、氨基酸等。药理作用有降压、抗真菌。临床主要用于热病伤阴后舌红、口干、烦躁、便秘、咽喉肿痛等。板蓝根：本品为十字花科植物菘青Isatis indigotica Fort.的根。主要含靛玉红、氨基酸等。药理作用有抑菌、抗病毒、抗过敏等。骨碎补：本品为水龙骨科植物槲蕨Drynaria fortunei(Kze.)J.Sm.的根茎。主要含柚皮苷等多种黄酮类化合物。

实施例2本发明药物口含片的制备

原料组方：金银花45g，野菊花15g，玄参15g，板蓝根15g，骨碎补7.5g，按实施例1方法提取浓缩纯化后，加入口含制剂用辅料制备成口含片。

实施例3本发明药物口腔贴片的制备

称取原料组方：金银花45g、野菊花15g、玄参45g、板蓝根45g、骨碎补22.5g按实施例1方法提取浓缩纯化后，制备成口腔贴片。

实施例4本发明药物口腔用凝胶剂的制备

按实施例1的方法制备的滤液浓缩，加入聚乙烯醇-124、丙二醇、氮酮等，按凝胶剂的制备方法制备成凝胶。

实施例5本发明药物口腔膜剂

按实施例1的方法制备的滤液浓缩，加入尼泊金甲酯、羟甲基纤维素等成膜剂，制备成口腔膜剂。

以下通过具体临床试验及药效学试验证明本发明的有益效果。

试验例1本发明药物含漱剂对慢性牙周炎的临床效果研究

目的：评价本发明药物含漱剂对慢性牙周炎的临床效果。

诊断标准：根据《牙周病学》（第三版，人民卫生出版社）中1999年牙周病国际研讨会制定的分类标准，纳入标准:每个病例余留牙不少于20；每一象限至少有2或2以上患牙牙周探诊深度（PD）≥4mm；X线片显示有中重度骨吸收；无系统性疾病；3个月内未使用过避孕药等性激素制剂；3个月内未使用过免疫制剂；患者签署知情同意书。

方法：对60例慢性牙周炎患者，随机分成两组，龈上洁治龈下刮治组+含实施例1制备的漱剂组（A组）和单纯龈上洁治龈下刮治组（B组），分别予以不同的治疗（具体使用方法和剂量：取本含漱剂10-20ml，含漱1分钟，每日3次），在治疗前、治疗后1周、2周和4周记录牙周袋探诊深度（PPD）、临床附着水平（PAL）和牙龈出血指数（SBI）。

结果：治疗1周和2周后各指标显著减轻，2周比1周减轻更明显（P<0.05），4周与2周相比无显著性差异（P>0.05）。A组各指标在1周和2周时减轻比B更显著（P<0.05），但4周时两组指标均无显著性差异（P>0.05）。

结论：本发明药物含漱剂配合龈上洁治龈下刮治能更好的控制牙周炎症。

本发明药物含漱剂配合基础治疗对慢性牙周炎的治疗效果

试验例2本发明药物含漱剂对急性牙龈炎的临床效果研究

目的：评价本发明药物含漱剂对急性牙龈炎的临床效果。

诊断标准：根据《牙周病学》（第三版，人民卫生出版社）中急性龈乳头炎标准，纳入标准为牙龈乳头发红肿胀，探触和吸允是易出血，有自发性胀痛和明显探触痛。

方法：对60例急性牙龈炎患者，随机分成两组，牙周常规冲洗组+含漱剂组（A组）和单纯牙周常规冲洗组（B组），分别予以不同的治疗（具体使用方法和剂量：取本含漱剂10-20ml，含漱1分钟，每日3次，牙周冲洗持续3天），在治疗前、1天后、2天后和1周记录疼痛指数（VAS），牙周袋探诊深度（PPD）和牙龈出血指数（SBI）。

结果：治疗2天后各指标显著减轻（P<0.05）。A组各指标在1天和2天时减轻比B组更显著（P<0.05），但1周时两组指标均无显著性差异（P>0.05）。

结论：本发明药物含漱剂能有效的治疗急性牙龈炎。

本发明药物含漱剂对急性牙龈炎的治疗效果

试验例3本发明药物含漱剂对复发性口腔溃疡的临床效果研究

目的：评价本发明药物含漱剂对复发性口腔溃疡临床效果。

诊断标准：《口腔黏膜病学》（第三版，人民卫生出版社），结合复发性、自限性、周期性特点及病史和临床症状体征做出诊断，（1）口腔黏膜溃疡呈单个或数个反复发作，间歇期不规律；（2）溃疡呈圆形或椭圆形，中心略凹陷，周围有充血红晕，表面有黄色假膜；（3）溃疡疼痛明显。

方法：对56例复发性口腔溃疡患者，随机分成两组，本发明药物含漱剂组（A组具体使用方法和剂量：取本含漱剂10-20ml，含漱1分钟，每日3次。）和对照B组（给予生理盐水含漱），分3别予以不同的治疗，在治疗前、1天、3天、一周分别记录疼痛指数（VAS），溃疡直径以及溃疡愈合时间。

结果：A组1天、3天后的VAS评分与B组相比有显著性的减少（P<0.05），A组溃疡愈合时间明显比B组缩短（P<0.05）。溃疡直径变化在两组间无显著性差异（P>0.05）。

结论：本发明药物含漱剂能很好的缓解溃疡疼痛，缩短溃疡愈合时间。

本发明药物含漱剂对口腔溃疡的临床效果

试验例4本发明药物与临床单独使用金银花的对比试验

本发明药物与金银花对急性牙龈炎的对比试验结果如下，本发明药物组为A组，金银花组为B组（具体诊断标准及用法同试验例2）

对急性牙龈炎的治疗效果

对口腔细菌最低抑制浓度（MIC）值

NA：无抑菌作用

本发明药物与单独使用金银花在同等剂量下的对比试验中，选择与本发明药物相同剂量的金银花作为对比，进行了急性牙龈炎及口腔常驻细菌的抑菌实验，证明本发明药物效果比相同剂量的金银花疗效更优。

试验例5本发明药物药效学试验

1.抑菌实验

（1）材料与方法

1.1实验菌株

牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277

福赛类杆菌ATCC43037

变形链球菌ATCC 25175

血链球菌ATCC 10556

唾液链球菌SS 196

粘性放线菌Actinomyces viscosus ATCC 19246

以上菌株均由华西口腔医学院口腔生物医学工程重点实验室微生物室提供

1.2菌液制备

将复苏48小时后的各株细菌分别接种于TPY液体培养基中，80%N2，20%CO2，37℃下厌氧培养18小时，涂片检查为纯培养后，使用比浊仪测取菌悬液浓度，用PBS缓冲液将菌悬液调至1x108CFU/ml。

1.3实验分组

阴性对照组1：TPY液体培养基，每组2个平行

阳性对照组：含0.12%洗必泰的TPY液体培养基，每组2个平行

实验组：含本发明药物含漱剂的TPY液体培养基，每组2个平行

1.4本发明药物含漱剂对口腔细菌最低抑制浓度（MIC）的测定

将本发明药物含漱剂按2倍稀释法溶于TPY液体培养基中，使其最终浓度达到1/2,1/4,1/8,1/16,1/32。将细菌悬液与各组药液按1∶1(v/v)比例，各100ul分别接种于96孔板中,用微量震荡器震荡1min后，置于80%N2，20%CO2,37℃下厌氧培养48h。在黑色背景下，以肉眼观察无浑浊出现的最低药物浓度为其最低抑菌浓度（MIC）值；若结果不易判断，则将96孔板用微量震荡器震荡1min，以接种环挑少量菌液接种于TPY固体培养基上，80%N2，20%CO2,37℃下厌氧培养48h，观察是否有菌落生长。

MIC测定重复3次。

（2）结果

本发明药物含漱剂对口腔细菌最低抑制浓度（MIC）见表1

表1本发明药物含漱剂对口腔细菌最低抑制浓度（MIC）值

结果表明本发明药物含漱剂对牙龈卟啉单胞菌、福赛类杆菌、粘性放线菌等牙周致病菌有较强的抑菌作用，而对血链球菌为代表的口腔有益菌抑菌作用较弱，说明该制剂对口腔细菌有显著的抑菌作用，而且对牙周微生态尚有有益的调节作用。

试验例6本发明药物毒理学研究

1.细胞毒性实验

（1）材料

PDLF细胞株（四川大学基础与法医学院免疫学教研室）；

新生小牛血清（兰州明海）；

DMEM培养液（GIBCO，美国）；

MTT（SIGMA）；

超净工作台（苏净集团安泰公司）；

HF151C02培养箱（Heal Force）；

离心沉淀机（LXJ-Ⅱ,上海医用分析仪器厂）；

IM-1生物倒置显微镜（OLYMPUS，日本）；

CH生物显微镜（OLYMPUS，日本）；

ZS-3板式酶标仪（北京航新）

其它：DMSO为国产

（2）方法：

取处于对数生长期的人牙周成纤维细胞（hPDLF），用含0.02％EDTA的0.25%胰蛋白酶消化，再用含10％新生小牛血清的DMEM培养液吹打培养瓶底部，制成单细胞悬液；苔盼兰染色计数，细胞活力≥95％，用营养液调整细胞浓度为1×10⁵/ml，每孔接种细胞悬液100μl于96孔培养板中，用营养液补足200μl，共三板（细胞加样顺序见加样表）。37℃、5％CO₂培养过夜。

次日取出细胞板，倒置显微镜下观察细胞均匀分布在细胞培养板孔底，约达底面积的50％左右。每孔弃培养上清100μl，，再于其中三板细胞培养孔中分别加入样品，使稀释度分别为1/25、1/50、1/100、1/200、0（CELL）。每培养孔液体体积为200μl，每一浓度孔均做三复孔。在37℃，5％CO₂条件下培养。分别于培养时间结束（24h、48h、72h）前4～6h取出培养板，依次在每孔中加入MTT溶液10μl，继续孵育至培养结束。在酶联免疫检测仪上选择570nm波长测定各孔光吸收值（A值）。按照公式计算细胞相对增殖率(relative growth rate，RGR)，RGR=A实验组/A对照组×100%

（3）结果及结果计算：

表2本发明药物含漱剂对人牙龈成纤维细胞增殖的影响

由图1可见该制剂在抑菌浓度范围内对人牙龈成纤维细胞仅有轻微抑制作用。

2.本发明药物含漱剂多次刺激性试验

(1)试验目的

观察动物口腔黏膜多次接触本发明药物含漱剂后所产生的刺激反应情况和恢复情况。

(2)试验材料

1.1受试药物：本发明药物含漱剂，按实施例1制备；由成都中医药大学药剂科提供。临床拟用法用量为含漱15ml/次，3次/日，连用3天，最多不超过7天。

1.2实验动物：豚鼠30只，雌雄各半，体重180±20g。由四川省动物管委会养殖场提供，动物合格证号SCXK（川）2008-14。适应性喂养3日后开始实验。

(3)试验方法

豚鼠30只，雌雄各半，按体重随机分为3组：正常对照组，本发明药物含漱剂低剂量组、本发明药物含漱剂高剂量组，每组10只。其中，牙周炎低剂量组为临床用量的等效剂量，牙周炎高剂量组为临床等效剂量的5倍用量，正常对照组给予等量生理盐水。每组每日给药2次，连续给药7日，给药时使药液均匀涂布在口腔两侧颊粘膜，并保留10min。每日给药前，观察口腔黏膜有无充血、水肿、出血、糜烂、溃疡等刺激症状。末次给药24h后，肉眼观察动物有无全身不良反应，口腔黏膜有无局部刺激症状。处死豚鼠，取两侧颊粘膜及口腔喉组织，10%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，连续切片，HE染色观察。

(4)试验结果

如图2所示，试验期间，实验动物均未出现局部及全身不良刺激反应，肉眼观察黏膜均未见黏膜充血，水肿等现象。

综上所述，通过临床试验和药效学试验，证明本发明药物组合物用于治疗牙龈炎、牙周炎、口腔溃疡，使用安全，药效明确。

Claims (10)

1.一种治疗牙周病的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

金银花15-45份、野菊花15-45份、玄参15-45份、板蓝根15-45份、骨碎补7.5-22.5份。

2.根据权利要求1所述的治疗牙周病的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

金银花30份、野菊花30份、玄参30份、板蓝根30份、骨碎补15份。

3.根据权利要求1或2所述的治疗牙周病的药物组合物，其特征在于：它是由金银花、野菊花、玄参、板蓝根、骨碎补的水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

4.根据权利要求3所述的治疗牙周病的药物组合物，其特征在于：所述的制剂是口服制剂、口含制剂。

5.根据权利要求4所述的治疗牙周病的药物组合物，其特征在于：所述的口含制剂是口含片、口腔贴片、含漱剂、口腔凝胶剂、膜剂。

6.一种制备权利要求1-5任意一项所述的治疗牙周病的药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、称取原料药；

b、加水或有机溶剂提取，过滤，浓缩，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成所述制剂。

7.权利要求1-5任意一项所述的药物组合物在制备治疗牙周炎的药物中的用途。

8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述的牙周炎为慢性牙周炎。

9.权利要求1-5任意一项所述的药物组合物在制备治疗急、慢性牙龈炎的药物中的用途。

10.权利要求1-5任意一项所述的药物组合物在制备治疗口腔溃疡的药物中的用途。

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