CN102600084A

CN102600084A - 冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN102600084A
Application number: CN2012100803379A
Authority: CN
Inventors: 张典瑞; 郑丹丹; 程惠玲; 段存贤; 王飞虎; 刘悦; 刘光璞
Original assignee: Shandong University
Current assignee: Shandong University
Priority date: 2012-03-23
Filing date: 2012-03-23
Publication date: 2012-07-25

Abstract

本发明公开了一种冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，是由冬凌草甲素、脂质材料、表面活性剂、半乳糖基化壳聚糖、冻干保护剂和注射用水组成的，以100ml纳米粒制剂计，各组分含量如下：冬凌草甲素0.01～1.0g，脂质材料0.1～10.0g，表面活性剂0.2～20.0g，半乳糖基化壳聚糖0.005～1.0g，注射用水100ml。本发明克服了冬凌草甲素难溶于水的缺陷，本发明所制备的纳米粒可以显著延长冬凌草甲素的体外释放。本发明的纳米粒生物相容性好，做成口服纳米粒溶液有利于儿童和老人等吞服困难的人群适用，增加生物利用度，减小给药剂量，降低毒副作用。

Description

冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂及其制备方法。

背景技术

癌症是危害人类生命与健康的严重疾病。近年来，癌症发病率和死亡率已呈明显上升趋势。据统计，全球每年新发病的恶性肿瘤约635万，其中原发性肝癌30万，占4.7％。我国是世界上肝癌高发国家之一，肝癌年发病人数逾13万人，占全世界肝癌年死亡人数的43.7％。

目前临床上的癌证治疗一般视手术、放疗、化疗为三大支柱，但由于肝癌起病隐匿，恶性程度高，发展变化快，患者就诊时往往已进入中晚期，失去了最佳手术时机。因此，在肝癌的临床治疗中广泛应用的是化学药物疗法。大多数化疗药物虽可抑制肿瘤细胞过度增生，但其毒副作用大，对正常细胞组织也有很强的杀伤作用，部分病人因身体极度虚弱已无法耐受西药的治疗。中药在治疗肝癌方面因其独特的优势而被临床广泛采纳，其在治疗局部的同时，重视全身治疗，能够改善和提高病人的生活质量，延长生命周期，并且副作用小。比较当前的肝癌一线治疗药物，不难发现，多数中药只定位于癌肿的辅助治疗用药，这种现象很可能与中药本身缺乏强有力的针对癌肿局部脏器药物靶点治疗有关。为此，有必要研究中药有效组分的分子治疗技术，将有效治疗用药物分子，直接输送到肿瘤细胞内，提高药物靶向性，大幅度提高中药针对局部肿瘤脏器的治疗效果。

冬凌草甲素(Oridonin，ORI)为唇形科香茶菜属植物冬凌草(Rabdosia rubescens)的主要抗癌有效成分，分子中与环外亚甲基共轭的环戊酮结构是其抗癌活性中心。冬凌草甲素属四环二萜类化合物，分子式C₂₀H₂₈O₆，如图1所示，分子量364，为无色棱柱状结晶，熔点248-250℃，味道极苦，不溶于水，溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、醋酸乙酯、1，2丙二醇和二甲基亚砜等有机溶剂。冬凌草甲素属于贝壳杉烯型二萜，它具有与肉瘤毒素相类似的抗癌活性中心α-亚甲基环戊酮。如果环外双键变成饱和键或裂环，则抗癌活性消失，因此也认为具有双功能，烷化烯酮O＝C-C＝CH₂系统则有抗癌活性。

经查阅文献，ORI抗癌谱较广，可通过多种途径诱导癌细胞凋亡，对人肝癌BEL-7402细胞，非小细胞肺癌组织NCI-H520、NCI-H460、NCI-H1299，人白血病HL-60细胞，食管癌CaES-17细胞及结肠癌HCT8细胞等均有明显细胞毒作用，临床上也显示了一定疗效。但由于冬凌草甲素水溶性差，体内生物半衰期短，目前有关制剂的抗癌疗效尚不理想，因此需要寻求新的制剂以克服这些问题。

冬凌草制剂有片剂和糖浆剂，因属于粗制剂，所以冬凌草甲素的含量较低，片剂含量为1.189％，糖浆剂含量为0.566％，加之冬凌草甲素为二萜类成分，几乎不溶于水，因此上述剂型口服后血药浓度较低，肿瘤细胞周围的冬凌草甲素浓度更低，很难达到有效治疗浓度，从而影响冬凌草甲素的抗癌效果。单纯以冬凌草甲素制成的制剂仅有“癌得宁”注射液一种，虽然其抗癌的临床疗效高于片剂和糖浆剂，但“癌得宁”注射液主要采用有机溶剂加表面活性剂的办法增加冬凌草甲素的溶解度，长期静脉滴注宜引起血管发炎、疼痛等副作用，从而限制了冬凌草甲素注射液的应用。CN1994293公开了冬凌草甲素在制药中的应用，是目前有关冬凌草甲素的唯一专利，还未出现制剂方面的专利。

纳米粒(nanoparticles)具备：较高的载药量；较高的包封率；有适宜的制备及提纯方法；有适当的粒径与形状；可控制药物的释放；有较长的体内循环时间，减少药物被网状内皮吞噬系统(RES)吞噬，增加对病变部位的暴露时间，从而增加疗效；载体材料可生物降解，毒性较低或没有毒性。

壳聚糖，又名甲壳质，是自然界普遍存在的一种多糖，主要来源于虾蟹的外壳中，化学名称为β-(1-4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡聚糖，是由2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖以β-1，4糖苷键缩合而成。分子中大量氨基的存在赋予壳聚糖许多独特的性质，加之其生物相容性好，毒性小，价廉易得，因此近年来壳聚糖在医药领域中的应用越来越受到广泛关注。微粒、纳米制剂是近几年逐渐发展的新型药物传递系统，与其他传统剂型相比微粒纳米制剂具有改善药物的功效，提高药物稳定性，控制药物释放，降低药物毒性及改善患者的顺应性等优点。壳聚糖可溶于酸或酸性水溶液，无毒无抗原性，在体内能被溶菌酶等酶解，具有优良的生物降解性，在体内可溶胀成水凝胶，具有良好的成球性能，可以作为微粒给药载体用来控释和输送药物。壳聚糖纳米粒除了具有壳聚糖本身的性质外，还可以提高药物稳定性，使药物到达病灶部位，达到靶向治疗的目的。

壳聚糖纳米粒作为一种新型的药物载体，具有无毒、生物相容性和生物可降解性良好，可提高药物稳定性、增加药物吸收、提高药物生物利用度、降低药物毒性作用等特点，还可使药物在体内达到控释和靶向治疗的作用。壳聚糖目前已成为靶向和缓控释研究的热点，特别适合于基因、蛋白质、多肽等生物活性大分子药物的包载，具有广阔的应用前景。运用现代分子设计思想和先进的合成技术对壳聚糖纳米粒表面进行修饰，使其具有靶器官、靶组织和靶细胞所要求的选择性，也是未来研究的方向。

半乳糖是肝细胞表面去唾液酸糖蛋白受体的特异性配体，是肝靶向基团，具有诱导和提高肝细胞在细胞外基质支架材料上的黏附性能。以壳聚糖为基体材料，在EDC和NHS的活化作用下，将半乳糖基引入到壳聚糖的结构中，合成和制备出新型肝靶向支架材料——半乳糖基化壳聚糖。

其中药物的平均粒径小于1μm，一般在100-500nm之间。壳聚糖纳米粒可以进一步制备为适合口服、注射或其他给药途径的药物剂型，从而提高药物的吸收和生物利用度。

纳米粒的制备方法主要有乳化蒸发-低温固化法、高压乳匀法、薄膜-超声分散法、溶剂挥发法、微乳法、溶剂分散凝聚法等。根据壳聚糖的特点和药物本身性质，采用溶剂挥发法制备载药壳聚糖纳米粒，此法工艺简单、回收率较高。

综上所述，将冬凌草甲素制成半乳糖基化壳聚糖纳米粒，预期可以达到改变药物体内分布、延长药物作用时间、提高生物利用度、药物作用靶向性增强等目的。现有技术中并未见有关于将冬凌草甲素制成半乳糖基化壳聚糖纳米粒的报道。虽然将药物制成纳米粒是常规的技术手段，但要研制出一种具有效果好、生物相容性好、生物利用度高、释药可控等优点的配方及制备方法并不是很容易的，需要付出创造性劳动。

发明内容

针对上述现有技术，针对冬凌草甲素水溶性差、生物利用度低的临床应用局限性，本发明提供了一种冬凌草甲素的新剂型：冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，该制剂可以增加冬凌草甲素的生物利用度，且毒副作用小、体系稳定；本发明还提供了该冬凌草甲素纳米粒制剂的制备方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，是由冬凌草甲素、脂质材料、表面活性剂、半乳糖基化壳聚糖、冻干保护剂和注射用水组成的，以100ml纳米粒制剂计，各组分含量如下：

所述脂质材料与表面活性剂的质量比为1∶2。

优选的，以100ml纳米粒制剂计，各组分含量如下：

所述脂质材料与表面活性剂的质量比为1∶2。

所述脂质材料为Soybean Oil(药用大豆油)或/和MCT(中链三酸甘油酯)。

所述表面活性剂为脂肪酸甘油酯、多元醇型非离子表面活性剂、聚氧乙烯型非离子表面活性剂、泊洛沙姆、卵磷脂中的一种或多种的组合，优选泊洛沙姆188或卵磷脂。

所述半乳糖基化壳聚糖是由壳聚糖(Chitosan，CS)与乳糖醛酸(Lactobionic acid，LA)反应制备而成。

所述壳聚糖(Chitosan，CS)与乳糖醛酸(Lactobionic acid，LA)反应条件为：将壳聚糖、乳糖醛酸溶于含有EDAC(碳二亚胺盐酸盐)和NHS(N-羟基丁二酰胺)的乙酸溶液中，其中，壳聚糖、乳糖醛酸与乙酸溶液的质量体积比(w/v，g/ml)分别为0.05％～2.5％、0.1％～5％，EDAC、NHS与乙酸溶液的质量体积比(w/v，g/ml)分别为0.7％、0.3％，乙酸溶液浓度为0.6％(w/v，g/ml)，用TMEA(N，N，N’，N’-四甲基乙二胺)调pH至4～5，500r/min搅拌72h，所得溶液在透析袋中透析3天，每天换三次水；透析后按照2mL/瓶分装至西林瓶，迅速放入超低温冰箱，在-80℃温度下冷冻24小时，再取出迅速放入温度已降至-50℃的冻干机搁板上，盖上真空罩，开启真空泵开关，冻干48小时后，取出，即得半乳糖基化壳聚糖；其中，每0.01～0.5g壳聚糖与0.02～1.0g乳糖醛酸进行反应。

所述泊洛沙姆188为一种O/W型表面活性剂，是目前用于静脉乳剂的极少数合成表面活性剂之一，具有无毒、无抗原性、无致敏性、无刺激性、化学性质稳定及不引起溶血的优良性质，制备的乳剂能够耐受热压灭菌和低温冰冻而不改变其物理稳定性；所述卵磷脂制得的乳剂的乳滴很细且稳定，无毒，可用注射用乳剂的表面活性剂，也可作为脂质微粒制剂的主要辅料。

所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将冬凌草甲素、表面活性剂和脂质材料加入有机溶剂中，在超声下使冬凌草甲素、表面活性剂和脂质材料全部溶解，得到油相；

(2)将半乳糖基化壳聚糖加入注射用水中；

(3)在磁力搅拌作用下，将油相分散到上述含有半乳糖基化壳聚糖的注射用水中，得冬凌草甲素纳米粒溶液；

(4)将步骤(3)所得冬凌草甲素纳米粒溶液在真空条件下旋转蒸发除去有机溶剂，即得冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂。

所述步骤(1)中，有机溶剂为乙醇或/和丙酮，优选丙酮和乙醇的混合，丙酮和乙醇二者的体积比为5∶1～1∶5，最优选7∶3。

所述步骤(1)中，表面活性剂和脂质材料分散在有机溶剂中时，其用量关系如下：每0.1～10.0g脂质材料分散在50ml有机溶剂中。

所述步骤(3)中，油、水两相混合的具体操作为：在转速为1000rpm磁力搅拌作用下，将油相逐滴缓慢加入到水相中。

所述步骤(4)中，旋转蒸发条件为：在30～60℃下真空旋转蒸发10～30min，除去有机溶剂。

本发明的冬凌草甲素纳米粒制剂的制备方法，采用乳化-溶剂挥发法，它是先将药物溶于溶有表面活性剂和脂质材料的有机溶剂中，然后在磁力搅拌作用下将其滴入含有半乳糖基化壳聚糖材料的水相中，最后在真空条件下蒸去有机溶剂，制得纳米粒。本法还适于制备注射用的微乳、脂质体、纳米囊等。

本发明所制备得到的冬凌草甲素纳米粒制剂在具体应用时，可以制成注射剂应用，毒副作用小，体系稳定；也可以制成口服制剂，如片剂、胶囊剂等。

本发明为了提高冬凌草甲素的口服生物利用度以及制备注射用冬凌草甲素，以增加疗效和拓展临床应用，采用了适当的辅料和乳化-溶剂挥发法制备了冬凌草甲素纳米粒。本发明所使用的表面活性剂、脂质材料和靶向因子均为药物制剂领域广泛应用的辅料，无毒、无刺激性，无免疫应答性，具备良好的生物相容性。本发明通过工艺优化和处方筛选，选择适当的搅拌速度，表面活性剂、脂质材料种类及浓度，有机溶剂配比及组成，制备出粒径大小可以控制的冬凌草甲素纳米粒。本发明的方法制备得到的冬凌草甲素纳米粒溶液在透射电镜下观察，可见冬凌草甲素为类球形的实体粒子，粒径在250nm左右，根据粒子的形态和大小可以判定该制剂为冬凌草甲素纳米粒。

预期可以达到改变药物体内分布、延长药物作用时间、提高生物利用度等目的。本发明的冬凌草甲素纳米粒的制备工艺简单，所得纳米粒生物相容性好，做成口服纳米粒溶液有利于儿童和老人等吞服困难的人群适用，增加生物利用度，减小给药剂量，降低毒副作用。

附图说明

图1：冬凌草甲素化学结构式。

图2：冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒的透射电镜照片。

图3：冬凌草甲素纳米粒溶液的粒径分布图(横坐标：粒径(Diameter，单位nm)，纵坐标：百分率(Cumulative Intensity，％))，其中，图3A为制备后的粒径分布图，图3B为放置30天后的粒径分布图。

图4：冬凌草甲素及冬凌草甲素纳米粒体外释放的释放百分率-时间曲线示意图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1：制备冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒

将0.05g壳聚糖、0.1g半乳糖酸溶于含有140mg EDAC和60mg NHS的20ml 0.6％乙酸溶液中，用TMEA调pH至4～5，500r/min搅拌72h。所得溶液在透析袋中透析3天，每天换三次水，然后进行冷冻干燥：透析后按照2mL/瓶分装至西林瓶，迅速放入超低温冰箱，在-80℃温度下冷冻24小时，再取出迅速放入温度已降至-50℃的冻干机搁板上，盖上真空罩，开启真空泵开关，冻干48小时后，取出，得半乳糖基化壳聚糖。

称取0.1g冬凌草甲素、1.25g MCT、2.5g卵磷脂溶于50ml有机溶剂(乙醇与丙酮体积比为7∶3)中，超声至药物与辅料全部溶解后，在磁力搅拌1000rpm作用下将其逐滴加入到含0.02g半乳糖基化壳聚糖的100ml注射用水中，然后在40℃下真空旋转蒸发20min，除去有机溶剂，即可得冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒。

取上述冬凌草甲素纳米粒溶液稀释到一定倍数，透射电镜下观察，如图2所示；粒径分布图如图3A所示，由图可见，为类球形的实体粒子，粒径在250nm左右，根据粒子的形态和大小可以判定该制剂为冬凌草甲素纳米粒；将制剂置于-4℃条件下放置30天后，以同样方法测得粒径分布图如图3B所示，与图3A相比，无明显变化，可见其稳定性良好。

冬凌草甲素纳米粒的药物释放，通过以下方式实现：精密吸取冬凌草甲素纳米粒2ml置于含100ml PBS(pH 7.4)的小溶出杯中，设定温度为37℃，搅拌浆转速为100r/min。取样经超滤离心后，进样20μl进行HPLC测定，计算累积释放百分率，如图4所示，由图可知冬凌草甲素纳米粒体外释放呈双相动力学，即最初为突释后为缓释，可以显著延长冬凌草甲素的体外释放。

实施例2：制备冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒

将0.06g壳聚糖、0.15g半乳糖酸溶于含有140mg EDAC和60mg NHS的20ml 0.6％乙酸溶液中，用TMEA调pH至4-5，500r/min搅拌72h。所得溶液在透析袋中透析3天，每天换三次水，然后进行冷冻干燥。

称取0.2g冬凌草甲素、2.5g MCT、5.0g卵磷脂溶于25ml有机溶剂(乙醇与丙酮体积比为1∶1)中，超声至药物与辅料全部溶解后，在磁力搅拌1000rpm作用下将其逐滴加入到含0.02g半乳糖基化壳聚糖的100ml注射用水中，然后在40℃下真空旋转蒸发20min，除去有机溶剂，即可得冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒。

实施例3：制备冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒

将0.1g壳聚糖、0.05g半乳糖酸溶于含有140mg EDAC和60mg NHS的20ml 0.6％乙酸中，用TMEA调pH至4-5，500r/min搅拌72h。所得溶液在透析袋中透析3天，每天换三次水，然后进行冷冻干燥。

称取0.8g冬凌草甲素、10.0g MCT、20.0g卵磷脂溶于50ml有机溶剂(乙醇与丙酮体积比为3∶2)中，超声至药物与辅料全部溶解后，在磁力搅拌1000rpm作用下逐滴加入到含0.2g半乳糖基化壳聚糖的注射用水中，然后在40℃下真空旋转蒸发20min，除去有机溶剂，即可得冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒。

实施例4：制备冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒

将0.15g壳聚糖、0.25g半乳糖酸溶于含有140mg EDAC和60mg NHS的20ml 0.6％乙酸溶液中，用TMEA调pH至4-5，500r/min搅拌72h。所得溶液在透析袋中透析3天，每天换三次水，然后进行冷冻干燥。

称取0.1g冬凌草甲素、1.25g大豆油、2.5g卵磷脂溶于25ml有机溶剂(乙醇与丙酮体积比为2∶3)中，超声至药物与辅料全部溶解后，在磁力搅拌1000rpm作用下逐滴加入到含0.02g半乳糖基化壳聚糖的注射用水中，然后在40℃下真空旋转蒸发20min，除去有机溶剂，即可得冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒。

实施例5：制备冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒

将0.05g壳聚糖、0.01g半乳糖酸溶于含有140mg EDAC和60mg NHS的20ml 0.6％乙酸溶液中，用TMEA调pH至4-5，500r/min搅拌72h。所得溶液在透析袋中透析3天，每天换三次水，然后进行冷冻干燥。

称取0.5g冬凌草甲素、6.25g MCT、12.5g卵磷脂溶于15ml有机溶剂(乙醇与丙酮体积比为1∶3)中，超声至药物与辅料全部溶解后，在磁力搅拌1000rpm作用下逐滴加入到含0.12g半乳糖基化壳聚糖的注射用水中，然后在40℃下真空旋转蒸发20min，除去有机溶剂，即可得冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒。

实施例6：制备冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒

将0.05g壳聚糖、0.05g半乳糖酸溶于含有140mg EDAC和60mg NHS的20ml 0.6％乙酸溶液中，用TMEA调pH至4-5，500r/min搅拌72h。所得溶液在透析袋中透析3天，每天换三次水，然后进行冷冻干燥。

称取0.2g冬凌草甲素、2.5g大豆油、5.0g卵磷脂溶于50ml有机溶剂(乙醇与丙酮体积比为3∶1)中，超声至药物与辅料全部溶解后，在磁力搅拌1000rpm作用下逐滴加入到含0.05g半乳糖基化壳聚糖的注射用水中，然后在40℃下真空旋转蒸发20min，除去有机溶剂，即可得冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒。

Claims

1.一种冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，其特征在于：是由冬凌草甲素、脂质材料、表面活性剂、半乳糖基化壳聚糖、冻干保护剂和注射用水组成的，以100ml纳米粒制剂计，各组分含量如下：

所述脂质材料与表面活性剂的质量比为1∶2。

2.根据权利要求1所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，其特征在于：以100ml纳米粒制剂计，各组分含量如下：

3.根据权利要求1或2所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，其特征在于：所述脂质材料为Soybean Oil或/和MCT。

4.根据权利要求1或2所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，其特征在于：所述表面活性剂为脂肪酸甘油酯、多元醇型非离子表面活性剂、聚氧乙烯型非离子表面活性剂、泊洛沙姆、卵磷脂中的一种或多种的组合。

5.根据权利要求4所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，其特征在于：所述表面活性剂为泊洛沙姆188或卵磷脂。

6.根据权利要求1或2所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，其特征在于：所述半乳糖基化壳聚糖是由壳聚糖与乳糖醛酸反应制备而成。

7.根据权利要求6所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂，其特征在于：所述壳聚糖与乳糖醛酸反应条件为：将壳聚糖、乳糖醛酸溶于含有EDAC和NHS的乙酸溶液中，其中，壳聚糖、乳糖醛酸与乙酸溶液的质量体积比分别为0.05％～2.5％、0.1％～5％，EDAC、NHS与乙酸溶液的质量体积比分别为0.7％、0.3％，乙酸溶液浓度为0.6％，用TMEA调pH至4～5,500r/min搅拌72h，所得溶液在透析袋中透析3天，每天换三次水；透析后在-80℃温度下冷冻24小时，取出，-50℃真空冻干48小时，即得半乳糖基化壳聚糖；其中，每0.01～0.5g壳聚糖与0.02～1.0g乳糖醛酸进行反应。

8.权利要求1～7中任一项所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)将冬凌草甲素、表面活性剂和脂质材料加入有机溶剂中，在超声下使冬凌草甲素、面活性剂和脂质材料全部溶解，得到油相；

(2)将半乳糖基化壳聚糖加入注射用水中；

9.根据权利要求8所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，有机溶剂为乙醇或/和丙酮。

10.根据权利要求8或9所述的冬凌草甲素半乳糖基化壳聚糖纳米粒制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，每0.1～10.0g脂质材料分散在50ml有机溶剂中。