CN107582943A - 一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属动物中医药技术领域，为解决现有治疗动物疥螨病的化学类药与中药制剂中存在的上述问题，提供一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂及制备方法。由苦参、百部、花椒、狼毒乙醇提取物，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物按一定比例混合，加入一定比例的水溶性维生素、甘油、吐温80、冰片、氮酮、丙二醇混合制备而成。使用方便，有效透过动物皮肤表皮层杀灭皮肤隧道内疥螨，清热燥湿、杀菌消炎、迅速止痒、收敛止渗、消炎止痛、控制感染、促进新生皮肤生长的作用。具有广谱、高效、低毒、无残留、不污染环境且经济、方便的特点，有效预防和治疗动物螨虫病，可为控制目前日益严重的动物体表寄生虫病提供一种有效的药物和技术手段。

Description

一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂及制备方法

技术领域

本发明属于动物中医药技术领域，具体涉及一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂及制备方法。

背景技术

疥螨病又疥癣病、疥疮、癞病等，是疥螨科或痒螨科的螨虫引起的多种动物共患的一种顽固性、慢性、接触性、高度传染性体外寄生虫病，是对家畜和毛皮动物造成损失最大的体外寄生虫病。该病的特征是患病动物体表有湿疹性皮炎、掉毛、剧痒、结痂、脱毛、皮肤增厚、干裂、形成鱼鳞状痂皮、局部擦破出血、患病动物形体消瘦为特征，严重影响动物发育、生产性能和毛皮质量，甚至可造成死亡，已成为规模化养殖场危害最大的体外寄生虫病。马、牛、羊、兔、猪等家畜以及犬、猫、熊猫、鹿、骆驼、狐、貂等宠物和野生动物均可感染本病。在家畜养殖与经济动物养殖中常见的且危害巨大的有羊疥螨病、兔疥螨病、猪疥螨病、犬疥螨病、牛疥螨病等。

山西省与内蒙古自治区羊群的螨虫感染率达100%，疥螨病发病率在90%以上；牛的感染率达95%，发病率为68%。羊感染疥螨后，成年病羊营养不良，身体衰弱，对其他病抵抗力减低，饲料利用率降低，极度消瘦死亡，羔羊生长发育停止，消瘦极度衰竭而死亡，皮肤脱毛也常常引起死亡。研究发现羊螨虫的感染率与羊痘、羊传染性脓疱病成正相关，提示螨虫病在羊的传染性疾病的发生中起到了重要的传播作用；疥螨病是肉牛、奶牛常见的皮肤寄生虫病，传播迅速，可使犊牛、青年牛生长发育受阻，泌乳牛产奶量下降。因此控制牛、羊疥螨等有害生物，对于控制疫病的传播，提高牛、羊的生产性能，实现增产节支，有着至关重要的意义。

猪疥螨是猪最严重的体外寄生虫，在我国几乎所有猪群都存在着猪疥螨感染。猪感染后引起慢性皮肤病变或皮肤过敏性病变，影响猪屠宰时的胴体皮肤外观，降低出售品质，也影响皮革质量。据韩谦报道，感染疥螨的仔猪比未感染仔猪的增重少8％，而饲料消耗却增加10％，直接降低养猪场的经济效益。研究显示，猪蓝耳病、附红细胞体病、圆环病毒病、猪瘟等传播、发生与螨虫的感染有密切的关系。因此，积极采取有效措施，降低猪群疥螨感染率及其严重程度，减轻因外寄生虫感染所造成的损失，控制螨虫的传播媒介作用已是众多猪场的共识。

兔螨虫病在兔群中普遍发生和流行，一旦发生感染，其病程较长，感染面积较大，久治难愈，且严重影响兔的生长发育和繁殖，感染严重者死亡率较高，同时也影响毛皮和肉品的质量，给养兔场、农户造成巨大的的经济损失。

寄生于犬、猫皮肤的疥螨，不仅损害犬、猫的健康，而且也损坏了犬猫的外貌(尤其是珍贵的宠物犬猫)，严重的引起死亡。此外，螨虫感染狐、貂等毛皮动物，引起毛皮质量下降，经济效益降低。

由此可见，动物螨虫病侵袭面广，发病率高，传播速度快，危害十分严重。随着动物集约化养殖的发展和宠物数量的增多，本病的危害将日趋严重，如何有效控制和治疗本病是目前养殖业共同面临的重要课题之一。

目前，世界各国对于螨病的控制多使用有机合成类杀螨剂(acaricide)，方法有外用和非外用等，疗效不一。常用治疗疥螨的药物主要有拟菊酯类（如胺菊酯）、有机磷类（如敌百虫、辛硫磷）、大环内酯类（如伊维菌素、阿维菌素）及双甲脒等。

常用剂型主要有涂抹剂、油制剂、浇泼剂、喷洒剂、口服制剂以及注射针剂等。这些化学合成药物几乎都具有广谱、高效的优点，但也存在无法克服弊端：（1）有一定的毒副作用，若使用不当极易引起中毒；（2）药物无法完全效透过动物皮肤表皮层杀灭皮肤隧道内疥螨（3）对患病动物机体的刺激强烈，易产生应激反应；（4）不具有抗炎、抗过敏和抗损伤作用；（5）容易引起耐药性的产生和动物产品的兽药高残留，且造成环境污染，危害人类健康；（6）使用不方便。

已报道有39种中药杀螨活性成分，包括生物碱类、黄酮类、萜类化合物、精油等，都具有显著的杀螨作用，并在生产实践中得到广泛应用。研究显示中药具有低毒、无残留、无公害、药液吸附力强、药效持续时间长、经济方便等特点。

透皮给药是指在皮肤表面给药，药物经由皮肤吸收进入全身血液循环，并达到有效血药浓度而起到全身治疗或预防作用的一种给药新途径。特别对于皮肤疾病，药物可通过透皮剂直接作用于损伤皮肤的表层及深层，杀灭病原和修复组织，发挥良好的疗效。

大量的研究证实中药在治疗动物疥螨病中显示出与传统杀螨化学合成药有相当的疗效，尤其是植物源中药的化学成分多样，作用具有协同性，用于杀螨和螨病的治疗具有多靶点，不易产生耐药性；而且具有祛风湿、解毒止痒的效果，加快皮肤康复的作用。由此可见，中药克服了化药毒性大、高残留、刺激性大、抗药性产生以及环境污染等缺陷，具有使用安全，毒副作用较低，原料来源广、成本低廉、制备操作简单等特点，有广阔的应用前景。但现有的抗疥螨复方中药多为碾碎过筛制成膏剂，或水煎后制成洗液。水煎剂洗液用量大，透皮性差，药物有效成分很难透过表皮深入到皮肤表皮层杀灭皮肤隧道内疥螨；杀螨膏剂虽然有较好的透皮性，但需要在患处涂抹，使用不便，特别是对于大量发生疥螨病的动物治疗时，几乎是不可行的。

多种中药对动物螨虫具有杀灭作用，实践中多采用直接粉碎或水煎涂抹，存在用药量大和使用不便的问题。而提取技术不同，各味药有效成分也有差异，对杀螨效果影响很大，故认为采用合理的提取方法，最大可能保留杀螨成分是研制复方杀螨制剂的基础；其次，单味中药在治疗动物疥螨病中存在使用剂量大、杀螨效果差的问题，而现有方剂则侧重于杀螨，不具有杀菌、止痒和修复皮肤的作用。因此研制中药复方，应按照祛风湿、解毒止痒的原则，可利用各有效杀螨有效成分之间的相互作用，提高杀螨效果，降低使用量。

因此，新一代药物应具全面的杀灭螨虫的效力，不易产生耐药性、低毒、无残留或低残留、刺激性小、投药次数少、节省劳动力，同时具有抗炎、抗损伤、杀菌和修复皮肤作用等优点。既可以作为动物疥螨病的预防药物，也可以作为出现临床症状的动物疥螨病的治疗药物，有效的解决目前抗疥螨病药物的通用弊端，经济效益和社会效益显著。

发明内容

本发明为了解决现有治疗动物疥螨病的化学类药与中药制剂中存在的上述问题，提供了一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂及制备方法。

本发明由如下技术方案实现的：一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物1-3份、百部醇提物2-4份、花椒醇提物2-3份、狼毒醇提物1-2份，苦楝、地肤子、五倍、栀子的混合水提物1-4份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 2-4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

优选配方1：由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物2份、百部醇提物4份、花椒醇提物3份、狼毒醇提物1份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物4份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

优选配方2：由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物1份、百部醇提物2份、花椒醇提物2份、狼毒醇提物1份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物1份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

优选配方3：由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物3份、百部醇提物4份、花椒醇提物3份、狼毒醇提物2份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物1份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 2份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

优选配方4：由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物3份、百部醇提物4份、花椒醇提物3份、狼毒醇提物2份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物4份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

制备上述一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂的方法，包括如下步骤：

（1）有效成分提取：苦参、百部、花椒、狼毒分别用乙醇进行提取：苦参、百部、花椒、狼毒分别粉碎成100-200目的药粉，分别置于药粉重量5-10倍的95%的乙醇中，28℃、180rpm摇床中震荡提取2次，每次3d，过滤后合并滤液，滤液旋转蒸发仪浓缩，干燥后分别获得苦参醇提物、百部醇提物、花椒醇提物、狼毒醇提物；

苦楝、地肤子、五倍、栀子用蒸馏水进行提取：苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比例混合，粉碎成10-100目的药粉后置于10倍药粉重量的蒸馏水中，浸泡60min，砂锅煮沸40-50min，滤出药液，再加入6倍药粉重量的蒸馏水，继续煮沸40-50min，滤出药液，将2次药液混合后过滤，滤液浓缩、干燥后获得苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物；

（2）混合：按比例称取步骤（1）获得的苦参醇提物、百部醇提物、花椒醇提物、狼毒醇提物，以及苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物，苦参醇提物、百部醇提物、花椒醇提物、狼毒醇提物混合后用90%的乙醇溶解；苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物用蒸馏水溶解；然后将乙醇溶液和水溶液混合搅拌均匀；

（3）在步骤（2）获得的混合液中按比例加入的水溶性维生素、甘油、吐温80、冰片、氮酮、丙二醇，在组织捣碎机中8000r/min 混合均匀，灌封即可。

本发明所采用的水溶性维生素为：国药准字H32023002，华瑞制药有限公司生产。每瓶含：硝酸硫胺3.1mg，核黄素磷酸钠4.9mg，烟酰胺40mg，盐酸吡哆辛4.9mg，泛酸钠16.5mg，维生素C钠113mg，生物素60μg，叶酸0.4mg，维生素B12 5.0μg。

本发明所使用的药物中：苦参，味苦，性寒，具有清热燥湿，杀虫利尿等功效。其主要活性成分为生物碱和黄酮两大类化合物。苦参中含有大量的生物碱，其中含量最高的是苦参碱和氧化苦参碱，约占苦参药材根干总重的2%（其中大部分以氧化苦参碱的形式存在），研究证实苦参碱是杀螨的主要物质；百部，味甘、苦，性微温，具有润肺下气止咳，杀虫灭虱功效。其主要活性成分为生物碱，杀虫谱很广，如对螨虫、线虫、球虫等都有作用，应用也很广泛。其代表成分为百部叶碱；瑞香狼毒，味辛、性平，清热解毒，消肿，泻炎症，止溃疡，祛腐生肌功效。瑞香狼毒主要含有黄酮类，瑞香狼毒提取物对多种昆虫和螨虫具有较强的杀虫活性，研究证实狼毒乙醇提取物对螨虫具有极强杀灭作用；花椒，温中散寒，具有除湿，止痛，杀虫的功效。花椒的化学成分主要有挥发油、生物碱、酞胺、香豆素和脂肪酸等。研究发现花椒乙醇提取物对褐飞虱若虫有很好的触杀毒力，花椒精油对两种蠕形螨均有明显的抑杀作用；苦楝皮，苦，寒，具有杀虫，疗癣功效，常用于蛔虫病，蛲虫病，虫积腹痛和外治疥癣瘙痒。其药理作用主要表现在增强免疫力、抗细菌、抗病毒和驱虫等作用。研究发现50%的苦楝皮的提取物可在4 h内杀死全部实验痒螨；地肤子，性寒、味甘苦，具有清热利湿、祛风止痒等功效，用于小便涩痛、阴痒带下、风疹、湿疹、皮肤瘙痒等症。研究发现地肤子水提物对多种癣菌有不同程度的抑菌作用，对螨虫也具有良好的杀灭作用；五倍子，味酸、涩，性寒，具有敛肺降火，涩肠止泻，敛汗，止血，收湿敛疮的功效。研究显示其对金黄色葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌以及伤寒、副伤寒、痢疾、炭疽、白喉、绿脓杆菌等均有明显的抑菌或杀菌作用。五倍子的鞣质分子对各种自由基都有很强的清除作用，从而清除体内自由基造成的损伤，发挥抗氧化作用，修复损伤的组织；栀子，苦，寒，具有泻火除烦，清热利湿，凉血解毒，外用消肿止痛的功效。在临床药理研究证实栀子具有良好的抗微生物、抗炎及对软组织损伤的修复作用。可用来疗食管炎和口疮、急性卡他性结膜炎、扭挫外伤和多种类型皮炎等。以上药物配伍，除了具有驱虫作用外，还具有杀菌、止痒、抗炎和修复损伤组织的作用。

吐温-80是非离子表面活性剂，具有增溶、乳化、润湿等作用。可对在水中难溶药物起增溶作用，也能对难溶的沉淀物质产生润湿作用；甘油除具有保湿、保润功能外，还具有高活性、抗氧化、促醇化等特殊功效。可混溶于乙醇，与水混溶，也可溶解某些无机物；本发明利用甘油与乙醇水溶液的互溶性以及透皮性，与吐温80合用促进各种活性物质在皮肤表面的铺展、吸附和渗透，并维持溶液的稳定性；水溶性维生素含有维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素PP等和抗坏血酸（VC），绝大多数以辅酶或辅基形式参加各种酶系统工作，在中间代谢的许多环节中都起着极重要的作用，具有修复皮肤、营养皮肤，和增强皮肤抵抗力的作用；氮酮、丙二醇和冰片组成复合型透皮促进剂，对亲水亲油性化合物均有明显的助渗作用，增加药物的透皮性；冰片局部应用具有一定的止痛及温和的防腐作用。

通过中药的合理配伍，发挥杀螨、抗菌、止痒、抗炎和修复损伤组织作用；制剂中加入吐温-80、甘油发挥增溶和保湿作用，水溶性维生素具有营养和修复皮肤作用；复合型透皮促进剂可有效促进杀螨有效成分进入的皮肤深层杀灭其中的疥螨，并发挥复方中药制剂的杀菌、抗炎和促进皮肤生长作用。

本发明按照祛风湿、解毒止痒的原则，利用中药及方剂中组分间的协同增效作用，突出制剂的杀螨、杀菌、抗炎、止痒、抗损伤作用，并通过添加助溶剂、透皮剂和皮肤营养剂等，使药物提取成分能渗透到皮肤深层，增强药物对皮肤隧道内螨虫的杀灭效果，同时可修复损伤的皮肤。

本发明按照清热燥湿、杀菌消炎、止痒收敛、促进新生皮肤生长的原则制备制剂，建立小鼠透皮系统模型，通过动物试验研究该制剂各使用剂量对动物体疥螨的杀灭效果和疗效，统计有效率和治愈率，进一步核实该制剂的使用效果和剂量；预测制剂保存期；皮肤急性毒性及刺激性评价试验，为工业化生产制剂的标准的制定提供了科学依据。

本发明所制备透皮喷雾剂具有杀虫、抗菌和抗炎修复作用；组方中的助溶剂可使中药提取物有效溶解，并有较强的去油脂、溶痴皮作用，并通过促渗剂增强皮肤对药物的渗透性，促进药物的透皮渗透，与虫体作用，迅速杀灭皮肤深层的疥螨。

本发明所制备的透皮喷雾剂能有效杀灭皮肤深层的疥螨，治疗动物疥螨病疗效与目前常用的化学杀螨药物阿维菌素和敌百虫水剂相当，且服现有化学合成杀螨剂毒副作用大、对动物机体的刺激强烈、抗药性产生、动物产品残留、环境污染以及使用不便等弊端。特别是本制剂可以有效渗透到动物皮肤表皮层，杀灭皮肤隧道内疥螨，使用方便，且具有抗炎、抗过敏、抗损伤、杀菌和修复皮肤作用，该特点是目前各类杀螨剂所不具备的。可用于家畜的各类螨虫感染，也可用于犬、猫等宠物的螨虫病治疗。

本发明可以有效渗透到动物皮肤表皮层，杀灭皮肤隧道内疥螨，使用方便，且具有抗炎、抗过敏、抗损伤、杀菌和修复皮肤作用。该制剂用于羊、猪、兔、犬等动物疥螨病的预防和治疗，可有效控制疥螨病的发生，适合我国动物养殖的实际需求，除直接经济效益外，间接经济效益更加可观（提高饲料转化率、降低死亡率、其他细菌病、毒性传染病发病率大大降低等），该药物预防和治疗疥螨病效果显著，使用方便，可迅速在市场推广应用。因此，本制剂有效解决了现有杀灭疥螨药物的弊端，具有重大的经济意义。同时也解决了化学杀虫杀螨剂的广泛使用带来的严重的“3R”问题。因此，也具有明显的社会效益，为动物疥螨病的防制开辟了一条新的途径，具有广阔的应用前景。

本发明不但可以有效治疗动物疥螨病，有效控制该病的传播，减少损失；同时可切断如羊焦虫病、附红细胞体等疾病的传播途径，产生显著的经济效益。同时复方中药透皮喷雾剂替代化学药物和农药杀虫剂，可减少兽药残留、抗药性产生和环境污染，对维护公共卫生与食品安全有重要的意义，具有重大的社会效益。

本发明利用不同中药在杀灭疥螨过程中的协同作用的优势，组织配方，药物有效成分提取，加入助溶剂、透皮吸收促进剂、保湿剂等制成喷雾剂，该制剂使用方便，可有效透过动物皮肤表皮层杀灭皮肤隧道内疥螨，同时具有清热燥湿、杀菌消炎、迅速止痒、收敛止渗、消炎止痛、控制感染、促进新生皮肤生长的作用。所制备的喷雾剂为广谱、高效、低毒、无残留、不污染环境并且经济、方便的控制动物螨虫病的中药制剂，对兽医临床及兽药研究具有较大的应用价值，也是控制我国目前日益严重的动物体表寄生虫病的有效手段。

附图说明

图1为本发明所制备的防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂对小鼠耳廓肿胀抑制作用结果图；图2为HPLC-UV法测定本发明所制备的防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂透皮后氧化苦参碱色谱图。

具体实施方式

实施例1：一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，由以下组分按重量份混合配制而成：苦参醇提物2份、百部醇提物4份、花椒醇提物3份、狼毒醇提物1份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物4份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

所采用的水溶性维生素为：国药准字H32023002，华瑞制药有限公司生产。每瓶含：硝酸硫胺3.1mg，核黄素磷酸钠4.9mg，烟酰胺40mg，盐酸吡哆辛4.9mg，泛酸钠16.5mg，维生素C钠113mg，生物素60μg，叶酸0.4mg，维生素B12 5.0μg。

苦参、百部、花椒、狼毒分别用乙醇进行提取：苦参、百部、花椒、狼毒分别粉碎成100-200目的药粉，分别置于药粉重量5-10倍的95%的乙醇中，28℃、180rpm摇床中震荡提取2次，每次3d，过滤后合并滤液，滤液旋转蒸发仪浓缩，干燥后分别获得苦参醇提物、百部醇提物、花椒醇提物、狼毒醇提物。

苦楝、地肤子、五倍、栀子用蒸馏水进行提取：苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合，粉碎成10-100目的药粉后置于10倍药粉重量的蒸馏水中，浸泡60min，砂锅煮沸40-50min，滤出药液，再加入6倍药粉重量的蒸馏水，继续煮沸40-50min，滤出药液，将2次药液混合后过滤，滤液浓缩、干燥后获得苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物；

按比例称取步骤（1）获得的苦参醇提物、百部醇提物、花椒醇提物、狼毒醇提物，以及苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物，苦参醇提物、百部醇提物、花椒醇提物、狼毒醇提物混合后用90%的乙醇溶解；苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物用蒸馏水溶解；然后将乙醇溶液和水溶液混合搅拌均匀，然后按比例加入的皮肤营养剂水溶性维生素、保湿剂甘油、助溶剂吐温80、三元促透剂冰片、氮酮、丙二醇，在组织捣碎机中8000r/min 混合均匀，灌封即可。

实施例2：一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，由以下组分按重量份混合配制而成：苦参醇提物1份、百部醇提物2份、花椒醇提物2份、狼毒醇提物1份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物1份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。其制备方法同实施例1所述制备方法。

实施例3：一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，由以下组分按重量份混合配制而成：苦参醇提物3份、百部醇提物4份、花椒醇提物3份、狼毒醇提物2份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物1份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 2份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。其制备方法同实施例1所述制备方法。

实施例4：一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，由以下组分按重量份混合配制而成：苦参醇提物3份、百部醇提物4份、花椒醇提物3份、狼毒醇提物2份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物4份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。其制备方法同实施例1所述制备方法。

实验例1：所制备的防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂稳定性试验：采用经典恒温法，取本发明所制备的喷雾剂，分别置于55℃、65℃、75℃、85℃的恒温水浴中，按实验设计定时取样，取出后迅速流水冷却终止反应,观察其颜色、澄明度，测定pH值及喷雾剂中指示中药成分的氧化苦参碱的含量变化，预测制剂保存期，实验设计见表1。

经恒温加速实验后，对本发明所制备的透皮喷雾剂中氧化苦参碱的含量变化的物理性质进行检测，结果见表1；氧化苦参碱不同温度下Lg（C%）与T之间的回归方程相关系数（r）及反应速度常数，结果见表2，结果表明线性关系显著，说明氧化苦参碱的含量随温度、时间变化符合一级降解反应。按照Arrhenius计算氧化苦参碱90%稳定大约保存时间为22988h（2.62a），约957天，见表3。物理性质未出现显著变化，见表4。

表1 恒温法试验中透皮喷雾剂中氧化苦参碱的含量变化（mg/ml）

表2 氧化苦参碱在不同恒温条件下测定数据的线性回归方程

表3 透皮喷雾剂中氧化苦参碱的有效期预测

表4 复方中药透皮喷雾剂保存中理化性质的变化

实验例2：透皮率测定实验

应用FRANZ扩散装置（RYJ-6A型药物透皮扩散试验仪），单室扩散池，池内温度为37℃士0.5℃，磁力搅拌速度约300r.min^-1，小白鼠离体皮肤作透皮介质，以复方透皮剂中主要味药苦参中的有效成分氧化苦参碱作为参照物质，高效液相色谱法测定了4个复方中药透皮喷雾剂组和相应对照组（未加透皮剂）中氧化苦参碱16h的累计透皮渗透量。结果显示4个配方的复方中药透皮剂组方中的氧化苦参碱均可有效透过小鼠离体皮肤，单位面积累计透皮渗透量和透皮率为各自对照组的6.71、7.67、7.19、8.90倍，透皮效果显著，结果见表5、图2。

表5 复方中药透皮喷雾剂体外累积透过量和体外药物渗透速率（氧化苦参碱）

实验例3：刺激性试验：

试剂与药物：本发明所制备透皮喷雾剂、生理盐水。实验动物：健康白色家兔，体重2-2.5kg，由山西农业大学试验兔场提供，正常饲养。

实验方法：分组处理：取体重相近的白色家兔12只，雌雄各半，剪短家兔背部两侧毛后，将所选区域毛剔除，每侧大小约5cm×5cm左右，剔除毛24h后，选皮肤健康无损家兔备用。将家兔随机分为2组，第1组为完整皮肤组；第2组为破损皮肤组，每组6只。每只家兔，一侧皮肤为对照组，一侧为用药组。对于破损皮肤组，在给药前用灭菌号针头呈“﹟”字形划破右侧皮肤，使皮肤出现渗血为度，完整皮肤组与空白对照组不作处理。

采用同体左右侧自身对照，每组家兔的右侧背部脱毛区涂擦透皮喷雾制剂，左侧背部涂擦生理盐水作为对照；高剂量组家兔用喷雾剂4ml/只涂布。完整皮肤组与破损皮肤组涂抹高剂量透皮喷雾制剂，每天给药2次，间隔12小时，每次4mL，用药后用玻璃纸、三层无菌纱布和胶布固定。连续用药7d，末次给药24h后，用温开水清洗，除去残留药物，去除药物后1h、24h、48h、72h肉眼观察，观察皮肤变化并记录。

皮肤刺激的判断与评价标准：皮肤刺激反应评分按表6进行，皮肤刺激强度分级按表7进行。

表6 皮肤刺激反应评分

表7 皮肤刺激强度分级

完整皮肤刺激性试验结果见表8：停药1h、24h内家兔用药部位勉强可见红斑，皮肤刺激反应总积分均值分别为1.17和0.67，提示为轻度刺激性，停药48h后皮肤刺激强度低于0.4，属无刺激性。

破损皮肤刺激性试验结果见表9，停药1h、24h内家兔用药部位可见红斑，皮肤刺激反应总积分均值分别为2.83和2.67，提示为中等刺激性，停药48h后皮肤刺激强度低于0.4，属无刺激性。

表8 完整皮肤刺激性试验结果

表9 破损皮肤刺激性试验结果

实验例4：急性毒性试验

试剂与药物、实验动物与实验例2相同。

取体重相近的白色家兔20，只雌雄各半，将家兔背部两侧毛剪短后，剃毛5cm×5cm左右，剃毛24h后，选皮肤健康无损家兔备用，称重。随机分成组5组。分别是完整皮肤复方中药透皮喷雾剂高剂量组（4ml/只）、完整皮肤复低剂量组（2ml/只）、破损皮肤复方中药透皮喷雾剂高剂量组（4ml/只）、破损皮肤复低剂量组（2ml/只）和空白对照组。

透皮喷雾剂高剂量组家兔用喷雾剂4ml/只涂布，低剂量组家兔给予喷雾剂2ml/只涂布，空白对照组给予生理盐水4ml/只涂布。具体操作同实验例2所述方法。连续用药7d，末次给药24h后，用温开水清洗，除去残留药物，去除药物后1h、24h、48h、72h至7d肉眼观察，每日观察记录实验家兔的体重、饮食和粪便、皮肤、毛发、眼和黏膜、呼吸、中枢神经系统、四肢活动等有无中毒表现，死亡情况等。若有动物、死亡应及时进行尸检和肉眼观察，肉眼可见病变时，应进行病理组织学检查，并计算给药7d后的增重。

实验结果见表10，实验期各组家兔未见发病和死亡。破损皮肤组在给药3d后出现血痂，停药后第7d血痂开始脱落，第10天痊愈。各组完整皮肤给药后7d增重差异均不显著（P≧0.05），提示透皮喷雾剂毒性极小。透皮喷雾剂对家兔完整皮肤无刺激性，破损皮肤为轻刺激性，无急性毒性。

表10 皮肤急性毒性试验对家兔体重的影响X±S

实验例5：抗炎效果观察

实验药物：透皮喷雾剂，分别是实施例1、实施例2、实施例3、实施例4所制备喷雾剂，二甲苯（批号：20150108，天津试剂有限公司）；实验动物：昆明鼠，购自山西医科大学实验动物房。

实验方法：36只昆明鼠，雌雄各半，体重21g±2g，随机分为6组，每组6只。分别为实施例1组、实施例2组、实施例3组、实施例4组、生理盐水组和二甲苯致炎对照组。

所有小鼠的左耳前后两面涂布致炎剂二甲苯，含量为0.02ml/只，右耳不做任何处理。涂致炎剂30min后，药物组在同样的位置涂抹同样剂量的试验药物，生理盐水组涂抹同量的生理盐水组，二甲苯致炎对照组不作任何处理。4h后将小鼠处死，剪下双耳，用直径为6mm的打孔器分别在同一部位取圆形耳片，称重。每只鼠的左耳片重量减去右耳片重量即为肿胀度。分别将各组肿胀度进行统计学处理，比较抗炎效果的抑制率。抗炎效果抑制率=（二甲苯致炎对照组肿胀度-实验组或生理盐水组肿胀度）/对照组肿胀度×100%。

人工二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制试验结果见表11、图1，结果显示，透皮喷雾剂可显著降低小鼠耳廓肿胀度，对二甲苯所致的的炎症有明显的抑制作用。4个中药透皮喷雾剂组方小鼠耳廓肿胀度显著低于生理盐水组和空白对照组（P≤0.05），生理盐水组和空白对照组差异不显著（P≥0.05）；实施例1、实施例2、实施例3、实施例4间差异不显著（P≥0.05）。4个透皮喷雾剂组对肿胀抑制率在47.47%-60.34%之间，明显高于生理盐水组（19.20%）。

本试验中各试验药物为液体，在涂抹致炎剂二甲苯后，可能起到一定的稀释作用而影响对实验结果的判断，设立生理盐水对照组可以更加精确判断喷雾剂的抗炎作用。结果显示4组喷雾剂均有显著的抗炎作用，以实验例4所制备的喷雾剂的抗炎作用最强。

表11透皮喷雾剂对二甲苯所致的耳廓肿胀抑制实验结果（单位g）

实验例6：对兔螨病的治疗效果：

供试动物：试验兔来自阳泉市盂县某规模化獭兔场，挑选足爪部、耳部和嘴唇部临床症状明显的的疑似螨病患兔，具体表现为患部皮肤发红，搔痒，患兔用爪不时搔抓或摩擦患部，被毛脱落形成干燥硬痂。

供试药物与试剂：本发明所制备透皮喷雾剂；1%伊维菌素注射液：山西兆益生物有限公司，批号：201301；甘油、生理盐水、聚维酮碘溶液、新洁尔灭消毒液、酒精。

患病兔确诊：选取临床症状为疑似庎螨病的病兔，刮取患兔病健交界处皮屑，溶于适量甘油水溶液中，置载玻片上于显微镜下观察，所有患兔病料都能找到庎螨虫体，部分还能观察到螨虫卵，可确诊为兔庎螨阳性。

治疗实验：将确诊为庎螨的日龄接近的试验兔60只，按照患病部位、病情轻重分为3组，每组20只，组与组之间患病部位、轻重程度比例比较接近，分别为复方中药透皮喷雾剂治疗组、阿维菌素治疗组、不治疗对照组。分别于治疗前与治疗结束后（周期为28天）称重，计算相对增重率。相对增重率（%）＝实验组平均增重/健康对照组平均增重×100。透皮喷雾剂治疗组：患部采用喷雾、滴入、涂擦和药浴给药，1d一次，连用3周。伊维菌素治疗组：皮下注射，间隔7d—次，连续给药3次。

预防实验：选取日龄相近的未患庎螨的兔45只，随机分为3组。用75%酒精消毒左耳后，Ⅰ、Ⅱ组用细砂纸打磨耳部皮肤致微渗血，Ⅰ组15只每天耳部喷复方中药透皮喷雾剂1次，三天后在打磨过的耳部涂抹分离的庎螨感染，作为复方中药透皮喷雾剂预防组，Ⅱ组15只为伊维菌素预防组，按0.15mg/kg皮下注射预防注射1次，三天后打磨耳部涂抹分离的庎螨感染，作为伊维菌素预防组；Ⅲ组15只打磨耳部，涂抹分离的庎螨，为感染对照组。各组隔离饲养，均自由采食。

疗效判定标准：活螨检查：试验兔在用药后7天、14天、21天、28天共进行4次活螨检查。见有虫体活动者判定为阳性，否则为阴性。检查方法：用手术刀刮取患病部位至微见出血吋止，刮取范围约3cm²，把所刮取的痂皮或皮屑置于载玻片上，滴50%甘油2-3滴，微温，用低倍镜观察，计算每平方厘米的平均活螨数。

病变分级标准：0级标准为没有任何病变且无活螨；1级标准为有瘙痒而无痂皮；2级标准为有瘙痒，有痂皮，但痂皮局限于爪部或鼻面部；3级标准为严重瘙痒且有较厚痂皮，足爪部、鼻面部病灶面积较大；4级标准为瘙痒非常严重，痂皮厚，病变波及范围广，有全身症状。

治愈判定标准：患兔瘙痒症状消失，结痂脱落，病灶部位新毛长出，病变部位镜检活螨为阴性者，即可判定为治愈。有效判定标准：病变等级降低者表明病情好转，同一部位取材活螨检查显示皮肤病灶每平方厘米平均活螨数减少，则判定为治疗有效。感染：人工致病感染部位能检出活螨或卵，并表现出1级以上的临床症状。每天仔细观察，并做记录。

疗效试验结果：透皮喷雾剂临床治疗效果对比试验结果显示，在4周的治疗周期内复方中药透皮喷雾剂的治愈率为95%，与伊维菌素相同；但用药周期则缩短1天左右，2种药物的有效率均达100%。详见表12、表13。

表12 透皮喷雾剂的治疗试验

表13 透皮喷雾剂治疗患疥螨病兔后螨虫被杀灭情况

透皮喷雾剂对兔疥螨病的预防试验结果：结果见表14，透皮喷雾剂预防兔疥螨病于伊维菌素相同，均达100%。在整个试验周期内，未见试验兔感染疥螨，而感染组感染率为66.67%，并出现瘙痒和痂皮，并且感染范围有扩大趋势。

表14 透皮喷雾剂对兔疥螨病的预防试验结果

临床治疗试验的经济效益分析：结果见表15，透皮喷雾剂在整个治疗周期内，患兔相对增重率为88.77%，与伊维菌素治疗组接近，不治疗对照组仅为68.42%，而且皮毛受损。随着患兔日龄增长，疥螨病会不断加重，甚至出现死亡。综合分析，在28d的治疗期内，复方中药透皮喷雾剂仅增重方面即可比不治疗组增加经济效益20%以上。

表15 复方中药透皮喷雾剂对疥螨病兔的增重效果

实验例7：透皮喷雾剂对育肥羊螨病的治疗效果观察

实验药物：本发明所制备透皮喷雾剂；90%敌百虫，湖北沙隆达股份有限公司，农药登记证：PD84108-9。使用时，准确量取90%敌百虫，用纯水稀释至2%备用。治疗时，对病羊进行涂擦。试验动物：山西太谷县肉羊育肥专业合作社临床诊断为疥螨病的羔羊作为试验用动物。

分组：将确诊为疥螨病的羊64只随机分为3组，分别为中药透皮喷雾剂治疗组40只、敌百虫治疗组12只、不治疗对照组12只。另随机选取20只健康羊作为对照组。

治疗组用药前将病羊患处痂皮刮掉直至可见新鲜皮肤。透皮喷雾剂治疗组方法为在患处及周边皮肤喷雾或涂擦，每天2次；敌百虫治疗组患处涂擦，每天2次；均连用10天。不治疗对照组和健康对照组不做任何治疗。各组分开饲养，饲喂相同饲料，直至出栏。治疗前和出栏时分别称重，计算增重和相对增重率。相对增重率%=实验组增重/健康组增重×100。

疗效判定：治疗后的羊，随时观察临床症状，以啃咬、瘙痒、舔舐、擦柱为判断疗效标准之一。痊愈：痒觉消失, 脱毛区长出被毛，皮肤柔软有弹性，体表检查无活的疥螨；有效：为痒感减轻, 脱毛区长出少量被毛，体表仍检出少量活的疥螨；无效：瘙痒依旧，脱毛区扩大，体表被覆痴皮并有大量活的疥螨寄生。以用药后第40天进行判定。

活螨检查：分别于用药后第10天、20 天、30天、40天各刮取痂皮镜检和检查体表1次，以找不到活疥螨为有效。并按以下公式计算疥螨的杀灭率。杀灭率（%）=（治疗前有疥螨的羊只数- 治疗后有疥螨的羊只数）/ 治疗前有疥螨的羊只数×100%。

临床疗效观察：结果见表16，结果显示：透皮喷雾剂治疗组和敌百虫治疗组对疥螨病的有效率均为100%，但在用药后40d临床观察并结合镜检，中药透皮喷雾剂治疗组治愈率可达92.5%，优于敌百虫治疗组（83.3%）。

表16 透皮喷雾剂与敌百虫对羊疥螨病的临床疗效

活虫检查：疥螨活虫检查结果发现用药后第20d，复方中药透皮喷雾剂和敌百虫治疗组的杀灭率分别为92.5%和91.6%。但第30d和40d检查，敌百虫治疗组出现复发病例，杀灭率降为83.3%，复方中药透皮喷雾剂未出现复发病例，详见表17。

表17 活虫检查结果

增重：结果见表18，用透皮喷雾剂和敌百虫水剂对患3月龄左右疥螨病育肥羔羊进行治疗，在三个半月的育肥期内，复方中药透皮喷雾剂治疗组羊只3天后骚痒减轻，5天左右骚痒消失，10天左右用药部位大部分检测不到活螨，20天左右皮肤恢复，开始长出新毛，有效率为100%。效果优于敌百虫组。三个半月的育肥期内，复方中药透皮喷雾剂治疗组平均增重为21.91kg，敌百虫水剂平均增重为19.24kg，不治疗组平均增重为17.66kg。复方中药透皮喷雾剂治疗组比不治疗组和敌百虫水剂治疗组分别可增加收入19.19%和12.05%。

表18 透皮喷雾剂对患病羊的疗效观察

实验例8：复方中药透皮喷雾剂对犬猫疥螨病的治疗效果观察

实验药物：本发明所制备透皮喷雾剂；双甲咪，江苏南农高科动物药业有限公司，兽药字（2012）400171046，10毫升兑水7.5公斤，对宠物进行药浴或涂擦，其中药浴时间不要少于15分钟。试验动物：来自山西农业大学动物医院和有关宠物医院就诊的疑似患犬猫，临床表现为持续性的搔抓和摩擦、多发生于头、眼、耳、鼻周围脱毛，有的波及颈部和四肢。患处皮肤发红、有疹块和黄色痂皮，皮肤干燥、增厚并形成皱褶。经临床检查或实验室检查为阳性（感染疥螨虫卵、幼虫或成虫）者作为试验用动物。

确诊：在犬猫患病部位与健康部位的交界剪毛，用外科手术刀刮取表皮至皮肤微有出血，将刮到的病料收集到消毒后的青霉素瓶里，做病原检查。将病料放入小烧杯中，加入10%氢氧化纳溶液适量，于酒精灯上加热煮沸2min-3min，使痂皮完全溶解后以2000r/min离心沉淀2min-3min，去上清液，吸取沉淀物涂片镜检，发现疥螨虫卵、幼虫或成虫确诊为疥螨病。于2014年-2016年共临床确诊犬58例，猫51例疥螨病。

治疗方案：选取36例犬和32例猫用透皮喷雾剂治疗，方法为在患处及周边皮肤喷雾或涂擦，每天2次，连用10d；22例犬和19例猫用双甲咪药浴或涂擦，3d一次，连用3次；用药后连续观察和检测4周，特别观察各组动物的食欲与精神状态，了解药物是否可引起不良反应。

判定：痊愈：痒觉消失, 脱毛区长出被毛，皮肤柔软有弹性，体表检查无活的疥螨；有效：为痒感减轻,脱毛区长出少量被毛，体表仍检出少量活的疥螨；无效：瘙痒依旧， 脱毛区扩大，体表被覆痴皮并有大量活的疥螨寄生。

活螨检查：将病料置于载玻片上，加1-2滴50%甘油水溶液，使皮屑散开，加上盖玻片，在低倍镜检查，以节肢微动为麻痹，节肢完全不动为死亡。分别于用药后第1、2、3、4周进行检查计数。

临床疗效观察：复方中药透皮喷雾剂治疗犬猫疥螨病临床治愈率分别为91.6%和93.7%，优于双甲咪，见表19。实验期各组动物精神、饮食正常，未见不良反应。

表19复方中药透皮喷雾剂与双甲咪对犬猫疥螨病的临床疗效

活虫检查：疥螨活虫检查结果与临床疗效相符合，详见表20。

表20 活螨检查结果

Claims (6)

1.一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，其特征在于：由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物1-3份、百部醇提物2-4份、花椒醇提物2-3份、狼毒醇提物1-2份，苦楝、地肤子、五倍、栀子的混合水提物1-4份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 2-4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

2.根据权利要求1所述的一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，其特征在于：由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物2份、百部醇提物4份、花椒醇提物3份、狼毒醇提物1份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物4份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

3.根据权利要求1所述的一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，其特征在于：由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物1份、百部醇提物2份、花椒醇提物2份、狼毒醇提物1份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物1份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

4.根据权利要求1所述的一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，其特征在于：由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物3份、百部醇提物4份、花椒醇提物3份、狼毒醇提物2份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物1份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 2份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

5.根据权利要求1所述的一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂，其特征在于：由以下组分按重量份数混合配制而成：苦参醇提物3份、百部醇提物4份、花椒醇提物3份、狼毒醇提物2份，苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物4份、水溶性维生素1份、甘油4份、吐温80 4份、冰片2份、氮酮2份、丙二醇4份、90%乙醇35份、蒸馏水20份；所述苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物为苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比为2：4：8：1混合后进行水提所得的水提物。

6.一种制备权利要求1-5所述的一种防治动物疥螨病的复方中药透皮喷雾剂的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）有效成分提取：苦参、百部、花椒、狼毒分别用乙醇进行提取：苦参、百部、花椒、狼毒分别粉碎成100-200目的药粉，分别置于药粉重量5-10倍的95%的乙醇中，28℃、180rpm摇床中震荡提取2次，每次3d，过滤后合并滤液，滤液旋转蒸发仪浓缩，干燥后分别获得苦参醇提物、百部醇提物、花椒醇提物、狼毒醇提物；

苦楝、地肤子、五倍、栀子用蒸馏水进行提取：苦楝、地肤子、五倍、栀子按重量比例混合，粉碎成10-100目的药粉后置于10倍药粉重量的蒸馏水中，浸泡60min，砂锅煮沸40-50min，滤出药液，再加入6倍药粉重量的蒸馏水，继续煮沸40-50min，滤出药液，将2次药液混合后过滤，滤液浓缩、干燥后获得苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物；

（2）混合：按比例称取步骤（1）获得的苦参醇提物、百部醇提物、花椒醇提物、狼毒醇提物，以及苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物，苦参醇提物、百部醇提物、花椒醇提物、狼毒醇提物混合后用90%的乙醇溶解；苦楝、地肤子、五倍、栀子混合水提物用蒸馏水溶解；然后将乙醇溶液和水溶液混合搅拌均匀；

（3）在步骤（2）获得的混合液中按比例加入的水溶性维生素、甘油、吐温80、冰片、氮酮、丙二醇，在组织捣碎机中8000r/min 混合均匀，灌封即可。