CN102636605A - 一种hplc波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中多种成分含量的方法 - Google Patents
一种hplc波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中多种成分含量的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102636605A CN102636605A CN 201210079073 CN201210079073A CN102636605A CN 102636605 A CN102636605 A CN 102636605A CN 201210079073 CN201210079073 CN 201210079073 CN 201210079073 A CN201210079073 A CN 201210079073A CN 102636605 A CN102636605 A CN 102636605A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- root
- kudzuvine root
- gradient elution
- kudzu vine
- phosphoric acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
一种HPLC同时测定葛根、升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中多种成分含量的方法，包括制备供试品溶液和葛根、升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的成分含量测定两个步骤。供试品溶液是取葛根、升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂，相当于葛根药材0.5—1.5g，用乙醇回流提取方法制得。而成分含量测定采用对供试样品上ODS色谱柱、梯度洗脱和HPC波长切换实现同时测定1—8种成分含量。洗脱液为乙腈与磷酸水混合液。本发明可以作到更全面、更准确的控制葛根、升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂质量的效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种HPLC波长切换技术同时测定中药及中药制剂中多种成分的方法，特别是涉及一种HPLC同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1-8种成分的含量的方法。
背景技术
同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1-8种成分的含量，是建立葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂质量标准的重要组成部分，为全面评价中药质量提供依据。目前《中国药典》（2010版）仅采用HPLC固定波长法对葛根中葛根素一种含量较大的成分进行了测定。但葛根中有效物质并不是单一的成分，而且每种成分的最大吸收波长是不一样的。通过测定中药的某一个成分含量的高低对该中药进行质量控制，不够全面。
发明内容
本发明的目的是提供一种HPLC波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1-8种成分含量的方法，该方法较其他含量检测方法，如单一成分含量检测、非切换波长检测等方法，可以做到更全面，准确的控制葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂质量的效果。
采用的技术方案是：
一种HPLC波长切换同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1-8种成分含量的方法，包括下述工艺步骤：
1、制备供试品溶液，分别盛装备用，其制备方法如下：取葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂，相当于含葛根药材0.5-1.5 g，精密称定，置圆底烧瓶中，加50%-70%乙醇30-50倍量，回流提取2-3次，每次2-3小时，放冷，再称定重量，用50%-70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取5-10ml，置10-25ml量瓶中，加30%-50乙醇至刻度，摇匀，即得。
2、葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1-8种成分的含量测定，采用高效液相色谱法，应用波长切换及梯度洗脱技术：取上述制备的一份供试品溶液，上ODS色谱柱（150-250×4.6-6.0mm,2-5μm），梯度洗脱；洗脱液为乙腈与磷酸水混合液:第一梯度洗脱采用乙腈5—9%：磷酸水95—91%的混合液，第二梯度洗脱采用乙腈9—9%：磷酸水91—91%的混合液，第三梯度洗脱采用乙腈9—12%：磷酸水91—88%的混合液，第四梯度洗脱采用乙腈12—13%：磷酸水88—87%的混合液，第五梯度洗脱采用乙腈13—16%：磷酸水87—84%的混合液，第六梯度洗脱采用乙腈16—22%：磷酸水84—78%的混合液，第七梯度洗脱采用乙腈22—22%：磷酸水78—78%的混合液，第八梯度洗脱采用乙腈22—32%：磷酸水78—68%的混合液，第九梯度洗脱采用乙腈32—42%：磷酸水68—58%的混合液，第十梯度洗脱采用乙腈42—60%：磷酸水58—40%的混合液；洗脱液流速为0.8—1ml/min；检测波长：第一时间段为247nm，第二时间段为250nm，第三时间段为259nm,第四时间段为261nm，第五时间段为248nm，第六时间段为261nm，第七时间段为248nm，第八时间段为261nm，可依次测定并计算出样品葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1-8种成分的含量，在上述色谱条件下，理论塔板数以葛根素计不低于25000，分离度＞1.5。
上述百分比为体积百分比。
3、制备对照品储备液，其制备方法如下： 分别精密称取3＇-羟基葛根素、葛根素对照品适量，加30%甲醇分别制成每1ml中含3＇-羟基葛根素、葛根素各0.70-2.0，1.0 -3.0mg的对照品储备液；精密称取大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A对照品适量，加甲醇分别制成每1 ml含大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A各0.61-2.1、0.30-1.2、0.78-1.6、0.17-0.35、0.17-0.36、0.015 -0.038mg的对照品储备液。
4、方法学考察：
线性范围的考察 精密吸取1-8种混合对照品储备液适量，置量瓶中，加甲醇稀释至各对照品浓度均在0.002-10mg/ml范围内，摇匀，制得混合对照品溶液。分别精密吸取混合对照品溶液适量，在上述色谱条件下分别进样进行测定。以进样量（X，μg）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。
精密度考察 精密吸取供试品溶液10 μl，连续进样5次，测得3＇-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A等1-8种成分峰面积的RSD均应小于3%。
稳定性考察 取供试品溶液，分别在12h内进样10μl，测得3＇-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A等1-8种成分峰面积的RSD均应小于3%。
重复性考察 取葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂5份，每份含葛根药材0.5-1.5 g，精密称定，按步骤一方法平行制备5份供试品溶液，分别进样10μl进行测定。结果3＇-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A等1-8种成分的RSD均应小于3%。
加样回收率考察 取已知含量的葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂5份，每份含葛根药材0.5-1.5 g，精密称定，分别置圆底烧瓶中，精密加入3＇-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A等1-8种对照品储备液适量。按“步骤3的方法操作，在上述色谱条件下进行测定后计算回收率，上述1-8种成分的加样回收率均应在95%-105%。
本发明的优点在于：
同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1-8种成分的含量，并且利用同一种检测条件和波长切换的方法，这样既可以达到增加质量覆盖面的目的，又可以保证每种成分在最大吸收波长处被检测，提高检测灵敏度。
具体实施方式
实施例一
一种HPLC波长切换技术同时测定葛根中8种成分含量的方法，其特征在于采用波长切换和梯度洗脱同时测定8种成分，包括下述工艺步骤：
（1）、制备供试品溶液，分别盛装备用，其制备方法如下：取葛根1g，精密称定，置圆底烧瓶中，加70%乙醇30倍量，回流提取2次，每次3小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取5ml，置10ml量瓶中，加30%乙醇至刻度，摇匀，即得。
（2）、取上述制备的供试品溶液，上ODS色谱柱（150×4.6mm,3μm），梯度洗脱；洗脱液为乙腈与0.05%磷酸水混合液；第一梯度洗脱采用乙腈5—9%：磷酸水95—91%的混合液，第二梯度洗脱采用乙腈9—9%：磷酸水91—91%的混合液，第三梯度洗脱采用乙腈9—12%：磷酸水91—88%的混合液，第四梯度洗脱采用乙腈12—13%：磷酸水88—87%的混合液，第五梯度洗脱采用乙腈13—16%：磷酸水87—84%的混合液，第六梯度洗脱采用乙腈16—22%：磷酸水84—78%的混合液，第七梯度洗脱采用乙腈22—22%：磷酸水78—78%的混合液，第八梯度洗脱采用乙腈22—32%：磷酸水78—68%的混合液，第九梯度洗脱采用乙腈32—42%：磷酸水68—58%的混合液，第十梯度洗脱采用乙腈42—60%：磷酸水58—40%的混合液；洗脱液流速为1ml/min；检测波长：第一时间段为247nm，第二时间段为250nm，第三时间段为259nm,第四时间段为261nm，第五时间段为248nm，第六时间段为261nm，第七时间段为248nm，第八时间段为261nm，可依次测定并计算出葛根中8种成分的含量，在上述色谱条件下，理论塔板数以葛根素计不低于25000，分离度＞1.5，上述百分比为体积百分比。
实施例二
一种HPLC波长切换技术同时测定升麻、葛根药对中8种成分含量的方法，其特征在于采用波长切换和梯度洗脱同时测定8种成分，包括下述工艺步骤：
(1)、制备供试品溶液，分别盛装备用，其制备方法如下：取升麻、葛根药对1g，精密称定，置圆底烧瓶中，加50%乙醇40倍量，回流提取3次，每次2小时，放冷，再称定重量，用50%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取5ml，置10ml量瓶中，加40%乙醇至刻度，摇匀，即得。
(2)、取上述制备的供试品溶液，上ODS色谱柱（200×5.0mm,4μm），梯度洗脱；洗脱液为乙腈与0.1%磷酸水混合液；第一梯度洗脱采用乙腈5—9%：磷酸水95—91%的混合液，第二梯度洗脱采用乙腈9—9%：磷酸水91—91%的混合液，第三梯度洗脱采用乙腈9—12%：磷酸水91—88%的混合液，第四梯度洗脱采用乙腈12—13%：磷酸水88—87%的混合液，第五梯度洗脱采用乙腈13—16%：磷酸水87—84%的混合液，第六梯度洗脱采用乙腈16—22%：磷酸水84—78%的混合液，第七梯度洗脱采用乙腈22—22%：磷酸水78—78%的混合液，第八梯度洗脱采用乙腈22—32%：磷酸水78—68%的混合液，第九梯度洗脱采用乙腈32—42%：磷酸水68—58%的混合液，第十梯度洗脱采用乙腈42—60%：磷酸水58—40%的混合液；洗脱液流速为0.8ml/min；检测波长：第一时间段为247nm，第二时间段为250nm，第三时间段为259nm,第四时间段为261nm，第五时间段为248nm，第六时间段为261nm，第七时间段为248nm，第八时间段为261nm，可依次测定并计算出升麻、葛根药对中8种成分的含量，在上述色谱条件下，理论塔板数以葛根素计不低于25000，分离度＞1.5，上述百分比为体积百分比。
实施例三
一种HPLC波长切换技术同时测定含升麻、葛根药对的制剂中8种成分含量的方法，其特征在于采用波长切换和梯度洗脱同时测定8种成分，包括下述工艺步骤：
(1)、制备供试品溶液，分别盛装备用，其制备方法如下：取含升麻、葛根药对的制剂适量，相当于含葛根药材1.5g，精密称定，置圆底烧瓶中，加60%乙醇50倍量，回流提取2次，每次3小时，放冷，再称定重量，用60%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取10ml，置25ml量瓶中，加50%乙醇至刻度，摇匀，即得。
（2）、取上述制备的供试品溶液，上ODS色谱柱（200×6.0mm,5μm），梯度洗脱；洗脱液为乙腈与0.15%磷酸水混合液；第一梯度洗脱采用乙腈5—9%：磷酸水95—91%的混合液，第二梯度洗脱采用乙腈9—9%：磷酸水91—91%的混合液，第三梯度洗脱采用乙腈9—12%：磷酸水91—88%的混合液，第四梯度洗脱采用乙腈12—13%：磷酸水88—87%的混合液，第五梯度洗脱采用乙腈13—16%：磷酸水87—84%的混合液，第六梯度洗脱采用乙腈16—22%：磷酸水84—78%的混合液，第七梯度洗脱采用乙腈22—22%：磷酸水78—78%的混合液，第八梯度洗脱采用乙腈22—32%：磷酸水78—68%的混合液，第九梯度洗脱采用乙腈32—42%：磷酸水68—58%的混合液，第十梯度洗脱采用乙腈42—60%：磷酸水58—40%的混合液；洗脱液流速为0.9ml/min；检测波长：第一时间段为247nm，第二时间段为250nm，第三时间段为259nm,第四时间段为261nm，第五时间段为248nm，第六时间段为261nm，第七时间段为248nm，第八时间段为261nm，可依次测定并计算出含升麻、葛根药对的制剂中8种成分的含量，在上述色谱条件下，理论塔板数以葛根素计不低于25000，分离度＞1.5，上述百分比为体积百分比。
Claims (1)
1.一种HPLC波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1-8种成分含量的方法，其特征在于采用波长切换和梯度洗脱同时测定1-8种成分，包括下述工艺步骤：
（1）、制备供试品溶液，分别盛装备用，其制备方法如下：取葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂，相当于含葛根药材0.5-1.5 g，精密称定，置圆底烧瓶中，加50%-70%乙醇30-50倍量，回流提取2-3次，每次2-3小时，放冷，再称定重量，用50%-70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取5-10ml，置10-25ml量瓶中，加30%-50%乙醇至刻度，摇匀，即得；
（2）、葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对制剂的含量测定，采用高效液相色谱法，应用波长切换及梯度洗脱技术：取上述制备的一份供试品溶液，上ODS色谱柱，ODS色谱柱规格为150-250×4.6-6.0mm,2-5μm，梯度洗脱；洗脱液为乙腈与磷酸水混合液，第一梯度洗脱采用乙腈5—9%：磷酸水95—91%的混合液，第二梯度洗脱采用乙腈9—9%：磷酸水91—91%的混合液，第三梯度洗脱采用乙腈9—12%：磷酸水91—88%的混合液，第四梯度洗脱采用乙腈12—13%：磷酸水88—87%的混合液，第五梯度洗脱采用乙腈13—16%：磷酸水87—84%的混合液，第六梯度洗脱采用乙腈16—22%：磷酸水84—78%的混合液，第七梯度洗脱采用乙腈22—22%：磷酸水78—78%的混合液，第八梯度洗脱采用乙腈22—32%：磷酸水78—68%的混合液，第九梯度洗脱采用乙腈32—42%：磷酸水68—58%的混合液，第十梯度洗脱采用乙腈42—60%：磷酸水58—40%的混合液；洗脱液流速为0.8—1ml/min；检测波长：第一时间段为247nm，第二时间段为250nm，第三时间段为259nm,第四时间段为261nm，第五时间段为248nm，第六时间段为261nm，第七时间段为248nm，第八时间段为261nm，可依次测定并计算出葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中1-8种成分的含量，在上述色谱条件下，理论塔板数以葛根素计不低于25000，分离度＞1.5，上述百分比为体积百分比。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201210079073 CN102636605A (zh) | 2012-03-23 | 2012-03-23 | 一种hplc波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中多种成分含量的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201210079073 CN102636605A (zh) | 2012-03-23 | 2012-03-23 | 一种hplc波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中多种成分含量的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102636605A true CN102636605A (zh) | 2012-08-15 |
Family
ID=46621075
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201210079073 Pending CN102636605A (zh) | 2012-03-23 | 2012-03-23 | 一种hplc波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中多种成分含量的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102636605A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106226440A (zh) * | 2016-09-27 | 2016-12-14 | 华润三九医药股份有限公司 | 升麻葛根汤组合物的质量控制方法 |
-
2012
- 2012-03-23 CN CN 201210079073 patent/CN102636605A/zh active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106226440A (zh) * | 2016-09-27 | 2016-12-14 | 华润三九医药股份有限公司 | 升麻葛根汤组合物的质量控制方法 |
| CN106226440B (zh) * | 2016-09-27 | 2019-03-01 | 华润三九医药股份有限公司 | 升麻葛根汤组合物的质量控制方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103018371B (zh) | 黄蜀葵花药材及其提取物与制剂中多种黄酮含量的测定方法 | |
| CN102854281B (zh) | 一种无糖型强力枇杷露的检测方法 | |
| CN103954724B (zh) | 荆防颗粒的检测方法 | |
| CN104020235A (zh) | 一种同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷含量的方法 | |
| CN104777243B (zh) | 一种同时测定半夏中有机酸、核苷和麻黄碱的hplc方法 | |
| CN106770828A (zh) | 一种同时测定银杏叶提取物及其制剂中多组分含量的方法 | |
| CN101502616B (zh) | 白及药材的含量测定方法 | |
| CN104950052A (zh) | 一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法 | |
| CN103808835B (zh) | Hplc-dad法同时测定四物汤煎剂中10种化学成分含量的方法 | |
| CN101703611A (zh) | 当归益血口服液的质量检测方法 | |
| CN104897787A (zh) | 一种同时测定牛黄宁宫片中六种活性成分的方法 | |
| CN101982189A (zh) | 丹参舒心胶囊的检测方法 | |
| CN102662024B (zh) | 一种小儿化痰止咳颗粒中三种生物碱的同时测定方法 | |
| CN102520103A (zh) | 六味地黄丸对照中成药提取液及其制备方法和应用 | |
| CN105301123A (zh) | 一种良附类制剂的hplc检测方法 | |
| CN104678004A (zh) | 一种葛山降脂颗粒的质量控制方法 | |
| CN102707006B (zh) | 穿破石配方颗粒的质量检测方法 | |
| CN104374841A (zh) | 羚羊感冒片质量控制参照品及用途 | |
| CN116953099A (zh) | 一种水飞蓟及其制剂的特征图谱构建方法及质量检测方法 | |
| CN102636605A (zh) | 一种hplc波长切换技术同时测定葛根，升麻、葛根药对及含升麻、葛根药对的制剂中多种成分含量的方法 | |
| CN105675755A (zh) | 一种基于hplc的青钱柳中黄酮类化合物含量的检测方法 | |
| CN102680593B (zh) | 一种行气活血、化瘀通脉的药物组合物的检测方法 | |
| CN102297918A (zh) | Hplc波长切换同时测定白芍及炮制品中9种成分含量方法 | |
| CN101596229B (zh) | 猴耳环提取物及其制剂的质量控制方法 | |
| CN103823000B (zh) | 一种芭蕉根的质量检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120815 |