CN102676389B - 一种便于随时取种的食用菌菌种保藏方法及装置 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种便于随时取种的食用菌菌种保藏方法及装置，方法包括以下步骤：1）制作试管：试管由盆式底座及立设于盆式底座内的子母套环管构成，所述子母套环管包括两个以上大径端朝上的锥台形套筒，所述各锥台形套筒沿上下方向同轴插接并密封配合，其中位于最下层的一个锥台形套筒与盆式底座密封配合；2）配置浆料培养基；3）装料；4）灭菌；5）密封：步骤4）灭菌结束后，在试管冷却之前将相邻两锥台形套筒之间及最下层的锥台形套筒与盆式底座之间通过石蜡密封；6）接种培养：满管后在接种箱内消毒并重新加紧塞子，放入带循环扇的冰箱或冰柜中在4℃环境下保藏。解决了被保藏的菌种在部分取出时易污染剩余菌种的问题。

Description

一种便于随时取种的食用菌菌种保藏方法及装置
技术领域
本发明涉及菌种保藏领域，尤其是一种便于随时取种的食用菌菌种保藏方法及装置。
背景技术
菌种是重要的生物资源，是菌类及其相关产品生产的重要因素。菌种质量的高低及遗传性状的优劣决定着食用菌的生产能力。在相同的栽培条件下，良种比一般品种可增产三成以上，甚至成倍增长。但选择出的优良菌种，如果管理不好，就会引起衰退，污染杂菌，造成减产，因此，保藏菌种和选育菌种具有同样重要的意义。在生产中由于原种和栽培种数量大，不易保藏，菌种生产者通常以母种形式保藏食用菌菌种，栽培前再进行扩接用于生产。菌种通过保藏，控制其生长，使优良菌种不衰退，不变异，不死亡，不被杂菌污染，以保证在生产上长期应用。
菌种保藏是在人为创造条件下，使菌种的新陈代谢活动处于相对静止的状态，从而较长时间保持菌种的生命力和原有性状。所以为了保持其优良性状不变，应当及时对其进行保藏，目前食用菌菌种保藏方法主要有：液氮低温保藏法、斜面定期移植法、液体石蜡保藏法、砂土管保藏法、生理盐水保存法以及自然基质保藏法等，其中自然基质保藏法又包括：木屑基质保藏法、麦粒保藏、麸皮保藏法。
目前，液氮低温保藏法是目前较为先进的一种方法，但费用较高，国外保藏机构多采用此法；在我国生产或研究中，食用菌菌种仍然主要采用试管或瓶保藏法，即需将需要保藏的菌种接种在适宜的斜面培养基上，适温培养，当菌丝健壮地长满斜面时取出，放在3-5℃低温干燥处或4℃冰箱、冰柜中保藏，每隔4-6个月时间移植转管一次，主要缺点有：耗时长且保存时间较短、菌种稳定性不好易失活，易发生变异或退化，转接及多次取种，尤其是部分取种过程中操作不当而造成菌种污染。
发明内容
本发明的目的在于提供一种便于随时取种的食用菌菌种保藏方法，以解决被保藏的菌种在部分取出时易污染剩余菌种的问题，同时发明的目的还在于提供用于实施上述方法的装置。
为了解决上述问题，本发明的便于随时取种的食用菌菌种保藏方法采用以下技术方案：一种便于随时取种的食用菌菌种保藏方法，包括以下步骤：1）制作试管：试管由盆式底座及立设于盆式底座内的子母套环管构成，所述子母套环管包括两个以上大径端朝上的锥台形套筒，所述各锥台形套筒沿上下方向同轴插接并密封配合，其中位于最下层的一个锥台形套筒与盆式底座密封配合； 2）配置浆料培养基；3）装料：将上述步骤2）中配置的培养基装入步骤1）所述试管并填实压紧，清洁最上层的锥台形套筒的上端口后用塞子将试管的上端用塞子密封；4）灭菌：在121℃环境下进行灭菌2-2.5小时；5）密封：步骤4）灭菌结束后，在试管冷却之前将相邻两锥台形套筒之间及最下层的锥台形套筒与盆式底座之间通过石蜡密封；6）接种培养：满管后在接种箱内消毒并重新加紧塞子，放入带循环扇的冰箱或冰柜中在4℃环境下保藏。
步骤2）中所述的培养基的配方如下：木屑粉68%，发酵牛粪粉末20%，麸皮10%，石膏2%，料水质量比1：1.6-1： 2。
步骤6）中子母套环管在重新加紧塞子之后放入所述冰箱或冰柜之前通过保鲜膜包裹至少两层。
所述塞子为锥台形的硅胶塞。
所述锥台形套筒采用聚丙烯塑料材质，其厚度1-3mm，长度4-5cm，大口端内径1.5-2cm，小口端内径1-1.5cm，大、小口端内径之差大于10mm且小于15mm。
本发明的便于随时取种的食用菌菌种保藏装置采用以下技术方案：一种便于随时取种的食用菌菌种保藏装置，包括试管，所述试管包括盆式底座及立设于所述盆式底座内的子母套环管，所述子母套环管包括两个以上大径端朝上的锥台形套筒，所述各锥台形套筒沿上下方向同轴插接并密封配合，其中位于最下层的一个锥台形套筒与盆式底座密封配合，位于最上层的锥台形套筒的上端设有用于封闭试管的塞子。
所述盆式底座具有锥筒形的立壁，位于最下层的锥台形套筒的外壁面与所述立壁的内壁面密封配合。
所述塞子为锥台形的硅胶塞。
所述锥台形套筒为聚丙烯塑料筒，其厚度1-3mm，长度4-5cm，大口端内径1.5-2cm，小口端内径1-1.5cm，大小口内径之差大于10mm且小于15mm。
由于本发明的便于随时取种的食用菌菌种保藏方法是通过所述的试管来保藏菌种，所述的试管具有与所述盆式底座密封配合的子母套环管，所述子母套环管由两个以上所述锥台形套筒密封插合而成，因此当需要将所述试管内的菌种部分取出时，只需在无菌环境下根据所需菌种的数量将位于子母套环管上端的一节或两节以上锥台形套筒拧下便可将位于被拧下的锥台形套筒内的菌种取下，其余的菌种仍通过无菌的塞子密封封闭即可避免被污染、失活，从而保持优良性能，解决了被保藏的菌种在部分取出时易污染剩余菌种的问题。
由于本发明的便于随时取种的食用菌菌种保藏装置具有所述的试管，所述的试管具有与所述盆式底座密封配合的子母套环管，所述子母套环管由两个以上所述锥台形套筒密封插合而成，因此当需要将所述试管内的菌种部分取出时，只需在无菌环境下根据所需菌种的数量将位于子母套环管上端的一节或两节以上锥台形套筒拧下便可将位于被拧下的锥台形套筒内的菌种取下，其余的菌种仍通过无菌的塞子密封封闭即可避免被污染、失活，从而保持优良性能，解决了被保藏的菌种在部分取出时易污染剩余菌种的问题。
附图说明
图1是本发明的便于随时取种的食用菌菌种保藏方法中所用的试管加上塞子后的结构示意图；
图2是本发明的便于随时取种的食用菌菌种保藏装置的实施例1的结构示意图。
具体实施方式
便于随时取种的食用菌菌种保藏方法的实施例1，一种便于随时取种的食用菌菌种保藏方法，包括以下步骤：
1）制作试管：试管的结构如图1所示，包括盆式底座1及立设于盆式底座1内的子母套环管，子母套环管包括两个以上大径端朝上的锥台形套筒2，锥台形套筒2的内孔同样为上大、下小的锥孔，各锥台形套筒2采用聚丙烯塑料材质，锥台形套筒厚度1-3mm，长度4-5cm，大口端内径1.5-2cm，小口端内径1-1.5cm，但大小口内径之差大于10mm且小于15mm；各锥台形套筒2沿上下方向同轴插接并密封配合，其中位于最下层的一个锥台形套筒与盆式底座1密封配合；盆式底座1与子母套环管一起围成一料腔，该料腔以子母套环管的各锥台形套筒为单位分段，具体地说，从上向下每拧下一节锥台形套筒，则该被拧下的锥台形套筒内含有的菌种随之被拧下。
2）配置培养基；本实施例中，培养基的配方如下：木屑粉68%，发酵牛粪粉末20%，麸皮10%，石膏2%，料水质量比1：1.6-1： 2，木屑颗粒为0.5-1.5mm，有利于压实保水；发酵的牛粪粉及麸皮的加入，使得营养搭配能较好的满足绝大多数的食用菌的营养需求；较大的含水量可在紧密压实培养基后，培养基表面基本能看到水，这样的含水量也为后期的长久保存提供保障。
当然，在其它实施例中，培养基还可以为现有技术中用于培养食用菌的其它常规培养基。
3）装料：将上述步骤2）中配置的培养基装入步骤1）所述试管并填实压紧，在挤压时以表面基本能看到水为好，清洁最上层的锥台形套筒的上端口后用塞子将试管的上端用塞子密封；本实施例中采用的塞子为硅胶塞，呈上大下小的锥台形。
4）灭菌：在121℃环境下进行高压灭菌2-2.5小时；
5）密封：步骤4）灭菌结束后，及时从灭菌锅内取出，以免余热烘干试管，在试管冷却之前将相邻两锥台形套筒之间及最下层的锥台形套筒与盆式底座之间通过石蜡密封，从而进一步保证子母套环管上及子母套环管与盆式底座的连接处均无间隙。
6）接种培养：常规接种培养方式接种，满管后于接种箱内消毒并重新加紧塞子，重新加紧塞子可让内部的培养基处于缺氧状态，并防止失水，母套环管在重新加紧塞子之后通过保鲜膜包裹至少两层，最后放入带循环扇的冰箱或冰柜中在4℃环境下保藏。
在需要取种进行邮寄或外卖时，只需在无菌条件下，根据所需菌种数量拧掉最上端的一节或两节以上所述锥台形套筒，则位于被拧掉的锥台形套筒内的菌种被同时拧下，然后通过无菌封口套环套上，随对应锥台形套筒被拧下的菌种便可邮寄；通过在被拧断后的子母套环管的最上端塞无菌的塞子即可防止剩余的菌种不被污染。当需要转接菌种时，将子母套环管上端的薄膜打开翻卷在子母套环管上，在酒精灯上方的无菌区去掉塞子，用火焰灼烧过的接种针钩取木屑粉菌种即可转管或培养皿，根据实验，三年内成活率达100%。
便于随时取种的食用菌菌种保藏装置的实施例1，如图2所示，包括试管，试管包括盆式底座，盆式底座呈盆形，具有位于底部的底板11-1及立设于底板上表面上的立壁11-2，立壁11-2呈上大下小的锥筒形，盆式底座的内腔呈上大下小的锥台形，盆式底座内立设有子母套环管，子母套环管由两个以上锥台形套筒12密封插接而成，具体地说，即各锥台形套筒12均呈上大下小的锥台形并具有上大下小的锥台形通孔，各锥台形套筒12之间从下向上层叠设置，其中任意相邻的两锥台形套筒12中位于上方的一个的外壁面与位于下方的一个的内壁面密封配合，锥台形套筒12为聚丙烯塑料筒，其锥台形套筒厚度1-3mm，长度4-5cm，大口端内径1.5-2cm，小口端内径1-1.5cm，但大小口内径之差大于10mm且小于15mm；本实施例中，各锥台形套筒的上端口直径1.5cm，下端口直径1.2cm，高3cm，各锥台形套筒的形状及大小均与盆式底座的立壁形成的锥筒的形状及大小相同，盆式底座与子母套环管一起围成一料腔，该料腔以子母套环管的各锥台形套筒为单位分段，具体地说，从上向下每拧下一节锥台形套筒，则该被拧下的锥台形套筒内的物料随之被拧下；位于最上层的锥台形套筒的上端口通过塞子13塞紧密封，塞子13为锥台形的硅胶塞。

Claims (9)

1.一种便于随时取种的食用菌菌种保藏方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）制作试管：试管由盆式底座及立设于盆式底座内的子母套环管构成，所述子母套环管包括两个以上大径端朝上的锥台形套筒，所述各锥台形套筒沿上下方向同轴插接并密封配合，其中位于最下层的一个锥台形套筒与盆式底座密封配合；
2）配置浆料培养基；
3）装料：将上述步骤2）中配置的培养基装入步骤1）所述试管并填实压紧，清洁最上层的锥台形套筒的上端口后用塞子将试管的上端用塞子密封；
4）灭菌：在121℃环境下进行灭菌2-2.5小时；
5）密封：步骤4）灭菌结束后，在试管冷却之前将相邻两锥台形套筒之间及最下层的锥台形套筒与盆式底座之间通过石蜡密封；
6）接种培养：满管后在接种箱内消毒并重新加紧塞子，放入带循环扇的冰箱或冰柜中在4℃环境下保藏；
使用时，从上到下每拧下一节锥台形套筒，则该被拧下的锥台形套筒内含有的菌种随之被拧下。
2.根据权利要求1所述的便于随时取种的食用菌菌种保藏方法，其特征在于，步骤2）中所述的培养基的配方如下：木屑粉68%，发酵牛粪粉末20%，麸皮10%，石膏2%，料水质量比1：1.6-1：2。
3.根据权利要求1所述的便于随时取种的食用菌菌种保藏方法，其特征在于，步骤6）中子母套环管在重新加紧塞子之后放入所述冰箱或冰柜之前通过保鲜膜包裹至少两层。
4.根据权利要求1所述的便于随时取种的食用菌菌种保藏方法，其特征在于，所述塞子为锥台形的硅胶塞。
5.根据权利要求1所述的便于随时取种的食用菌菌种保藏方法，其特征在于，所述锥台形套筒采用聚丙烯塑料材质，其厚度1-3mm，长度4-5cm，大口端内径1.5-2cm，小口端内径1-1.5cm，大、小口端内径之差大于10mm且小于15mm。
6.一种便于随时取种的食用菌菌种保藏装置，其特征在于，包括试管，所述试管包括盆式底座及立设于所述盆式底座内的子母套环管，所述子母套环管包括两个以上大径端朝上的锥台形套筒，所述各锥台形套筒沿上下方向同轴插接并密封配合，其中位于最下层的一个锥台形套筒与盆式底座密封配合，位于最上层的锥台形套筒的上端设有用于封闭试管的塞子；使用时，从上到下每拧下一节锥台形套筒，则该被拧下的锥台形套筒内含有的菌种随之被拧下。
7.根据权利要求6所述的便于随时取种的食用菌菌种保藏装置，其特征在于，所述盆式底座具有锥筒形的立壁，位于最下层的锥台形套筒的外壁面与所述立壁的内壁面密封配合。
8.根据权利要求6所述的便于随时取种的食用菌菌种保藏装置，其特征在于，所述塞子为锥台形的硅胶塞。
9.根据权利要求6所述的便于随时取种的食用菌菌种保藏装置，其特征在于，所述锥台形套筒为聚丙烯塑料筒，其厚度1-3mm，长度4-5cm，大口端内径1.5-2cm，小口端内径1-1.5cm，大小口内径之差大于10mm且小于15mm。
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