CN102579432A - 3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与2-莰醇组合物的新应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及依达拉奉与龙脑药物组合物在制备预防和/或治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用。

Description

3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与2-莰醇组合物的新应用

技术领域

本发明涉及3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑组合物在制备预防和/或治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用。

背景技术

机体组织器官正常代谢、功能的维持，有赖于良好的血液循环。各种原因造成的局部组织器官的缺血，常常使组织细胞发生缺血性损伤。在动物试验和临床观察中也发现，在一定条件下恢复血液再灌注后，部分动物或患者细胞功能代谢障碍及结构破坏不但未减轻反而加重，因而将这种血液再灌注后缺血性损伤进一步加重的现象称为缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury，IRI)。IRI将会是一个重大的临床问题，已引起世界各国学者的广泛关注和研究。

缺血再灌注损伤机制，目前虽未彻底明了，但日益深入，目前已认识到的有以下方面：自由基增多、钙超载、内皮细胞抗氧化系统损伤、内皮细胞合成与释放血管活性物质障碍、炎症介质释放、基因表达谱改变等。

羟自由基是氧自由基的一种形式，其活性很高，它通过攻击膜组分磷脂中的未饱和脂肪酸，引发一系列自由基链式反应，生成多种脂质过氧化物.致使生物膜的结构和功能改变。如未饱和脂肪酸减少，磷脂组成发生变化，膜流动性降低，通透性增加，膜上蛋白质或酶损伤失活以及脂质过氧化作用的有毒产物对细胞与亚细胞膜的毒性效应等，最终造成整个细胞结构与功能的损伤。心肌缺血再灌注时随着大量氧的涌人，致使氧自由基大量产生，与心肌细胞膜上的多价不饱和脂肪酸发生连锁反应，造成细胞膜的脂质过氧化，使膜电位不稳定，触发严重的心律失常。

3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮，又称依达拉奉，其结构式为：

依达拉奉分子式为C₁₀H₁₀N₂O，分子量为174.19，CAS号为89-25-8。依达拉奉目前在临床上作为一种脑保护剂，清除自由基，抑制脂质过氧化，从而抑制脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化损伤。大鼠在缺血/缺血再灌注后静脉给予依达拉奉，可阻止脑水肿和脑梗塞的进展，并缓解所伴随的神经症状，抑制这发性神经元死亡。

中华人民共和国《药典》2010年版一部中收录了天然冰片、艾片、冰片(合成龙脑)。天然冰片中主要含右旋龙脑，其右旋龙脑含量不少于96.0％。艾片中主要含左旋龙脑，其左旋龙脑含量以龙脑计不少于85.0％。冰片(合成龙脑)中含龙脑不少于55.0％。

右旋龙脑又称为(+)-2-莰醇，左旋龙脑又称为(-)-2-莰醇。

H.Nakazawa等研究了依达拉奉在心肌缺血再灌注损伤的应用(Free RadicalResearch，1996，24(5)，361-367)。CN101524352公开了依达拉奉与冰片组合物以及所述组合物在治疗缺血性脑血管病中的应用，但该文献未公开依达拉奉与龙脑组合物在心血管疾病治疗中的应用。

本发明发现依达拉奉和龙脑的组合物可以更加有效的预防和治疗心肌缺血再灌注损伤，可以在较少的使用量达到良好的治疗效果。

发明内容

本发明的目的是提供一种依达拉奉与龙脑药物组合物在制备预防和/或治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用。优选地，将上述药物组合物用于制备预防和治疗心肌梗塞、冠心病、心绞痛、心脏血栓药物中的应用。所述依达拉奉与龙脑药物组合物配合使用时具有协同作用，可以提高使用效果。

本发明中依达拉奉与龙脑的质量比为20∶1～1∶4，优选为10∶1～1∶2，更优选的为8∶1～1∶1。进一步的优选质量比选自8∶1或7∶1或6∶1或17∶3或21∶4或5∶1或4∶1或19∶6或3∶1或18∶7或7∶3或17∶8或2∶1或13∶7或16∶9或3∶2或14∶11或11∶9或13∶12或1∶1；更加进一步的优选为选自8∶1或7∶1或6∶1或5∶1或4∶1或3∶1或2∶1或1∶1。更加进一步的优选为4∶1。

本发明中所述的龙脑可以选自天然冰片、艾片和合成龙脑。优选使用天然冰片。

本发明中所述的龙脑还可以使用经过纯化的2-莰醇，所述的2-莰醇的纯度不低于96.0％，优选地为不低于98.0％，更优选地为不低于99.0％。

本发明中所述的经过纯化的2-莰醇优选单一构型的(+)-2-莰醇或(-)-2-莰醇。所述的(+)-2-莰醇的纯度不低于96.0％，优选地为不低于98.0％，更优选地为不低于99.0％。所述的(-)-2-莰醇的纯度不低于96.0％，优选地为不低于98.0％，更优选地为不低于99.0％。

本发明中所述的龙脑最优选的为纯度不低于99.0％的(+)-2-莰醇。

上述的药物组合物中还可以含有溶剂，可以使得依达拉奉与龙脑更好地混合。所述溶剂可以选用水溶性有机溶剂、或者水溶性有机溶剂与水的混合物。常用的水溶性有机溶剂主要有醇类溶剂、醚类溶剂、酮类溶剂等。本发明中优选水、水溶性有机溶剂与水的混合物。常用的醇类溶剂有乙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇等；常用的醚类溶剂有乙二醇单乙基醚、乙二醇单丁基醚等；常用的酮类溶剂有丙酮、N-甲基-2-吡咯烷酮。水溶性有机溶剂优选使用丙二醇。

本发明中在大鼠心肌缺血再灌注损伤后，分别给予依达拉奉与龙脑组合物、依达拉奉、(+)-2-莰醇、(-)-2-莰醇，均可以通过减少梗死范围、降低TNF-α、IL-1β的含量，对心肌缺血具有保护作用。其中与依达拉奉组、(+)-2-莰醇组、(-)-2-莰醇组相比，依达拉奉与龙脑组合物组能显著减少梗死范围。并且依达拉奉与冰片的组合物相对于单独使用时可以在较低的治疗使用量达到更好的治疗效果。

在家兔心肌缺血再灌注损伤后，分别给予依达拉奉与龙脑组合物、依达拉奉、(+)-2-莰醇、(-)-2-莰醇，均可以通过减少梗死范围、升高SOD、降低MDA的含量，对心肌缺血具有保护作用。其中与依达拉奉组、(+)-2-莰醇组、(-)-2-莰醇组相比，依达拉奉与龙脑组合物组能显著减少梗死范围。并且依达拉奉与冰片的组合物相对于单独使用时可以在较低的治疗使用量达到更好的治疗效果。

下面以实施例的方式对本发明作进一步说明，给出本发明的实施细节，但是并不是旨在限定本发明的保护范围。

具体实施方式

实施例1注射液配制

称取1.111g依达拉奉和139mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液A1。

称取889mg依达拉奉和111mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液A2。

称取889mg依达拉奉和111mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液A3。

称取1.094g依达拉奉和156mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液B1。

称取875mg依达拉奉和125mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液B2。

称取875mg依达拉奉和125mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液B3。

称取1.072g依达拉奉和178mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液C1。

称取857mg依达拉奉和143mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液C2。

称取857mg依达拉奉和143mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液C3。

称取1.041g依达拉奉和208mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液D1。

称取833mg依达拉奉和167mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液D2。

称取833mg依达拉奉和167mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液D3。

称取1g依达拉奉和250mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液E1。

称取800mg依达拉奉和200mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液E2。

称取800mg依达拉奉和200mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液E3。

称取938mg依达拉奉和312mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液F1。

称取750mg依达拉奉和250mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液F2。

称取750mg依达拉奉和250mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液F3。

称取833mg依达拉奉和417mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液G1。

称取667mg依达拉奉和333mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液G2。

称取667mg依达拉奉和333mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液G3。

称取625mg依达拉奉和625mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1.25mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液H1。

称取500mg依达拉奉和500mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为1mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液H2。

称取500mg依达拉奉和500mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至0.5L，得到浓度为2mg/ml的依达拉奉龙脑复方注射液H3。

(+)-2-莰醇注射液：称取500mg(+)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为0.5mg/ml的(+)-2-莰醇注射液。

(-)-2-莰醇注射液：称取500mg(-)-2-莰醇，溶于80ml 1，2-丙二醇，加入注射用水稀释至1L，得到浓度为0.5mg/ml的(-)-2-莰醇注射液。

依达拉奉注射液为市售产品(商品名：必存，规格：10mg/5mL，南京先声东元制药有限公司生产)。

实施例2大鼠心肌缺血再灌注实验

2.1大鼠心肌缺血再灌注模型的制备

SD大鼠(上海斯莱克实验动物有限责任公司)于普通级环境检疫，体重280g-300g，以戊巴比妥腹腔注射麻醉(30mg/kg)，仰位固定，以标准II导联监测动物心电图；切开气管，插入气管插管，接动物人工呼吸机行人工呼吸(90次/min，呼吸比值(115∶1)。于左侧第4～5肋间开胸，破开心包膜，暴露心脏，除1组外其他各组均于冠状动脉前降支根部穿线(3/8弧带针缝合线，0/3尼龙线)，备结扎用；穿线后稳定10min，将两个细塑料环套入结扎线的两端(与血管并行)，结扎(无sT段及T波改变者淘汰)，30min后，解开结扎线，使前降支实现再灌注；缝合胸壁，恢复自然呼吸。再灌注后1h后终止实验。尾静脉建立静脉通路给药，再灌注后立即给药，假手术组、模型组给予0.2ml/kg生理盐水，其余组分别尾静脉注射给予指定的注射液。

缺血的标志为sT段抬高和R波增高，左室发绀。再灌的标志为：以sT段下降≥1/2，发绀区变红为再灌注成功标志。有下列情况之一的大鼠将退出实验：(1)当灌注染色后，缺血质量(AAR)不足心脏重的15％；(2)结扎冠状动脉失败或未发现再灌注者；(3)过度出血并致血压下降者；(4)呼吸心跳停止超过30s者。

2.2实验过程

SD大鼠制备心肌缺血模型后，将动物机率均等单盲分配至各组，每组10只。所有组于再灌注后立即尾静脉注射给药1次，共给药1次。实验过程中记录心电图，再灌注后1小时，经颈静脉取血，离心分离血清，应用ELISA法检测IL-1β，放免法检测血浆TNF-a，均按试剂盒要求进行检测。肿瘤坏死因子(TNF-a)试剂盒：南京建成生物工程研究所；白介素-1β试剂盒：南京建成生物工程研究所。

尔后处死大鼠，取出心脏，生理盐水洗去余血，沿冠状沟剪去心房及大血管，沿心脏结扎线以下横切6片，置于0.1％N-BT液中，37℃恒温水裕染色15min正常心肌为暗蓝色，梗死心肌不着色，用刀片切下染色区，剩下的为梗死区，称量梗死区心肌质量和未梗死区心肌质量，计算梗死区心肌占全心脏质量百分率。

统计学处理：用SPSS 10.0软件包进行统计学分析，数据用(x±SD)表示，组间比较应用方差分析。

2.3大鼠实验结果1

实验分为：假手术组、模型组、依达拉奉龙脑复方注射液D1组(0.75mg/kg，下文简称复方依达拉奉注射液组)、依达拉奉注射液组(3.0mg/kg)、(+)-2-莰醇组(0.4mg/kg)。

对心肌梗死范围的影响：各给药组全心脏的重量与模型组比较无显著差异(P＞0.05)；假手术组各动物心肌染色后未见明显梗塞区；模型组心肌梗塞区占全心脏重的百分比(33.18±4.87)％；复方依达拉奉注射液组、依达拉奉注射液组及(+)-2-莰醇组梗塞程度明显减轻，梗塞区重占全心脏的百分比与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05)，以复方依达拉奉注射液组为优(P＜0.01)，见表1。

对血清中TNF-a、IL-1β的影响：放免法检测血浆TNF-a含量的结果显示，模型组TNF-a数值较假手术组升高，各给药组给药后均有不同程度的降低，但无统计学差异。模型组IL-1β含量较假手术组升高，各给药组给药后均有有不同程度的下降，其中以复方依达拉奉注射液组为优(P＜0.01)，见表2。

2.4大鼠实验结果2

实验分为：假手术组、模型组、复方依达拉奉注射液组(0.75mg/kg)、依达拉奉注射液组(3.0mg/kg)、(-)-2-莰醇组(0.4mg/kg)。

对心肌梗死范围的影响：各给药组全心脏的重量与模型组比较无显著差异(P＞0.05)；假手术组各动物心肌染色后未见明显梗塞区；模型组心肌梗塞区占全心脏重的百分比(35.48±6.87)％；复方依达拉奉注射液组、依达拉奉注射液组及(-)-2-莰醇组梗塞程度明显减轻，梗塞区重占全心脏的百分比与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05)，以复方依达拉奉注射液组为优(P＜0.01)，见表3。

对血清中TNF-a、IL-1β的影响：放免法检测血浆TNF-a含量的结果显示，模型组TNF-a数值较假手术组升高，各给药组给药后均有不同程度的降低，但无统计学差异。模型组IL-1β含量较假手术组升高，各给药组给药后均有有不同程度的下降，其中以复方依达拉奉注射液组为优(P＜0.01)，见表4。

实施例3家兔心肌缺血再灌注实验

3.1家兔心肌缺血再灌注模型的制备

家兔(上海斯莱克实验动物有限责任公司)于普通级环境检疫，体重2.2～3.0kg，雌雄兼用，以1.5％戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉(30mg/kg)，仰位固定，以标准II导联监测动物心电图；切开气管，插入气管插管，接动物人工呼吸机行人工呼吸(90次/min，呼吸比值(115∶1)。于左侧第4～5肋间开胸，破开心包膜，暴露心脏，除1组外其他各组均于冠状动脉前降支根部穿线(3/8弧带针缝合线，0/3尼龙线)，备结扎用；穿线后稳定10min，将两个细塑料环套入结扎线的两端(与血管并行)，结扎(无sT段及T波改变者淘汰)，30min后，解开结扎线，使前降支实现再灌注；缝合胸壁，恢复自然呼吸。再灌注后1h后终止实验。耳缘静脉建立静脉通路给药，再灌注后立即给药，假手术组、模型组给予0.2ml/kg生理盐水，其余组分别耳缘静脉注射给予指定的注射液。

缺血的标志为sT段抬高和R波增高，左室发绀。再灌的标志为：以sT段下降≥1/2，发绀区变红为再灌注成功标志。有下列情况之一的动物将退出实验：(1)当灌注染色后，缺血质量(AAR)不足心脏重的15％；(2)结扎冠状动脉失败或未发现再灌注者；(3)过度出血并致血压下降者；(4)呼吸心跳停止超过30s者。

3.2实验过程

家兔制备心肌缺血模型后，将动物机率均等单盲分配至各组，每组6只。所有组于再灌注后立即耳缘静脉注射给药1次，共给药1次。实验过程中记录心电图，再灌注后1小时，经股静脉取血，离心分离血清，测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量，均按试剂盒要求进行检测。超氧化物歧化试剂盒：南京建成生物工程研究所；丙二醛试剂盒：南京建成生物工程研究所。

尔后处死家兔，取出心脏，生理盐水洗去余血，沿冠状沟剪去心房及大血管，将心室称重，然后将心肌切成若干片，每片厚度0.4cm左右，置于0.1％N-BT液中，37℃恒温水裕染色15min正常心肌为暗蓝色，梗死心肌不着色，用刀片切下染色区，剩下的为梗死区，称量梗死区心肌质量，计算梗死区心肌占全心脏质量百分率。

统计学处理：用SPSS 10.0软件包进行统计学分析，数据用表示，组间比较应用方差分析。

3.3家兔实验结果1

实验分为：假手术组、模型组、复方依达拉奉注射液组(0.75mg/kg)、依达拉奉注射液组(3.0mg/kg)、(+)-2-莰醇组(0.4mg/kg)。

对心肌梗死范围的影响：假手术组各动物心肌染色后未见明显梗塞区；模型组心肌梗塞区占全心脏重的百分比(32.3±2.1)％；复方依达拉奉注射液组、依达拉奉注射液组及(+)-2-莰醇组梗塞程度明显减轻，梗塞区重占全心脏的百分比与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05)，以复方依达拉奉注射液组为优(P＜0.01)，见表5。

对血清中SOD、MDA的影响：结果显示，模型组SOD数值较假手术组降低，各给药组给药后均有不同程度的降低(P＜0.05)。模型组MDA含量较假手术组升高，各给药组给药后均有有不同程度的升高，其中以复方依达拉奉注射液组为优(P＜0.01)，见表6。

3.4家兔实验结果2

实验分为：、假手术组、模型组、复方依达拉奉注射液组(0.75mg/kg)、依达拉奉注射液组(3.0mg/kg)、(-)-2-莰醇组(0.4mg/kg)。

对心肌梗死范围的影响：假手术组各动物心肌染色后未见明显梗塞区；模型组心肌梗塞区占全心脏重的百分比(31.7±3.1)％；复方依达拉奉注射液组、依达拉奉注射液组及(+)-2-莰醇组梗塞程度明显减轻，梗塞区重占全心脏的百分比与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05)，以复方依达拉奉注射液组为优(P＜0.01)，见表7。

对血清中SOD、MDA的影响：结果显示，模型组SOD数值较假手术组降低，各给药组给药后均有不同程度的降低(P＜0.05)。模型组MDA含量较假手术组升高，各给药组给药后均有有不同程度的升高，其中以复方依达拉奉注射液组为优(P＜0.01)，见表8。

表1复方依达拉奉注射液对心肌梗死范围的影响

注：与假手术组比较，^＊P＜0.01；与模型组比较，^＊＊P＜0.05，^＊＊＊P＜0.01；与复方依达拉奉注射液组比较，#P＜0.01。

表2复方依达拉奉注射液对TNF-a、IL-1β的影响

注：与假手术组比较，^＊P＜0.05；与模型组比较，^＊＊P＜0.05，^＊＊＊P＜0.01。

表3复方依达拉奉注射液对心肌梗死范围的影响

注：与假手术组比较，^＊P＜0.01；与模型组比较，^＊＊P＜0.05，^＊＊＊P＜0.01。与复方依达拉奉注射液组比较，#P＜0.01。

表4复方依达拉奉注射液对TNF-a、IL-1β的影响

注：与假手术组比较，^＊P＜0.05；与模型组比较，^＊＊P＜0.05，^＊＊＊P＜0.01。

表5复方依达拉奉注射液对心肌梗死范围的影响

注：与假手术组比较，^＊P＜0.01；与模型组比较，^＊＊P＜0.05，^＊＊＊P＜0.01。与复方依达拉奉注射液组比较，#P＜0.01。

表6复方依达拉奉注射液对SOD、MDA的影响

注：与假手术组比较，^＊P＜0.05；与模型组比较，^＊＊P＜0.05，^＊＊＊P＜0.01。

表7复方依达拉奉注射液对心肌梗死范围的影响

注：与假手术组比较，^＊P＜0.01；与模型组比较，^＊＊P＜0.05，^＊＊＊P＜0.01。与复方依达拉奉注射液组比较，#P＜0.01。

表8复方依达拉奉注射液对SOD、MDA的影响

注：与假手术组比较，^＊P＜0.05；与模型组比较，^＊＊P＜0.05，^＊＊＊P＜0.01。

Claims (10)

1.3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑组合物在制备预防和/或治疗心血管疾病药物中的应用。

2.权利要求1中所述的应用，其特征在于所述龙脑选自天然冰片、艾片、冰片(合成龙脑)。

3.权利要求1中所述的应用，其特征在于所述龙脑为含量超过98.0%的(+)-2-莰醇。

4.权利要求1中所述的应用，其特征在于所述龙脑为含量超过98.0% 的(-)-2-莰醇。

5.权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于所述心血管疾病可以导致心肌缺血再灌注损伤。

6.权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于所述心血管疾病为心肌梗塞、冠心病、心绞痛、心脏血栓。

7.权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于所述组合物中3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑的质量比为20:1~1:4。

8.权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于所述组合物中3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑的质量比为10:1~1:2。

9.权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于所述组合物中3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与龙脑的质量比选自8:1或7:1或6:1或5:1或4:1或3:1或2:1或1:1。

10.权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于所述组合物还可以包括其他可药用非活性组分。