CN102643440B - 除去交联透明质酸中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷的方法 - Google Patents

除去交联透明质酸中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102643440B
CN102643440B CN201110392621.5A CN201110392621A CN102643440B CN 102643440 B CN102643440 B CN 102643440B CN 201110392621 A CN201110392621 A CN 201110392621A CN 102643440 B CN102643440 B CN 102643440B
Authority
CN
China
Prior art keywords
hyaluronic acid
cross
linked
linking agent
pressure
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201110392621.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102643440A (zh
Inventor
简军
李睿智
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Limited by Share Ltd technology development
Original Assignee
BEIJING AIMEIKE BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by BEIJING AIMEIKE BIOTECHNOLOGY Co Ltd filed Critical BEIJING AIMEIKE BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201110392621.5A priority Critical patent/CN102643440B/zh
Priority to PCT/CN2011/084096 priority patent/WO2012146031A1/zh
Publication of CN102643440A publication Critical patent/CN102643440A/zh
Priority to US13/844,842 priority patent/US20130217872A1/en
Application granted granted Critical
Publication of CN102643440B publication Critical patent/CN102643440B/zh
Priority to US15/202,664 priority patent/US20160310522A1/en
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Abstract

本发明涉及一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法，方法是将交联透明质酸水凝胶整pH值7-8，放置滚床上滚动18-24h，置于高压灭菌锅中，加热至沸腾后，当气压升至0.12MPa，温度升至105℃时，打开放气阀放气，至压力降至0.1MPa，温度降至100℃时关掉放气阀门；如此反复4-5次。本发明可以去除大部分残留于交联透明质酸中的1，2，7，8-二环氧辛烷，达到安全的含量范围内，可以确保交联透明质酸产品的安全性。本发明方法简单，容易操作，成本低廉，安全可靠。

Description

除去交联透明质酸中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷的方法
技术领域
本发明涉及一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法，特别指的是用高压蒸汽法去除交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)。 
背景技术
开发能应用与临床的皮肤填充剂，就必须对透明质酸进行一系列的化学修饰和处理过程。如果采用非交联的透明质酸作为皮肤填充剂，那么，在皮肤中天然存在的透明质酸酶与自由基就会一个一个的切断聚合起来的透明质酸分子，快速降解非交联的透明质酸。结果使得透明质酸在组织内的半衰期只有一天到两天，然后经过水的稀释，在肝脏内逐步降解为水和二氧化碳。这样，产品在注射的部位就会很快的失去效用(在一周内)，结果使得非交联的透明质酸在皮肤中的滞留时间受到了很大的限制。因此，非交联的透明质酸起不到一个作为皮肤填充剂应该起到的疗效。 
所以，采用1，2，7，8-二环氧辛烷作为透明质酸的交联剂，将透明质酸的羟基和羧基都交联起来，提高了透明质酸分子的稳定性，有效地防止了透明质酸酶和自由基对透明质酸的降解作用，明显地提高了透明质酸在皮肤内的停留时间，具有量好的作为皮肤填充剂应有的疗效。但是，依据化学材料安全评估报告(Material Safety Data Sheets，简称MSDS)，1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)对皮肤具有刺激性甚至毒性。在透明质酸交联反应完全结束后，此交联剂必须被清除，以免残留的交联剂对皮肤造成不良的影响。 
发明内容
本发明的目的在于提供一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法，采用高压蒸汽空法去除交联透明质酸中1，2，7，8-二环氧辛烷，去除大部分残留于交联透明质酸中的1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)，而达到安全的含量范围内。可以确保交联透明质酸产品的安全性。 
本发明提供的一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法包括如下步骤： 
1)将交联透明质酸水凝胶用酸调整pH值至7-8，放置滚床上滚动18-24h，至达到透明质酸吸水平衡。 
2)用透气非透菌纸封住瓶口，置于高压灭菌锅中，加热至沸腾后，关掉高压灭菌锅 上的放气阀门。 
3)当气压升至0.12MPa，温度升至105℃时，打开放气阀放气，至压力降至0.1MPa，温度降至100℃时关掉放气阀门。 
4)重复步骤3)，让温度压力上升至之前的读数，如此反复4-5次，即可达到去除交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)的目的。 
所述的水凝胶浓度为15-35mg/mL。 
步骤3)至步骤4)的高压时间为25-35min，优选30min。 
本发明中使用的交联透明质酸，其交联剂选用的是1，2，7，8-二环氧辛烷，其中交联剂加入量与透明质酸的质量比为0.01-1，实验中可选择交联剂与透明质酸的质量比为1∶1。 
本发明是采用高温下通过水蒸气将交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷汽化至上层蒸汽中，汽化后的1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)蒸汽进入到外层的水蒸气中，并随着灭菌高压锅的放气口随水蒸气放出。当达到一定压强(0.12MPa)与一定温度(105℃)时，放去高压锅中的高压蒸汽，反复4-5次来回放气的过程，可通过气相色谱测得交联透明质酸中的1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)的残留量。 
本发明提供了一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法，采用高压蒸汽空法去除交联透明质酸中1，2，7，8-二环氧辛烷，去除大部分残留于交联透明质酸中的1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)，达到安全的含量范围内，可以确保交联透明质酸产品的安全性。本发明方法简单，容易操作，成本低廉，安全可靠。 
附图说明
图1为1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)标准样的顶空法气相色谱图。 
图2为经本发明高压蒸汽后交联透明质酸的顶空法气相色谱图。 
具体实施方式
实施例1： 
1、交联剂透明质酸水凝胶的制备 
将0.5g氢氧化钠溶解于20ml水中，加入5g透明质酸钠(山东福瑞达生物技术有限公司出品)，搅拌12-14h，搅拌至透明质酸钠完全溶解后，再向反应体系中加入5g 1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)，迅速搅拌均匀，在25℃下反应24小时。反应用2mol/L盐酸终止，调至pH＝5左右，同时在40℃，13.3Kpa的真空度条件下蒸馏去除反应体系中的水，当蒸馏出的水达到50mL时停止减压蒸馏。分3次用200mL pH＝8-9的含30％乙醇的氢氧化钠溶液浸泡，中和凝胶的盐酸。将中和后的凝胶转入真空干燥箱中，于60℃，40Kpa的条件下 干燥10h使凝胶固化定型，凝胶吸水率为45倍。所得凝胶在90℃，13.3Kpa真空干燥至衡重，得交联透明质酸微颗粒。 
2、将透明质酸水凝胶进行高压蒸汽去除1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO) 
将交联透明质酸微颗粒按照25mg/mL的浓度配成水凝胶，用0.05mol/L盐酸调整pH值至7-8，放置滚床上滚动20h，至达到透明质酸吸水平衡。用透气非透菌纸封住瓶口，置于高压灭菌锅(实验室用高压灭菌锅，合肥华泰医疗设备有限公司，型号YX-280D)中，加热至沸腾后，关掉高压灭菌锅上的放气阀门，当气压升至0.12MPa，温度升至105℃时，打开放气阀放气，至压力降至0.1MPa，温度降至100℃时关掉放气阀门，让温度压力上升至之前的水平，如此反复放气4-5次，高压时间在30min左右，即可达到去除交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)的目的。 
实施例2： 
气相色谱顶空法对比1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)标准样与实施例1高压蒸汽法处理后的交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)的残留量(采用岛津公司GC-9A型气相色谱仪作为检测仪器，采用顶空法作为实验方法)。 
用微量注射器抽取2μL 1，2，7，8-二环氧辛烷置于顶空瓶中，加10mL纯化水溶解作为储备液。密封后顶空瓶于95℃恒温40分钟后，取顶空气体1mL，进样检测，得到色谱图1。积分得到标准样峰面积。 
精密称取经高压蒸汽法处理过的样品2mL左右，置于顶空瓶中，加水8mL。密封后顶空瓶于95℃恒温40分钟后，取顶空气体1mL，进样检测，得到色谱图2。积分得到样品峰面积。 
结果处理：用外标法计算1，2，7，8-二环氧辛烷的残留量： 
1，2，7，8-二环氧辛烷残留量＝(样品峰面积×标准样浓度)÷标准样峰面积。 
对比结果如附图所示。 
通过附图1可以看出，1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)标准样在850.1s处出现了一个很强的吸收峰，而去除了1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)的交联透明质酸样品则没有在该处出现吸收峰，图2，说明该样品中的1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)含量已经低于气相色谱的最低检出限，即低于0.1ppm，保证了该交联透明质酸样品的安全性，证明了高压蒸汽法去除交联透明质酸中1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)的有效性。 

Claims (6)

1.一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法，其特征在于：它包括如下步骤：
1)将交联透明质酸水凝胶用酸pH值调整至7-8，放置滚床上滚动18-24h，至达到透明质酸吸水平衡；
2)用透气非透菌纸封住瓶口，置于高压灭菌锅中，加热至沸腾后，关掉高压灭菌锅上的放气阀门；
3)当气压升至0.12MPa，温度升至105℃时，打开放气阀放气，至压力降至0.1MPa，温度降至100℃时关掉放气阀门；
4)重复步骤3)，让温度压力上升至之前的读数，如此反复4-5次，即可去除交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的水凝胶浓度为15-35mg/mL。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的水凝胶浓度为25mg/mL。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)至步骤4)的高压时间为25-35min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)至步骤4)的高压时间为30min。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的交联透明质酸是用1，2，7，8-二环氧辛烷作为透明质酸的交联剂合成。
CN201110392621.5A 2011-04-26 2011-12-01 除去交联透明质酸中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷的方法 Active CN102643440B (zh)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110392621.5A CN102643440B (zh) 2011-12-01 2011-12-01 除去交联透明质酸中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷的方法
PCT/CN2011/084096 WO2012146031A1 (zh) 2011-04-26 2011-12-16 透明质酸与羟丙基甲基纤维素复合凝胶及制备方法
US13/844,842 US20130217872A1 (en) 2011-04-26 2013-03-16 Method for producing composite gel by cross-linking hyaluronic acid and hydroxypropyl methylcellulose
US15/202,664 US20160310522A1 (en) 2011-04-26 2016-07-06 Method for producing composite gel by cross-linking hyaluronic acid and hydroxylpropyl methylcellulose

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110392621.5A CN102643440B (zh) 2011-12-01 2011-12-01 除去交联透明质酸中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102643440A CN102643440A (zh) 2012-08-22
CN102643440B true CN102643440B (zh) 2014-03-26

Family

ID=46656532

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201110392621.5A Active CN102643440B (zh) 2011-04-26 2011-12-01 除去交联透明质酸中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102643440B (zh)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4688503B2 (ja) * 2005-01-07 2011-05-25 ダイセル化学工業株式会社 高純度脂環式ジエポキシ化合物およびその製造方法
CN101724164B (zh) * 2008-10-31 2011-12-14 科妍生物科技股份有限公司 交联透明质酸的制造方法
US20100261893A1 (en) * 2009-04-09 2010-10-14 Scivision Biotech Inc. Method for producing cross-linked hyaluronic acid

Also Published As

Publication number Publication date
CN102643440A (zh) 2012-08-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Chang et al. Equilibrium solubility of carbon dioxide in aqueous solutions of (diethylenetriamine+ piperazine)
DK2585524T3 (en) A method for dissolving lignocellulosic materials
Bano et al. Characterization and potential applications of gamma irradiated chitosan and its blends with poly (vinyl alcohol)
US10961324B2 (en) Method for preparation of novel modified bio based materials
CN102643440B (zh) 除去交联透明质酸中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷的方法
CN110123745B (zh) 一种耐受终端灭菌的紫杉醇注射液制备方法
CN105111488B (zh) 一种药用橡胶塞的生产方法
CN102492180B (zh) 交联透明质酸与羟丙基甲基纤维素组合水凝胶及其制备方法
ES2423255A1 (es) Procedimiento para la eliminación de haloanisoles y halofenoles presentes en el corcho e instalación para llevar a cabo dicha eliminación
Mwangi et al. Removal of phenolics from aqueous media using quaternised maize tassels
CN104013654A (zh) 一种板蓝根注射液的制备方法
CN102495154B (zh) 水相凝胶渗透色谱法检测交联透明质酸体外酶解的方法
CN102435702B (zh) 交联透明质酸水凝胶中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷残留量的测定方法
AU2008238324B8 (en) Method for producing storage-stable solutions from pelargonium extracts
JPWO2014020866A1 (ja) 塩基性アミノ酸又は塩基性アミノ酸塩の製造方法
Barbarin et al. Role of residual solvents in the formation of volatile compounds after radiosterilisation of cefotaxime
CN108658827A (zh) 一种脯氨酸粗品的制备方法
Barker et al. 531. Effects of γ-radiation. Part I. Polymer formation from sugars, hydroxy-acids, and amino-acids
CN101574634B (zh) 用辐照处理蛋白发泡剂的方法
CN108640865A (zh) 一种药用脯氨酸的制备方法
ES2551928T3 (es) Inhibición de la corrosión en calderas mediante la adición de polihidroxibenceno
CN108680669A (zh) 一种植物源性产品和食品中蒽醌的测试方法
Gotoh et al. Metal Hydroxide Formation in DMAPAA Hydrogel and Novel Metal Ion Removal Method
CN101849937A (zh) 奥硝唑与右旋糖酐的药物组合物及制备方法
JP4704827B2 (ja) がごめ昆布から昆布エキスを粉末状態で抽出する方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
C56 Change in the name or address of the patentee
CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: Beikong science and technology building, No. 10 Beijing 102200 Changping District science and Technology Park floating Stephen White Road 4 416B room

Patentee after: Limited by Share Ltd technology development

Address before: Beikong science and technology building, No. 10 Beijing 102200 Changping District science and Technology Park floating Stephen White Road 4 416B room

Patentee before: Beijing Aimeike Biotechnology Co., Ltd.