CN102697757A - 对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑病药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑病药物中的应用，尤其涉及对羟基苄叉丙酮在制备治疗和/或预防脑损伤疾病或脑血管疾病的药物中的应用。本发明通过药理研究发现，对羟基苄叉丙酮用作制备治疗脑血管疾病药物应用时，对于脑缺血与脑再灌注损伤均有良好的治疗作用。本发明的研究从脑生理功能、神经细胞生化及病理形态学等方面表明对羟基苄叉丙酮是一个治疗效果好、毒副反应低的化合物，疗效优于现有的相关脑血管病药物，有可能发展成为治疗脑血管疾病、对抗脑缺血和再灌注损伤和脑损伤的新药。

Description

对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑病药物中的应用

技术领域

本发明涉及对羟基苄叉丙酮的一种新用途，具体涉及对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑病药物中的应用。

背景技术

脑病（encephalopathy）指任何脑器质性损害，系由遗传、先天性脑发育不全、脑外伤、脑肿瘤、脑出血、脑梗阻、感染、化学药物中毒等原因引起的大脑神经组织损伤的疾病。常见的脑病可以分为三大类：一是遗传、先天发育不良造成的小儿脑瘫，智力低下等；二是外伤造成的急性脑损伤后遗症、脑血管病造成的脑中风后遗症等；三是因中枢神经纤维损伤导致脑神经细胞衰老退化的慢性退行性疾病，包括老年痴呆症、脑萎缩、帕金森病等。

纵观各种脑病，由于神经信息传导通道（脑路）——神经纤维的堵塞，造成神经各种信息的传导不畅，致使脑神经细胞功能缺失，是脑病的病变本质。例如：中风是指由于脑血管堵塞或破裂导致神经纤维传导功能的损伤、堵塞、断裂，进而使神经细胞变性、损伤或死亡，出现偏瘫、失语等感觉、运动功能障碍；胎儿脑神经纤维发育受阻、不能促进神经细胞的分化成熟，新生儿缺血、缺氧，就造成以中枢性运动功能障碍为主的脑性瘫痪；大脑黑质神经元数量减少，合成多巴胺不足，就会导致帕金森病；信息传导通道--神经纤维的衰老与凋亡加剧，导致脑细胞的衰老（脑组织萎缩），就形成了老年性痴呆。

目前，国内外越来越多的报道指出早期治疗缺血性脑血管疾病的重要性，特别在发病3～6小时内。抗凝治疗(包括肝素和口服抗凝剂)长时期用于防止血栓的扩延和进展性脑血管病、短暂性脑缺血发作、椎—基底动脉血栓形成和预防脑栓塞再发，其疗效仍不确定，如使用不当，可增加颅内和全身出血的危险。降纤治疗仍处于研究阶段，降纤至何种程度，如何减少出血并发症的问题，尚待解决，其疗效也有待进一步评价。在介入治疗方面，据报道，颈动脉内膜切除术对防治短暂性脑缺血性发作已取得肯定疗效，对颈内动脉闭塞70%以上者，疗效相对较好。虽然这些介入性治疗，已引起越来越多的重视，但资料不多，包括颅内外血管经皮腔内血管成形术、血管内支架置入或与溶栓治疗结合，尚处于研究阶段，缺乏成熟经验。

颅脑创伤排全身创伤发生率第二位，但致死率和致残率却位居第一。颅脑创伤病人通常存在意识丧失、运动神经功能障碍、记忆功能障碍和精神功能异常。为了挽救病人的生命，改善他们的生存状态，临床医师常常使用各种脑保护药物，期盼能够促进病人脑功能的恢复。但目前部分常用药物临床疗效极差，有的甚至有害。

脑保护剂已成为当今研究的热点，在理论上有一定的依据，但迄今尚未找到经临床研究证明确定有效的制剂。

长期以来，临床上出现了大量所谓脑保护药物，此类药物的选择使用也存在着很大的盲目性。国外学者已经采用循证医学方法，将200多种脑保护药物用于治疗急性颅脑创伤病人，但未能发现任何一种临床有特效的药物。

根据上述研究结果，结合我国的基本国情和临床诊治实际情况，《中国颅脑创伤病人脑保护药物治疗指南》对以下10类药物提出如下意见：对超大剂量激素、镁制剂和超大量白蛋白提出了强烈不推荐使用的意见；而常规剂量按药典使用。对尼莫地平、谷氨酸受体拮抗剂、自由基清除剂、缓激肽拮抗剂和线粒体功能保护剂不推荐使用。因多种肽类脑神经营养药物治疗颅脑创伤病人的疗效缺乏一级临床循证医学证据，建议慎重使用。对经长期临床应用证明无不良反应，且价格便宜，药理作用明确的三磷酸腺苷、辅酶A、维生素B6和维生素C，建议推荐使用。

因此，临床上强烈盼望新型有效的脑保护药物的出现，用于预防和治疗脑病。

对羟基苄叉丙酮，其化学式为：C₁₀H₉O₂，分子量为162，其化学结构式（1）如下所示， 

（1）

目前尚未有对羟基苄叉丙酮应用于脑保护剂、用于预防和/或治疗脑病的报导，通过对羟基苄叉丙酮已知的性质无法推断其是否具有预防和/或治疗脑病的作用。

发明内容

本发明的目的在于提供对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑病药物中的应用。

本发明解决上述问题的技术方案为：

对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑病药物中的应用。

优选的，对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑损伤疾病药物中的应用。

优选的，对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑血管疾病药物中的应用。

优选的，脑血管疾病为脑缺血、脑缺血/再灌注损伤中的任一种。

优选的，脑血管疾病为脑出血。

优选的，对羟基苄叉丙酮与药物上可接受的载体和/或稀释剂混合，组成一种药物组合物。

优选的，所述药物组合物与其他药物合用在制备预防和/或治疗脑损伤疾病药物的应用。

优选的，所述药物组合物与其他药物合用在制备预防和/或治疗脑血管疾病药物的应用。

本发明所述脑缺血/再灌注损伤（cerebral ischemia-reperfusion injury）是指脑缺血致脑细胞损伤、恢复血液再灌注后，其缺血性损伤反而进一步加重的现象。

本发明的对羟基苄叉丙酮使用时，可以制成水剂、粉针、片剂或胶囊等，分别采用静脉注射、肌肉注射或口服的方法。根据不同的动物及实验模型，用量为0.1～80mg/kg。

本发明所述对羟基苄叉丙酮用于制备预防和/或治疗哺乳动物脑病药物。所述哺乳动物包括人。

本发明通过在体动物实验表明对羟基苄叉丙酮对脑缺血及缺血/再灌注损伤引起的脑梗塞有显著治疗作用。

本发明通过实验表明对羟基苄叉丙酮能降低血管通透性，抗脂质过氧化，保护受损脑细胞，从而发挥治疗缺血性脑血管疾病作用。

本发明还从神经生化、神经病理学和行为学三个方面，观察和研究对羟基苄叉丙酮对胶原酶所诱导的大鼠脑出血模型的保护作用。

本发明提供了对羟基苄叉丙酮在脑缺血再灌注所致小鼠血管性痴呆保护方面的应用。

本发明还通过在体动物实验表明对羟基苄叉丙酮单独和联合用药对大鼠脑缺血和脑损伤有显著保护作用。

本发明提供了注射用对羟基苄叉丙酮在脑保护方面的应用。

本发明的有益效果是：

本发明通过药理研究发现，对羟基苄叉丙酮用作制备治疗脑血管疾病药物应用时，对于脑缺血与脑再灌注损伤均有良好的治疗作用。本发明的研究从脑生理功能、神经细胞生化及病理形态学等方面表明对羟基苄叉丙酮是一个治疗效果好、毒副反应低的化合物，疗效优于现有的相关脑血管病药物，有可能发展成为治疗脑血管疾病、对抗脑缺血和再灌注损伤和脑损伤的新药。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明作进一步的说明，但并不局限如此。

实施例1

本发明涉及对羟基苄叉丙酮对培养脑神经细胞的作用实验。

1、实验材料

普通级Sprague Dawley大鼠18只，体重250～280g。多聚赖氨酸为Sigma公司产品；DMEM培养基为Gibco公司产品；其余试剂均为分析纯。

2、神经细胞原代培养

将怀孕15d大鼠水合氯醛麻醉，75％乙醇消毒胸腹部，在无菌条件下取出胎鼠，剥出，分离两侧皮层组织，用手术刀切成糜状，移入含0.125％胰蛋白酶的磷酸缓冲液中消化30 min(37℃)后弃去消化液，加入含10％胎牛血清，10％马血清，100U/ml青霉素，100U/ml链霉素的DMED培养液，用小口径吸管反复吹打分散，200目细胞筛过滤后，以DMEM调整细胞浓度至10⁵个/m1，接种至预先涂有0.0l％多聚赖氨酸的培养皿中，每皿2 m1，置CO₂培养箱中37℃孵育，于培养第3天在培养液中加入细胞分裂抑制剂阿糖胞普储备液以抑制非神经元细胞的过度增殖，作用48h后换新鲜培养液，以后每周换液2次，每次更换半量液。

3、NMDA诱导神经细胞损伤

细胞培养至14d后，随机分五组：（1）正常对照组；（2）N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA) 50mmol/L损伤组；（3）NMDA+对羟基苄叉丙酮（10mmol/L)；（4）NMDA+对羟基苄叉丙酮（100mmol/L)；（5） NMDA+神经节苷脂（Ganglioside，GM,50mmol/L）对照组。将（3)组～（5）组所用的对羟基苄叉丙酮、神经节苷脂分别与低血清DMEM(5%胎牛血清，5%马血清，30 mmol/L HEPES)混合配制成含药低血清DMEM；实验各组分别换含不同药物的低血清DMEM，其中，1）组和2）组使用不含药物的低血清DMEM，实验各组继续培养6h后除1）组外均加终浓度为50mmol/L NMDA，孵育12h后观察细胞形态，计数200个细胞，计算细胞死亡率。

4、结果

4.1对培养神经细胞形态变化的影响

正常神经细胞培养至14d时，生长良好，胞体呈锥形、梭形或三角形，突触粗而长，呈树根状交织成网；当细胞在含50mmol/L NMDA的培养基中孵育12h时，细胞出现肿胀、轮廓模糊，神经元突触断裂、消失、甚至细胞崩解；如细胞同时与10、100mmol/L对羟基苄叉丙酮孵育，则细胞损伤程度明显减轻，细胞形态基本保持完整，但细胞密度有所降低，仍可见突触断裂等现象；表明对羟基苄叉丙酮对NMDA诱导的大鼠神经细胞损伤有显著的保护作用。50mmol/L神经节苷脂的保护作用与10mmol/L对羟基苄叉丙酮相当。

4.2 对培养神经细胞死亡率影响

各组对培养神经细胞死亡率的影响结果见表1，由表可知，神经细胞在含50mmol/L NMDA的培养基中孵育12h后，台盼蓝染色着色细胞明显增多(NMDA组43.5% vs正常对照组7.9％，P<0.001)，提示细胞死亡率增加；于培养基中同时加入10、100 mmol/L对羟基苄叉丙酮(分别为33.8％、19％)可明显降低细胞死亡率，与NMDA组相比有显著差异。且10mmol/L对羟基苄叉丙酮的保护作用优于50mmol/L神经节苷脂。故对羟基苄叉丙酮对脑神经细胞有显著的保护作用。

实施例2

本实验涉及对羟基苄叉丙酮对闭合性脑外伤小鼠的保护作用实验。

1、实验仪器

跳台实验自动记录仪，中国医学科学院药物所仪电室；荧光分光光度计，日本HITACHI公司；酶标仪。

2、实验动物

清洁级昆明种小鼠，体重20～22g。

3、实验

取小鼠60只，随机分为六组：（1）正常对照组；（2）模型组；（3）对羟基苄叉丙酮 1 mg/kg（药物使用时以5%葡萄糖注射液稀释至合适浓度）组；（4）对羟基苄叉丙酮2 mg/kg组；（5）对羟基苄叉丙酮4 mg/kg组；（6）ATP（三磷酸腺苷二钠）4mg/kg组，每组10只。

将（2）组～（6）组小鼠禁食16小时后造成小鼠闭合性脑外伤模型，（3）组～（6）组分别静脉给药，24小时后所有组剥取鼠脑，称量湿重，70℃烘干24小时，称干重，计算脑含水量；脑含水量高于正常值表示脑部水肿，各组对闭合性脑外伤小鼠脑水肿的影响结果见表2。

由表2可知，由模型组与正常对照组比较，闭合性脑外伤造成小鼠脑严重水肿，给予不同剂量的对羟基苄叉丙酮，小鼠脑水肿有不同程度的减轻，且呈剂量依赖性。对羟基苄叉丙酮作用优于ATP。可见，对羟基苄叉丙酮对闭合性脑外伤小鼠有显著的治疗作用。

实施例3

本实施例涉及对羟基苄叉丙酮对血管性痴呆小鼠的神经保护作用实验。

药品及实验仪器：对羟基苄叉丙酮：用时以5%葡萄糖注射液稀释至合适浓度。跳台实验自动记录仪，中国医学科学院药物所仪电室产品；荧光分光光度计，日本HITACHI公司产品；酶标仪。

实验动物：清洁级昆明种小鼠，体重20～22g。

1、对羟基苄叉丙酮对脑缺血再灌注小鼠学习记忆功能障碍的改善作用

将小老鼠50只，随机分为五组：（1）假手术组；（2）模型组；（3）对羟基苄叉丙酮 1 mg/kg组；（4）对羟基苄叉丙酮2 mg/kg组；（5）对羟基苄叉丙酮4 mg/kg组；每组10只。

禁食16小时后建立小鼠缺血再灌注所致痴呆模型，具体操作如下：小鼠以戊巴比妥钠(60 mg/kg，ip)麻醉后，仰卧位固定。颈正中切口，分离双侧颈总动脉，并穿以零号丝线。双侧颈总动脉阻断血流10 min，然后恢复血流10 min，如此重复3次，缝合皮肤。置小鼠于正常饲养条件。假手术组只分离双侧颈总动脉。

缺血再灌注后10 min，尾静脉注射药物，缺血再灌注24h后，第2次给药。给药半小时后进行跳台实验。将待测小鼠放入跳台仪中，适应环境3 min，然后向底部栅板通电，观察小鼠跳上高台时间(反应时间)和5 min内小鼠由高台跳下受到电击的次数(训练期错误次数)。24 h后，再次给药，然后进行第2次跳台实验测定记忆获得功能。将小鼠放于实验仪高台上，底部栅板同时通电，记录小鼠跳下高台的时间(潜伏期)和5 min内受到电击次数(重测期错误次数)。每次缺血再灌注后给药方法：除假手术组和模型组外其余组小鼠尾静脉注射不同浓度对羟基苄叉丙酮。各组对脑缺血再灌注小鼠学习记忆功能的影响结果见表3。

结果如表3所示，由模型组与假手术组结果对比可知，重复脑缺血再灌注可以使小鼠出现明显的学习记忆障碍，反应时间延长，错误次数增加，潜伏期缩短。对羟基苄叉丙酮对缺血再灌注引起的学习记忆障碍有改善作用，减少反应时间，延长潜伏期，减少测试期和重测期错误次数，与模型组比较有显著性差异(*P<0.05或**P<0.01)。

2、对羟基苄叉丙酮对脑缺血再灌注小鼠脑SOD活性、MDA和GSH含量的影响

小鼠缺血再灌注方法和给药方式同上，缺血再灌注完成后，断头处死，于0℃下取出大脑用磷酸缓冲液制成匀浆，邻苯三酚自氧化法测定SOD的活性，TBA法测定MDA的含量，DTNB法测定GSH的含量，考马斯亮蓝定量蛋白质。各检测指标见表4。

 由表4可知，由模型组与假手术组结果对比可知，重复脑缺血再灌注可以使小鼠脑匀浆SOD活性下降，MDA含量升高，GSH含量降低。给予不同剂量对羟基苄叉丙酮可抑制缺血再灌注小鼠脑组织MDA的升高，增加GSH的含量，提高SOD的活性，与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。

实施例4

本实施例涉及对羟基苄叉丙酮用于治疗感染性脑水肿的在体动物实验。

将体重200～220g的SD大鼠30只，随机分成3组：生理盐水对照组(NS,n=10)；百日咳菌液模型组(PB,n=10)；对羟基苄叉丙酮预处理百日咳菌液组(JBTA,n=10)。

大鼠颈正中切口，分离左颈总动脉，颈外动脉，颈内动脉及分支，结扎翼腭动脉和枕动脉。夹闭颈外动脉后，用1ml注射器4.5号针头于左颈总动脉穿刺向左颈内动脉注射百日咳菌液0.2ml/kg(百日咳菌液由北京生物制品研究所提供的灭活菌液，含菌10.8×109/ml)，15s内注射完毕。NS组则用同法注射等量的无菌生理盐水。对羟基苄叉丙酮组在注百日咳菌液前48h每天静脉注射0.5mg/kg，连续2d。各组大鼠注菌或生理盐水4h后断头处死。

检测各组大鼠脑的脑含水量及钠、钾离子的含量，检测结果见表5。采用ELISA法与Griess法分别测大鼠脑组织匀浆中IL-1β、TNF-α和NO含量，检测结果见表6。

由表5可知，对羟基苄叉丙酮预处理后能显著降低百日咳菌液脑水肿大鼠的脑含水量及钠离子的含量，增加钾离子含量。表明对羟基苄叉丙酮预处理对大鼠感染性脑水肿有保护作用。

由表6可知，对羟基苄叉丙酮预处理组IL-1β、TNF-α及NO含量显著降低(P＜0.01)。

    可见，PB组注菌后4h大鼠脑含水量增加、Na⁺含量增加，K⁺含量降低，表明已成功的建立了大鼠感染性脑水肿模型；同时脑组织中IL-1β、TNF-α及NO的含量增加，与相应NS对照组比较差异有极显著性(P＜0.01)。可见这些因子与感染性脑水肿关系密切，上述因子的大量生成可能加重感染性脑损伤。而大鼠经对羟基苄叉丙酮预处理后再制成感染性脑水肿模型，与未作预处理的大鼠感染性脑水肿模型比较，预处理后脑组织的IL-1β、TNF-α及NO的含量明显下降，同时脑含水量，Na+含量降低，K+含量增加，与模型组比较，差异有极显著性(P＜0.01)。说明对羟基苄叉丙酮可减少IL-1β、TNF-α及NO的生成量，对感染性脑水肿大鼠有保护作用。

实施例5

本实施例涉及对羟基苄叉丙酮对局部脑缺血大鼠的保护作用实验。

实验试剂：尼莫地平注射液，山东新华制药股份有限公司产品，规格：10 mg/50 ml，TUNEL试剂盒：南京建成生物工程开发公司。

实验动物：普通级SD大鼠60只，体重250g-280g，

1、局部脑缺血模型制作

动物随机分为假手术组，模型组，尼莫地平组(Nim，1 mg/kg)，对羟基苄叉丙酮组（0.5、1、2mg/kg)，每组10只。各组小鼠禁食16小时后，水合氯醛(350 mg/kg，ip)麻醉，分离右侧颈总动脉，夹闭颈内、颈总动脉，颈外动脉近心端及远心端结扎，中间剪断。将颈外动脉游离端拉至与颈内动脉成一条直线，将栓线(选用直径0.24尼龙线，长度5.0cm)由颈外动脉插入至颅内，遇轻微阻力时停止，插入深度约为2 cm。结扎颈外动脉开口，并打开颈总动脉动脉夹，消毒缝合伤口，造成右侧大脑中动脉局灶性缺血模型（MACO）；假手术组仅进行右侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉的分离(以上实验均在23～25℃进行)。各组动物手术完成30 min后除假手术组、模型组外分别给予相应药物。

2、神经行为评分和TTC染色测定梗死面积

24小时后观察并记录大鼠的行为障碍：(1)提鼠尾观察前肢屈曲情况，如双前肢对称伸向地面，计为0分，如手术对侧前肢出现腕屈曲计为1分，肘屈曲计为2分，肩内旋计为3分，既有腕屈曲和／或肘屈曲，又有肩内旋者，计为4分。(2)将动物置于平地面上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力。如双侧阻力对等且有力，计为0分，如向手术对侧推动时阻力下降者，根据下降程度不同分为轻、中、重三度，分别计为l，2和3分。(3)将动物双前肢置一金属网上，观察双前肢的肌张力。双前肢肌张力对等且有力者计为0分。同样根据手术对侧肌张力下降程度不同计为1，2和3分。(4)动物有不停地向一侧转圈者，计为1分。根据标准评分，满分为11分，分数越高，表示动物行为障碍越严重。

行为评分后处死大鼠，取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，冠状切成5片，脑片用红四氮唑(TTC)染色，正常组织经染色后呈红色，梗塞组织呈白色，染色后照相，用中国航空航天大学病理图像分析软件求梗塞面积比。

各组对局部脑缺血大鼠神经行为、脑梗死面积的影响结果见表7所示。由表可知，缺血24小时后，大鼠表现出明显的行为障碍，大鼠脑组织也出现明显的灶状缺血坏死区，达到全脑的25％左右；给予不同剂量的对羟基苄叉丙酮(0.5、1、2mg/kg)，动物行为障碍有不同程度的减轻，大鼠脑缺血区也有明显缩小。

   

 病理观察: 经TTC染色后的脑片置10％福尔马林中固定，经脱水、浸蜡、包埋、切片等步骤后，制成8 μm厚的组织切片，甲苯胺蓝染色，在光学显微镜下进行检查，并进行细胞计数。计数的方法：选择每只大鼠视交叉与漏斗柄连线中点处的病理切片，以固定范围的皮层下基底节为观察对象，以细胞核消失、细胞体暗染的坏死神经元为计数对象，用细胞计数器，计算坏死神经元数占总神经元数的百分比。

数据用x±SD表示，组内给药前后、组间均以参比差值法(ANOVA)进行统计学处理。检测结果见表8。

病理检查结果：MCAO后24 h，模型组的大鼠患侧半球MCA供血区苍白、无光泽，脑病理切片显示，于MCA闭塞侧脑组织有严重损伤的坏死中心区和轻中度损伤的半影区及其以外的外周区，其中半影区对缺血性变化较为敏感，在模型组大鼠表现为大量神经元周围间隙扩大，出现散在的暗染神经元，神经细胞出现不同程度的皱缩。对侧脑组织未见病理改变。给予对羟基苄叉丙酮组动物有不同程度的减轻。我们以相同切面的脑片半影区来进行细胞计数。由表8可见，对羟基苄叉丙酮治疗组皮层、纹状体神经元坏死百分比明显减少，与模型组比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。

实施例6

本实施例涉及对羟基苄叉丙酮用于治疗脑缺血再灌注损伤疾病的动物实验。

采用小鼠线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型，缺血2h,再灌24h,证明对羟基苄叉丙酮对缺血再灌注损伤脑的保护作用。

将小鼠用10％水合氯醛(350 mg/kg)腹腔注射麻醉，静注给予1mg/kg，5mg/kg对羟基苄叉丙酮或20 u /kg的辅酶A(CoA)，按实施例5所述方法制作大脑中动脉缺血。术后2h将尼龙线从颈内动脉中拔出，直至头端达颈总动脉分叉处。再灌注24h。假手术组除不插线外，其余步骤同上。再灌注24h后存活的小鼠断头取脑，迅速置-20℃冷冻箱中5 min后取出，在操作台上迅速由前向后切成厚度为2.0mm的冠状切片，将切片立即置于1％的TTC磷酸盐缓冲液中，避光常温孵育30 min。每隔10 min翻动脑片使均匀接触到染色液，扫描观察染色结果。各组对脑缺血模型小鼠脑梗死面积的影响见表9。

脑梗死体积观察：由于TTC是脂溶性光敏感复合物，是呼吸链中吡啶-核苷结构酶系统的质子受体，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白。因此，假手术组(A)脑组织无梗塞，由表9可知，手术组(B)缺血侧脑组织有明显梗塞现象，脑片梗塞区占整个冠面的百分比为26.7±2.2(％)。对羟基苄叉丙酮治疗组(C)可显著缩小缺血侧脑组织梗塞面积，与手术组相比有非常显著差异(P<0.01)，5mg/kg对羟基苄叉丙酮组效果优于CoA组。可见，对羟基苄叉丙酮对小鼠脑缺血/再灌注损伤引起的脑梗塞有显著保护作用。

实施例7

本实施例涉及对羟基苄叉丙酮联合其他药物用于治疗脑缺血实验。

模型制备、给药方法及指标检测同实施例5。对羟基苄叉丙酮联合NGF(注射用鼠神经生长因子)、Vit B6（维生素B6）治疗脑缺血。对羟基苄叉丙酮剂量1mg/kg iv，大鼠脑损伤后即刻肌肉注射NGF 250U， Vit B6剂量0.2mg/kg iv。联合用药对局部脑缺血大鼠的影响结果见表10。由表10可知，对羟基苄叉丙酮与与其他药物合用效果更佳。

实施例8

本实施例涉及注射用对羟基苄叉丙酮用于治疗缺血再灌注性脑血管疾病的在体动物实验。

本实施例注射用对羟基苄叉丙酮冻干制剂处方及工艺如下：

处方(5ml/瓶×1000瓶)：

对羟基苄叉丙酮原料药    10.0g

甘露醇               100.0g

将以上原料溶于注射用水中，同时用盐酸调节pH至3，用注射用水定容至5000ml，得对羟基苄叉丙酮制剂，分装成1000瓶，5ml/瓶。

将配制、分装好的对羟基苄叉丙酮制剂放入冻干箱样品室内→-30℃预冻→-15℃升华干燥→25℃再干燥→自动压塞→盖铝盖→压盖→质检。

成品按注射用对羟基苄叉丙酮质量标准检验，应符合规定。

模型制备及给药方法同实施例6，实验各组脑缺血模型小鼠的梗死面积结果见表11。由表11可知，对羟基苄叉丙酮（冻干制剂）对小鼠脑缺血/再灌注损伤引起的脑梗塞有显著保护作用，且作用优于ATP及依达拉奉。

Claims (7)

1.对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑病药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：脑病为脑损伤疾病或脑血管疾病。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：脑血管疾病为脑缺血、脑缺血/再灌注损伤中的任一种。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：脑血管疾病为脑出血。

5.根据权利要求1～4任一项所述的应用，其特征在于：对羟基苄叉丙酮与药物上可接受的载体和/或稀释剂混合，组成一种药物组合物。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述药物组合物与其他药物合用在制备预防和/或治疗脑损伤疾病药物的应用。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述药物组合物与其他药物合用在制备预防和/或治疗脑血管疾病药物的应用。