CN102648908B

CN102648908B - 3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑组合物的应用

Info

Publication number: CN102648908B
Application number: CN201110046673.7A
Authority: CN
Inventors: 杨士豹; 华垚
Original assignee: Jiangsu Simcere Pharmaceutical R&D Co Ltd
Current assignee: SIMCERE PHARMACEUTICAL GROUP; Jiangsu Simcere Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2011-02-26
Filing date: 2011-02-26
Publication date: 2015-05-20
Anticipated expiration: 2031-02-26
Also published as: CN102648908A

Abstract

本发明涉及3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑组合物的一种新应用，即在制备预防和/或治疗银屑病药物中的应用。

Description

3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑组合物的应用

技术领域

本发明涉及3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑组合物在制备预防和/或治疗银屑病药物中的应用。

背景技术

银屑病(psoriasis)是一种较常见的、具有遗传倾向的慢性炎症性皮肤疾患，目前认为是一种多基因控制，与环境因素密切相关的免疫性炎症疾病。临床症状以皮疹上覆盖银白色鳞屑、剥开后有薄膜现象和点状出血为主要特征，部分患者伴有关节病变。其组织病理学主要表现为角质形成细胞的过度增生、炎症细胞聚集和真皮乳头部血管增生扩张等，而且其皮损中多种细胞因子表达增加，约1/3受累患者伴有进行性关节炎。本病在临床上治疗都以暂时缓解为目的，难以根治，也不能制止复发，严重影响了患者的生活质量。

据不完全统计，全球范围内该病患者数量近2000万，国内已逾300万，且发病率近年来仍呈继续升高趋势。

目前对于银屑病的治疗手段主要包括：传统药物治疗、常规药物治疗、生物治疗、物理治疗、心理治疗等。

传统药物治疗包括使用免疫抑制剂(如甲氨喋林、环孢菌素)、糖皮质类固醇激素、焦油类(如煤焦油、松馏油)。常规药物治疗包括抗感染治疗、维A酸类药物、维生素D3类似物、复方甘草甜素等。生物治疗包括使用英利昔单抗(Infliximab)、依那西普(Etanercept)、阿法西普(Alefacept)、依法利珠单抗(Efalizumab)、他克莫司(Tacrolimus)和匹美克莫司(Pimercrolimus)等。物理治疗包括光疗法、矿泉水浴疗法。精神因素在寻常性银屑病的发病中起重要作用，部分研究表明心理治疗有助于预防银屑病复发。

3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮，又称依达拉奉，其结构式为：

依达拉奉分子式为C₁₀H₁₀N₂O，分子量为174.19，CAS号为89-25-8。依达拉奉目前在临床上作为一种脑保护剂，清除自由基，抑制脂质过氧化，从而抑制脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化损伤。

中华人民共和国《药典》2010年版一部中收录了天然冰片、艾片、冰片(合成龙脑)。天然冰片中主要含右旋龙脑，其右旋龙脑含量不少于96.0％。艾片中主要含左旋龙脑，其左旋龙脑含量以龙脑计不少于85.0％。冰片(合成龙脑)中含龙脑不少于55.0％。

右旋龙脑又称为(+)-2-莰醇，左旋龙脑又称为(-)-2-莰醇。

发明内容

本发明的目的是提供依达拉奉与龙脑药物组合物在制备预防和/或治疗银屑病药物中的应用。所述依达拉奉与龙脑药物组合物配合使用时具有协同作用，可以提高使用效果。

本发明中依达拉奉与龙脑的质量比为20:1～1:4，优选为10:1～1:2，更优选的为8:1～1:1。进一步的优选质量比选自8:1或7:1或6:1或17:3或21:4或5:1或4:1或19:6或3:1或18:7或7:3或17:8或2:1或13:7或16:9或3:2或14:11或11:9或13:12或1:1；更加进一步的优选为选自8:1或7:1或6:1或5:1或4:1或3:1或2:1或1:1。更加进一步的优选自5:1或4:1或3:1，再进一步优选为4:1。

本发明中所述的龙脑可以选自天然冰片、艾片和合成龙脑。优选使用天然冰片。

本发明中所述的龙脑还可以使用经过纯化的2-莰醇，所述的2-莰醇的纯度不低于96.0％，优选地为不低于98.0％，更优选地为不低于99.0％。

本发明中所述的经过纯化的2-莰醇优选单一构型的(+)-2-莰醇或(-)-2-莰醇。所述的(+)-2-莰醇的纯度不低于96.0％，优选地为不低于98.0％，更优选地为不低于99.0％。所述的(-)-2-莰醇的纯度不低于96.0％，优选地为不低于98.0％，更优选地为不低于99.0％。

本发明中所述的龙脑最优选的为纯度不低于99.0％的(+)-2-莰醇。

上述的药物组合物中还可以含有溶剂，可以使得依达拉奉与龙脑更好地混合。所述溶剂可以选用水溶性有机溶剂、或者水溶性有机溶剂与水的混合物。常用的水溶性有机溶剂主要有醇类溶剂、醚类溶剂、酮类溶剂等。本发明中优选水、水溶性有机溶剂与水的混合物。常用的醇类溶剂有乙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇等；常用的醚类溶剂有乙二醇单乙基醚、乙二醇单丁基醚等；常用的酮类溶剂有丙酮、N-甲基-2-吡咯烷酮。水溶性有机溶剂优选使用丙二醇。

本发明使用普萘诺尔诱导的银屑病动物模型对依达拉奉与龙脑药物组合物在治疗银屑病的应用进行评价。结果表明依达拉奉与龙脑药物组合物配合使用时具有协同作用，可以提高治疗效果。依达拉奉与龙脑药物组合物对银屑病动物模型具有较好的治疗效果。

银屑病的基本病理特点是表皮细胞增殖过快和角化不全，如能抑制表皮细胞的增生或角化不全(促进颗粒层形成)者，即可能具有治疗银屑病的药理作用。

普萘诺尔诱导银屑病动物模型，是利用普萘诺尔特有的药理作用，即可阻断角质形成细胞的β-肾上腺能受体而降低了细胞内cAMP水平。应用后可出现动物表皮角化过度、角化不全和棘层肥厚等类似银屑病的组织病理改变。可利用此模型观察药物对受损皮肤的改善情况。

下面以实施例的方式对本发明作进一步说明，给出本发明的实施细节，但是并不是旨在限定本发明的保护范围。

具体实施方式

实施例1药品准备

称取1.111g依达拉奉和139mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的复方依达拉奉注射液A1。

称取1.111g依达拉奉和139mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2.5mg/ml的复方依达拉奉注射液A2。

称取1.094g依达拉奉和156mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的复方依达拉奉注射液B1。

称取1.094g依达拉奉和156mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2.5mg/ml的复方依达拉奉注射液B2。

称取1.072g依达拉奉和178mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的复方依达拉奉注射液C1。

称取1.072g依达拉奉和178mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2.5mg/ml的复方依达拉奉注射液C2。

称取1.041g依达拉奉和208mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的复方依达拉奉注射液D1。

称取1.041g依达拉奉和208mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2.5mg/ml的复方依达拉奉注射液D2。

称取1g依达拉奉和250mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的复方依达拉奉注射液E1。

称取1g依达拉奉和250mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2.5mg/ml的复方依达拉奉注射液E2。

称取938mg依达拉奉和312mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的复方依达拉奉注射液F1。

称取938mg依达拉奉和312mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2.5mg/ml的复方依达拉奉注射液F2。

称取833mg依达拉奉和417mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的复方依达拉奉注射液G1。

称取833mg依达拉奉和417mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2.5mg/ml的复方依达拉奉注射液G2。

称取625mg依达拉奉和625mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液H1。

称取625mg依达拉奉和625mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1,2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2.5mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液H2。

取盐酸普萘洛尔5g以50％乙醇为溶剂，使药物溶解，加入Azone-丙二醇5ml作为复合促进剂，加入PVPK₃₀5g为成膜材料，补加50％乙醇至100ml，制备盐酸普萘洛尔乳搽剂。

以下实施例中所用的注射用甲氨蝶呤为市售药品；规格：0.1g/支；生产单位：江苏恒瑞医药股份有限公司。

实施例2依达拉奉和龙脑组合物对银屑病的治疗效果动物模型评价

取体重300～400g豚鼠44只，雌雄各半，随机分成空白组10只，模型组34只。模型组每只动物用玻璃棒以5％盐酸普萘洛尔乳搽剂涂左侧耳廓皮肤(0.3g/cm2)，每日2次,连续2周。末次给药后杀死正常组和模型组各4只豚鼠分别取左侧耳廓皮肤标本，甲醛固定，HE染色，光镜观察，以此评价造模质量。

将模型组剩余的30只豚鼠随机分成5组，即模型组，甲氨蝶呤(1mg/kg)阳性药对照组，复方依达拉奉高中低剂量(1.5、0.75、0.375mg/kg，选用实施例1中复方依达拉奉注射液E2稀释)组。模型组不用任何药物，作为皮损模型自然恢复对照组；给药组每日腹腔注射1次，用药2周后，取豚鼠左侧耳廓皮肤，用10％福尔马林固定，石蜡包埋，HE染色，观察耳部皮肤角化层、颗粒层、棘细胞层、基底细胞层及固有层的变化，并在光学显微镜下(╳400)用测微尺测表皮厚度，然后换算成实际厚度(用mm表示)，进行各组间差异性比较。

在光镜下观察，正常豚鼠耳部皮肤能见到完整的角质层，颗粒层为线状，两侧有黑色颗粒，棘细胞层为多角形细胞，基底层是单层柱状细胞，有丝分裂相较少；模型组角质层角化不全或过度，棘层增厚，基底层有丝分裂相减少，部分基底细胞质中有较多黑褐色颗粒细胞，固有层个别部位充血。复方依达拉奉低、中、高剂量组和阳性对照组的角质层均较完整，颗粒层由较多褐色颗粒组成，棘细胞层变薄，基底层细胞分裂相减少，未见明显的褐色颗粒。

模型组豚鼠耳部表皮厚度较正常对照组明显增加，复方依达拉奉低、中、高剂量组和阳性对照组豚鼠耳部皮肤厚度与模型组相比显著减少，其中复方依达拉奉高剂量组豚鼠耳部皮肤厚度接近正常对照组。见表1。

表1复方依达拉奉注射液对豚鼠耳部表皮厚度的影响

均值±标准差。*，p<0.05，与模型组相比。

Claims

1.3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑的组合物在制备预防和/或治疗银屑病药物中的应用。

2.权利要求1中所述的应用，其特征在于所述龙脑选自天然冰片、艾片、合成龙脑。

3.权利要求1中所述的应用，其特征在于所述龙脑为含量超过98.0％的2-莰醇。

4.权利要求1中所述的应用，其特征在于所述龙脑为含量超过98.0％的(+)-2-莰醇。

5.权利要求1中所述的应用，其特征在于所述龙脑为含量超过98.0％的(-)-2-莰醇。

6.权利要求1-5中任一项所述的应用，其特征在于所述组合物中3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑的质量比为20:1～1:4。

7.权利要求1-5中任一项所述的应用，其特征在于所述组合物中3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑的质量比为10:1～1:2。

8.权利要求1-5中任一项所述的应用，其特征在于所述组合物中3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑的质量比选自8:1或7:1或6:1或5:1或4:1或3:1或2:1或1:1。

9.权利要求1-5中任一项所述的应用，其特征在于所述组合物中3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑的质量比选自5:1或4:1或3:1。

10.权利要求1-5中任一项所述的应用，其特征在于所述组合物还包括其他可药用非活性组分。