CN102716431B - 一种治疗奶牛乳房炎的中药涂膜剂制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗奶牛乳房炎的中药涂膜剂制备方法，其特点是，包括如下步骤：采用生大黄、当归、透骨草、忍冬藤、蒲公英、莪术、乳香、没药、金银花、紫花地丁和连翘作为原料，分别经过单独提取后浓缩成流浸膏再复方配伍为成品中药，然后一起与涂膜剂基质和透皮剂混合后即成为中药涂膜剂。通过实验统计，本发明的中药涂膜剂对临床型和隐性乳房炎的治愈率分别为72％和85.3％，达到了良好的治疗效果，未治愈病例临床症状明显减轻。另外本发明的中药涂膜剂属纯中药制剂，具有抗菌、消炎、制备工艺简单、易操作、无残留等优点，临床效果显著，比目前的软膏剂更佳。

Description

一种治疗奶牛乳房炎的中药涂膜剂制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗奶牛乳房炎的中药涂膜剂制备方法。

背景技术

奶牛乳房炎(Mastitis)，中兽医又称为奶黄、奶肿及乳痈，是一种复杂的乳腺综合症，是奶牛乳房受到微生物、物理和化学等有害因素损伤而产生的一种炎症反应，其特征是乳腺发生各种不同类型的炎症，表现为乳腺感染、乳腺炎症、乳房微循环和免疫障碍等；同时，乳汁发生理化性质和细菌学变化，它分为临床型乳房炎和隐性乳房炎两种类型。病原微生物以大肠杆cf菌、金黄色葡萄球菌和链球菌为主。

乳房炎是奶牛生产中最常见、最难防治、花费较大对奶牛业的发展阻碍较为严重的疾病之一。据1996年统计，全球每年因乳房炎造成的损失约为350亿美元。2005年，美国、日本的发病率为62.1％，美国奶牛业由乳房炎造成的损失就高达20亿美元，英国损失达2.67亿英镑，日本达5亿美元，德国乳牛业因隐性乳房炎年损失10亿欧元。

目前，奶牛乳房炎的临床处置主要以抗生素防治为主，长期大量使用抗生素不仅导致耐药菌株的产生，而且药物的残留对人的健康也会产生危害。中草药属于纯天然物质，含有多种生物活性成分，具有抗菌、消炎，无残留、无公害等特点。

涂膜剂的特点主要表现为：(1)制备工艺简单，不需要特殊设备；(2)使用时涂于患处，形成药膜保护创面，且耐磨性能好，不易脱落；(3)不需包扎，容易清洗，使用方便；(4)膜的形成减少了皮肤表面水分的蒸发，促进了水合作用和溶解角质作用，使药物透过角质层逐渐释放药物，更好的发挥治疗作用；(5)使血药水平较长时间保持在有效浓度范围内，避免药物在胃肠道及肝的首过效应，改善病人的顺应性，不必频繁给药，提高安全性，如有副作用，容易及时移去制剂，减少了口服及注射给药不能终止的危险性。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗奶牛乳房炎的中药涂膜剂制备方法，并且该中药涂膜剂还具有抗菌消炎、低残留、使用方便的特点。

一种治疗奶牛乳房炎的中药涂膜剂制备方法，其特别之处在于，包括如下步骤：采用生大黄、当归、透骨草、忍冬藤、蒲公英、莪术、乳香、没药、金银花、紫花地丁和连翘作为原料，分别经过单独提取后浓缩成流浸膏再复方配伍为成品中药，然后一起与涂膜剂基质和透皮剂混合后即成为中药涂膜剂。

按重量份计，原料组成为：1份生大黄、1份当归、1份透骨草、1～2份忍冬藤、1～2份蒲公英、1～2份莪术、1～2份乳香、1～2份没药、1～2份金银花、1～2份紫花地丁和1～2份连翘。

其中涂膜剂基质由成膜材料聚乙烯醇124、助溶剂甘油、溶剂蒸馏水、乙醇、丙酮组成，而透皮剂为氮酮、丙二醇和冰片，以重量计各成分比例为成品中药：聚乙烯醇124：乙醇：丙酮：蒸馏水：甘油：丙二醇：冰片：氮酮=1～3：1∶2.5～4：2～3：10～20：1.6～2.5：0.8～1.6∶1.3～2.5：0.5～0.9。

进一步的，包括如下步骤：

(1)各中药有效成分提取：

a．忍冬藤、蒲公英、当归、莪术、乳香、没药的提取：

首先将上述中药分别粉碎至40～60目，然后分别放入药材重量10～20倍量的水中煎煮2～3次，每次0.5～3h，然后将所有提取溶液混合、单层滤纸过滤、浓缩制成1∶1的各中药的流浸膏，即1g药材最后得到1ml流浸膏；

b．大黄、金银花、连翘的提取：

首先将上述中药分别粉碎至40～60目，然后分别放入药材重量8～10倍、体积浓度为70％～90％的乙醇溶液中，采用回流的方法提取，提取2～4次，每次的提取时间为1～2h，提取温度为65℃～85℃，然后将所有提取溶液混合、单层滤纸过滤、浓缩制成1∶1的各中药的流浸膏，即1g药材最后得到1ml流浸膏；

c．透骨草、紫花地丁的提取：

首先将上述中药分别粉碎至40～60目，然后分别放入药材重量10～15倍、体积浓度为65％～90％的乙醇溶液中，采用超声振荡的方法提取，提取1～3次，每次提取时间为1.5～3h，提取温度为50℃～55℃，功率为75W～100W，然后将所有提取溶液混合、单层滤纸过滤、浓缩制成1∶1的各中药的流浸膏，即1g药材最后得到1ml流浸膏；

(2)中药复方配伍：

将得到的所有流浸膏混合，2500r/min～3000r/min离心20～30min后收集上清液，将上清液浓缩成1.5～2∶1的流浸膏，即为成品中药待用；

(3)涂膜剂的制备：

按下述重量比分别称取各组分，成品中药：聚乙烯醇124：乙醇：丙酮：蒸馏水：甘油：丙二醇：冰片：氮酮=1～3：1∶2.5～4：2～3：10～20：1.6～2.5：0.8～1.6∶1.3～2.5：0.5～0.9；

按照上述配比，将聚乙烯醇124置于容器中，加入蒸馏水，80℃～85℃水浴完全溶化后，再加入成品中药和甘油，然后加入用乙醇完全溶解的冰片后搅拌均匀，之后加入丙酮，边加边搅拌，最后加入氮酮和丙二醇的混合液，即得中药涂膜剂。

通过实验统计，本发明的中药涂膜剂对临床型和隐性乳房炎的治愈率分别为72％和85.3％，达到了良好的治疗效果，未治愈病例临床症状明显减轻。另外本发明的中药涂膜剂属纯中药制剂，具有抗菌、消炎、制备工艺简单、易操作、无残留等优点，临床效果显著，比目前的软膏剂更佳。

具体实施方式

本发明采用生大黄(Rheum palmatum L．)、当归(Angelica sinensis)、透骨草(Phryma leptostachya Linn)、忍冬藤(CaulisLonicerae)、蒲公英(Herba Taraxaci)、莪术(Rhizoma Curcumae Aeruginosae)、乳香(Boswelliacarteri)、没药(Commiphora myrrha)、金银花(Lonicera Japonica)、紫花地丁(Viola philippica Car)和连翘(Forsythia suspensa)作为原料，还用到了冰片(DryobalanopsaromaticaGwaertn.f)。

本发明中药涂膜剂的用法与用量：

用药前，首先用温水清洗病牛乳区，然后擦干，在每个乳区涂抹中药涂膜剂20ml～30ml，保持至下次挤奶，每天2次，5～7天为一个疗程。

实施例1：

1、中药有效成分提取：在下述提取方法中，1份相当于50g中药，1∶1的流浸膏，即指1g药材最后得到1ml流浸膏。

①生大黄的提取：

首先将生大黄粉碎至40目，然后将粉碎后的生大黄1份放入药材8倍重量、体积浓度为90％的乙醇溶液中，采用(热)回流的方法，提取2次，第一次的时间为2h、第二次的时间为1h，提取温度为80℃，将两次的提取液混合、单层滤纸过滤后，将过滤液置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即50ml；

②忍冬藤的提取：首先将忍冬藤粉碎至40目，然后将粉碎的忍冬藤2份置于砂锅中，按常规的中药煎煮方法放入该药材10倍重量水煎煮3次，第1次1h，第二次1h，第三次0.5h，将煎煮后的提取液混合后，单层滤纸过滤，将过滤液置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即100ml；

③蒲公英的提取：首先将蒲公英粉碎至40目，然后将粉碎后的蒲公英2份置于砂锅中，按常规的中药煎煮方法煎煮3次，第1次加入该药材重量的20倍量的水，煎煮2h；第2次加15倍量的水，煎煮2h；第3次加10倍量的水，煎煮1h；将3次煎煮后的提取液混合、单层滤纸过滤后，将过滤液置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即100ml；

④当归的提取：首先将当归粉碎至40目，然后将粉碎后的当归1份置于砂锅中，按常规的中药煎煮方法，加入该药材重量的10倍量水煎煮3次，每次的煎煮时间均为1h，将煎煮后的提取溶液混合、单层滤纸过滤后，置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即50ml；

⑤莪术的提取：首先将莪术粉碎至40目，然后将粉碎后的莪术2份置于砂锅中，按常规的中药煎煮方法，加入该药材重量的10倍量水煎煮三次，每次煎煮的时间均为0.5小时。将煎煮后的提取溶液混合、单层滤纸过滤后，将过滤液置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即100ml；

⑥透骨草的提取：首先将透骨草粉碎至40目，然后将粉碎的透骨草1份放入体积浓度为95％的乙醇溶液中，用超声振荡提取，提取一次，时间为3h，提取温度50℃，功率为200W，提取时的乙醇溶液与透骨草的重量比为10∶1；将提取液经单层滤纸过滤后，置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即50ml；

⑦乳香的提取：首先将乳香粉碎至40目，然后将粉碎后的乳香2份置于砂锅中，按常规的中药煎煮方法，加入该中药重量的10倍量水煎煮三次，每次煎煮的时间均为0.5小时。将煎煮后的提取溶液混合、单层滤纸过滤后，将过滤液置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即100ml；

⑧没药的提取：首先将没药粉碎至40目，然后将粉碎后的2份没药置于砂锅中，按常规的中药煎煮方法，加入该药材重量的10倍量水煎煮三次，每次煎煮的时间均为0.5小时。将煎煮后的提取溶液混合、单层滤纸过滤后，将过滤液置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即100ml；

⑨金银花的提取：首先将金银花粉碎至40目，然后将粉碎后的2份金银花放入以药材重量10倍量、体积浓度为70％的乙醇溶液中，采用回流提取的方法，提取2次，2次的提取时间均为1h，提取温度为85℃；将2次的提取液混合、单层滤纸过滤后，将过滤液置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即100ml；

⑩紫花地丁的提取：首先将紫花地丁粉碎至40目，然后将粉碎后的2份紫花地丁放入以药材重量15倍量、体积浓度为65％的乙醇溶液中，采用超声振荡的方法提取，提取3次，每次的提取时间均为1.5h，提取温度为50℃，功率为200W；将3次的提取溶液混合、单层滤纸过滤后，将过滤液置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即100ml；

连翘的提取：首先将连翘粉碎至40目，然后将粉碎后的2份连翘放入以药材重量8倍量、体积浓度为75％的乙醇溶液中，采用回流提取的方法，提取4次，每次的提取时间为2h，提取温度为65℃，将4次的提取溶液混合、单层滤纸过滤后，将过滤液置于旋转蒸发仪上浓缩，制成1：1的流浸膏即100ml；

2、中药复方配伍：

将上述所有流浸膏混合共950ml，首先在常温下静置24小时，3000r/min离心30分钟，收集上清液，弃去残渣。将上清液置于旋转蒸发仪上浓缩至2∶1的流浸膏，即为成品中药475ml。

3、涂膜剂的制备：

取上述成品中药150ml、聚乙烯醇(PVA-124)50g、乙醇200ml、丙酮100ml、蒸馏水500ml、丙二醇50ml、冰片80g，甘油100ml、氮酮30ml。

将聚乙烯醇置于烧杯中，加入蒸馏水，85℃水浴待完全溶化后，以3ml/s的速度加入成品中药，再加入甘油，之后将完全溶解于乙醇的冰片加入其中，并不断搅拌，再以3ml/s的速度缓慢加入丙酮，边加边搅拌，最后加入氮酮和丙二醇的混合液，即得所需的中药涂膜剂。

4、疗效实验：

选取某牛场临床型乳房炎和隐型乳房炎各20头，挤完奶用温水清洗病牛乳区，用干毛巾擦干后用药，每个乳区涂抹实施例1的中药涂膜剂25ml，保留至下次挤奶，一天两次，6天一个疗程。通过实验统计，实施例1的中药涂膜剂对临床型和隐性乳房炎的治愈率分别为74.2％和86.8％，达到了良好的治疗效果，并且未治愈病例临床症状明显减轻。

实施例2：

1、中药有效成分的提取：

(1)水煎剂：

中药名称	份数	料液比	提取次数	提取时间
					忍冬藤	2	1∶10	3	60
蒲公英	2	1∶20	3	90
					当归	1	1∶10	3	60
莪术	2	1∶10	3	30
					乳香	2	1∶10	3	30

没药

2

1∶10

3

30

(2)回流提取：

(3)超声提取：

2、中药复方配伍

按上述方法配制中药复方800ml，在常温下静置24h后，然后在3000r/min的条件下离心30min，收集上清液，弃去残渣，将上清液置于旋转蒸发仪上浓缩至1.5∶1的流浸膏，即为成品中药533ml。

3、涂膜剂的制备

取上述成品中药150ml、聚乙烯醇(PVA-124)50g、乙醇150ml、丙酮100ml、蒸馏水700ml、丙二醇58ml、冰片92g，甘油115ml、氮酮35ml。将聚乙烯醇置于烧杯中，加入蒸馏水，85℃水浴待完全溶化后，以3ml/s的速度加入成品中药，再加入甘油，之后将完全溶解于乙醇的冰片加入其中，并不断搅拌，再以3ml/s的速度缓慢加入丙酮，边加边搅拌，最后加入氮酮和丙二醇的混合(简单混合)液，即得所需的中药涂膜剂。

4、疗效实验：

选取某牛场临床型乳房炎和隐型乳房炎各20头，挤完奶用温水清洗病牛乳区，用干毛巾擦干后用药，每个乳区涂抹自制的中药涂膜剂25ml，保留至下次挤奶，一天两次，6天一个疗程。通过实验统计，中药涂膜剂对临床型和隐性乳房炎的治愈率分别为72％和85.3％，达到了良好的治疗效果，未治愈病例临床症状明显减轻。

其余部分与实施例1相同。

上述两个实例所制备的中药涂膜剂的质量检查：

(1)加速试验：

将样品装入具塞试管内，置于温度为35～40℃，相对湿度为75％±5％的条件下进行试验，在试验期间在0、1、2、3个月月末，取样检查，各项指标均符合规定。

(2)适应性试验：

将样品涂膜剂在强光照射下放置1d，取样观察；将样品涂膜剂在高温下放置1d，取样观察；再将样品涂膜剂在高湿度下放置1d，取样观察，结果表明该涂膜剂在高温下不稳定，在强光照射和高湿度下基本稳定。

本发明实施例1、2的中药涂膜剂的刺激性试验

(1)试验动物处理：

取体重相近的家兔4只，雌雄各半，随即分成2组，试验前24小时将家兔背部两侧毛剪短后，用手术刀片剃毛(勿将皮肤刮破或出血)。将其中一组家兔皮肤消毒后，用灭菌6号针头呈“#”字形划破两侧皮肤，使皮肤出现渗血为度，破损区面积4cm×5cm，划痕间距0.5cm，作为破损皮肤试验区。另一组家兔皮肤完整无破损。

(2)给药方法：

第1组涂抹完整皮肤组，1次/d，连续7d；第2组涂抹破损皮肤组，1次/d，连续7d。每组左侧都涂布涂膜剂，右侧涂布空白基质且每次给药容量均为1g/kg。各组均于最后1次涂抹24h后除去受试物，再用温水洗净，去除受试物后24、48、72h观察涂抹部位皮肤有无红斑及水肿等变化，以及上述变化的恢复情况。

(3)结果评价：

皮肤完整的实验组皮肤从未出现红斑和水肿，皮肤破损的实验组家兔皮肤未出现水肿，充血现象在24小时迅速消失。

本发明实施例1、2的中药涂膜剂的皮肤急性毒性实验：

(1)试验方法：取家兔4只，随机均分为两组，将每只家兔背部脱毛，实验组涂抹25g涂膜剂，对照组涂抹等量的空白基质，并将其固定。24小时后摘除膜，并且每天观察家兔的精神状态、黏膜颜色，以及全身有无中毒或者死亡的情况。

(2)结果：每一组的家兔精神状态良好，也未见中毒和死亡情况，实验说明该涂膜剂无急性皮肤毒性。

本发明实施例1、2的中药涂膜剂的临床效果观察总结如下：

(1)试验动物：选取某牛场临床型乳房炎和隐型乳房炎各20头，各40乳区。

(2)治疗方案：

在用药前用温水清洗病牛乳区，用干毛巾擦干后，每个乳区涂抹自制中药涂膜剂25g左右，保持至下次挤奶，每天2次，5～7天为一个疗程。

(3)试验结果：

中药涂膜剂对临床型和隐性乳房炎的治愈率分别为72％～74.2％和85.3％～86.8％，达到了良好的治疗效果，未治愈病例临床症状明显减轻。

Claims (1)

1.一种治疗奶牛乳房炎的中药涂膜剂制备方法，其特征在于，包括如下步骤：采用生大黄、当归、透骨草、忍冬藤、蒲公英、莪术、乳香、没药、金银花、紫花地丁和连翘作为原料，分别经过单独提取后浓缩成流浸膏再复方配伍为成品中药，然后一起与涂膜剂基质和透皮剂混合后即成为中药涂膜剂；

按重量份计，原料组成为：1份生大黄、1份当归、1份透骨草、1～2份忍冬藤、1～2份蒲公英、1～2份莪术、1～2份乳香、1～2份没药、1～2份金银花、1～2份紫花地丁和1～2份连翘；

具体包括如下步骤：

（1）各中药有效成分提取：

a.忍冬藤、蒲公英、当归、莪术、乳香、没药的提取：

首先将上述中药分别粉碎至40～60目，然后分别放入药材重量10～20倍量的水中煎煮2～3次，每次0.5～3h，然后将所有提取溶液混合、单层滤纸过滤、浓缩制成1:1的各中药的流浸膏，即1g药材最后得到1ml流浸膏；

b.生大黄、金银花、连翘的提取：

首先将上述中药分别粉碎至40～60目，然后分别放入药材重量8～10倍、体积浓度为70%～90%的乙醇溶液中，采用回流的方法提取，提取2～4次，每次的提取时间为1～2h，提取温度为65℃～85℃，然后将所有提取溶液混合、单层滤纸过滤、浓缩制成1:1的各中药的流浸膏，即1g药材最后得到1ml流浸膏；

c.透骨草、紫花地丁的提取：

首先将上述中药分别粉碎至40～60目，然后分别放入药材重量10～15倍、体积浓度为65%～90%的乙醇溶液中，采用超声振荡的方法提取，提取1～3次，每次提取时间为1.5～3h，提取温度为50℃～55℃，功率为75W～100W，然后将所有提取溶液混合、单层滤纸过滤、浓缩制成1:1的各中药的流浸膏，即1g药材最后得到1ml流浸膏；

（2）中药复方配伍：

将得到的所有流浸膏混合，2500r/min～3000r/min离心20～30min后收集上清液，将上清液浓缩成1.5～2:1的流浸膏,即为成品中药待用；

（3）涂膜剂的制备：

按下述重量比分别称取各组分，成品中药：聚乙烯醇124：乙醇：丙酮：蒸馏水：甘油：丙二醇：冰片：氮酮=1～3：1:2.5～4：2～3：10～20：1.6～2.5：0.8～1.6:1.3～2.5：0.5～0.9；

按照上述配比，将聚乙烯醇124置于容器中，加入蒸馏水，80℃～85℃水浴完全溶化后，再加入成品中药和甘油，然后加入用乙醇完全溶解的冰片后搅拌均匀，之后加入丙酮，边加边搅拌，最后加入氮酮和丙二醇的混合液，即得中药涂膜剂。