CN102608255B - 一种鹤草酚薄层鉴别方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物分析领域，本发明目的在于提供一种使用薄层色谱快速鉴别鹤草酚的方法。本发明所述的鉴别法操作简单，速度快。本发明的鉴别方法，包括以下步骤：1)制得鹤草酚溶液；2)在硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开；3)置紫外光灯(365nm)下检视。
Description
技术领域
本发明属于药物分析领域，涉及一种使用薄层色谱快速鉴别鹤草酚的方法。
背景技术
仙鹤草是蔷薇科植物龙牙草的干燥地上部分，性味归经：苦、涩，平。其含有的鹤草酚(agrimol)属于间苯三酚类化合物，现已发现有鹤草酚A、B、C、D、E、F等多种成分。仙鹤草具有明显的抗疟杀虫及抗癌作用。
以仙鹤草为成分的中药制剂日益增加，在质量控制中对于鹤草酚的鉴别判断非常重要。目前常采用石油醚-乙酸乙酯-乙酸(2010版药典收载方法)系统作为展开剂进行薄层分析，此方法存在展开结果不能直接观察，需要喷以硫酸乙醇溶液，高温加热后才能显示斑点进行观察的弊端，操作过程繁琐，检验周期延长。
本发明采用二氯甲烷-甲醇系统进行展开，展开后样品可在紫外灯下直接观察，操作简单，检验周期缩短。
发明内容
本发明目的在于提供一种使用薄层色谱快速鉴别鹤草酚的方法。
其中，鉴别样品包括含有鹤草酚的中药材及其饮片，包括仙鹤草、朝鲜龙芽草、大花龙芽草、小花龙芽草等；含有鹤草酚的中药制剂。
本发明所述的鉴别法操作简单，速度快。
本发明的鉴别方法，包括以下步骤：
1)制得鹤草酚溶液；
2)在硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开。
3)置紫外光灯(365nm)下检视；
样品的薄层展开以二氯甲烷-甲醇系统为展开剂；
使用低分子醇类调节二氯甲烷的极性利于展开，包括甲醇与乙醇，以甲醇为佳，甲醇使用比例为0.02％-5％，以1％为佳。
展开后的样品可在紫外灯下直接检查，所用波长为350nm-380nm，以365nm为佳。
具体实施方式
通过以下具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的限制。
实施例1、仙鹤草药材鉴别试验
取本品2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸于。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，同法制得对照药材溶液。再取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例2、鹤仙灵颗粒鉴别试验
取本品5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例3、朝鲜龙芽草鉴别试验
取本品2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，同法制得对照药材溶液。再取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例4、大花龙芽草鉴别试验
取本品2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，同法制得对照药材溶液。再取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例5、小花龙芽草鉴别试验
取本品2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，同法制得对照药材溶液。再取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例6、含有仙鹤草成分的某中药片剂鉴别试验
取本品2g，研碎，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例7、含有仙鹤草成分的某中药口服液鉴别试验
取本品10ml，用稀盐酸调节pH值1-2，加三氯甲烷40ml振摇提取，水洗涤，浓缩至1ml作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例8、以二氯甲烷-甲醇(10∶0.02)为展开剂试验
取参仙灵颗粒5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.02)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例9、以二氯甲烷-甲醇(10∶0.5)为展开剂试验
取参仙灵颗粒5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例10、紫外灯下350nm处检查样品薄层色谱分析结果
取参仙灵颗粒5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)操作，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(350nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
实施例11、紫外灯下380nm处检查样品薄层色谱分析结果
取参仙灵颗粒5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60℃-90℃)40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷10ml溶解，5％氢氧化钠溶液10ml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷10ml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
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Claims (4)
1.一种含有鹤草酚的中药材或制剂的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)分别制得供试品、对照品、对照药材溶液；
(2)在硅胶G薄层板上，以体积比为10∶0.02-0.5的二氯甲烷-甲醇为展开剂展开，其中甲醇为展开剂系统的极性调节剂；
(3)置紫外光灯下检视，检测波长为350-380nm。
2.根据权利要求1所述的方法，含有鹤草酚的中药材包括仙鹤草、朝鲜龙芽草、大花龙芽草、小花龙芽草。
3.根据权利要求1所述的方法，二氯甲烷-甲醇的体积比为10∶0.1。
4.根据权利要求1所述的方法，检测波长为365nm。
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