CN102649943B - 一种低温条件下高效降解苯胺的菌 - Google Patents
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Abstract
一种低温条件下高效降解苯胺的菌，它涉及一种降解苯胺的菌。它为低温条件下高效降解苯胺的菌N1，属于哈特假单胞菌属(Pseudomonas huttiensis)新种，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.5844，保藏日期为2012年3月5日。本发明低温条件下高效降解苯胺的菌N1，具有高效降解苯胺的功能，当苯胺浓度达到0.5g/L时，该株菌N1可在48h时其降解率可达94.2％，且不造成二次污染。本发明一株低温条件下高效降解苯胺的菌为生物处理低温含苯胺废水的研究奠定了物质基础，具有较高的应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及一种降解苯胺的菌。
背景技术
我国北方地区室外温度在10℃以下的时间大约占全年的一半，因此找到能够在低温环境下能够降解污染物的微生物具有重要意义。
苯胺作为一种重要的化工原料，在杀虫剂、染料、橡胶、塑料和药物等的合成中需要大量使用。近年来，越来越多的苯胺废水排放到上壤和自然水体中，因具严重污染环境并且具有致畸、致癌、致突变效应而受到人们的广泛关注。已被美国EPA列为优先控制的129种污染物之一，我国以及其它各国也将苯胺列为严重污染环境和危害人体健康的环境优先控制污染物。随着化工工业的发展，对苯胺的需求呈明显上升趋势，由此进入自然环境的量也会越来越多，对环境的毒害也会越来越大，已经成为环境保护的一大难题。
目前，含苯胺污水生物处理中污染物去除效果差，物理化学方法处理又存在成本高、易造成二次污染的缺陷的问题。
发明内容
本发明提供了一种低温条件下高效降解苯胺的菌；目的是解决目前含苯胺污水生物处理中污染物去除效果差，物理化学方法处理又存在成本高、易造成二次污染的缺陷的问题。
低温条件下高效降解苯胺的菌，它为低温条件下高效降解苯胺的菌N1，属于哈特假单胞菌属(Pseudomonas huttiensis)新种，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.5844，保藏日期为2012年3月5日；它为为革兰氏阳性好氧杆菌，长为2000nm，宽为360nm，无鞭毛；在牛肉膏蛋白胨培养基上形成奶黄色菌落，表面光滑，边缘整齐。
本发明中低温条件下高效降解苯胺的菌N1接触酶阳性、油脂水解实验阳性、柠檬酸盐实验阳性、吲哚实验阳性、产氨实验阳性、甲基红实验阴性、V.P实验阴性、淀粉水解实验阴性。
本发明中低温条件下高效降解苯胺的菌N1最适宜在苯胺浓度为0.5g/L、温度为10～15℃，pH值7.5的环境中生长。
本发明中低温条件下高效降解苯胺的菌N1经16SrDNA测序及同源性比较，得到与其最相近的种属是哈特假单胞菌属(Pseudomonas huttiensis)，同源性达99％。结合细菌形态特征、生长条件、生理生化鉴定结果，确定低温条件下高效降解苯胺的菌N1为哈特假单胞菌属的一个新菌种。
本发明低温条件下高效降解苯胺的菌，菌株号为N1，属于哈特假单胞菌属(Pseudomonas huttiensis)新种，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.5844，保藏日期为2012年3月5日。
本发明低温条件下高效降解苯胺的菌N1，具有高效降解苯胺的功能，当苯胺浓度达到0.5g/L时，该株菌N1可在48h时其降解率可达94.2％，且不造成二次污染。本发明一株低温条件下高效降解苯胺的菌为生物处理低温含苯胺废水的研究奠定了物质基础，具有较高的应用价值。
附图说明
图1为具体实施方式一中低温条件下高效降解苯胺的菌N1的简单染色图；图2为具体实施方式一中低温条件下高效降解苯胺的菌N1的原子力显微镜观察图；图3为具体实施方式一中低温条件下高效降解苯胺的菌N1的原子力显微镜观察图；图4为具体实施方式中低温条件下高效降解苯胺的菌N1的脂肪酸含量分析色谱图。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式低温条件下高效降解苯胺的菌，它为低温条件下高效降解苯胺的菌N1，属于哈特假单胞菌属(Pseudomonas huttiensis)新种，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号.中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.5844，保藏日期为2012年3月5日；它为为革兰氏阳性好氧杆菌，长为2000nm，宽为360nm，无鞭毛；在牛肉膏蛋白胨培养基上形成奶黄色菌落，表面光滑，边缘整齐。
本实施方式中低温条件下高效降解苯胺的菌N1的简单染色图片见图1；原子力显微镜观察图见图2和3。
本实施方式中是根据《伯杰细菌鉴定手册》第八版对低温条件下高效降解苯胺的菌N1进行生理生化鉴定：结果为：接触酶阳性、油脂水解实验阳性、柠檬酸盐实验阳性、吲哚实验阳性、产氨实验阳性、甲基红实验阴性、V.P实验阴性、淀粉水解实验阴性。
本实施方式中低温条件下高效降解苯胺的菌N1最适宜在苯胺浓度为0.5g/L、温度为10～15℃，pH值7.5的环境中生长。
本实施方式中低温条件下高效降解苯胺的菌N1是从哈尔滨市太平污水处理厂的污泥中筛选得到的，步骤如下：取哈尔滨市太平污水处理厂污泥10ml置于100mlLB富集培养基中，在10℃、120r/min的环境中摇床富集培养7d；然后接菌于含有苯胺浓度为0.5g/ml的无机盐固体培养基上，在10℃条件下培养2～4d；之后挑选单菌落反复多次划线纯化培养，即可得到低温苯胺降解菌株。
其中LB富集培养基由10g的蛋白胨、5g的酵母膏、10g的NaCl和1000ml H2O的组成；
含有苯胺浓度为0.5g/ml的无机盐固体培养基由3g的(NH4)2SO4、0.5g的KH2PO4、0.5g的NH4H2PO4、0.3g的MgSO4·7H2O、1ml的微量元素液、1000ml的H2O、20g的琼脂和0.5g的苯胺组成；其中微量元素液由0.5g的FeSO4·7H2O、0.15g的MnSO4·H2O、0.14g的ZnSO4、0.2g的COCl2和1000ml的H2O组成。
依据《伯杰细菌鉴定手册》第八版低温苯胺降解菌株进行常规生理生化鉴定，采用CTAB法进行细菌总DNA的提取并进行16SrDNA测序，将测序结果用BLAST软件与Genbank中已登录的16SrDNA序列进行同源性比较，发现本实施方式筛选得到的低温苯胺降解菌株最相近的种属是哈特假单胞菌属(Pseudomonas huttiensis)，同源性达99％。结合细菌形态特征、生长条件、生理生化鉴定结果，确定筛选的低温苯胺降解菌株为哈特假单胞菌属的一个新菌种，命名为低温条件下高效降解苯胺的菌N1。
采用美国MIDI全细胞脂肪酸分析系统鉴定低温条件下高效降解苯胺的菌N1，其脂肪酸含量分析色谱图，如图4所示。
本实施方式中低温条件下高效降解苯胺的菌N1，当苯胺浓度达到0.5g/L时，该株菌N1可在48h时其降解率可达94.2％。实验证明低温条件下高效降解苯胺的菌N1具有低温下高效处理苯胺的功能，而且无需添加其它化学制剂，大幅度降低了废水的处理成本，具有广阔的应用前景。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是高效降解苯胺的菌N1接触酶阳性、油脂水解实验阳性、柠檬酸盐实验阳性、吲哚实验阳性、产氨实验阳性、甲基红实验阴性、V.P实验阴性、淀粉水解实验阴性。其它与具体实施方式一相同。
Claims (1)
1.一种低温条件下高效降解苯胺的菌，其特征在于它为低温条件下高效降解苯胺的菌N1，属于哈特假单胞菌属（Pseudomonas huttiensis）新种，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNo.5844，保藏日期为2012年3月5日；它为革兰氏阳性好氧杆菌，长为2000nm，宽为360nm，无鞭毛；在牛肉膏蛋白胨培养基上形成奶黄色菌落，表面光滑，边缘整齐。
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