CN102719361A - 一种组织培养器皿与组织培养方法 - Google Patents

一种组织培养器皿与组织培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102719361A
CN102719361A CN2012102039628A CN201210203962A CN102719361A CN 102719361 A CN102719361 A CN 102719361A CN 2012102039628 A CN2012102039628 A CN 2012102039628A CN 201210203962 A CN201210203962 A CN 201210203962A CN 102719361 A CN102719361 A CN 102719361A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bowl
tissue culture
tissue
petridish
culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2012102039628A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102719361B (zh
Inventor
曹鸿国
章孝荣
杨盼
蒲勇
张运海
陶勇
李运生
刘亚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anhui Agricultural University AHAU
Original Assignee
Anhui Agricultural University AHAU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anhui Agricultural University AHAU filed Critical Anhui Agricultural University AHAU
Priority to CN 201210203962 priority Critical patent/CN102719361B/zh
Publication of CN102719361A publication Critical patent/CN102719361A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102719361B publication Critical patent/CN102719361B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02—Form or structure of the vessel
    • C12M23/10—Petri dish
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/34—Internal compartments or partitions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/38—Caps; Covers; Plugs; Pouring means

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

本发明公开了一种组织培养器皿与组织培养方法。组织培养器皿包括底壁与至少一个侧壁以限定出的内腔的培养皿，培养皿包括盖子，内腔中还包括至少一个碗状容器，碗状容器包括半球形的碗底与开口，开口处设有与碗状容器侧壁垂直的边挡，边挡的内缘直径小于开口，外缘直径大于开口；碗状容器底部与培养皿底壁连接。组织培养方法包括如下步骤：（1）用亲水性明胶包被碗状容器；（2）添加培养液；（3）切割和加入组织块；（4）倒置培养皿后放入培养箱。本发明通过在普通培养皿的内腔设置碗状容器，营造了组织培养所需要的气液共存的培养环境，其使用方便、成本较低、效果较好，特别适宜体积较小和密度较大的组织块的培养。

Description

一种组织培养器皿与组织培养方法
 
技术领域
本发明涉及一种专门用于组织培养的培养器皿以及使用该培养器皿进行组织培养的方法。
背景技术
组织工程是当前生命科学研究的前沿学科，人类身体健康离不开组织工程科学的发展和完善。传统机体修复多采用自体组织移植手术，虽然可以取得满意疗效，但它是以牺牲自体健康组织为代价，挖东墙补西墙的保守办法，最终会导致很多并发症及附加二次损伤。最重要的是，一些人体重要的组织在机体内是独一无二的，例如，眼角膜。在眼角膜受到伤害之后，机体内没有可以替代的组织，只能采用其他供体的或者人造的。但是，目前人体捐献的供体眼角膜来源十分有限，许多病人的健康恢复无法得到保障。从而，组织工程为众多的组织缺损的病人治疗带来了曙光。组织培养是组织工程得以发展和组织产品能够快速应用的重要技术基础。目前，组织培养研究较为迅速和成熟的是有关皮肤、眼角膜和卵巢组织的培养或再造等方面。通过体外培养角膜，再移植回人体，让因为角膜缺失或损坏而失明的人士恢复视力。对于被烧伤、炎症等因素损害的皮肤，通过体外培养皮肤组织移植人体，达到修复皮肤的外形和功能的目的。通过卵巢组织的培养，能够实现卵巢内遗传资源的开发和利用，对于现代畜牧业的遗传育种、新品种培育和濒临灭绝野生动物的保护具有着重要的意义。
由于组织培养不同于细胞培养，组织培养需要有一个气液共存的培养环境。而目前常规的细胞培养器皿的结构无法提供理想的气液共存的培养环境，不能满足组织培养的需要。因此目前缺乏专用于组织培养的培养器皿。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种专门用于组织培养的培养器皿。
本发明要解决的另外一个技术问题是提供一种使用上述培养器皿的组织培养方法。
对于组织培养器皿，本发明采用的技术方案是：一种组织培养器皿，包括底壁与至少一个侧壁以限定出的内腔的培养皿，培养皿包括盖子，内腔中还包括至少一个碗状容器，碗状容器包括半球形的碗底与开口，开口处设有与碗状容器侧壁垂直的边挡，边挡的内缘直径小于开口，外缘直径大于开口；碗状容器底部与培养皿底壁连接。
作为改进，边挡外缘与培养皿的侧壁连接。
更进一步的改进，多个碗状容器的边挡相互连接。
另外一个改进是，碗状容器由塑料制成。
还有一个改进是，碗状容器与培养皿由透明塑料一体制成。
对于组织培养方法，本发明采用的技术方案是：一种使用上述的组织培养皿的组织培养方法，包括以下步骤： 
（1）在组织培养前，使用亲水性较强的无菌的明胶溶液对所述碗状容器进行包被；
（2）将所述组织培养皿正置，使碗状容器开口朝上，添加组织培养液于明胶溶液包被过的碗状容器内，培养液以添加到所述碗状容器边挡的下缘为宜；
（3） 切割培养组织块，使培养组织块的体积为0.1~1mm3；把培养组织块放入添加培养液的碗状容器内；
（4）合上组织培养器皿盖子，将组织培养皿整体倒置，使碗状容器开口朝下，然后放入培养箱中培养。
上述步骤（1）先将组织培养器皿的碗状容器使用亲水性试剂明胶溶液进行包被，是为了使组织培养器皿的碗状容器在倒置时能够牢固含住培养液。明胶是水溶性蛋白质混合物，皮肤、韧带、肌腱中的胶原经酸或碱部分水解或在水中煮沸而产生，作为亲水性材料目前已广泛用于食品和制作的粘合剂。
本发明的有益效果是：
通过在普通培养皿的内腔设置碗状容器，营造了组织培养所需要的气液共存的培养环境，使得所培养的组织在该环境中既能接触空气，又能保持营养供给。其使用方便、成本低廉、培养效果好，能够有效解决当前组织培养专业器皿的缺乏问题。本发明非常适合组织体积较小和密度较大的组织块的培养。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
图1是本发明组织培养器皿实施例的主视图。
图2是本发明组织培养器皿实施例的俯视图。
图3是本发明组织培养器皿实施例的使用状态图。
图中，1-外壁，101-盖子，2-碗状容器，201-边挡，3-培养液。
具体实施方式
图2是一种方形组织培养器皿，由底壁与4个侧壁构成培养皿的正方形的外壁1，外壁1所围成了培养皿的内腔，外壁1的开口处以盖子101将培养皿的内腔封闭。内腔设有4个开口直径约1cm的碗状容器2，碗状容器2具有半球形的碗底与边挡201。
在图1中，边挡201垂直于碗状容器的侧壁，边挡201的内缘直径小于碗状容器的开口，边挡的外缘直径则大于开口。边挡201内径较碗状容器开口小，有利于当碗状容器倒置后，容器内液体不会从开口处向外流出。
为使得碗状容器2能够稳稳固定在培养皿中，将碗状容器2底部与培养皿底壁连接，将边挡201的外缘与培养皿的侧壁连接，将4个碗状容器的边挡相互连接。
本实施例中，碗状容器2与培养皿外壁1都是用透明塑料一体制成的。
使用时，先将组织培养皿正置，使碗状容器2开口朝上，再将直径不大且开口处更小的碗状容器2盛满培养液3并放入要培养的组织块，然后合上盖子101将培养皿内腔封闭，再将整个培养皿倒置，使碗状容器2开口朝下（图3），由于碗状容器出口处的液体表面张力使得容器内液体不会流出而含在碗状容器中并倒悬在培养皿的半空，使培养液中所培养的组织块既能得到培养液供给的营养，又能与培养皿内腔的空气接触，由此营造了一个气液共存的良好的组织培养环境。
为了使用效果更好，可在放入培养液和组织块之前先用亲水性试剂明胶溶液对组织培养器皿的碗状容器2进行包被。
本实施例适合用于培养组织体积较小和密度较大的组织块，如生殖细胞来源的卵巢组织和睾丸组织。
以上所述的本发明实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何在本发明的精神和原则之内所作的修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的权利要求保护范围之内。

Claims (7)

1.一种组织培养器皿，包括底壁与至少一个侧壁以限定出的内腔的培养皿，所述培养皿包括盖子，其特征在于：所述内腔中还包括至少一个碗状容器，所述碗状容器包括半球形的碗底与开口，所述开口处设有与碗状容器侧壁垂直的边挡，所述边挡的内缘直径小于开口，外缘直径大于开口；所述碗状容器底部与培养皿底壁连接。
2.根据权利要求1所述的组织培养器皿，其特征在于：所述边挡外缘与培养皿的侧壁连接。
3.根据权利要求1所述的组织培养器皿，其特征在于：多个所述碗状容器的边挡相互连接。
4.根据权利要求1所述的组织培养器皿，其特征在于：所述碗状容器由塑料制成。
5.根据权利要求1所述的组织培养器皿，其特征在于：所述碗状容器与培养皿由透明塑料一体制成。
6.一种使用权利要求1所述的组织培养皿的组织培养方法，其特征在于：包括以下步骤： 
（1）在组织培养前，使用亲水性较强的无菌的明胶溶液对所述碗状容器进行包被；
（2）将所述组织培养皿正置，使碗状容器开口朝上，添加组织培养液于明胶溶液包被过的碗状容器内，培养液以添加到所述碗状容器边挡的下缘为宜；
（3） 切割培养组织块，使培养组织块的体积为0.1~1mm3；把培养组织块放入添加培养液的碗状容器内；
（4）合上组织培养器皿盖子，将组织培养皿整体倒置，使碗 状容器开口朝下，然后放入培养箱中培养。
7.根据权利要求6所述的组织培养方法，其特征在于：所述明胶为分析纯级别以上的细胞培养用产品，明胶溶于水高压灭菌后即为无菌的明胶溶液。 
CN 201210203962 2012-06-20 2012-06-20 一种组织培养器皿与组织培养方法 Expired - Fee Related CN102719361B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 201210203962 CN102719361B (zh) 2012-06-20 2012-06-20 一种组织培养器皿与组织培养方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 201210203962 CN102719361B (zh) 2012-06-20 2012-06-20 一种组织培养器皿与组织培养方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102719361A true CN102719361A (zh) 2012-10-10
CN102719361B CN102719361B (zh) 2013-12-18

Family

ID=46945236

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN 201210203962 Expired - Fee Related CN102719361B (zh) 2012-06-20 2012-06-20 一种组织培养器皿与组织培养方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102719361B (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100785049B1 (ko) * 2006-01-11 2007-12-12 한국과학기술연구원 줄기세포로부터 배아체를 형성 및 성장시키는 방법 및 장치
CN101652660A (zh) * 2007-02-26 2010-02-17 干细胞技术公司 减小液体培养基的弯月面曲率的方法
CA2737627A1 (en) * 2008-09-22 2010-03-25 Universitaet Zuerich Prorektorat Forschung Hanging drop plate
CN102046773A (zh) * 2008-05-30 2011-05-04 康宁股份有限公司 具有不同微孔外形的细胞培养装置
CA2788575A1 (en) * 2010-01-28 2011-08-04 Shuichi Takayama Hanging drop devices, systems and/or methods

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100785049B1 (ko) * 2006-01-11 2007-12-12 한국과학기술연구원 줄기세포로부터 배아체를 형성 및 성장시키는 방법 및 장치
CN101652660A (zh) * 2007-02-26 2010-02-17 干细胞技术公司 减小液体培养基的弯月面曲率的方法
CN102046773A (zh) * 2008-05-30 2011-05-04 康宁股份有限公司 具有不同微孔外形的细胞培养装置
CA2737627A1 (en) * 2008-09-22 2010-03-25 Universitaet Zuerich Prorektorat Forschung Hanging drop plate
CA2788575A1 (en) * 2010-01-28 2011-08-04 Shuichi Takayama Hanging drop devices, systems and/or methods

Also Published As

Publication number Publication date
CN102719361B (zh) 2013-12-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2404682T3 (es) Sistema de cartílago particulado
CN106350482A (zh) 一种培养体系及其应用与培养软骨细胞的方法
CN107177546A (zh) 一种人牙髓干细胞培养基及人牙髓干细胞的制备方法
WO2018207907A1 (ja) 細胞培養容器
KR101594950B1 (ko) 갈조류 유리배우체의 대량배양 채묘장치
JP2016013094A (ja) 人工軟骨形成用基材
CN202558868U (zh) 一种用于组织工程角膜构建和保存的容器
CN106635816B (zh) 一种藻类混合培养方法
CN102719361B (zh) 一种组织培养器皿与组织培养方法
KR100462497B1 (ko) 약용버섯류(동충하초, 상황버섯)의 균사체를 배양한기능성 쌀의 생산방법
JP5909757B1 (ja) ミジンコの培養セットおよびミジンコの連続培養方法
CN214482668U (zh) 一种用于组培苗快速生根驯化和运输的装置
CN1590536A (zh) 培养组织的保存方法
CN203329089U (zh) 负载干细胞的大面积羊膜贴片的制备装置
CN205005668U (zh) 一种适用于液体培养基的带有内置固定架的培养瓶
CN209722173U (zh) 一种皮肤角质形成细胞气液面培养系统
CN109468270A (zh) 一种脂肪干细胞和脐带间充质干细胞的成软骨诱导方法
CN205774572U (zh) 一种用于成熟脂肪细胞天花板培养的培养皿
TW201247868A (en) Fast culture flask of Cinnamomum kanehirae fruiting body and mycelium
CN102696484A (zh) 组织培养器皿与组织培养方法
CN109370982A (zh) 一种鸡胚提取物及其制备与应用
CN205648720U (zh) 一种南美对虾受精卵固定检查装置
CN201901351U (zh) 一种用于盛放鸡蛋的工艺盘
CN215757408U (zh) 一种生物工程用细胞培养装置
CN203492604U (zh) 一种带有蚂蚁工坊的鱼缸

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20131218

Termination date: 20150620

EXPY Termination of patent right or utility model