CN102584968B - 一种提取纯化植物大分子活性成分的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种提取纯化植物大分子活性成分的方法，该方法包括以下步骤：(1)将植物药材用水提取，得提取液；(2)提取液澄清过滤得清液；(3)清液进行微孔膜精滤，得精滤液；(4)精滤液进行活性分子纯化截流，得大分子纯化浓缩液；(5)纯化浓缩液低温干燥得到大分子活性成分。与现有技术相比，本发明具有可大幅度高产品的功效等优点。

Description

一种提取纯化植物大分子活性成分的方法
技术领域
本发明涉及一种提取纯化植物大分子活性成分的方法。
背景技术
随着植物化学研究的深入，植物大分子活性物质越来越受到医疗保健界的关注。植物大分子包括蛋白质、糖蛋白、糖肽、多糖、多肽、酶类及多酚类物质。研究表明，植物大分子具有很强的生物活性，如：免疫调节、抗癌、降血糖、降血脂、降血压、抗氧化等功效。因此，在天然植物药的研发生产中，对植物大分子的运用越来越广泛。
在传统针对植物大分子的制备方法包括：水提醇沉法，有机溶剂法、树脂吸附法等。但是，这些传统方法都存在高温、有机溶剂残留以及强酸碱的问题。这些因素都会影响植物大分子的结构，尤其是当破坏大分子三维立体结构以后，其功效就会迅速丧失失活，从而影响产品功效。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可大幅度高产品的功效的提取纯化植物大分子活性成分的方法。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种提取纯化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)将植物药材用水提取，得提取液；
(2)提取液澄清过滤得清液；
(3)清液进行微孔膜精滤，得精滤液；
(4)精滤液进行活性分子纯化截流，得大分子纯化浓缩液；
(5)纯化浓缩液低温干燥得到大分子活性成分。
步骤(1)植物药材包括枸杞、茶叶、青钱柳、麦冬、石斛或余甘子。
步骤(1)所述的植物药材用水提取为：按植物药材与水重量比1∶16混合进行搅拌提取，搅拌速度为20-30rpm。
步骤(2)所述的澄清过滤为：将提取液静置12h，抽取上层清液在转速为8000-10000rpm下进行高速离心，得清液。
步骤(3)所述的微孔膜的孔径为0.1-0.2μm。
步骤(4)所述的精滤液进行活性分子纯化截流是：根据植物药材大分子活性的分子量大小选择与其分子量相匹配的膜进行过滤。
步骤(4)所述的纯化浓缩液低温干燥的温度为：35℃-40℃，干燥时间为8小时。
与现有技术相比，本发明采用水作为提取液，而且在低温下进行干燥，不会影响植物大分子的结构，尤其是不会破坏大分子三维立体结构，可以保持活性，从而大大提高了其功效。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
一种提取纯化枸杞中大分子活性成分糖蛋白的方法，该方法包括以下步骤：
(1)将枸杞用水提取，得提取液；
(2)提取液澄清过滤得清液；
(3)清液用孔径为0.1-0.2μm微孔膜进行精滤，得精滤液；
(4)由于枸杞糖蛋白的分子量大小在70k-80k范围内，因此选用分子量为50k和100k的超滤膜进行分离纯化得到枸杞糖蛋白纯化浓缩液；
(5)纯化浓缩液低温干燥得到枸杞糖蛋白。
将本发明产品枸杞糖蛋白与市场上销售的同类产品进行活性比较结果如下：
两个剂量组：即上述方法制得的枸杞糖蛋白5mg、市售枸杞糖蛋白500mg/kg.BW。同时设空白对照组。采用SPF级昆明种小鼠，连续经口灌胃给予，30天后开始实验。实验结果显示：本发明5mg剂量与市售500mg作用相当，1)能明显增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力；2)能明显增强二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应；3)能明显升高小鼠血清溶血素含量；4)能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能；5)能明显增强小鼠碳廓清能力；6)能明显增强抗体生成细胞能力。
由此可见，本发明方法制得的枸杞糖蛋白可以明显提高生物活性。
实施例2
一种提取纯化茶叶中大分子活性成分茶多糖的方法，该方法包括以下步骤：
(1)将粗老茶用水提取，得提取液；
(2)提取液澄清过滤得清液；
(3)清液用孔径为0.1-0.2μm微孔膜进行精滤，得精滤液；
(4)由于茶多糖的分子量大小在40k左右，因此选用分子量为30k和50k的超滤膜进行分离纯化得到茶多糖纯化浓缩液；
(5)纯化浓缩液低温干燥得到活性茶多糖。
将本发明方法制得的活性茶多糖10mg/kg与市售同类产品500mg/kg进行降血糖活性比较：
Figure BDA0000127921390000031
由此可见，本发明方法制得的茶多糖降血糖活性明显大幅度提高。
综上所述：本发明方法能够更好的保留植物活性大分子的活性，使其产品功效更显著。

Claims (1)

1.一种提取纯化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）将植物药材用水提取，得提取液；
（2）提取液澄清过滤得清液；
（3）清液进行微孔膜精滤，得精滤液；
（4）精滤液进行活性分子纯化截流，得大分子纯化浓缩液；
（5）纯化浓缩液低温干燥得到大分子活性成分；
步骤（1）植物药材选自枸杞或茶叶；
步骤（1）所述的植物药材用水提取为：按植物药材与水重量比1:16混合进行搅拌提取，搅拌速度为20-30rpm；
步骤（2）所述的澄清过滤为：将提取液静置12h，抽取上层清液在转速为8000-10000rpm下进行高速离心，得清液；
步骤（3）所述的微孔膜的孔径为0.1-0.2μm；
步骤（4）所述的精滤液进行活性分子纯化截流是：根据植物药材大分子活性的分子量大小选择与其分子量相匹配的膜进行过滤；
步骤（5）所述的纯化浓缩液低温干燥的温度为：35℃-40℃，干燥时间为8小时。
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