CN102573474A

CN102573474A - 同工型选择性磷脂酶 d 抑制剂

Info

Publication number: CN102573474A
Application number: CN2010800423044A
Authority: CN
Inventors: H·亚历克斯·布朗; C·W·林德斯列; 亚历克斯·G·沃特森; 莎拉·A·斯科特
Original assignee: Vanderbilt University
Current assignee: Vanderbilt University
Priority date: 2009-07-24
Filing date: 2010-07-23
Publication date: 2012-07-11
Also published as: IN2012DN01661A; EP2456307B1; SG178102A1; CA2768940C; EP2456307A1; EP2456307A4; AU2010275526A1; BR112012001586A2; IL217720A0; JP2013500260A; MX2012001064A; WO2011011680A1; US9127005B2; RU2012106657A; US20120214832A1; CA2768940A1; KR20120090034A

Abstract

本发明公开了同工型选择性磷脂酶D抑制剂。一方面，所公开的化合物可具有由下式(I)表示的结构：

本发明也公开了制造和使用所述化合物的方法。本发明也公开了包含所述化合物的医药组合物和试剂盒。本摘要意图作为扫描工具以便在特定技术中搜索且并非想要限制本发明。

Description

同工型选择性磷脂酶 D 抑制剂

相关申请的交叉引用

本申请要求2009年7月24日提交的美国申请No.61/61/228,492的优先权，所述申请的全部内容以引用的方式并入本文。

背景

磷脂酶D(PLD；EC3.1.4.4)酶为将磷脂的游离头基水解成磷脂酸(PA)的磷酸二酯酶。在哺乳动物细胞中，主要的底物为磷脂酰胆碱(PC)，且PA的产生具有广泛的生物功能。PA调节细胞膜的生物物理学性质，充当改变许多酶和蛋白质的活性的第二信使，且随后分别由脂质磷酸磷酸酶和磷脂酶A₂代谢为二酰基甘油和溶血磷脂酸。来源于PC的二酰基甘油为重要的细胞信号分子且溶血磷脂酸经释放作为影响许多细胞类型的胞外信使。证据支持PLD在经调节的胞吐作用、细胞增殖、膜转运和肿瘤形成中的作用。

PLD的同工酶已由动物、真菌、植物、细菌和病毒克隆。已鉴别出两种哺乳动物PLD基因(PLD1和PLD2)，且已经表征数种剪接变体蛋白质产物。哺乳动物同工酶具有保守一级序列和域结构，但由上游信号途径差示调节。两种酶都是在其N端具有串联的pleckstrin同源(PH)域和phox同源(PX)域的PXPH-PLD亚族的成员(Eliás M，

M，CvrckováF，

V.，“Molecular diversity ofphospholipase D in angiosperms，”BMC Genomics.2002；3(1)：2.2002年2月1日电子版)且猜测其具有具备恒定HXKX₄D基元的假二聚催化域(Ponting CP，Kerr ID.，“A novel family of phospholipase Dhomologues that includes phospholipid synthases and putativeendonucleases：identification of duplicated repeats and potential activesite residues，”Protein Sci.1996年5月；5(5)：914-22.；Stuckey J.A.，Dixon J.E.，“Crystal structure of a phospholipase D family member，”NatStruct Biol.1999年3月；6(3)：278-84.)。

PA的产生具有广泛的生理学影响且已经提出胆碱释放在乙酰胆碱的合成中起作用。最初在植物中鉴别出PLD且对于纯化的卷心菜PLD 的早期实验(Yang S.F.，Freer S.，Benson A.A.，“Transphosphatidylation by phospholipase D，”J Biol Chem.1967年2月10日；242(3)：477-84.)确立了磷脂酰胆碱磷酸水解酶活性(方程1)和竞争性磷脂酰胆碱磷脂酰转移酶活性(方程2)。

磷脂酰胆碱+H₂O→磷脂酸+胆碱(方程1)

磷脂酰胆碱+ROH→磷脂酰基-OR+胆碱(方程2)

磷脂酰基从磷脂底物转移到伯醇(ROH)产生磷脂酰醇(方程2)。由于其独特的来源、生物膜中的低分布量和新陈代谢稳定性，已经将磷脂酰醇的形成用作PLD活性的特定标志。已经开发特定体外和体内测定系统以允许使用电喷雾电离质谱鉴别信号调节剂、相关活性和底物-产物关系(Brown，H.A.，Gutowski，S.，Moomaw，C.R.，Slaughter，C.和Sternweis，P.C.(1993)ADP-ribosylation factor(ARF)，a smallGTP-dependent regulatory protein，stimulates phospholipase D activity.Cell 75：1137-1144；Walker，S.J.和Brown，H.A.(2003)Measurement ofG protein stimulated phospholipase D activity in intact cells.见Methodsin Molecular Biology第237卷：G Protein Signaling：Methods andProtocols，由A.V.Smrcka编，Humana Press Inc.，Totowa，NJ.；和Brown，H.A.，Henage，L.G.，Preininger，A.M.，Xiang，Y.和Exton，J.H.(2007)Biochemical Analysis of Phospholipase D.见Methods in Enzymology.434，Lipidomics and Bioactive Lipids：Lipids and Cell Signaling.由H.Alex Brown编，Elsevier.第49-87页)。

由于PLD及其产物的作用，PLD的酶活性由多种激素、神经传递素、生长因子、细胞因子、整合素及其它细胞信号紧密调节。PLD1同工酶在体内和体外处于广泛控制之下。该紧密调节在某种程度上是数十年来很难研究该酶的原因，直到确定磷脂酰肌醇4，5-二磷酸(PIP₂)为催化活性的必要调节剂(Brown等，1993)。在PLD和脂质小泡之间的相互作用取决于PIP₂(Henage，L.，Exton，J.和Brown，H.A.Kineticanalysis of a mammalian Phospholipase D：Kinetic analysis of amammalian Phospholipase D：Allosteric modulation by monomericGTPases，Protein kinase C and polyphosphoinosites.(2006)J.Biol.Chem.281：3408-3417.)。该相互作用主要由在C末端PLD催化子域内的保守多碱基区域介导，但似乎也有PLD和磷酸肌醇直接相互作用的其它位点。先前的工作提出对于主要调节剂来说，存在不同的但又相互作用的结合位点。突变研究鉴别出在这些相互作用中所涉及的PLD1域和氨基酸序列。PLD1活性由蛋白激酶C的常规同工型经不依赖于激酶活性的直接蛋白质-蛋白质相互作用调节。PLD1也由Rho和Arf GTP酶家族的成员调节。

相比之下，PLD2具有相对较高的基础活性且不需要由GTP酶调节来活化。最初，这导致了以下不恰当的假设：PLD1为信号同工酶，而PLD2涉及到更寻常的看家功能。最新证据显示PLD1和PLD2两者都由包括酪氨酸激酶生长因子受体的许多细胞表面受体活化。PA的产生对于介导由这些生长促进和细胞增殖途径调节的后续过程似乎是必需的。

许多实验室的先前工作提出PLD在生长、增殖、转型和肿瘤形成所需的许多细胞过程中起作用。Arf和PLD在Golgi膜上的存在和继后PA在被覆小泡的形成中起作用的报道提出了其在小泡转运中的作用。PLD与葡萄糖转运蛋白Glut-4到质膜的移位相关且PLD活性牵涉在表皮生长因子受体的内化中。这些研究依赖伯醇的使用来干扰由PLD形成PA，但已经通过非催化活性PLD突变体的表达且近来使用RNA干扰技术来阻断PLD同工酶的表达而获得了进一步的支持。这些方法中的每一种都具有局限性，因此预期开发特异性同工酶选择性抑制剂来大大补充这些先前方法。PLD双向耦合信号转导网络到细胞骨架。数种发现暗示PLD在控制细胞形状、运动性、化学趋向性和小泡转运中的作用。Rho、Rac和Cdc42也牵涉在这些过程中且显示其各自通过蛋白质-蛋白质相互作用使PLD活化。

许多研究暗示PLD在细胞存活的调节中的作用。已经显示调节细胞存活和细胞凋亡途径中所涉及的许多信号网络和促有丝分裂信号包括PLD的作用。具体情况随细胞类型而变。在一些细胞中，PLD活性为促细胞凋亡，而在其它细胞中，PLD促进细胞存活和有丝分裂发生。最新发现提出PLD1活化引起RAS-ERK/PI3K增加(评述于Andresen BT，Rizzo MA，Shome K，Romero G.，“The role ofphosphatidic acid in the regulation of the Ras/MEK/Erk signalingcascade，”FEBS Lett.2002年10月30日；531(1)：65-8.综述)和NFκB信号级联(Dong Woo Kang，Mi Hee Park，Craig Lindsley，H Alex Brown和Do Sik Min，“Regulation of Phospholip ase D 1signaling dynamics viaenzymatic activity dependent positive feedback loop，”Molecular andCellular Biology(2009)，审稿中)和随后PLD1在乳癌细胞中的选择性表达。这引起生长因子-诱发的基质金属蛋白酶上调，这对于癌细胞迁移和转移是必要的。也已经提出PLD产生的PA直接调节mTOR途径，已知mTOR途径在数种类型的人类癌症的发展中起重要作用(由以下文献评述：Foster DA.“Regulation of mTOR by phosphatidicacid”Cancer Res.2007年1月1日；67(1)：1-4.综述；Sun Y，Chen J.“mTOR signaling：PLD takes center stage，”Cell Cycle.2008年10月；7(20)：3118-23.2008年10月27日电子版.综述)。生长因子受体信号途径，关于细胞生长、营养状况和细胞生物能学的信息通过mTOR线路整合。数种最新研究提出许多细胞致癌基因的作用可解释OttoWarburg关于大多数癌细胞在其细胞生物能学上优先利用有氧糖酵解途径的倾向的最早观察结果。数种最新研究提出mTOR途径的调节对于下一代抗癌治疗剂的研发可能是最重要的(Vander Heiden MG，Cantley LC，Thompson CB.，“Understanding the Warburg effect：themetabolic requirements of cell proliferation，”Science.2009年5月22日；324(5930)：1029-33.)。PLD在这些关键信号和细胞存活途径的调节中似乎起重要作用。PLD的同工酶选择性抑制剂可提供抑制癌细胞转型和转移的新颖且有效的机制。

尽管有先前研究，但仍然需要可适用作同工型选择性磷脂酶D抑制剂的化合物和组合物，其可克服当前缺陷且有效治疗与磷脂酶D相关的疾病和病症。所公开化合物、组合物和方法解决了该需要以及其它需要。

概述

根据如本文所体现并广泛描述的本发明的目的，本发明一方面涉及同工型选择性磷脂酶D抑制剂。

本发明公开了包含由下式表示的结构的化合物：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基，或其医药上可接受的衍生物。

本发明也公开了具有由下式表示的结构的化合物：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；且其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基。

本发明也公开了包含治疗有效量的具有由下式表示的结构的化合物或其医药上可接受的衍生物和医药上可接受的载体的医药组合物：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基。

本发明也公开了制备化合物的方法，所述方法包括以下步骤：提供具有以下结构的化合物：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；且其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基，和与具有以下结构的化合物反应：

其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基，且其中G为保护基团。

其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基，其中G为保护基团，且其中X为离去基团。

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；且其中G为保护基团，和与具有以下结构的化合物反应：

其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基，且其中X为离去基团。

本发明也公开了所公开方法的产物。

本发明也公开了包含治疗有效量的所公开的产物和医药上可接受的载体的医药组合物。

本发明也公开了制造药剂的方法，所述方法包括组合至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物与医药上可接受的载体或稀释剂。

本发明也公开了治疗哺乳动物的与PLD活性相关的病症的方法，所述方法包括对所述哺乳动物施用可有效治疗所述哺乳动物的所述病症的剂量和量的至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物的步骤。

本发明也公开了抑制哺乳动物的PLD活性的方法，所述方法包括对受试者施用可有效抑制所述受试者的PLD活性的剂量和量的至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物的步骤。

本发明也公开了抑制至少一种细胞的PLD活性的方法，所述方法包括使所述至少一种细胞与可有效抑制所述至少一种细胞的PLD活性响应的量的至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物接触的步骤。

本发明也公开了化合物用于PLD抑制的用途，所述化合物具有由下式表示的结构：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基，或其医药上可接受的衍生物。

本发明也公开了至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物在制造用于治疗与PLD活性相关的病状的药剂中的用途。

本发明也公开了至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物在制造用于治疗与哺乳动物的PLD活性相关的病症的药剂中的用途。

本发明也公开了包含至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物和至少一种已知增加PLD活性的试剂的试剂盒。

本发明也公开了包含至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物和至少一种已知降低PLD活性的试剂的试剂盒。

附图简述

并入本说明书中并构成本说明书的一部分的附图说明多个方面且与所述描述一起用来解释本发明的原理。

图1显示化合物P1G的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图2显示化合物P0Q的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图3显示化合物P23的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图4显示化合物P1P的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图5显示化合物P1D的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图6显示化合物NGF的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图7显示化合物NFT的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图8显示化合物P22的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图9显示化合物P0L的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图10显示化合物P2B的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图11显示化合物P2E的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图12显示化合物NG3的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图13显示化合物P0A的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图14显示化合物NGH的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图15显示化合物NJ5的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图16显示化合物NGQ的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图17显示化合物P1E的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图18显示化合物P2C的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图19显示化合物P1Q的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图20显示化合物NFW的细胞对映纯浓度响应曲线(见表1)。

图21显示化合物P1P的外源浓度响应曲线(见表1)。

图22显示化合物NFT的外源浓度响应曲线(见表1)。

图23显示化合物P0L的外源浓度响应曲线(见表1)。

图24显示化合物P2E的外源浓度响应曲线(见表1)。

图25显示化合物NFW的外源浓度响应曲线(见表1)。

图26显示化合物P2C的外源浓度响应曲线(见表1)。

图27显示化合物NGH的外源浓度响应曲线(见表1)。

图28显示化合物P2B的外源浓度响应曲线(见表1)。

图29显示化合物P22的外源浓度响应曲线(见表1)。

图30显示在手性分离外消旋物以获得对映纯4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯之后观察到的例示性色谱图。

本发明的其它优势将在随后的描述中部分地陈述，且在某种程度上将自该描述显而易见或可通过实践本发明来习得。本发明的优势将借助于随附权利要求书中特定指出的要素和组合来实现并获得。应理解上述概述与以下详述两者都仅是例示性和说明性的，而并非限制如所要求的本发明。

发明详述

参考以下发明详述和其中包括的实施例可以更容易地理解本发明。

在公开并描述本发明的化合物、组合物、制品、系统、装置和/或方法之前，应理解，除非另外规定，否则它们不限于特定的合成方法，或除非另外规定，否则它们不限于特定的试剂，因此它们当然可以改变。也应该理解本文使用的术语仅是出于描述特定方面的目的，并非意图加以限制。尽管在实施或测试本发明中可使用与本文所述的那些方法和材料类似或等价的任何方法和材料，但是现在将描述例示性方法和材料。

虽然可以特定的法定可专利的类别(如系统法定可专利的类别)描述并要求本发明的各方面，但这仅是为了方便，所属领域的技术人员应理解可以任何法定可专利的类别描述并要求本发明的各方面。除非另外明确陈述，否则绝非想要将本文陈述的任何方法或方面看作是要求其步骤以特定顺序进行。因此，在方法权利要求项在权利要求书或说明书中没有具体陈述各步骤限于特定顺序的情况下，绝非意图指在任何方面推断顺序。这适用于用于解释的任何可能未表达的基本原则，包括关于步骤安排或操作流程的逻辑情况、源于语法组织或标点的简单含义或在说明书中描述的方面的数量或类型。

贯穿本申请，引用多个公开案。这些公开案的揭示内容以引用的方式全部并入本申请以更全面地描述其所属技术的状况。所公开的参考文献也以引用的方式个别或具体地并入本文，因为其中所含的材料在依赖参考文献的语句中论述。本文中没有什么被视作许可本发明由于现有发明而不被授权先于所述公告。此外，本文提供的公告日期可能不同于实际公告日期，这可能需要单独确认。

A.定义

除非上下文另外明确规定，否则在本说明书和随附权利要求书中使用的单数形式“一”和“该”包括多个讨论对象。因此，例如，提到“官能团”、“烷基”或“残基”包括两个或更多个所述官能团、烷基或残基等的混合物。

范围在本文中可表达为自“约”一特定值和/或到“约”另一特定值。当表达这样的范围时，另一方面包括自这一特定值和/或到另一特定值。类似地，当通过使用前行词“约”将值表达为近似值时，应理解所述特定值形成另一方面。应进一步理解各范围的终点既与另一终点显著有关又与另一终点无关。也应理解存在许多本文公开的值，且除了各值本身，该值在本文中也公开为“约”该特定值。例如，如果公开了值“10”，则也公开了“约10”。也应理解也公开了两个特定单元之间的各单元。例如，如果公开了10和15，那么也公开了11、12、13和14。

本文使用的对于包括有机化合物的化合物的命名法可使用常见名称、IUPAC、IUBMB或CAS关于命名法的推荐给出。当存在一个或多个立体化学特征时，可采用立体化学的Cahn-Ingold-Prelog规则来指出立体化学优先项目、E/Z规格等。如果通过使用命名约定系统降低化合物结构或通过市售软件如CHEMDRAWTM(CambridgesoftCorporation，U.S.A.)来给出名称，那么所属领域的技术人员可容易地确定化合物的结构。

本文所用的术语“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或境况可能发生或可能不发生且该描述包括所述事件或境况发生的情况和所述事件或境况不发生的情况。

本说明书和结论权利要求书中所用的化学物种的残基是指在特定反应方案或后续配方或化学产物中所述化学物种的所得产物的部分，而与该部分实际上是否是由所述化学物种获得无关。因此，聚酯中的乙二醇残基是指所述聚酯中的一个或多个-OCH₂CH₂O-单元，而与是否使用乙二醇来制备聚酯无关。类似地，聚酯中的癸二酸残基是指所述聚酯中的一个或多个-CO(CH₂)₈CO-部分，而与所述残基是否通过使癸二酸或其酯反应以获得聚酯而获得无关。

本文所用的术语“被取代”预期包括有机化合物的所有容许的取代基。在一个广泛方面，所述容许的取代基包括有机化合物的非环状和环状、分枝和不分枝、碳环和杂环及芳族和非芳族取代基。说明性取代基例如包括如下所述的取代基。对于适当有机化合物来说，所述容许的取代基可为一个或多个且可相同或不同。出于本发明的目的，诸如氮的杂原子可具有氢取代基和/或满足杂原子的化合价的本文所述有机化合物的任何容许的取代基。本发明并非意图以任何方式受限于有机化合物的容许取代基。并且，术语“取代”或“被......取代”包括所述取代根据被取代原子和取代基的容许化合价且所述取代产生稳定化合物，例如不会自发进行转变，诸如通过重排、环化、消除等转变的化合物的隐含附带条件。

在定义各种术语中，“A¹”、“A²”、“A³”和“A⁴”在本文中作为通用符号用以表示各种特定取代基。这些符号可为任何取代基，而不限于本文中公开的取代基，且当在一种情况下将它们定义为某些取代基时，在另一种情况下，它们可被定义为一些其它取代基。

本文所用的术语“烷基”为具有1到24个碳原子、例如1到12个碳、1到8个碳、1到6个碳或1到4个碳的分枝或不分枝的饱和烃基，诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、二十烷基、二十四基等。所述烷基可为环状或非环状的。所述烷基可为分枝或不分枝的。所述烷基也可被取代或未被取代。例如，所述烷基可被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团包括如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烷氧基、氨基、醚、卤化物、羟基、硝基、甲硅烷基、磺基-氧代基或硫醇。“低级烷基”为含有1到6个(例如1到4个)碳原子的烷基。

贯穿本说明书，“烷基”通常用以指未取代的烷基和取代的烷基；然而，取代的烷基在本文中也通过鉴别烷基上的特定取代基而具体提及。例如，术语“卤代烷基”具体指被一个或多个卤化物如氟、氯、溴或碘取代的烷基。术语“烷氧基烷基”具体指被一个或多个如下文所述的烷氧基取代的烷基。术语“烷基氨基”具体指被一个或多个如下文所述的氨基等取代的烷基。当在一种情况下使用“烷基”，而在另一情况下使用特定术语如“烷基醇”时，这意味着术语“烷基”也指特定术语如“烷基醇”等。

该惯例也适用于本文所述的其它基团。也就是说，虽然术语如“环烷基”是指未取代的环烷基部分和取代的环烷基部分，但所述取代的部分在本文中可另外具体鉴别；例如，特定取代的环烷基可称为例如“烷基环烷基”。类似地，取代的烷氧基可具体称为例如“卤代烷氧基”，特定取代的烯基可为例如“烯基醇”等。此外，使用通用术语如“环烷基”和特定术语如“烷基环烷基”的惯例意味着该通用术语也包括该特定术语。

本文所用的术语“环烷基”为主要由至少3个碳原子组成的非芳族基于碳的环。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片烷基等。术语“杂环烷基”为一种类型的如上定义的环烷基，且包括在术语“环烷基”的含义内，其中环的至少一个碳原子被诸如但不限于氮、氧、硫或磷的杂原子置换。所述环烷基和杂环烷基可为取代或未取代的。所述环烷基和杂环烷基可被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团包括如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烷氧基、氨基、醚、卤化物、羟基、硝基、甲硅烷基、磺基-氧代基或硫醇。

本文所用的术语“烷氧基”是指经醚键键结的烷基或环烷基；也就是说，“烷氧基”可定义为-OA¹，其中A¹为如上定义的烷基或环烷基。“烷氧基”也包括刚刚描述的烷氧基的聚合体；也就是说，烷氧基可为聚醚，如-OA¹-OA²或-OA¹-(OA²)_a-OA³，其中“a”为1到200的整数且A¹、A²和A³为烷基和/或环烷基。

本文所用的术语“烯基”为具有含至少一个碳碳双键的结构式的具有2到24个碳原子的烃基。不对称结构如(A¹A²)C＝C(A³A⁴)意图包括E异构体与Z异构体。这可在其中存在不对称烯烃的本文中的结构式中推定，或其可由键符号C＝C明确指出。所述烯基可被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团包括如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烷氧基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基、杂芳基、醛、氨基、羧酸、酯、醚、卤化物、羟基、酮、叠氮化物、硝基、甲硅烷基、磺基-氧代基或硫醇。

本文所用的术语“环烯基”为主要由至少3个碳原子组成且含有至少一个碳碳双键(即C＝C)的非芳族基于碳的环。环烯基的实例包括但不限于环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己二烯基、降冰片烯基等。术语“杂环烯基”为一种类型的如上定义的环烯基，且包括在术语“环烯基”的含义内，其中环的至少一个碳原子被诸如但不限于氮、氧、硫或磷的杂原子置换。所述环烯基和杂环烯基可为取代的或未取代的。所述环烯基和杂环烯基可被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团包括如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烷氧基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基、杂芳基、醛、氨基、羧酸、酯、醚、卤化物、羟基、酮、叠氮化物、硝基、甲硅烷基、磺基-氧代基或硫醇。

本文所用的术语“炔基”为具有含至少一个碳碳三键的结构式的具有2到24个碳原子的烃基。所述炔基可为未取代的或被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团包括如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烷氧基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基、杂芳基、醛、氨基、羧酸、酯、醚、卤化物、羟基、酮、叠氮化物、硝基、甲硅烷基、磺基-氧代基或硫醇。

本文所用的术语“环炔基”为主要由至少7个碳原子组成且含有至少一个碳碳三键的非芳族基于碳的环。环炔基的实例包括但不限于环庚炔基、环辛炔基、环壬炔基等。术语“杂环炔基”为一种类型的如上定义的环烯基，且包括在术语“环炔基”的含义内，其中环的至少一个碳原子被诸如但不限于氮、氧、硫或磷的杂原子置换。所述环炔基和杂环炔基可为取代的或未取代的。所述环炔基和杂环炔基可被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团包括如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烷氧基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基、杂芳基、醛、氨基、羧酸、酯、醚、卤化物、羟基、酮、叠氮化物、硝基、甲硅烷基、磺基-氧代基或硫醇。

本文所用的术语“芳基”为含有包括苯、萘、苯基、联苯基、苯氧基苯等的任何基于碳的芳族基团的基团。术语“芳基”也包括“杂芳基”，“杂芳基”定义为含有具有并入芳族基团环内的至少一个杂原子的芳族基团的基团。杂原子的实例包括但不限于氮、氧、硫和磷。同样，也包括在术语“芳基”中的术语“非杂芳基”定义含有不含杂原子的芳族基团的基团。所述芳基可为取代的或未取代的。所述芳基可被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团包括如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烷氧基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基、杂芳基、醛、氨基、羧酸、酯、醚、卤化物、羟基、酮、叠氮化物、硝基、甲硅烷基、磺基-氧代基或硫醇。术语“联芳基”为特定类型的芳基且包括在“芳基”的定义内。联芳基是指经稠环结构键结在一起的两个芳基，如在萘中，或经一个或多个碳碳键连接的两个芳基，如在联苯中。

本文所用的术语“醛”由式-C(O)H表示。贯穿本说明书，“C(O)”为羰基(即C＝O)的速记符号。

本文所用的术语“胺”或“氨基”由式NA¹A²A³表示，其中A¹、A²和A³可独立地为氢或如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基。

本文所用的术语“羧酸”由式-C(O)OH表示。

本文所用的术语“酯”由式-OC(O)A¹或-C(O)OA¹表示，其中A¹可为如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基。本文所用的术语“聚酯”由式-(A¹O(O)C-A²-C(O)O)_a-或-(A¹O(O)C-A²-OC(O))_a-表示，其中A¹和A²可独立地为本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基且“a”为1到500的整数。“聚酯”为用以描述通过具有至少两个羧酸基团的化合物与具有至少两个羟基的化合物之间的反应生成的基团的术语。

本文所用的术语“醚”由式A¹OA²表示，其中A¹和A²可独立地为本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基。本文所用的术语“聚醚”由式-(A¹O-A²O)_a-表示，其中A¹和A²可独立地为本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基且“a”为1到500的整数。聚醚基团的实例包括聚氧化乙烯、聚氧化丙烯和聚氧化丁烯。

本文所用的术语“卤化物”是指卤素，即氟、氯、溴和碘。

本文所用的术语“杂环”是指至少一个环成员不为碳的单或多环芳族或非芳族环系统。杂环包括吡啶；嘧啶；呋喃；噻吩；吡咯；异噁唑；异噻唑；吡唑；噁唑；噻唑；咪唑；噁唑，包括1，2，3-噁二唑、1，2，5-噁二唑和1，3，4-噁二唑；噻二唑，包括1，2，3-噻二唑、1，2，5-噻二唑和1，3，4-噻二唑；三唑，包括1，2，3-三唑、1，3，4-三唑；四唑，包括1，2，3，4-四唑和1，2，4，5-四唑；吡啶；哒嗪；嘧啶；吡嗪；三嗪，包括1，2，4-三嗪和1，3，5-三嗪；四嗪，包括1，2，4，5-四嗪；吡咯烷；哌啶；哌嗪；吗啉；氮杂环丁烷；四氢吡喃；四氢呋喃；二噁烷等。

本文所用的术语“羟基”由式-OH表示。

本文所用的术语“酮”由式A¹C(O)A²表示，其中A¹和A²可独立地为如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基。

本文所用的术语“叠氮基”由式-N₃表示。

本文所用的术语“硝基”由式-NO₂表示。

本文所用的术语“氰”由式-CN表示。

本文所用的术语“甲硅烷基”由式-SiA¹A²A³表示，其中A¹、A²和A³可独立地为氢或如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烷氧基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基。

本文所用的术语“磺基-氧代基”由式-S(O)A¹、-S(O)₂A¹、-OS(O)₂A¹或-OS(O)₂OA¹表示，其中A¹可为氢或如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基。贯穿本说明书，“S(O)”为S＝O的速记符号。本文使用的术语“磺酰基”是指由式-S(O)₂A¹表示的磺基-氧代基，其中A¹可为氢或如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基。本文所用的术语“砜”由式A¹S(O)₂A²表示，其中A¹和A²可独立地为如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基。本文所用的术语“亚砜”由式A¹S(O)A²表示，其中A¹和A²可独立地为如本文所述的任选取代的烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、环炔基、芳基或杂芳基。

本文所用的术语“硫醇”由式-SH表示。

术语“有机残基”定义含碳的残基，即包含至少一个碳原子的残基，且其包括但不限于上文定义的含碳基、残基或基团。有机残基可含有各种杂原子或经包括氧、氮、硫、磷等的杂原子与另一分子键结。有机残基的实例包括但不限于烷基或取代的烷基、烷氧基或取代的烷氧基、单或二取代的氨基、酰胺基等。有机残基可优选包含1到18个碳原子，1到15个碳原子、1到12个碳原子、1到8个碳原子、1到6个碳原子或1到4个碳原子。另一方面，有机残基可包含2到18个碳原子、2到15个碳原子、2到12个碳原子、2到8个碳原子、2到4个碳原子或2到4个碳原子。

术语“残基”的非常接近的同义词为如下术语“基团”，其在本说明书和结论权利要求书中用以指本文所述分子的片段、基团或亚结构，而与分子如何制备无关。例如，在特定化合物中的2，4-噻唑烷二酮基团具有以下结构：

而与噻唑烷二酮是否用以制备该化合物无关。在一些实施方案中，基团(例如烷基)可通过使一个或多个“取代基团”与其键结而进一步修饰(即，取代的烷基)。除非在本文中的其它地方明确指出相反情况，否则给定基团中原子的数目对于本发明并不关键。

在本文中定义并使用的术语“有机基团”含有一个或多个碳原子。有机基团可具有例如1到26个碳原子、1到18个碳原子、1到12个碳原子、1到8个碳原子、1到6个碳原子或1到4个碳原子。另一方面，有机基团可具有2到26个碳原子、2到18个碳原子、2到12个碳原子、2到8个碳原子、2到6个碳原子或2到4个碳原子。有机基团常具有与所述有机基团中的至少一些碳原子键结的氢。不含无机原子的有机基团的一个实例是5，6，7，8-四氢-2-萘基。在一些实施方案中，有机基团可含有与其键结或在其中的1-10个无机杂原子，包括卤素、氧、硫、氮、磷等。有机基团的实例包括但不限于烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、单取代的氨基、二取代的氨基、酰氧基、氰基、羧基、烷氧羰基、烷基羧酰胺、取代的烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺、取代的二烷基羧酰胺、烷基磺酰基、烷基亚磺酰基、硫代烷基、硫代卤烷基、烷氧基、取代的烷氧基、卤烷基、卤烷氧基、芳基、取代的芳基、杂芳基、杂环基或取代的杂环基，其中所述术语在本文中的其它地方定义。包含杂原子的有机基团的几个非限制性实例包括烷氧基、三氟甲氧基、乙酰氧基、二甲氨基等。

在本文中定义并使用的术语“无机基团”不含碳原子，且因此仅包含除碳以外的原子。无机基团包括选自氢、氮、氧、硅、磷、硫、硒和卤素如氟、氯、溴和碘的原子的键结组合，其可个别存在或以其化学上稳定的组合键结在一起。无机基团具有10个或更少或优选1到6个或1到4个键结在一起的如上所列的无机原子。无机基团的实例包括但不限于氨基、羟基、卤素、硝基、硫醇、硫酸根、磷酸根和类似的通常已知的无机基团。所述无机基团没有键结在其中的周期表的金属元素(如碱金属、碱土金属、过渡金属、镧系金属或锕系金属)，尽管所述金属离子有时可用作诸如硫酸根、磷酸根或类似阴离子无机基团的阴离子无机基团的医药上可接受的阳离子。除非在本文中的其它地方另外明确指出，否则无机基团不含两性金属元素，诸如硼、铝、镓、锗、砷、锡、铅或碲；或惰性气体元素。

在一些方面中，化合物的结构可由下式表示：

该式被理解为等价于下式：

其中n通常为整数。也就是说，Rⁿ理解为表示五个独立的取代基R^n(a)、R^n(b)、R^n(c)、R^n(d)、R^n(e)。“独立的取代基”是指各R取代基可独立地定义。例如，如果在一种情况下，R^n(a)为卤素，则在该情况下，R^n(b)不必为卤素。

以上定义的术语的某些情况可能在结构式中出现不止一次，且在所述出现时，各术语应独立于另一术语定义。

本文所用的术语“治疗”是指医学管理患者旨在治愈、改善、稳定或预防疾病、病理病状或病症。该术语包括积极治疗，也就是说治疗直接具体针对疾病、病理病状或病症的改善；以及包括病因治疗，也就是说治疗针对于去除相关疾病、病理病状或病症的病因。另外，该术语包括舒减治疗，也就是说治疗设计用来减轻症状，而不是治愈疾病、病理病状或病症；预防性治疗，也就是说治疗针对于使相关疾病、病理病状或病症的发展减到最小或部分或完全抑制相关疾病、病理病状或病症的发展；和支持治疗，也就是说治疗用以补充针对改善相关疾病、病理病状或病症的另一特定疗法。在各种方面，该术语涵盖对包括哺乳动物(例如人类)的受试者的任何治疗，且包括：(i)预防可能易于感染疾病但还未诊断出患该疾病的受试者患上该疾病；(ii)抑制疾病，即阻止其发展；或(iii)减轻疾病，即引起疾病退行。一方面，所述受试者为哺乳动物，诸如灵长类动物，且另一方面，所述受试者为人类。术语“受试者”也包括驯养动物(例如，猫、狗等)、家畜(例如，牛、马、猪、绵羊、山羊等)和实验动物(例如，小鼠、兔、大鼠、豚鼠、果蝇等)。

本文所用的术语“预防”是指特别是通过预先措施来排除、避开、避免、防止、阻止或妨碍某事发生。应理解，在本文使用降低、抑制或预防的情况下，除非另外具体指出，否则也明确公开了使用另外两个词语。

本文所用的术语“诊断”是指经受由技术人员例如医师进行的身体检查且发现患有可诊断或可由本文公开的化合物、组合物或方法治疗的病状。例如，“诊断患有可通过选择性抑制磷脂酶D1治疗的病症”是指经受由技术人员例如医师进行的身体检查且发现患有可诊断或可由可抑制PLD1的化合物或组合物治疗的病状。作为另一实例，“诊断具有选择性抑制磷脂酶D2的需要”是指经受由技术人员例如医师进行的身体检查且发现患有以PLD2活性为特征的病状。这一诊断可关于病症，诸如如本文论述的不受控制的细胞增殖的疾病等。

本文所用的短语“鉴别需要治疗病症”等是指基于治疗病症的需要选择受试者。例如，受试者可基于技术人员的早期诊断鉴别为具有治疗病症(例如，与PLD2活性有关的病症)的需要且此后经受该病症的治疗。预期该鉴别一方面可由与进行诊断的人员不同的人员进行。另一方面还预期施用可由随后进行该施用的人员进行。

本文所用的术语“施用”是指向受试者提供药物制剂的任何方法。本领域技术人员熟知所述方法且其包括但不限于口服、经皮施用、经吸入施用、鼻施用、局部施用、叶鞘内施用、眼科施用、耳内施用、脑内施用、直肠施用和肠胃外施用，包括可注射施用，诸如静脉内施用、动脉内施用、肌肉内施用和皮下施用。施用可连续或间歇进行。在各种方面，制剂可治疗性施用，也就是说，施用用以治疗现有疾病或病状。在其它各种方面，制剂可预防性施用，也就是说，施用用以预防疾病或病状。

本文所用的术语“接触”是指使所公开的化合物与细胞、目标组织胺受体或其它生物实体在一起，使得所述化合物可直接影响目标(例如剪接体、细胞等)的活性，即通过与目标本身相互作用，或间接影响目标的活性，即通过与目标的活性所依赖的另一分子、辅因子、因子或蛋白质相互作用。

本文所用的术语“有效量”是指足以实现所需结果或足以对不想要的病状起作用的量。例如，“治疗有效量”是指足以实现所需治疗结果或对不想要的症状起作用、但通常不足以引起不利的负面作用的量。对于任何特定患者的特定治疗有效剂量水平将取决于多种因素，包括正治疗的病症、病症严重程度；所采用的特定组合物；患者的年龄、体重、总体健康、性别和饮食；施用时间；施用路径；所用特定化合物的排泄速率；治疗持续时间；组合或与所用特定化合物同时使用的药物和医学技术中熟知的类似因素。例如，以低于实现所需治疗作用所需要的水平开始将化合物给药并逐渐增加剂量直至实现所需作用完全在本领域的技术之内。如果需要，那么可将有效日剂量分成多剂量以便于施用。因此，单剂量组合物可含有构成日剂量的所述量或其约数。如果有任何禁忌症，那么剂量可由个别医师调节。剂量可改变或可以一次或多次剂量施用每日施用历时1天或数天。文献中可见对于给定种类的医药产品的适当剂量的指导。在其他各种方面，制剂可以“预防有效量”施用；也就是说以有效预防疾病或病状的量施用。

术语“医药上可接受”描述并非生物学或在其它方面不合需要，即不引起不可接受水平的不合需要的生物作用或以有害方式相互作用的材料。

本文所用的术语“医药上可接受的载体”是指无菌水性或非水性溶液、分散液、悬浮液、乳液以及仅在使用前重构成无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。合适的水性和非水性载体、稀释剂、溶剂或媒介物的实例包括水、乙醇、多元醇(诸如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)、羧甲基纤维素及其合适混合物、植物油(诸如橄榄油)和可注射的有机酯如油酸乙酯。恰当的流动性可例如通过使用诸如卵磷脂的涂布材料、在分散液的情况下通过保持所需粒度和通过使用表面活性剂来保持。这些组合物还可含有佐剂，诸如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。可通过包含诸如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等的各种抗菌剂和防真菌剂来确保防止微生物作用。还可需要包含等渗剂，诸如糖、氯化钠等。可注射医药形式的延长吸收可通过包含延迟吸收的诸如单硬脂酸铝和明胶的试剂而达到。通过使药物微囊基质形成在诸如聚丙交酯-聚乙交酯、聚(原酸酯)和聚(酸酐)的可生物降解的聚合物中的来制得可注射储存形式。取决于药物与聚合物的比率和所用特定聚合物的性质，可控制药物释放的速率。也通过将药物截留在与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备储存可注射制剂。可注射制剂可例如通过经细菌保留滤纸过滤或通过并入呈可仅在使用前溶解或分散于无菌水或其它无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式的杀菌剂来杀菌。合适的惰性载体可包括糖，诸如乳糖。理想地，至少95重量％的活性成分粒子具有在0.01到10微米范围内的有效粒度。

本文所用的术语“衍生物”是指具有衍生自母体化合物(例如，本文公开的化合物)的结构的化合物和结构充分类似于本文公开的结构的化合物，且基于该类似点，本领域技术人员预期其将展示出与所要求的化合物相同或类似的活性和效用，或其将作为前体诱发与所要求的化合物相同或类似的活性和效用。例示性衍生物包括母体化合物的盐、酯、酰胺、酯或酰胺的盐及N-氧化物。

术语“可水解的残基”意欲指能够例如在碱性或酸性条件下进行水解的官能团。可水解残基的实例包括而不限于酰卤、活化羧酸及本领域已知的各种保护基团(参见，例如“Protective Groups in OrganicSynthesis，”T.W.Greene，P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience，1999)。

术语“离去基团”是指可带上成键电子替换为稳定物种的具有吸电子能力的原子(或原子群)。合适离去基团的实例包括磺酸酯，所述磺酸酯包括三氟甲磺酸酯、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、对溴苯磺酸酯，和卤化物。

本文所用的“IC₅₀”是用来指达到生物过程或包括蛋白质、子单元、细胞器、核糖核蛋白等的过程组分的50％抑制所需要的物质(例如，化合物或药物)的浓度。一方面，IC₅₀可指如本文其它地方进一步定义的达到50％体内抑制作用所需要的物质的浓度。

本文所述的化合物可含有一个或多个双键，且因此潜在地产生顺式/反式(E/Z)异构体以及其它构象异构体。除非陈述相反情况，否则本发明包括所有这些可能的异构体以及这些异构体的混合物。

除非陈述相反情况，否则具有仅显示为实线而不是楔形或虚线的化学键的式涵盖各可能的异构体，例如各对映异构体和非对映异构体及异构体的混合物，诸如外消旋或成比例的(scalemic)混合物。本文所述的化合物可含有一个或多个不对称中心，且因此潜在地产生非对映异构体和光学异构体。除非陈述相反情况，否则本发明包括所有这些可能的非对映异构体以及其外消旋混合物、其基本纯的拆分对映异构体、所有可能的几何异构体及其医药上可接受的盐。还包括立体异构体的混合物以及分离的特定立体异构体。在用以制备这些化合物的合成程序的过程期间或在使用本领域技术人员已知的外消旋或差向异构化程序的过程中，这些程序的产物可为立体异构体的混合物。

许多有机化合物以具有使平面偏振光的平面旋转的能力的旋光形式存在。在描述旋光化合物的过程中，前缀D和L或R和S用以指示分子关于其手性中心的绝对构型。前缀d和l或(+)和(-)用以指示由化合物引起的平面偏振光的旋转标志，(-)或意味着化合物为左旋的。前缀为(+)或d的化合物为右旋的。对于给定的化学结构，称为立体异构体的这些化合物除了它们彼此不能重叠的镜像之外都相同。特定立体异构体也可称为对映异构体，且这些异构体的混合物常称为对映异构混合物。对映异构体的50∶50混合物称为外消旋混合物。本文所述的许多化合物可具有一个或多个手性中心，且因此可以不同镜像异构形式存在。如果需要，那么手性碳可用星号(*)指示。当在所公开的式中将到手性碳的键描述成直线时，应理解手性碳的(R)与(S)构型、由此两种对映异构体及其混合物包含在该式内。如在本领域中所用，当希望指定关于手性碳的绝对构型时，可将到手性碳的键中的一个描述为楔形(到平面上方原子的键)且另一个键可描述为一连串或楔形的短平行线(到平面下方原子的键)。Cahn-Inglod-Prelog系统可用于指定手性碳的(R)或(S)构型。

当所公开的化合物含有一个手性中心时，所述化合物以两种镜像异构体形式存在。除非具体陈述相反情况，否则所公开的化合物包括两种对映异构体和对映异构体的混合物，诸如称为外消旋混合物的特定50∶50混合物。对映异构体可通过诸如以下方法的本领域技术人员已知的方法拆分：形成例如可通过结晶分离的非对映异构体的盐(参见，CRC Handbook of Optical Resolutions via Diastereomeric SaltFormation by David Kozma(CRC Press，2001))；形成例如可通过结晶、气-液或液相色谱法分离的非对映异构体的衍生物或复合物；选择性反应一种对映异构体与对映异构体特异性试剂，例如酶促酯化；或在手性环境中、例如在具有经结合手性配体的手性载体上(例如二氧化硅)或在手性溶剂存在下的气-液或液相色谱法。应了解，在所需对映异构体通过上述分离程序之一转化为另一化学实体的情况下，另一步骤可释放所需镜像异构形式。或者，可通过使用光学活性剂、底物、催化剂或溶剂不对称合成来合成特定对映异构体或通过不对称转变将一种对映异构体转化为另一种对映异构体来合成特定对映异构体。

应理解指定所公开的化合物中的手性碳上的特定绝对构型是指所述化合物的所指定的镜像异构形式以对映体过量(ee)提供。本文所用的对映体过量为存在大于50％、例如大于60％、大于70％、大于75％、大于80％、大于85％、大于90％、大于95％、大于98％或大于99％的特定对映异构体。一方面，所指定的对映异构体基本不含另一对映异构体。例如，“R”形式的化合物可基本不含“S”形式的化合物，且因此为呈对映体过量的“S”形式。相反地，“S”形式的化合物可基本不含“R”形式的化合物，因此为呈对映体过量的“R”形式。

当所公开的化合物具有两个或更多个手性碳时，其可具有两种以上的光学异构体且可以非对映异构形式存在。例如，当存在两个手性碳时，化合物可具有多达四种光学异构体和两对对映异构体((S，S)/(R，R)和(R，S)/(S，R))。对映异构体对(例如，(S，S)/(R，R))为彼此的镜像立体异构体。不为镜像的立体异构体(例如，(S，S)和(R，S))为非对映异构体。非对映异构对可通过本领域技术人员已知的方法分离，例如通过色谱法或结晶分离，且各对内的个别对映异构体可如上所述分离。除非另外具体排除，否则所公开的化合物包括这些化合物的各非对映异构体和其混合物。

本发明公开了用以制备本发明的组合物以及本身用于本文公开的方法内的组合物的组分。本文公开了这些及其它材料，且应理解当公开这些材料的组合、子集、相互作用、群组等时，虽然无法明确公开这些化合物的具体提及的每一各种个别和集体组合及排列，其各自在本文中具体涵盖并描述。例如，如果公开并论述特定化合物且论述可对包括所述化合物在内的许多分子进行的许多修饰，那么除非具体指出相反情况，否则具体涵盖化合物和可能的修饰的每个组合及排列。因此，如果公开一类分子A、B和C以及一类分子D、E和F，且公开组合分子A-D的实例，那么即使各情况没有个别叙述，各情况为个别并共同涵盖的含义组合，认为也公开了A-E、A-F、B-D、B-E、B-F、C-D、C-E和C-F。同样，也公开这些分子的任何子集或组合。因此，例如，认为公开了子集A-E、B-F和C-E。该理念适于本申请的所有方面，包括制造和使用本发明的组合物的方法的步骤。因此，如果存在多个可进行的额外步骤，那么应理解这些额外步骤中的每一步骤可用本发明方法的任何特定实施方案或实施方案的组合进行。

应理解本文公开的组合物具有某些功能。本文公开了用于进行所公开功能的某些结构需求，且应理解存在可进行与所公开结构有关的同一功能的多种结构，且这些结构通常实现相同结果。

除非另外明确陈述，否则绝非意图将本文陈述的任何方法看作是要求其步骤以特定顺序进行。因此，在方法权利要求项没有实际叙述其步骤所遵循的顺序或在权利要求书或描述中没有另外具体陈述各步骤将限于特定顺序的情况下，绝非想要在任何方面推断顺序。这适用于用于解释的任何可能未表达的基本原则，包括关于步骤安排或操作流程的逻辑情况；源于语法组织或标点的简单含义；和在本说明书中描述的实施方案的数量或类型。

B.化合物

一方面，本发明涉及可用作同工型选择性磷脂酶D抑制剂的化合物或其医药上可接受的衍生物。一般来讲，预期每一公开的化合物或衍生物可任选进一步被取代。还预期任一种或多种衍生物可任选从本发明中略掉。应理解所公开的化合物可由公开的方法提供。还应理解所公开的化合物可在公开的使用方法中采用。

1.结构

一方面，本发明涉及一种包含由下式表示的结构的化合物：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基；且其中Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵各自独立地包括N或C-R¹¹，其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基；且其中Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵各自独立地包括N或C-R¹¹，其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；且其中Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵各自独立地包括N或C-R¹¹，其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；且其中Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵各自独立地包括N或C-R¹¹，其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基；且其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基；且其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1达到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R⁸包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R⁷包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

应理解所公开的化合物可结合所公开的方法、组合物、试剂盒和用途使用。

2.R¹基团

一方面，R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基。

另一方面，R¹为选自苯基和萘基的任选取代的芳基。

另一方面，R¹为选自以下基团的任选取代的杂芳基：呋喃基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩、吲哚基、吲唑基、喹啉基、萘啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基和苯并三唑基。

另一方面，R¹为选自以下基团的任选取代的环烷基：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基、二环[3.1.0]己基、二环[4.1.0]庚基、二环[5.1.0]辛基、二环[6.1.0]壬基、二环[3.2.0]庚基、二环[4.2.0]辛基、二环[5.2.0]壬基、二环[3.3.0]辛基、二环[4.3.0]壬基、二环[2.2.1]庚基、二环[3.2.1]辛基、二环[4.2.1]壬基、二环[2.2.2]辛基、二环[3.2.2]壬基和二环[3.3.1]壬基。

另一方面，R¹为选自以下的任选取代的杂环烷基：氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢-2H-吡喃、氧杂环庚烷、氧杂环辛烷、二氧杂环丙烷、二氧杂环丁烷、二氧戊环、二噁烷、二氧杂环庚烷、二氧杂环辛烷、硫杂环丙烷、硫杂环丁烷、四氢噻吩、四氢-2H-噻喃、硫杂环庚烷、硫杂环辛烷、二硫杂环丙烷、二硫杂环丁烷、二硫杂环戊烷、二噻烷、二硫杂环庚烷、二硫杂环辛烷、氧硫杂环丙烷、氧硫杂环丁烷、氧硫杂环戊烷、氧硫杂环己烷、氧硫杂环庚烷、氧硫杂环辛烷、氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯烷酮、哌啶、氮杂环庚烷、氮杂环辛烷、二氮杂环丙烷、二氮杂环丁烷、咪唑烷、哌嗪、二氮杂环庚烷、二氮杂环辛烷、六氢嘧啶、三氮杂环己烷、氧氮杂环丙烷、氧氮杂环丁烷、噁唑烷、吗啉、氧氮杂环庚烷、氧氮杂环辛烷、硫氮杂环丙烷、硫氮杂环丁烷、噻唑烷、硫代吗啉、硫氮杂环庚烷和硫氮杂环辛烷。

另一方面，R¹为选自以下基团的任选取代的环烯基：环丁烯基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚烯基、环庚二烯基、环辛烯基、环辛二烯基、环壬烯基和环壬二烯基。

另一方面，R¹为包括选自以下的杂环烷基的单、二或三不饱和类拟物的任选取代的杂环烯基：氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢-2H-吡喃、氧杂环庚烷、氧杂环辛烷、二氧杂环丙烷、二氧杂环丁烷、二氧戊环、二噁烷、二氧杂环庚烷、二氧杂环辛烷、硫杂环丙烷、硫杂环丁烷、四氢噻吩、四氢-2H-噻喃、硫杂环庚烷、硫杂环辛烷、二硫杂环丙烷、二硫杂环丁烷、二硫杂环戊烷、二噻烷、二硫杂环庚烷、二硫杂环辛烷、氧杂硫杂环丙烷、氧硫杂环丁烷、氧硫杂环戊烷、氧硫杂环己烷、氧硫杂环庚烷、氧硫杂环辛烷、氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯烷酮、哌啶、氮杂环庚烷、氮杂环辛烷、二氮杂环丙烷、二氮杂环丁烷、咪唑烷、哌嗪、二氮杂环庚烷、二氮杂环辛烷、六氢嘧啶、三氮杂环己烷、氧氮杂环丙烷、氧氮杂环丁烷、噁唑烷、吗啉、氧氮杂环庚烷、氧氮杂环辛烷、硫氮杂环丙烷、硫氮杂环丁烷、噻唑烷、硫代吗啉、硫氮杂环庚烷和硫氮杂环辛烷。

另一方面，R¹为卤苯基，例如4-氟苯基。

3.R²基团

一方面，R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基.

另一方面，R²各自为氢。另一方面，R²各自独立地选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R²各自独立地选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，至少一个R²为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。

4.R³基团

一方面，R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基。另一方面，R³为氢。另一方面，R³为选自以下基团的任选取代的C1到C6烷基：甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基和环己基。另一方面，R³为选自以下基团的任选取代的C3到C6环烷基：环丙基、环丁基、环戊基、环己基和二环[3.1.0]己基。另一方面，R³为可水解的残基。

5.R⁴基团

一方面，R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基。

另一方面，R⁴各自为氢。另一方面，R⁴各自独立地选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R⁴各自独立地选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，至少一个R⁴为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。

6.R⁵基团

一方面，R⁵包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基。另一方面，R⁵为氢。另一方面，R⁵选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R⁵选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，R⁵为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。

7.R⁶基团

一方面，R⁶包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基。另一方面，R⁶为氢。另一方面，R⁶选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R⁶选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，R⁶为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。

另一方面，R⁶为氢且其中R⁵选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R⁶为氢且其中R⁵选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，R⁶为氢且其中R⁵为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。另一方面，R⁵为氢且其中R⁶选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R⁵为氢且其中R⁶选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，R⁵为氢且其中R⁶为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。另一方面，R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基。另一方面，其中R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括环丙基、环丁基、环戊基或环己基。

8.R⁷基团

一方面，R⁷包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基。另一方面，R⁷为氢。另一方面，R⁷选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R⁷选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，R⁷为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。另一方面，R⁷为甲基。

9.R⁸基团

一方面，R⁸包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基。另一方面，R⁸为氢。另一方面，R⁸选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R⁸选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，R⁸为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。另一方面，R⁸为甲基。

另一方面，R⁸为氢且其中R⁷选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R⁸为氢且其中R⁷选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，R⁸为氢且其中R⁷为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。另一方面，R⁷为氢且其中R⁸选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。另一方面，R⁷为氢且其中R⁸选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇和烷基磺酰基。另一方面，R⁷为氢且其中R⁸为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。另一方面，R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基。另一方面，R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括环丙基、环丁基、环戊基或环己基。

10.R⁹基团

一方面，R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基。另一方面，R⁹为氢。另一方面，R⁹为选自以下基团的任选取代的C1到C6烷基：甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基和环己基。另一方面，R⁹为选自环丙基、环丁基、环戊基和环己基的任选取代的C3到C6环烷基。另一方面，R⁹为可水解的残基。

11.R¹⁰基团

一方面，R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基。另一方面，R¹⁰为选自以下基团的任选取代的烷基：甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基、环己基、庚基、环庚基、辛基、环辛基、壬基、环壬基、癸基、环癸基、十一烷基、环十一烷基、十二烷基或环十二烷基。

另一方面，R¹⁰为选自苯基和萘基的任选取代的芳基。

另一方面，R¹⁰为选自以下基团的任选取代的杂芳基：呋喃基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩、吲哚基、吲唑基、喹啉基、萘啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基和苯并三唑基。

另一方面，R¹⁰为选自以下基团的任选取代的环烷基：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基、二环[3.1.0]己基、二环[4.1.0]庚基、二环[5.1.0]辛基、二环[6.1.0]壬基、二环[3.2.0]庚基、二环[4.2.0]辛基、二环[5.2.0]壬基、二环[3.3.0]辛基、二环[4.3.0]壬基、二环[2.2.1]庚基、二环[3.2.1]辛基、二环[4.2.1]壬基、二环[2.2.2]辛基、二环[3.2.2]壬基和二环[3.3.1]壬基。

另一方面，R¹⁰为选自以下的任选取代的杂环烷基：氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢-2H-吡喃、氧杂环庚烷、氧杂环辛烷、二氧杂环丙烷、二氧杂环丁烷、二氧戊环、二噁烷、二氧杂环庚烷、二氧杂环辛烷、硫杂环丙烷、硫杂环丁烷、四氢噻吩、四氢-2H-噻喃、硫杂环庚烷、硫杂环辛烷、二硫杂环丙烷、二硫杂环丁烷、二硫杂环戊烷、二噻烷、二硫杂环庚烷、二硫杂环辛烷、氧硫杂环丙烷、氧硫杂环丁烷、氧硫杂环戊烷、氧硫杂环己烷、氧硫杂环庚烷、氧硫杂环辛烷、氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯烷酮、哌啶、氮杂环庚烷、氮杂环辛烷、二氮杂环丙烷、二氮杂环丁烷、咪唑烷、哌嗪、二氮杂环庚烷、二氮杂环辛烷、六氢嘧啶、三氮杂环己烷、氧氮杂环丙烷、氧氮杂环丁烷、噁唑烷、吗啉、氧氮杂环庚烷、氧氮杂环辛烷、硫氮杂环丙烷、硫氮杂环丁烷、噻唑烷、硫代吗啉、硫氮杂环庚烷和硫氮杂环辛烷。

另一方面，R¹⁰为选自以下基团的任选取代的环烯基：环丁烯基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚烯基、环庚二烯基、环辛烯基、环辛二烯基、环壬烯基和环壬二烯基。

另一方面，R¹⁰为包括选自以下的杂环烷基的单、二或三不饱和类拟物的任选取代的杂环烯基：氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢-2H-吡喃、氧杂环庚烷、氧杂环辛烷、二氧杂环丙烷、二氧杂环丁烷、二氧戊环、二噁烷、二氧杂环庚烷、二氧杂环辛烷、硫杂环丙烷、硫杂环丁烷、四氢噻吩、四氢-2H-噻喃、硫杂环庚烷、硫杂环辛烷、二硫杂环丙烷、二硫杂环丁烷、二硫杂环戊烷、二噻烷、二硫杂环庚烷、二硫杂环辛烷、氧硫杂环丙烷、氧硫杂环丁烷、氧硫杂环戊烷、氧硫杂环己烷、氧硫杂环庚烷、氧硫杂环辛烷、氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯烷酮、哌啶、氮杂环庚烷、氮杂环辛烷、二氮杂环丙烷、二氮杂环丁烷、咪唑烷、哌嗪、二氮杂环庚烷、二氮杂环辛烷、六氢嘧啶、三氮杂环己烷、氧氮杂环丙烷、氧氮杂环丁烷、噁唑烷、吗啉、氧氮杂环庚烷、氧氮杂环辛烷、硫氮杂环丙烷、硫氮杂环丁烷、噻唑烷、硫代吗啉、硫氮杂环庚烷和硫氮杂环辛烷。

另一方面，R¹⁰为苯基乙炔基、吲哚基、喹啉基、萘基、苯基环丙基或氟苯基。

12.R¹¹基团

一方面，R¹¹独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基，所述任选取代的C1到C6有机残基例如为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。在各种方面，在所公开的化合物中存在1到5个R¹¹基团。例如，可存在1、2、3、4、5或6个R¹¹基团。另一方面，存在不超过两个R11非氢取代基。另一方面，仅存在一个R¹¹取代基。另一方面，不存在R¹¹基团。

13.R¹²基团

一方面，R¹²为共价键；C1到C3烷基，例如甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、正丙基或异丙基；或C1到C3环烷基，例如环丙基、咪唑、1，3-二氧戊环或1，3，5-三嗪。另一方面，R¹²具有以下结构：

14.Ar基团

一方面，Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。另一方面，Ar为苯基、吲哚基、喹啉基、萘基或氟苯基。

15.Y基团

一方面，Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵各自独立地包括N或C-R¹¹。在各种方面，1、2、3、4或5个Y基团可为N。另一方面，Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵中不超过两个为N。另一方面，Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵中仅一个为N。另一方面，Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵各自独立地包括C-R¹¹。另一方面，Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵各自独立地包括C-R¹¹且其中存在不超过两个R¹¹非氢取代基。另一方面，Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵各自独立地包括C-R¹¹且其中仅存在一个R¹¹非氢取代基。

16.例示性化合物

在各种方面，化合物可作为以下各物存在：

17.抑制活性

一方面，所述化合物抑制PLD活性；也就是说，化合物可抑制PLD1活性和/或PLD2活性。另一方面，所述化合物抑制Calu-1细胞中的PLD1响应。另一方面，所述化合物抑制HEK293gfpPLD2细胞中的PLD2响应。另一方面，所述化合物抑制体外PLD1响应。另一方面，所述化合物抑制体外PLD2响应。例如，所述化合物可具有小于约10μM、小于约5μM、小于约1μM、小于约500nM、小于约100nM或小于约50nM的PLD1IC₅₀。进一步举例，所述化合物可具有小于约10μM、小于约5μM、小于约1μM、小于约500nM、小于约100nM或小于约50nM的PLD2IC₅₀。

另一方面，所述化合物可具有小于约10μM、小于约1μM、小于约500nM、小于约100nM、小于约60nM或小于约20nM的PLD1IC₅₀。另一方面，所述化合物可具有小于约10μM、小于约1μM、小于约500nM、小于约100nM、小于约60nM或小于约20nM的PLD2IC₅₀。

一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基，且其中所述化合物抑制PLD1响应，具有小于约10μM的IC₅₀。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基，且其中所述化合物抑制PLD2响应，具有小于约10μM的IC₅₀。

18.对映异构体依赖性差示PLD抑制作用

一方面，所公开的化合物的R-对映异构体与相应S-对映异构体相比，更有效地抑制PLD活性。例如，所公开的化合物的特定R-对映异构体对于PLD1和/或PLD2来说可具有小于约10μM、小于约5μM、小于约1μM、小于约500nM、小于约100nM或小于约50nM的IC₅₀，而所公开的化合物的相应S-对映异构体具有＞10μM的IC₅₀。

另一方面，所公开的化合物的S-对映异构体与相应R-对映异构体相比，更有效地抑制PLD活性。例如，所公开的化合物的特定S-对映异构体对于PLD1和/或PLD2来说可具有小于约10μM、小于约5μM、小于约1μM、小于约500nM、小于约100nM或小于约50nM的IC₅₀，而所公开的化合物的相应R-对映异构体具有＞10μM的IC₅₀。

另一方面，所述化合物展示出至少约2∶1、至少约3∶1、至少约5∶1、至少约10∶1、至少约20∶1、至少约50∶1或至少约75∶1的PLD1∶PLD2抑制比。另一方面，所述化合物展示出至少约2∶1、至少约3∶1、至少约5∶1、至少约10∶1、至少约20∶1、至少约50∶1或至少约75∶1的PLD2∶PLD1抑制比。

一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基，且其中所述化合物展示出至少约2∶1、至少约3∶1、至少约5∶1、至少约10∶1、至少约20∶1、至少约50∶1或至少约75∶1的PLD1∶PLD2抑制比。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基，且其中所述化合物展示出至少约2∶1、至少约3∶1、至少约5∶1、至少约10∶1、至少约20∶1、至少约50∶1或至少约75∶1的PLD2∶PLD1抑制比。

另一方面，化合物具有由下式表示的结构：

虽然所公开的化合物可作为R-对映异构体与S-对映异构体的混合物而提供，但可需要提供富含更有效化合物的所公开化合物的对映异构体的混合物。可能需要这样的混合物以例如增加活性(或较大活性)对映异构体的浓度或降低较低活性(或非活性)对映异构体的浓度。这样的混合物可改良药物制剂的效力。这样的混合物还可使较低活性对映异构体中存在的及在较大活性对映异构体中不存在(或以较低程度存在)的不想要的副作用最小化。另外，特定对映异构体的选择可促进靶向PLD1的程度超过PLD2或靶向PLD2的程度超过PLD1。

因此，在各种方面，所公开的化合物可以富含所述化合物的R-对映异构体的形式提供。例如，所公开的化合物可以大于50％、大于60％、大于70％、大于75％、大于80％、大于85％、大于90％、大于95％、大于98％或大于99％的所述化合物的R-对映异构体的对映体过量提供。一方面，所述R-对映异构体基本不含所述S-对映异构体。例如，可提供基本不含“S”形式的所述化合物的“R”形式的化合物。

表1：PLD抑制剂浓度响应曲线

C.制造所述化合物的方法

一方面，本发明涉及制造可用作同工型选择性磷脂酶D抑制剂的化合物的方法，所述同工型选择性磷脂酶D抑制剂可用于治疗与PLD活性相关的病症。除了文献中已知、实验部分中例示或本领域技术人员清楚的其它标准操作以外，本发明的化合物可通过采用如在公开的方案中所示的反应制备。为了清楚起见，在根据本文公开的定义允许多个取代基的情况下，可显示具有较少取代基的实例。

例示性合成路径示于以下方案1中：

方案1

一般来说，该方法可包括两种化学转变中的一种或两种。第一种转变包括在胺官能团与羰基官能团之间的还原氨化反应的反应。该反应的产物因此可为胺，可将其分离或以未分离形式带入另一化学转变中。一方面，G可为保护基团，可将其在该反应之后以及在进一步反应之前或在进一步反应的同时除去。

可制备或购得起始氨基化合物与羰基化合物。在所述氨基化合物中存在立体中心。特定的立体异构体可在制备所述氨基化合物期间通过例如手性分离获得。在反应产物中存在一个或多个立体中心。所述产物的特定立体异构体可通过例如手性分离立体异构体的外消旋混合物来获得。

第二转变包括脱保护的胺官能团与活化羧基官能团之间的反应，这一反应产生酰胺。

因此，一方面，本发明涉及一种制备化合物的方法，所述方法包括以下步骤：提供具有以下结构的化合物：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；且其中R⁴包括独立地选自氢、卤素、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基，和与具有以下结构的化合物反应：

另一方面，提供手性分离法。另一方面，所述方法还包括与具有以下结构的化合物反应的步骤：

其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基，且其中X为离去基团。另一方面，G为叔丁氧基羰基。

供选的合成路径示于以下方案2中：

方案2

一般来说，该方法可包括两种化学转变中的一种或两种。第一种转变包括在胺官能团与亲电烷基官能团之间的亲核取代反应的反应。该反应的产物因此可为胺，可将其分离或以未分离形式带入另一化学转变中。一方面，G可为保护基团，其可在该反应之后以及在进一步反应之前或在进一步反应的同时除去。

可制备或购得起始氨基化合物与亲电烷基化合物。在所述氨基化合物中存在立体中心。特定的立体异构体可在所述氨基化合物的制备期间通过例如手性分离获得。在所述反应产物中存在一个或多个立体中心。所述产物的特定立体异构体可通过例如手性分离立体异构体的外消旋混合物来获得。

因此，另一方面，所述方法包括以下步骤：提供具有以下结构的化合物：

另一方面，提供手性分离法。

另一方面，所述方法还包括与具有以下结构的化合物反应的步骤：

另一方面，所述方法包括以下步骤：提供具有以下结构的化合物：

另一方面，提供为使具有以下结构的化合物：

另一方面，提供为使具有以下结构的化合物：

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；且其中R⁴包括独立地选自氢、卤素、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基，与具有以下结构的化合物反应：

其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基，其中G为保护基团，且其中X为离去基团。另一方面，所述方法还包括手性分离的步骤。另一方面，G为叔丁氧基羰基。

应理解所公开的方法可结合所公开的化合物、组合物、试剂盒和用途使用。

D.医药组合物

一方面，本发明涉及包含所公开的化合物的医药组合物。也就是说，可提供包含治疗有效量的至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物和医药上可接受的载体的医药组合物。

在某些方面，所公开的医药组合物包含作为活性成分的所公开的化合物(包括其医药上可接受的衍生物(例如其盐))、医药上可接受的载体和任选其它治疗成份或佐剂。所述组合物包括适于口服、直肠、局部和肠胃外(包括皮下、肌肉内和静脉内)施用的组合物，尽管在任何给定的情况下最合适的路径将取决于特定的宿主、正施用活性成分的病状的性质和严重程度。所述医药组合物可以单位剂型方便地存在且通过制药领域中熟知的方法中的任一种制备。

所公开的化合物可通过口服、肠胃外(例如，肌肉内、腹膜内、静脉内、ICV、脑池内注射或输注、皮下注射或植入)、通过吸入喷雾，鼻、阴道、直肠、舌下或局部施用路径施用且可单独或一起以含有适于各施用路径的常规无毒的医药上可接受的载体、佐剂和媒介物的合适剂型配方配制。除了治疗温血动物如小鼠、大鼠、马、牛、绵羊、狗、猫、猴子等，本发明的化合物对于在人类中使用有效。本文所用的术语“组合物”用以涵盖包含预定量或比例的指定成分的产物以及由指定量的指定成分的组合直接或间接产生的任何产物。关于医药组合物的该术语用来涵盖包含一种或多种活性成分和包含惰性成分的任选载体的产物，以及由任何两种或更多种成分的组合、复合或聚集或由一种或多种成分的离解或一种或多种成分的其它类型的反应或相互作用直接或间接产生的任何产物。一般来讲，医药组合物通过使活性成分与液体载体或微细固体载体或两者均匀并紧密地结合，随后，如果需要，使产物成型为所需制剂来制备。在所述医药组合物中，活性目标化合物以足以对疾病的病程或病状产生所需作用的量而含入。因此，所述医药组合物涵盖通过混合本发明的化合物与医药上可接受的载体制造的任何组合物。

本文所用的术语“医药上可接受的盐”是指由医药上可接受的无毒碱或酸制备的盐。当所公开的化合物具有酸性时，其相应的盐可由包括无机碱和有机碱的医药上可接受的无毒碱方便地制备。得自所述无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜和亚铜、铁、亚铁、锂、镁、锰和亚锰、钾、钠、锌等的盐。特别优选铵、钙、镁、钾和钠盐。得自医药上可接受的有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺以及环胺和取代的胺如天然存在和合成的取代胺的盐。可形成盐的其它医药上可接受的有机无毒碱包括离子交换树脂，诸如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、胺基葡萄糖、组氨酸、海卓胺、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、多胺树脂、普鲁卡因(procaine)、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。

本文所用的术语“医药上可接受的无毒酸”包括无机酸、有机酸和由其制备的盐，例如，乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、反丁烯二酸、葡糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、羟乙基磺酸、乳酸、顺丁烯二酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘液酸、硝酸、帕莫酸、泛酸、磷酸、丁二酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸等。优选柠檬酸、氢溴酸、盐酸、顺丁烯二酸、磷酸、硫酸和酒石酸。

实际上，本发明的化合物或本发明的其医药上可接受的衍生物可根据常规医药混配技术组合为与医药载体紧密混合的活性成分。所述载体可视例如口服或肠胃外(包括静脉内)的施用所需要的制剂形式而采用各种形式。因此，医药组合物可作为诸如各自含有预定量的活性成分的胶囊剂、扁囊剂或片剂的适于口服的离散单位来提供。此外，所述组合物可作为粉剂、颗粒、溶液、在水性液体中的混悬液、非水液体、水包油乳液或油包水液体乳液来提供。除了以上陈述的常见剂型，本发明的化合物和/或其医药上可接受的盐还可通过控制释放设备和/或传送装置施用。所述组合物可通过任何制药学方法制备。一般来讲，所述方法包括使活性成分与构成一种或多种必要成分的载体结合的步骤。一般来讲，所述组合物通过将活性成分与液体载体或微细固体载体或两者均匀且紧密地混合来制备。所述产物因此可方便地成型为所需外观。

因此，本发明的医药组合物可包含医药上可接受的载体和本发明的化合物或所述化合物的医药上可接受的盐。本发明的化合物或其医药上可接受的盐也可与一种或多种其它治疗活性化合物组合包含在医药组合物中。

所用的医药载体的实例可为固体、液体或气体。固体载体的实例包括乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁和硬脂酸。液体载体的实例为糖浆、花生油、橄榄油和水。气态载体的实例包含二氧化碳和氮气。

在制备用于口服剂型的组合物的过程中，可采用任何方便的医药介质。例如，可使用水、二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等来形成口服液体制剂，诸如混悬液、酏剂和溶液；同时可使用载体如淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等来形成口服固体制剂，诸如粉剂、胶囊剂和片剂。由于施用简易性，片剂和胶囊剂是优选的口服剂型，由此使用固体医药载体。片剂可任选通过标准水性或非水性技术包衣。

含有本发明组合物的片剂可通过任选与一种或多种辅助成分或佐剂一起压缩或模制来制备。压缩片剂可通过在合适机器中压缩任选与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂或分散剂混合的诸如粉剂或颗粒的呈自由流动形式的活性成分来制备。模制片剂可通过在合适机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物来制造。

适于肠胃外施用的医药组合物可制备为活性化合物在水中的溶液或混悬液。可包含合适的表面活性剂，诸如羟丙基纤维素。还可在甘油、液体聚乙二醇及其在油中的混合物中制备分散液。此外，可包含防腐剂来防止微生物的有害生长。

适于可注射用途的医药组合物包括无菌水溶液或分散液。另外，所述组合物可呈用于临时制备所述无菌可注射溶液或分散液的无菌粉剂形式。在所有情况下，最终可注射形式必须为无菌的且必须为适合容易注射的有效流体。所述医药组合物在制造和储存条件下必须稳定；因此，优选应该保藏以防诸如细菌和真菌的微生物的污染作用。所述载体可为溶剂或分散介质，其包含例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、植物油及其合适的混合物。

医药组合物可呈适于局部施用的形式，诸如气溶胶、乳膏、软膏、洗液、细粉、漱口剂、含漱剂等。此外，所述组合物可呈适合在经皮装置中使用的形式。这些配方可利用本发明的化合物或其医药上可接受的盐经常规处理方法来制备。例如，乳膏或软膏通过混合亲水材料和水以及约5重量％到约10重量％的所述化合物以制得具有所需稠度的乳膏或软膏来制备。

本发明的医药组合物可呈适于直肠施用的形式，其中载体为固体。优选所述混合物形成单位剂量栓剂。合适的载体包括可可脂和本领域中通常使用的其它材料。所述栓剂可通过首先混合所述组合物与软化或熔融的载体、接着冷却并在模具中成型来方便地形成。

除了上述载体成分以外，上述医药配方可视情况包含一种或多种其他载体成分，诸如稀释剂、缓冲剂、调味剂、粘合剂、表面活性剂、增稠剂、润滑剂、防腐剂(包括抗氧化剂)等。另外，可包含其它佐剂以使制剂与预定接受者的血液等渗。含有本发明的化合物和/或其医药上可接受的盐的组合物也可以粉剂或液体浓缩形式制备。

在所公开病状的治疗中，适当剂量水平通常将为约0.01到500mg/kg患者体重/日，其可以单剂量或多剂量施用。优选所述剂量水平将为约0.1到约250mg/kg/日；更优选约0.5到约100mg/kg/日。合适的剂量水平可为约0.01到250mg/kg/日、约0.05到100mg/kg/日或约0.1到50mg/kg/日。在该范围内，剂量可为0.05到0.5、0.5到5或5到50mg/kg/日。对于口服施用，对于待治疗患者的症状调整剂量来说，所述组合物优选以含有1.0到1000毫克活性成分的片剂、特别1.0、5.0、10、15、20、25、50、75、100、150、200、250、300、400、500、600、750、800、900和1000毫克活性成分的片剂形式提供。所述化合物可以1到4次/日、优选一次/日或两次/日的方案施用。可调节该给药方案以提供最佳治疗响应。然而，应理解，可改变任何特定患者的特定剂量水平和给药频率，且这将取决于多种因素，包括所用特定化合物的活性、所述化合物的新陈代谢稳定性和作用长久性、年龄、体重、总体健康、性别、饮食、施用模式和时间、排泄速率、药物组合、特定病状的严重程度和经受疗法的宿主。

所公开的医药组合物还可包含如本文进一步论述的其它治疗活性化合物，其通常用于治疗上述病理学病状。

因此，一方面，本发明涉及一种医药组合物，其包含治疗有效量的具有由下式表示的结构的化合物：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基，或其医药上可接受的衍生物和医药上可接受的载体。

另一方面，医药组合物可包含治疗有效量的任一种或多种所公开的化合物和医药上可接受的载体。另一方面，医药组合物可包含治疗有效量的任何所公开方法的一种或多种产物和医药上可接受的载体。一方面，本发明涉及一种制造药剂的方法，其包括组合至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物与医药上可接受的载体或稀释剂。

应理解，所公开的组合物可由所公开的化合物制备。还应理解，所公开的组合物可在公开的使用方法中使用。

E.试剂盒

一方面，本发明涉及一种包含至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物和至少一种已知增加PLD活性的试剂的试剂盒。另一方面，试剂盒包含至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物和至少一种已知降低PLD活性的试剂。另一方面，共同配制所述至少一种化合物或所述至少一种产物和所述至少一种试剂。另一方面，共同封装所述至少一种化合物或所述至少一种产物和所述至少一种试剂。

所述试剂盒也可包含与其它组分共同封装、共同配制和/或共同传送的化合物和/或产物。例如，药物制造商、药物转卖商、医师、混配车间或药剂师可提供包含所公开的化合物和/或产物和用于传送给患者的另一组分的试剂盒。

预期所公开的试剂盒可结合所公开的制造方法、所公开的使用方法和/或所公开的组合物来使用。

F.使用化合物、产物和组合物的方法

还提供了一种使用所公开的化合物、组合物或药剂的方法。一方面，所述使用方法针对病症的治疗。另一方面，所公开的化合物可作为单一试剂或与一种或多种其它药物组合用于治疗、预防、控制、改善或降低所述化合物或所述其它药物有效用的上述疾病、病症和病状的风险，其中药物在一起的组合比单独的药物更安全或更有效。所述其它药物可通过常用的路径和量与所公开的化合物同时或相继施用。当所公开的化合物与一种或多种其它药物同时使用时，优选呈含有所述药物和所公开的化合物的单位剂型的医药组合物。然而，也可按重复的时间表施以组合疗法。还设想一种或多种活性成分与所公开化合物的组合可能比任一单一试剂更有效。

本发明的医药组合物和方法还可包含如本文提到的通常用于治疗上述病理学病状的其它治疗活性化合物。

1.治疗方法

本文公开的化合物可用于治疗、预防、改善、控制或降低与PLD活性相关的多种病症的风险。因此，一方面，本发明涉及一种治疗哺乳动物的与PLD活性相关的病症的方法，其包括对所述哺乳动物施用有效治疗所述哺乳动物的所述病症的剂量和量的至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物。另一方面，所述病症与PLD活性功能障碍相关。另一方面，所抑制的PLD为PLD1。另一方面，所抑制的PLD为PLD2。

另一方面，所述哺乳动物为人类。另一方面，在施用步骤之前已经诊断所述哺乳动物具有治疗所述病症的需要。另一方面，所述方法还包括鉴别需要治疗所述病症的哺乳动物的步骤。

一方面，所述病症为不受控制的细胞增殖的疾病。另一方面，所述病症为癌症。另一方面，所述病症选自乳癌、肾癌、胃癌和结肠直肠癌。另一方面，所述病症选自淋巴瘤、脑癌、泌尿生殖道癌症、淋巴系统癌症、胃癌、喉癌、肺、胰腺癌、乳癌和恶性黑色素瘤。

2.PLD抑制作用

本文公开的化合物还可用于抑制PLD活性。因此，一方面，本发明涉及一种抑制哺乳动物中的PLD活性的方法，所述方法包括对受试者施用有效抑制所述受试者中的PLD活性的剂量和量的至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物的步骤。另一方面，所抑制的PLD为PLD1。另一方面，所抑制的PLD为PLD2。

另一方面，所述哺乳动物为人类。另一方面，在施用步骤之前已经诊断所述哺乳动物具有抑制PLD的需要。另一方面，在施用步骤之前已经诊断所述哺乳动物具有治疗与PLD活性有关的病症的需要。另一方面，所述方法还包括鉴别需要PLD抑制作用的哺乳动物的步骤。

另一方面，本发明涉及一种抑制至少一种细胞中的PLD活性的方法，所述方法包括使所述至少一种细胞与有效抑制所述至少一种细胞中的PLD活性响应的量的至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物接触的步骤。另一方面，接触经由对哺乳动物施用进行。另一方面，所述细胞为哺乳动物，例如人类。另一方面，在所述接触步骤之前已将所述细胞从哺乳动物分离。另一方面，所抑制的PLD为PLD1。另一方面，所抑制的PLD为PLD2。

应理解，所公开的方法可结合所公开的化合物、方法、组合物和试剂盒使用。

G.用途

一方面，本发明涉及化合物用于抑制PLD的用途，所述化合物具有由下式表示的结构：

其中------各自独立地包括任选的共价键；其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基，或其医药上可接受的衍生物。另一方面，所抑制的PLD为PLD1。另一方面，所抑制的PLD为PLD2。

另一方面，本发明涉及至少一种所公开的化合物或所公开方法的至少一种产物在制造用于治疗与PLD活性相关的病状的药剂中的用途。另一方面，所述用途为制造用于治疗哺乳动物的与PLD活性相关的病症的药剂。另一方面，所述病症为不受控制的细胞增殖的疾病。另一方面，所述病症为癌症。另一方面，所述病症选自乳癌、肾癌、胃癌和结肠直肠癌。另一方面，所述病症选自淋巴瘤、脑癌、泌尿生殖道癌症、淋巴系统癌症、胃癌、喉癌、肺、胰腺癌、乳癌和恶性黑色素瘤。

应理解，所公开的用途可结合所公开的化合物、方法、组合物和试剂盒使用。

在各种其它方面，本发明也涉及作为用于预防癌细胞恶性迁移到远端位点(即，转移)以及更局部化侵袭(例如，恶性胶质瘤)的治疗性抗癌剂的用途；用于治疗涉及已经显示通过PLD调节的信号途径的病症的用途，所述信号途径包括RAS/MEK/ERK信号级联、NFκB和mTOR途径，其中PLD已作为这些细胞信号和代谢途径的主要介体而牵涉到；用于治疗涉及醚键联的磷脂形成的病症的用途，其中PLD在这些分子物种的调节生成中起作用。已经报道数种人类癌症导致这些罕见醚键联的磷脂物种的形成；PLD抑制剂在神经病学和精神病症(即，如在DSM IV中所概述)的治疗中的用途，所述病症可包括神经退化性疾病；用于治疗糖尿病和代谢综合征的用途，其中PLD与细胞信号和代谢病症中的病症相关；和本文所述的任一抑制剂的兽医应用。

H.磷脂酶D抑制活性

可通过本领域已知的任何合适的已知方法评估所公开的化合物和组合物充当PLD1、PLD2或两者的抑制剂的能力。本文也公开了一种鉴别选择性抑制PLD酶或同工酶的试剂的筛选方法。已知许多这样的方法且它们可用以针对PLD-抑制活性筛选所公开的组合物。例如，合适的筛选方法公开在以下文献中：Scott S.A.等，Nat ChemBiol.2009年2月；5(2)：108-17；Brown，H.A.等，Cell.1993.75(6)：1137-44；Ivanova，P.T.等，(2007)“Glycerophospholipididentification and quantitation by electrospray ionization massspectrometry，”见Methods in Enzymology，432，Lipidomics andBioactive Lipids：Mass spectrometry based lipid analysis.由H.AlexBrown编，Elsevier.第21-57页)；和Brown，H.A.等，(2007)“Biochemical Analysis of Phospholipase D.”见Methods in Enzymology.434，Lipidomics and Bioactive Lipids：Lipids and Cell Signaling.由H.Alex Brown编.Elsevier.第49-87页。

一般来说，所述筛选方法可包括在允许磷脂水解成磷脂酰基醇的条件下提供包含所述磷脂、伯醇和PLD的样品，使所述样品与候选试剂接触，测量酶活性，比较所述酶活性与对照物，通过与所述对照物相比酶活性的降低鉴别出抑制所述PLD的试剂。

所述筛选方法可包括在允许磷脂水解成磷脂酸的条件下提供包含所述磷脂和PLD的样品，使所述样品与候选试剂接触，测量酶活性，比较所述酶活性与对照物，通过与所述对照物相比酶活性的降低鉴别出抑制所述PLD的试剂。

在一些方面，所述PLD为myr-Aff-1-激发的哺乳动物人类PLD1或人类PLD2。

所述筛选方法可包括提供选择性表达PLD同工酶的包括磷脂的细胞，使所述细胞与候选试剂在伯醇存在下接触，测量细胞中的磷脂酰基醇水平，比较所述磷脂酰基醇水平与对照物，通过与所述对照物相比磷脂酰基醇水平的降低鉴别出抑制PLD同工酶的试剂。

在一些方面，细胞中的PLD活性主要由PLD1介导。因此，在一些方面，所述细胞为人类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系Calu-1。在一些方面，所述细胞已被激发以活化所述细胞中的PLD1。例如，所述细胞可用佛波醇(phorbol)12-豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)激发。

在一些方面，细胞中的PLD活性主要由PLD2介导。因此，在一些方面，所述细胞稳定地过度表达重组PLD2。例如，所述细胞可为稳定地过度表达绿色荧光蛋白(GFP)-标记的PLD2的HEK293细胞。

在一些方面，所公开方法的伯醇为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇或辛醇。

在一些方面，使所公开方法的伯醇氘化以使得所得磷脂酰基醇氘化以有助于检测。因此，在一些方面，所述伯醇为甲醇-d₄、乙醇-d₆、丙醇-d₈或丁醇-d₁₀。已知其它这样的氘化伯醇且它们可在本文中使用。因此，在所述伯醇为丁醇-d₁₀的情况下，所述磷脂酰基醇可为磷脂酰基丁醇-d₉。

酶活性可使用本领域已知的标准酶测定测量。酶测定通常测量底物随时间的消耗量或产物随时间的生成量。存在大量测量底物和产物浓度的不同方法且许多酶可以数种不同方式测定。

酶测定可根据其取样方法分成两组：连续测定，其中所述测定给出活性的连续读数；和不连续测定，其中取出样品，使反应停止，随后测定底物/产物的浓度。连续测定最方便，其中一次测定给出反应速率，而无需进一步的工作。存在许多不同类型的连续测定，包括分光光度测定、荧光测定、量热测定、化学发光测定和光散射测定。

在分光光度测定中，通过测量测定溶液吸收光量的变化来跟踪反应过程。如果该光处于可见区，则实际上可见到测定的颜色的变化，这称作比色测定。MTT测定(使用四唑鎓染料作为底物的氧化还原测定)为比色测定的实例。常使用紫外光，因为以还原形式、而不是以氧化形式的常见辅酶NADH和NADPH吸收紫外光。由于使用NADH作为底物的氧化还原酶消耗辅酶，因此其可通过跟踪UV吸收度在340nm的波长下的降低来测定。

荧光测定使用底物与产物的荧光差异来测量酶反应。这些测定通常比分光光度测定更灵敏，但可遭受由杂质引起的干扰和许多荧光化合物在暴露于光时的不稳定性。

热量测定为测量由化学反应释放或吸收的热量。这些测定非常普遍，由于许多反应包括一些热量变化且利用微量热计，所以不需要大量酶和底物。这些测定可用以测量不可能以任何其它方式测定的反应。[5]

化学发光是通过化学反应发射光。一些酶反应产生光且可测量该光以侦测产物形成。这些类型的测定可能极其灵敏，因为所产生的光可由感光胶片在数天或数周范围内捕获，但可能难以量化，因为并非所有由反应释放的光都将被侦测到。

静态光散射测量溶液中大分子的重量平均摩尔质量与浓度的积。考虑到一种或多种物种在测量时间范围内的固定总浓度，散射信号为溶液的重量平均摩尔质量的直接量度，其将随复合物形成或离解而改变。因此，该测量量化了复合物的化学计量以及动力学。蛋白质动力学的光散射测定为不需要酶的非常普遍的技术。

不连续测定为：间隔地从酶反应取出样品，且测量这些样品中的产物的生成量或底物的消耗量。例如，放射测定测量并入底物的放射性或其从底物的释放。这些测定中最常使用的放射性同位素为¹⁴C、³²P、³⁵S和¹²⁵I。因为放射性同位素可允许单个原子特异性标记底物，所以这些测定极其灵敏且具有特异性。它们常用于生物化学中且常常是测量粗提取物中的特异性反应的唯一方式。

色谱测定通过由色谱法将反应混合物分离成其组分而测量产物形成。这通常通过高效液相色谱(HPLC)进行，但也可使用薄层色谱法的较简单的技术。尽管该方法可能需要许多材料，但其灵敏度可通过用放射性或荧光标志标记底物/产物来增加。测定灵敏度也已通过将方案转换到在比HPLC仪器高几倍的泵压下操作的改良的色谱仪器(例如，超高压液相色谱)来增加。

I.实验

提出以下实施例以向本领域的一般技术人员提供以如何制造和评估本文要求的化合物、组合物、制品、装置和/或方法的完整公开内容和描述，且它们意图为纯粹例示性的且并非想要限制本发明。尽力确保数值(例如，量、温度等)的准确性，但应该说明一些误差和偏差。除非另外指明，否则份数为重量份，温度是以℃计或为周围温度，且压力为或接近大气压。

在以下实施例中说明了数种制备本文公开的化合物的方法。在一些情况下，起始材料和必要的中间物为市售的，或可根据文献程序或如本文所说明来制备。所有反应是在氩气氛下使用标准化学技术进行。用于萃取、洗涤和色谱法的溶剂为HPLC级。所有试剂都以最高商品品质购自Aldrich Chemical Co.且在不纯化的情况下使用。使用Biotage引发剂-60进行微波辅助的反应。所有NMR光谱都在400MHzBruker AMX NMR上记录。¹H化学位移以从作为内标物的在DMSO中的TMS向前场迁移的δ值(ppm)报道。数据记录如下：化学位移，多重性(s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，br＝宽峰，m＝多重峰)，积分，耦合常数(Hz)。¹³C化学位移以δ值(ppm)报道，其中DMSO碳峰设定为39.5ppm。低分辨率质谱在具有电喷雾电离的Agilent 1200 LCMS上获得。高分辨质谱在具有电喷雾电离的Waters QToF-API-US外加Acquity系统上记录。分析薄层色谱在250μM硅胶60F₂₅₄板上进行。对于快速柱色谱，使用Merck硅胶(60，粒度0.040-0.063mm)。分析HPLC在具有在214nm和254nm下的UV检测以及ELSD检测的Agilent 1200分析LCMS上进行。库化合物的制备型纯化在具有由质量检测触发的收集的常规Agilent 1200制备型LCMS上进行。所有产率都是指分析纯且完全表征的材料(¹HNMR、¹³C NMR分析LCMS和Hi-Res MS)。

1.用于酰胺键形成的通用方法A载体

使含有0.11mmol的适当酸、0.12mmol EDCI、0.12mmol HOBt、3.3mmol三乙胺和1mL DCM的溶液搅拌15分钟且加入含1mLDCM和0.1mmol的适当胺的溶液。使反应混合物旋转过周末。在减压下除去溶剂且使残余物经受质量导向的HPLC纯化。

2.用于酰胺键形成的通用方法B

向含有0.11mmol的适当酰氯和1mL DCM的溶液中加入含有0.1mmol的适当胺和1mL DCM的溶液，接着加入3.3mmol三乙胺。使反应混合物旋转过周末。在减压下除去溶剂且使残余物经受质量导向的HPLC纯化。

3.实施例1

N-((S)-1-((R)-4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)丙-2-基)-3-苯基丙炔酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

a.步骤A：4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮

向3.5g(3.5mmol)4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮盐酸盐中加入EtOAc和10％NaOH水溶液，直到溶解发生。将各层分离且将水层用乙酸乙酯和DCM进一步萃取。将合并的有机层经MgSO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂以得到2.75g(90％)泡沫状白色固体4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮：¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.73(s，1H)，7.29(d，1H，J＝8.4Hz)，7.28(d，1H，J＝8.4Hz)，7.16-7.11(m，2H)，3.53(dd，1H，J＝10.4和7.8)，3.37-3.26(m，4H)，3.05-3.01(m，1H)，2.73-2.67(m，1H)，2.64-2.59(m，1H)，2.32-2.26(m，3H)和1.52-1.43(m，1H)；LCMS m/z：249.2(M+H)⁺。

b.步骤B：4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯

向含有2.06g(8.2mmol)的胺和40mL二噁烷的溶液中加入2.0g(9.12mmol)BOC₂O，接着加入1.7mL(10.0mmol)DIPEA。使反应混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物通过加入水骤冷且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经MgSO₄干燥且过滤。在减压下除去溶剂且使残余物经受硅胶纯化以得到2.38g(82％)泡沫状白色固体4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸烷8-甲酸叔丁酯：LCMS m/z：371.2(M+Na)⁺。

C.步骤C：手性分离

在Agilent 1200 HPLC展开方法。发现最优条件为在Chiraltech OJ管柱(10u，4.6×250mm)上以1.5mL/min的95％己烷和5％异丙醇。制备型HPLC在具有能够实现200mL/min的泵的Gilson 215 Prep LC上使用Chiraltech OJ 20u，50×250mm进行。流速为177mL/min且峰基于220nm的波长收集。最终制备条件由于化合物的不溶性质而自所述分析方法改变。采用梯度以降低导致差分辨率的样品溶剂的相互作用。IPA的百分数经65分钟从0％增加到8％。在62分标下，100％IPA洗涤使最终峰清晰洗脱出。在旋转蒸发溶剂之后，收集到0.99g的各对映异构体且使用上述分析方法测定95％为一种对映异构体。例示性色谱图示于图30中。

d.步骤D：(R)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮

将含有0.99g(2.84mmol)的来自ChiralPak OJ管柱的最后洗脱部分和15mL DCM的溶液用1.5mL TFA处理。使反应混合物搅拌过夜。再加入1.0mL TFA且使反应混合物再搅拌5小时。在减压下除去溶剂且使残余物分配在KOH水溶液和乙酸乙酯之间。将水层用DCM进一步萃取且将合并的有机层经MgSO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂以得到650mg(92％)棕褐色泡沫状固体(R)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮：LCMS m/z：249.2(M+H)⁺，[α]_D+1.67(c＝1.01，MeOH)。

e.步骤E：(S)-1-((R)-4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯

使含有0.25g(1.0mmol)(R)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮、0.25g(1.44mmol)(S)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁酯、2mL THF、1mL DCM和1g(2.5mmol)MP-三乙酰氧基硼氢化钠树脂的反应混合物旋转过夜。过滤反应混合物且在减压下除去溶剂。使残余物进行硅胶色谱法以得到250mg(61％)呈无色油状的(S)-1-((R)-4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯。¹HNMR(400MHz，CD₃OD)δppm 7.35-7.31(m，2H)，7.10-7.06(m，2H)，3.85(brs，1H)，3.73-3.68(m，1H)，3.55-3.51(m，2H)，3.39-3.27(m，1H)，3.10-2.87(m，2H)，2.78-2.59(m，3H)，2.01-1.72(m，5H)，1.42(s，9H)，1.32-1.20(m，1H)和1.11(d，3H，J＝2.4Hz)；LCMS m/z：406.2(M+H)⁺。

f.步骤F：(R)-8-((S)-2-氨基丙基)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮双2，2，2-三氟乙酸盐

向含有250mg(0.62mmol)(S)-1-((R)-4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)丙-2-基氨基甲酸叔丁酯和5mL DCM的溶液中加入约1mL TFA。使反应混合物在室温下搅拌过夜。在减压下除去溶剂且残余物在不进一步纯化的情况下使用。LCMS m/z：306.2(M+H)⁺。

g.步骤G：N-((S)-1-((R)-4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)丙-2-基)-3-苯基丙炔酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

使用通用方法A，由16mg(0.11mmol)3-苯基丙炔酸和53mg(0.1mmol)(R)-8-((S)-2-氨基丙基)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮双2，2，2-三氟乙酸盐制备10mg N-((S)-1-((R)-4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)丙-2-基)-3-苯基丙炔酰胺2，2，2-三氟乙酸盐：¹HNMR(400MHz，CD₃OD)δppm 7.58(m，2H)，7.49-7.46(m，1H)，7.44-7.7.40(m，2H)，7.35(brm，2H)，7.15-7.09(m，2H)，4.45(brs，1H)，3.99-3.40(m，6H)，3.27-3.10(m，2H)，2.21-1.85(m，3H)，1.49-1.32(m，2H)和1.25(d，3H)，J＝6.8Hz)；LCMS m/z：434.3(M+H)⁺。

4.实施例2

(S)-4-氟-N-(2-(4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)乙基)苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

a.步骤A：(S)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮

将含有0.99g(2.84mmol)的来自ChiralPak OJ管柱的早期洗脱部分和15mL DCM的溶液用1.5mL TFA处理。使反应混合物搅拌过夜。再加入1.0mL TFA且使反应混合物再搅拌5小时。在减压下除去溶剂且使残余物分配在KOH水溶液和EtOAc之间。将水层用DCM进一步萃取且将合并的有机层经MgSO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂以得到611mg(85％)棕褐色泡沫状固体(S)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮：LCMS m/z：249.2[M+H]⁺，[α]_D-3.3(c＝1.00，MeOH)。

b.步骤B：(S)-2-(4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)乙基氨基甲酸叔丁酯

将含有0.25g(1.0mmol)(S)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮、0.2g(1.41mmol)2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯、2mL THF、1mLDCM和1g(2.5mmol)MP-三乙酰氧基硼氢化钠树脂的混合物旋转过夜。过滤反应混合物且在减压下除去溶剂。使残余物进行硅胶色谱法以得到131mg(33％)呈无色油状的(S)-2-(4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)乙基氨基甲酸叔丁酯。¹HNMR(400MHz，CD₃OD)δppm 7.35-7.32(m，2H)，7.12-7.07(m，2H)，3.68(dd，1H，J＝10.4和7.6Hz)，3.57(dd，1H，J＝10.4和6.4Hz)，3.32-3.28(m，3H)，3.11-3.08(m，2H)，2.87-2.84(m，3H)，2.02-1.80(m，4H)，1.41(s，9H)和1.34-1.27(m，2H)；LCMS m/z：392.3(M+H)⁺。

c.步骤C：(S)-8-(2-氨基乙基)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮双(2，2，2-三氟乙酸盐)

向含有130mg(0.33mmol)(S)-2-(4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)乙基氨基甲酸叔丁酯和5mL DCM的溶液中加入1mL TFA。使反应混合物在室温下搅拌过夜。在减压下除去溶剂且残余物在不经进一步纯化的情况下使用。LCMS m/z：292.2(M+H)⁺。

d.步骤D：(S)-4-氟-N-(2-(4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)乙基)苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

使用通用方法A，由52mg(S)-8-(2-氨基乙基)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮双(2，2，2-三氟乙酸盐)和15mg 4-氟苯甲酸制备12mg(S)-4-氟-N-(2-(4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)乙基)苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐4-氟苯甲酸的旋转异构混合物：

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)δppm 8.09-8.05(m，0.5H)，7.88(dd，1.5H，J＝8.8和5.6Hz)，7.38-7.35(m，1.5H)，7.23-7.17(m，2.5H)，7.14-7.10(m，2H)，3.88-3.84(m，1H)，3.72-3.48(m，8H)，3.37-3.30(m，4H)，2.25(brm，1H)，2.05-1.94(m，2H)和1.44-1.37(m，1H)；LCMS m/z：414.2(M+H)⁺。

5.实施例3

(S)-N-(2-(4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)乙基)-2-苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

使用通用方法B，由52mg(S)-8-(2-氨基乙基)-4-(4-氟苯基)-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮双(2，2，2-三氟乙酸盐)和21mg 2-萘甲酰氯制备9mg(S)-N-(2-(4-(4-氟苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)乙基)-2-萘甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐：¹HNMR(400MHz，CD₃OD)δppm 8.39(s，1H)，7.99-7.87(m，4H)，7.63-7.58(m，2H)，7.37(brm，2H)，7.12(m，2H)，3.94-3.87(m，1H)，3.79-3.45(m，8H)，3.38-3.35(m，4H)，2.24-2.10(m，1H)，2.08-1.89(m，2H)和1.45-1.32(m，1H)；LCMS m/z：446.2(M+H)⁺。

将根据所公开方法制备的各种化合物与表征数据示于下表2中。

表2：化合物表征

本领域的技术人员将显而易见的是，可在不脱离本发明的范围和精神的情况下在本发明内进行各种修改和改变。本领域的技术人员由考虑本说明书和实践本文公开的本发明将显而易见本发明的其它实施方案。意图本说明书和实施例仅视为示例性的，本发明的真实范围和精神仅由以下权利要求书指示。

Claims

1.一种化合物，其包含由下式表示的结构：

其中------各自独立地包括任选的共价键；

其中R¹为选自芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C3到C9有机残基；

其中R²包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的3个取代基；

其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；

其中R⁴包括独立地选自氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基；

其中R⁵和R⁶各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁵和R⁶连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；

其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基，或者R⁷和R⁸连同中间的碳一起包括任选取代的C3到C6环烷基；

其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；

其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基，

或其医药上可接受的衍生物。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为选自苯基和萘基的任选取代的芳基。

3.根据权利要求1所述的化合物，其中R⁸为氢。

4.根据权利要求1所述的化合物，其中R⁸选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。

5.根据权利要求1所述的化合物，其中R⁸为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。

6.根据权利要求1所述的化合物，其中R⁸为甲基。

7.根据权利要求1所述的化合物，其中R⁷为氢且其中R⁸选自卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基。

8.根据权利要求1所述的化合物，其中R⁷为氢且其中R⁸为甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、环戊基、正己基、异己基、仲己基、二甲基丁基或环己基。

9.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹⁰为选自以下基团的任选取代的杂芳基：呋喃基、吡喃基、咪唑基、噻吩基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩、吲哚基、吲唑基、喹啉基、萘啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基和苯并三唑基。

10.根据权利要求1所述的化合物，其具有由下式表示的结构：

其中R⁷和R⁸各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基、任选取代的C1到C6烷基或任选取代的C3到C6环烷基；

其中Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵各自独立地包括N或C-R¹¹，其中R¹¹各自独立地包括氢、卤化物、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基或任选取代的C1到C6有机残基；

其中R¹²为共价键、C1到C3烷基或C1到C3环烷基；且

其中Ar为选自芳基和杂芳基的任选取代的C4到C10有机残基。

11.根据权利要求10所述的化合物，其中Y¹、Y²、Y³、Y⁴和Y⁵中至多两个为N。

12.根据权利要求10所述的化合物，其中Ar为苯基、吲哚基、喹啉基、萘基或氟苯基。

13.根据权利要求10所述的化合物，其中R¹²具有以下结构：

14.一种制备化合物的方法，其包括以下步骤：

a.提供具有以下结构的化合物：

其中R³包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基；且

其中R⁴包括独立地选自氢、卤素、羟基、三氟甲基、氨基、氰基、硝基、叠氮化物、甲酰氨基、烷氧基、硫醇、烷基磺酰基和任选取代的C1到C6有机残基的8个取代基，和

b.与具有以下结构的化合物反应：

其中R⁹包括氢、任选取代的C1到C6烷基、任选取代的C3到C6环烷基或可水解的残基，

其中G为保护基团，且其中X为离去基团。

15.根据权利要求14所述的方法，其中提供为手性分离。

16.根据权利要求14所述的方法，其进一步包括与具有以下结构的化合物反应的步骤：

其中R¹⁰包括选自烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的任选取代的C1到C12有机残基，且

其中X为离去基团。

17.一种治疗哺乳动物的与PLD活性相关的病症的方法，其包括向所述哺乳动物施用具有由下式表示的结构的至少一种化合物的步骤：

其中------各自独立地包括任选的共价键；

或其医药上可接受的衍生物。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述哺乳动物为人类。

19.根据权利要求17所述的方法，其中所述病症为不受控制的细胞增殖的疾病。

20.根据权利要求17所述的方法，其中所述病症与PLD活性功能障碍相关。