CN102703343B - 桑氏链霉菌kj40菌株及其液体制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种桑氏链霉菌KJ40菌株，该菌株于2010年7月10日分离自四川雅安市雨城区老板山杨树根际。该菌株已于2012年4月13日保藏在中国北京市朝阳区中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.5996，分类命名为桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)。本发明筛选出的桑氏链霉菌KJ40新菌株为一种具有防病、促生多重功能的新菌株。可预防紫纹羽病的发生，显著提高杨树生长能力，大幅提升生产效益。桑氏链霉菌KJ40新菌株对紫纹羽病有治疗作用，能改善土壤生物活性，且施用一次可长期有效、能持续控病，大幅降低成本。
Description
技术领域
本发明涉及的是桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40新菌株及其液体制剂。
背景技术
紫纹羽病又称紫色根腐病，寄主范围广泛，达45科，76属，100多种，主要危害松、柏、杉、刺槐、杨、榆、桑、柳、苹果等。病原菌为担子菌亚门层菌纲、木耳目、木耳科、卷担子属的紫卷担子菌Helicobasidium purpureum(tul.)Pat.异名Helicobasidium inompa Tanaka.Jacz.称桑卷担菌，是一类重要的土传病害。目前对林木紫纹羽病的防治措施主要有，对苗木严格检疫，避免栽植带病苗木；加强栽培管理，增强树势；采用波尔多液、硫酸铜、硫酸亚铁、代森铵、福尔马林、福美砷药液进行灌根。但由于长时期的施用化学农药不仅会造成病原菌抗药性的增强，也会给人们的身体健康和生态环境带来严重伤害，因此针对土传根病有必要探索生物防治等新的防治途径，生物防治是生态学领域的一个应用学科分支，是基于生态平衡的原理，引进有益生物基因或基因产物，达到稳定、有效地防治靶标病(虫)，生物农药(biopesticides)是利用生物活体或者其代谢产物对有害生物进行防治的一类制剂，是生物防治的物质基础和重要手段。
发明内容
本发明提供一种具有防病、促生多重功能的桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40菌株。
该菌株于2010年7月10日分离自四川雅安市雨城区老板山杨树根际。该菌株已于2012年4月13日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO.5996，分类命名为桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)。
所述的桑氏链霉菌KJ40菌株的液体制剂，其制备方法为：①一级斜面种子：常规方法制作改良高氏一号斜面培养基，接种桑氏链霉菌KJ40后在26-28℃下培养48小时制成一级斜面种子；
②二级液体种子：改良高氏一号培养液经高压灭菌后，按100mL液体盛于300mL三角瓶比例装瓶，在无菌状态接种KJ40斜面种子，每瓶接种2支斜面种子，温度26-28℃，初始pH值7.0，120r/min振荡培养36h，制成桑氏链霉菌KJ40二级液体种子；
③液体发酵：改良高氏一号培养液，经高压灭菌后，按200mL液体盛于500mL三角瓶比例装瓶，在无菌状态接种上述桑氏链霉菌KJ40二级液体种子，接种量10％，温度26-28℃，初始pH值7.0，120r/min振荡培养72h，制成桑氏链霉菌KJ40液体制剂。
桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40新菌株，不仅能有效控制杨树紫根病，且能改善根际微生物环境，促进植物生长，具有防病促生优化根系微生态环境三重功能。
本发明筛选出的的桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40新菌株为一种具有防病、促生多重功能的新菌株。可预防紫纹羽病的发生，显著提高杨树生长能力，大幅提升生产效益。
桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40新菌株对紫纹羽病有治疗作用，能改善土壤生物活性，且施用一次可长期有效、能持续控病，大幅降低成本。
具体实施方式
以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。
(1)桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40液体制剂的发酵
①一级斜面种子：常规方法制作改良高氏一号斜面培养基(KNO31g，KH2PO40.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，NaCl0.5g，Fe2(S04)3.7H2O 0.01g，可溶性淀粉20g，琼脂17g，水1000ml)，接种桑氏链霉菌KJ40后在26-28℃下培养48小时制成一级斜面种子。
②二级液体种子：改良高氏一号培养液(KNO31g，KH2PO40.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，NaCl0.5g，Fe2(S04)3.7H2O 0.01g，可溶性淀粉20g，杨树根浸渍液1000ml)经高压灭 菌后，按100mL液体盛于300mL三角瓶比例(通氧控制)装瓶，在无菌状态接种KJ40斜面种子，每瓶接种2支斜面种子，温度26-28℃，初始pH值7.0，120r/min振荡培养36h，制成桑氏链霉菌KJ40二级液体种子。
③液体发酵：改良高氏一号培养液(KNO31g，KH2PO40.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，NaCl0.5g，Fe2(S04)3.7H2O 0.01g，可溶性淀粉20g，杨树根浸渍液1000ml)经高压灭菌后，按200mL液体盛于500mL三角瓶比例(通氧控制)装瓶，在无菌状态接种上述桑氏链霉菌KJ40二级液体种子，接种量10％(体积比)，温度26-28℃，初始pH值7.0，120r/min振荡培养72h，制成桑氏链霉菌KJ40液体制剂。平板法测定KJ40对杨树紫根病菌(Helicobasidium purpureum(Tul.)Pat抑菌率达到100％以上。
(2)制剂保存：瓶装制剂常温保存半年或低温(4度)1年半不影响防治和促生效果。
(3)田间施用：
①预防处理：未发病杨树用上述液体制剂100-200倍(体积比)稀释度沿根系幅面灌根，每株100毫升，每年春季施用一次，可防病促生、改善土壤微生物区系。
②防治处理：发病杨树按50-100倍(体积比)稀释度沿根系幅面灌根及附近土壤淋灌，每株200毫升，春、夏各一次，连续三年，可治病促生、改善土壤微生物区系。
表1 桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40预防和促生功能参数：未发病杨树林地(1年生)
表2桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40治疗和改善根系微生物环境参数：发病杨树林地(2年生)，处理2年后
应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (2)
1.一种桑氏链霉菌KJ40菌株，该菌株保藏在中国北京市朝阳区中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.5996，分类命名为桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)。
2.含有权利要求1所述的桑氏链霉菌KJ40菌株的液体制剂，其特征在于，其制备方法为：①一级斜面种子：常规方法制作改良高氏一号斜面培养基，接种桑氏链霉菌KJ40后在26-28℃下培养48小时制成一级斜面种子；
②二级液体种子：改良高氏一号培养液经高压灭菌后，按100mL液体盛于300mL三角瓶比例装瓶，在无菌状态接种KJ40斜面种子，每瓶接种2支斜面种子，温度26-28℃，初始pH值7.0，120r/min振荡培养36h，制成桑氏链霉菌KJ40二级液体种子；
③液体发酵：改良高氏一号培养液，经高压灭菌后，按200mL液体盛于500mL三角瓶比例装瓶，在无菌状态接种上述桑氏链霉菌KJ40二级液体种子，接种量10％，温度26-28℃，初始pH值7.0，120r/min振荡培养72h，制成桑氏链霉菌KJ40液体制剂。
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