CN102533563A - 一种纤维素酶产生菌及其应用 - Google Patents

一种纤维素酶产生菌及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN102533563A
CN102533563A CN2011103516634A CN201110351663A CN102533563A CN 102533563 A CN102533563 A CN 102533563A CN 2011103516634 A CN2011103516634 A CN 2011103516634A CN 201110351663 A CN201110351663 A CN 201110351663A CN 102533563 A CN102533563 A CN 102533563A
Authority
CN
China
Prior art keywords
celluase
cellulase
producing bacteria
producing bacterium
enzyme
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2011103516634A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102533563B (zh
Inventor
陈树林
蔡鹏丽
武改红
贾文娣
马延和
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Microbiology of CAS
Tianjin Institute of Industrial Biotechnology of CAS
Original Assignee
Institute of Microbiology of CAS
Tianjin Institute of Industrial Biotechnology of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Microbiology of CAS, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology of CAS filed Critical Institute of Microbiology of CAS
Priority to CN 201110351663 priority Critical patent/CN102533563B/zh
Publication of CN102533563A publication Critical patent/CN102533563A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102533563B publication Critical patent/CN102533563B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种纤维素酶产生菌，纤维素酶产生菌的分类命名为桧状青霉(Penicillium piceum)，菌株的18S rDNA基因序列如SEQ ID NO1所述，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期：2011年10月9日，保藏号：CGMCC5314。本发明所述的纤维素酶产生菌具有较好的纤维素酶和半纤维素酶的产酶能力，尤其是对Beta-葡萄糖苷酶具有良好的生产能力。本发明的纤维素酶产生菌以及所生产的纤维素酶和半纤维素酶在生物燃料、医药、日用化工、食品发酵等多个行业具有广泛的应用前景。

Description

一种纤维素酶产生菌及其应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种纤维素酶产生菌及其应用，所本发明所涉及的纤维素酶产生菌，其具有较好的纤维素酶和半纤维素酶的产酶能力。
背景技术
纤维素是自然界中含量最丰富的碳水化合物，是一类可再生的资源和能源。但是纤维素很难被分解利用，如何将纤维素转化为能直接利用的资源和能源是摆在人们面前的一个难题。纤维素的降解有两条途径：化学法和生物法，化学法的特异性差、纯度低、污染环境，而生物酶法可克服这些缺点，因此，纤维素酶一经发现就受到了世界各国科学界的重视。
纤维素酶是指能降解纤维素Beta-1，4-葡萄糖苷键，使纤维素变成纤维二糖和葡萄糖的一组酶的总称，是起协同作用的多组分酶系。纤维素酶的主要组分是内切Beta-1，4-葡萄糖酶、外切葡聚糖酶和Beta-葡萄糖苷酶。前两种酶主要溶解纤维，后一种酶将纤维二糖转化为葡萄糖，当这三种主要成分活性比例适当时，就能完成纤维素的降解。
纤维素酶的应用现在已经扩展到医药、遗传、纺织、日用化工、造纸、环境、食品发酵、饲料、工业洗涤、石油开采、资源再生、废水处理、农业、生物能源等各个领域，尤其是在生物能源方面的应用，前景十分广阔。纤维素酶的获得是通过纤维素酶产生菌的发酵来得到，而目前存在的主要问题是纤维素酶的酶活力不高，酶解效率不高。选育优良菌种是提高纤维素酶活力的关键。因此纤维素酶高产菌株的筛选具有重要的生态效益、经济效益和社会效益。自然界微生物资源丰富，因而从自然界中获得高产纤维素酶的菌株是很有必要的。
发明内容
本发明的目的在于，提供了一种纤维素酶产生菌。本发明的纤维素酶产生菌具有较好的纤维素酶和半纤维素酶的产酶能力，尤其是对Beta-葡萄糖苷酶具有良好的生产能力。
本发明提供的技术方案为：
一种纤维素酶产生菌，纤维素酶产生菌的分类命名为桧状青霉(Penicillium piceum)，菌株的18S rDNA基因序列如SEQ ID NO1所述，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期：2011年10月9日，保藏号：CGMCC5314。
优选的是，所述的纤维素酶产生菌的应用中，所述纤维素酶产生菌应用于生产纤维素酶和半纤维素酶。
本发明所述的纤维素酶产生菌具有较好的纤维素酶和半纤维素酶的产酶能力，尤其是对Beta-葡萄糖苷酶具有良好的生产能力。本发明的纤维素酶产生菌以及所生产的纤维素酶和半纤维素酶在生物燃料、医药、日用化工、食品发酵等多个行业具有广泛的应用前景。
附图说明
图1为本发明所述的纤维素酶产生菌的基因序列的进化树。
图2为本发明所述的纤维素酶产生菌的菌株扫描电镜照片。
图3为本发明的桧状青霉9-3(在微晶纤维素上生长)的产酶曲线。
图4(a)为分别以三种纤维素生物质为底物，里氏木霉的粗酶液单独水解、桧状青霉9-3的粗酶液单独水解以及里氏木霉的粗酶液和桧状青霉9-3的粗酶液共同水解过程中的还原糖浓度变化情况图。
图4(b)为分别以三种纤维素生物质为底物，里氏木霉的粗酶液单独水解、桧状青霉9-3的粗酶液单独水解以及里氏木霉的粗酶液和桧状青霉9-3的粗酶液共同水解过程中的葡萄糖浓度变化情况图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
本发明提供一种纤维素酶产生菌，纤维素酶产生菌的分类命名为桧状青霉(Penicillium piceum)，菌株的18S rDNA基因序列如SEQ ID NO1所述，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期：2011年10月9日，保藏号：CGMCC5314。
所述的纤维素酶产生菌的应用中，所述纤维素酶产生菌应用于生产纤维素酶和半纤维素酶。
一、纤维素酶产生菌的制备方法
(1)将采集的可能含有菌种的样品取适量添加到含有纤维素的富集培养基中，培养3-7天后测定纤维素酶的活性，从而确定含有可以产生纤维素酶的菌群的样品；
(2)针对上述步骤(1)所确定的含有可以产生纤维素酶的菌群的样品，再筛选该样品中能够产生高活力的纤维素酶的菌株，即将该样品的富集培养液稀释涂布在土豆汁固体平板上，挑取平板上长出的各个菌落到产纤维素酶的产酶培养基中，培养3-7天后测定纤维素酶活，从中筛选出生产纤维素酶酶活力较高的菌株。
二、纤维素酶产生菌的鉴定
1、纤维素酶产生菌的基因序列的鉴定
(1)利用发酵培养基28℃培养过夜，收集菌丝，提取真菌的基因组。
发酵培养基：葡萄糖10g/l，玉米浆10～40g/l，(NH4)2SO4 2～6g/l，甘油1～3g/l，KH2PO4 2～8g/l，MgSO4 0～4g/l，CaCO3 0～5g/l，Tween80 0～4g/l，pH4～7，121℃，灭菌20min。
(2)利用真菌18S rDNA的通用引物，以真菌基因组为模板，通过PCR扩增反应，扩增真菌的18S rDNA基因，并对PCR产物进行纯化，送去测序，对该菌18S rDNA的测序结果进行数据库同源性比较。其中，真菌18S rDNA的通用上游引物序列为：GGAAGGGRTGTATTTATTAG；通用下游引物序列为：TCCTCTAAATGACCAAGTTTG。
基于该菌株的18S rDNA序列已登录GenBank数据库，登录号为：GU477623，基于该菌株的18S rDNA序列与GenBank数据库中的序列进行比对，使用MEGA 4.0软件，制作进化树(见图1)。分析结果显示该菌株与Penicillium piceum代表菌种的亲缘关系最近，最终命名为桧状青霉9-3。被比对分析序列右侧为GenBank中的序列号。
2、纤维素酶产生菌的菌株形态特征的表征
图2为本发明的纤维素酶产生菌的扫描电镜照片。分生孢子梗发生于气生菌丝，孢梗茎短，帚状枝双轮生，彼此紧贴。梗基每轮6-10个，瓶梗每轮5-8个，披披针状。分生孢子椭圆形或近球形，壁光滑。右图为菌落在PDA平板上30℃生长7天，菌落边缘的菌丝体薄，质地絮状，边缘兼绒状。分生孢子面暗黄绿色，菌落表面有少量淡黄色渗出液，反面黄褐色。
三、纤维素酶产生菌的应用
接种该菌到50ml发酵培养基中，28℃，190rpm培养，在一定时间点取样，离心，取上清测定胞外蛋白浓度和各个纤维素酶和半纤维素酶活力。以下实验中，测定滤纸酶酶活、内切葡聚糖酶酶活、Beta-葡萄糖苷酶酶活和木聚糖酶酶活。其中，内切葡聚糖酶和Beta-葡萄糖苷酶属于纤维素酶，且通过滤纸酶活可以确定纤维素酶的存在，并且通过滤纸酶活力可以表征纤维素酶的活力水平；木聚糖酶属于半纤维素酶，通过木聚糖酶测定可以确定半纤维素酶的活力水平。
发酵培养基：微晶纤维素20～50g/l，玉米浆10～40g/l，(NH4)2SO4 2～6g/l，甘油1～3g/l，KH2PO4 2～8g/l，MgSO4 0～4g/l，CaCO3 0～5g/l，Tween80 0～4g/l，pH4～7，121℃灭菌20min。
1、纤维素酶活测定方法
(1)葡萄糖标准曲线的绘制：
配置10mg/ml葡萄糖母液，并稀释成2.0，3.3，5.0和6.7mg/ml的葡萄糖溶液样品。取0.5ml的葡萄糖溶液样品加到1ml的0.05M，pH4.8的柠檬酸缓冲溶液中，再加3ml的DNS反应液，混匀，沸水浴加热5min，冷却至室温。使用分光光度计测定OD540。以OD540为纵坐标，对应葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线。
(2)木糖标准曲线的绘制
配制0.01M(＝0.15g/100ml缓冲液)，稀释成10、5、3.33和2μmol/ml的木糖溶液样品，取0.2ml加到1.8ml的木聚糖底物溶液中，添加3mlDNS反应液，混匀，沸水浴加热5min，冷却并离心。使用分光光度计于波长540nm下测定上清液吸光度OD540。以OD540为纵坐标，对应木糖浓度为横坐标，绘制标准曲线。
(3)BSA蛋白质标准曲线的绘制
采用Bradford法测定蛋白浓度，制作BSA蛋白质标准曲线，即分别吸取10mg/ml的BSA蛋白质标准液0、10、15、20、25、30μl，分别加水定容至100ul，加入1ml Bradford试剂，混匀，室温静置10min。以不含蛋白质的混合液为空白对照。使用分光光度计测定OD595。测定三次求平均值。以OD595为纵坐标，对应蛋白质浓度为横坐标，绘制标准曲线。
(4)滤纸酶酶活测定
试管内添加1.0ml，0.05M，pH4.8柠檬酸钠缓冲液。添加0.5ml的稀释酶液。加热至50℃，添加一条滤纸条带混合。50℃水浴反应60min，立即添加3.0mlDNS反应液混匀终止反应。沸水浴加热5min后，转移至冷水浴，冷却。取0.45ml颜色反应后的混合液，加入2.0ml去离子水或蒸馏水，充分混匀。在540nm下读取吸光度。由标准曲线读取样品的葡萄糖含量。
(5)内切葡聚糖酶酶活测定
添加0.5ml的稀释酶液至试管内。加热至50℃，添加0.5ml的底物溶液(用0.05M，pH4.8的柠檬酸缓冲液溶解，制备2％羧甲基纤维素(钠)，取代度＝0.7)，50℃水浴反应30min。添加3.0ml的DNS反应液，混匀。沸水浴加热5min。转移样品至冷水浴，添加20ml蒸馏水或去离子水，充分混匀。540nm处读取样品的吸光度。根据葡萄糖标准曲线，将测定管的样品的吸光度转换为葡萄糖的浓度。
(6)Beta-葡萄糖苷酶酶活测定
添加1ml酶液溶解于柠檬酸缓冲液中。加热至50℃，添加1.0ml的底物溶液(15.0mM纤维二糖，溶解于0.05M，pH4.8的柠檬酸缓冲液，该反应液需要现用现配)，混匀。50℃水浴反应30min。沸水浴加热5.0min，终止反应。冷却，通过葡萄糖分析仪测定葡萄糖的含量。
(7)木聚糖酶酶活测定
添加1.8ml的底物溶液(用0.05M，pH5.3的柠檬酸缓冲液溶解，制备1％木聚糖悬浮液)和添加0.2ml的稀释酶液至试管内。50℃水浴反应5min。添加3.0ml的DNS反应液，混匀。沸水浴加热5min。转移样品至冷水浴，然后离心沉淀未反应的底物，上清液于540nm处读取样品的吸光度。根据木糖标准曲线，将测定管的样品的吸光度转换为木糖的浓度。
(8)蛋白质浓度测定
使用Bradford方法测定蛋白质浓度，即将蛋白质样品进行适当倍数的稀释，取100μl加入1ml Bradford试剂，混匀，静置10min，后使用分光光度计测定OD595。三次测定求平均值。后根据标准曲线和稀释倍数计算出该样品的蛋白质浓度。
2、纤维素酶产生菌产酶的特性分析
1、产酶曲线
本发明的纤维素酶产生菌培养时间为8天，每隔24h取样。分别测定不同培养时间下的滤纸酶酶活、Beta-葡萄糖苷酶酶活和蛋白浓度，绘制发酵过程曲线。
图3为本发明的桧状青霉9-3(在微晶纤维素上生长)的产酶曲线(其中，◆代表滤纸酶酶活，▲代表蛋白浓度，■代表Beta-葡萄糖苷酶酶活)。在28℃下，桧状青霉培养3天时，此时已经具有较高的滤纸酶酶活(1.47IU/ml)、Beta-葡萄糖苷酶酶活(12.03IU/ml)、蛋白浓度(1.16mg/ml)。证明该菌的产酶周期较短，容易实现工业化生产。并且，由图3可以看出，桧状青霉培养7天可达到最高产酶。
2、纤维素酶产生菌产酶能力的比较
将黑曲霉CGMCC 3.316(购自于中国普通微生物菌种保藏中心)，里氏木霉RUT C-30(CICC13052，购自中国工业微生物菌种保藏中心)和桧状青霉9-3接种于微晶纤维素酶发酵培养基，培养温度为25～30℃，摇床转速为150～250转/分进行震荡培养，取发酵5天时培养液，分别测定滤纸酶活、β-葡萄糖苷酶酶活、内切葡聚糖酶酶活、木聚糖酶活力以及蛋白浓度。
表1桧状青霉9-3与黑曲霉CGMCC 3.316和里氏木霉RUT C-30的产酶能力比较
Figure BDA0000106565180000071
结果说明，桧状青霉9-3具有较好的纤维素酶和半纤维素酶的产酶能力，尤其是，Beta-葡萄糖苷酶的生产能力和蛋白分泌能力均比黑曲霉和里氏木霉高。
3、纤维素酶产生菌产纤维素酶的应用
利用桧状青霉9-3的粗酶液、里氏木霉的粗酶液以及桧状青霉9-3粗酶液与里氏木霉粗酶液的混合液，针对三种纤维素生物质(微晶纤维素(MCC)，玉米芯粉(CCP)，气爆秸秆(SECS))进行降解，粗酶液用量为6～10FPU/g生物质，底物浓度为3～5％，在pH4.8的柠檬酸缓冲体系，温度50℃条件下分别水解为6h和12h，得到还原糖和葡萄糖浓度。图4(a)为分别以三种纤维素生物质为底物，单独的里氏木霉的粗酶液、单独的桧状青霉9-3的粗酶液以及里氏木霉的粗酶液和桧状青霉9-3的粗酶液混合的水解过程中还原糖浓度变化情况图，图4(b)为分别以三种纤维素生物质为底物，单独的里氏木霉的粗酶液、单独的桧状青霉9-3的粗酶液以及里氏木霉的粗酶液和桧状青霉9-3的粗酶液混合的水解过程中葡萄糖浓度变化情况图。图4中以T代表里氏木霉，P代表桧状青霉9-3，T+P为里氏木霉和桧状青霉9-3的粗酶液共同水解。
由图4(a)和图4(b)分析可知，针对三种生物质，桧状青霉9-3的粗酶液和里氏木霉的粗酶液混合的协同作用时所得到的还原糖和葡萄糖的浓度均要比里氏木霉粗酶液单独作用时还原糖和葡萄糖的浓度高。水解玉米芯粉时，水解12h的情况下，两种粗酶液混合作用比里氏木霉粗酶液单独作用所得的还原糖高50％，所得的葡萄糖高40％。水解气爆秸秆时，水解12h的情况下，两种粗酶液混合作用比里氏木霉粗酶液单独作用所得的还原糖高30％，所得的葡萄糖高112％。并且，在水解富含半纤维素的玉米芯时，水解12h的情况下，桧状青霉9-3粗酶液单独作用所得到的还原糖浓度是里氏木霉的粗酶液单独作用所产生的还原糖浓度的1.17倍。
综上所述，本发明的桧状青霉9-3制备的粗酶液单独使用时对纤维素生物质中的纤维素和半纤维素具有较好的水解效果，与里氏木霉粗酶液混合使用时则具有较强的协同水解作用。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。
Figure IDA0000106565250000011
Figure IDA0000106565250000021

Claims (2)

1.一种纤维素酶产生菌，其特征在于，纤维素酶产生菌的分类命名为桧状青霉(Penicillium piceum)，菌株的18S rDNA基因序列如SEQ ID NO1所述，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期：2011年10月9日，保藏号：CGMCC5314。
2.如权利要求1所述的纤维素酶产生菌的应用，其特征在于，所述纤维素酶产生菌应用于生产纤维素酶和半纤维素酶。
CN 201110351663 2011-11-08 2011-11-08 一种纤维素酶产生菌及其应用 Expired - Fee Related CN102533563B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 201110351663 CN102533563B (zh) 2011-11-08 2011-11-08 一种纤维素酶产生菌及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 201110351663 CN102533563B (zh) 2011-11-08 2011-11-08 一种纤维素酶产生菌及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102533563A true CN102533563A (zh) 2012-07-04
CN102533563B CN102533563B (zh) 2013-04-10

Family

ID=46341600

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN 201110351663 Expired - Fee Related CN102533563B (zh) 2011-11-08 2011-11-08 一种纤维素酶产生菌及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102533563B (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103074239A (zh) * 2012-12-31 2013-05-01 浙江工业大学 山梨木糖假丝酵母及其在制备(s)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中的应用
CN103555595A (zh) * 2013-11-20 2014-02-05 中国科学院天津工业生物技术研究所 一株产纤维素酶菌株及其应用
CN103710326A (zh) * 2013-12-11 2014-04-09 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种β-葡萄糖苷酶及其应用
CN104560917A (zh) * 2014-10-30 2015-04-29 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种β-葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶突变体及应用
CN105969689A (zh) * 2016-05-31 2016-09-28 中国科学院烟台海岸带研究所 产纤维素酶细菌及应用
CN108048350A (zh) * 2017-12-18 2018-05-18 安徽师范大学 适冷纤维素酶产生菌

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101434909A (zh) * 2008-12-19 2009-05-20 中国科学院武汉病毒研究所 一种青霉菌及制备方法和应用
CN101463327A (zh) * 2008-12-30 2009-06-24 中南林业科技大学 爪哇正青霉菌株及其筛选培养方法和应用
CN101717728A (zh) * 2009-12-28 2010-06-02 华东理工大学 一株青霉菌及其用于催化水解木质纤维素的用途
CN101974436A (zh) * 2010-09-21 2011-02-16 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 一种木质纤维素降解菌及其应用
CN102021120A (zh) * 2010-08-13 2011-04-20 广东省生态环境与土壤研究所 一种宛氏拟青霉菌株及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101434909A (zh) * 2008-12-19 2009-05-20 中国科学院武汉病毒研究所 一种青霉菌及制备方法和应用
CN101463327A (zh) * 2008-12-30 2009-06-24 中南林业科技大学 爪哇正青霉菌株及其筛选培养方法和应用
CN101717728A (zh) * 2009-12-28 2010-06-02 华东理工大学 一株青霉菌及其用于催化水解木质纤维素的用途
CN102021120A (zh) * 2010-08-13 2011-04-20 广东省生态环境与土壤研究所 一种宛氏拟青霉菌株及其应用
CN101974436A (zh) * 2010-09-21 2011-02-16 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 一种木质纤维素降解菌及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CAI P 等: "Penicillium piceum strain 9-3 18S ribosomal RNA gene，partial sequence", 《GENBANK》 *
MCILHATTON,B.P. 等: "Penicillium piceum strain NCPF 2720 18S ribosomal RNA gene, partial sequence", 《GENBANK》 *
田朝光 等: "真菌降解木质纤维素的功能基因组学研究进展", 《生物工程学报》 *

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103074239A (zh) * 2012-12-31 2013-05-01 浙江工业大学 山梨木糖假丝酵母及其在制备(s)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中的应用
CN103555595A (zh) * 2013-11-20 2014-02-05 中国科学院天津工业生物技术研究所 一株产纤维素酶菌株及其应用
CN104312928A (zh) * 2013-11-20 2015-01-28 中国科学院天津工业生物技术研究所 一株产纤维素酶菌株及其应用
CN103710326A (zh) * 2013-12-11 2014-04-09 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种β-葡萄糖苷酶及其应用
CN103710326B (zh) * 2013-12-11 2016-01-20 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种β-葡萄糖苷酶及其应用
CN104560917A (zh) * 2014-10-30 2015-04-29 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种β-葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶突变体及应用
CN104560917B (zh) * 2014-10-30 2018-12-18 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种β-葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶突变体及应用
CN105969689A (zh) * 2016-05-31 2016-09-28 中国科学院烟台海岸带研究所 产纤维素酶细菌及应用
CN105969689B (zh) * 2016-05-31 2019-04-09 中国科学院烟台海岸带研究所 产纤维素酶细菌及应用
CN108048350A (zh) * 2017-12-18 2018-05-18 安徽师范大学 适冷纤维素酶产生菌
CN108048350B (zh) * 2017-12-18 2020-10-23 安徽师范大学 适冷纤维素酶产生菌

Also Published As

Publication number Publication date
CN102533563B (zh) 2013-04-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Moretti et al. Selection of thermophilic and thermotolerant fungi for the production of cellulases and xylanases under solid-state fermentation
CN102533563B (zh) 一种纤维素酶产生菌及其应用
Navya et al. Production, statistical optimization and application of endoglucanase from Rhizopus stolonifer utilizing coffee husk
CN102660519B (zh) 一种利用发酵废液制备生物酶的方法
CN102174433B (zh) 一株高抗逆性贝氏梭菌及其应用
Han et al. Solid-state fermentation on poplar sawdust and corncob wastes for lignocellulolytic enzymes by different Pleurotus ostreatus strains
CN101717728B (zh) 一株青霉菌及其用于催化水解木质纤维素的用途
CN104312928B (zh) 一株产纤维素酶菌株及其应用
Jung et al. Cellulolytic enzymes produced by a newly isolated soil fungus Penicillium sp. TG2 with potential for use in cellulosic ethanol production
CN101671645B (zh) 一种制备β-甘露聚糖酶的方法及其专用菌株
CN104774879B (zh) 一种混菌发酵甘油生产1,3‑丙二醇的方法
CN104988077A (zh) 一种产高温纤维素酶及木聚糖酶的微细正青霉及应用
CN102634460B (zh) 米根霉rh1-5及其分离培养方法
CN102363748B (zh) 一种高效纤维素降解真菌新种Acremonium sp.DPZ-SYz-2-3及其应用
CN102787104A (zh) 一种高活性复合纤维素酶及其制备和在木质纤维酶解糖化中的应用方法
Shokrkar et al. Exploring strategies for the use of mixed microalgae in cellulase production and its application for bioethanol production
CN104263658A (zh) 一种里氏木霉菌株及其应用
CN108424896B (zh) 一种混菌发酵玉米秸秆糠醛渣生产纤维素酶的方法
CN102080050B (zh) 产嗜温耐乙醇β-葡萄糖苷酶的绿色木霉W2及其应用
Garcia-Kirchner et al. Mixed submerged fermentation with two filamentous fungi for cellulolytic and xylanolytic enzyme production
Khalid-Bin-Ferdaus et al. Commercial production of alpha amylase enzyme for potential use in the textile industries in Bangladesh
CN103484381B (zh) 一株嗜热烟曲霉及其在生产纤维素酶中的应用
CN103497917B (zh) 一株可利用木质纤维素原料发酵生产2,3-丁二醇的嗜热地衣芽孢杆菌
CN102492634B (zh) 一株耐高温酵母菌及其应用
CN102559511B (zh) 高产嗜温耐乙醇β-葡萄糖苷酶的肉座菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: TIANJIN INSTITUTE OF INDUSTRIAL BIOTECHNOLOGY, CHI

Free format text: FORMER OWNER: TIANJIN INSTITUTE OF INDUSTRIAL BIOTECHNOLOGY

Effective date: 20140429

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20140429

Address after: 100101 Beichen West Road, Beijing, No. 1 hospital, No. 3, No.

Patentee after: Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences

Patentee after: Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences

Address before: 100101 Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, No. 1, West Beichen Road, Chaoyang District, Beijing,

Patentee before: Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences

Patentee before: Tianjin Institute of Industrial Biotechnology

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20130410

Termination date: 20181108

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee