CN102526113A - 一种治疗骨质疏松的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗骨质疏松的药物组合物及其制备方法，该药物组合物的活性成分为牡蛎提取物，由以下方法制备：牡蛎加4-5倍量的水，然后加入冰醋酸，反应4-8小时，即得。

Description

一种治疗骨质疏松的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药发明领域，具体涉及一种治疗骨质疏松的药物组合物及其制备方法。

背景技术

钙是人体的生命之源！

人体内，骨骼不断进行自我更新，在周儿复始地分解及重建过程中，不同年龄状态下有不同的情况。在婴儿期、妊娠期、哺乳期、妇女绝经后，以及老年如何补充钙剂，怎样更易于人体的吸收？是一个十分重要的问题。随着人类社会的老龄化，原发性老年性骨质疏松症已成为老年人的常见病、多发病。据统计目前本症已在世界常见病、多发病中跃居第六位。尤其绝经后5年以上的妇女发病率高达60％以上。

骨质疏松(Osteoporosis)是以骨质减少和骨结构破坏为特征而导致骨脆性及骨折率增加的疾病。其临床表现主要以腰背或全身关节疼痛，驼背，身长缩短，易发生骨折为特点。骨质疏松造成的疼痛已给患者带来了很大的痛苦，病理骨折更给社会家庭及个人带来了沉重的负担和经济压力，因此骨质疏松的防治是十分重要的。

本发明是纯天然海洋制剂，是牡蛎经低温处理研制而成的纯天然制品。祖国医学认为，牡蛎：味成涩，软坚散结之效。用于热病伤阴、虚风馁动、肝阴不足、肝阳上亢、惊狂烦躁、心悸失眠、自汗盗汗、遗精崩带、痰核瘰疬、胃疼吐酸的治疗。

中国专利申请200610125157.2公开了牡蛎的颗粒剂，由牡蛎粉与辅料，及淀粉浆或乙醇组成，其中辅料为蔗糖粉，或可溶性淀粉、糊精、乳糖、甜菊糖，或碳酸氢钠、聚乙烯吡咯烷酮、枸橼酸；同时还公开了上述颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：将牡蛎粉碎成粗粉，用食用醋浸提三次，合并浸提液，滤过，滤液减压浓缩成稠膏，稠膏真空干燥、粉碎，向干膏粉中加辅料，混匀，加入淀粉浆或乙醇制软材，制粒，整粒得颗粒剂。该专利中，用食用醋浸泡时间长达24、12、12小时，反应时间长，工艺繁琐，不便于操作；牡蛎粉用食用醋提取收率低，对比专利收率仅30％。

因此，需要提供一种工艺简单、收率高的牡蛎提取方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗骨质疏松的药物组合物。

本发明提供的治疗骨质疏松的药物组合物，其活性成分为牡蛎提取物，其由以下方法制备：牡蛎加4-5倍量的水，然后加入冰醋酸，反应4-8小时，即得。

具体的，牡蛎提取物由以下方法制备：牡蛎粉碎，过40-200目筛，加4-5倍量的水，搅拌20-30分钟，然后边搅拌边加入冰醋酸，反应4-8小时，滤过，液体比重15～18波美度，喷雾干燥，粉碎，即得牡蛎提取物。

所述冰醋酸与牡蛎的重量比为5-20∶1；

所述牡蛎过筛优选为40-100目，进一步优选为80目筛。

本发明提供的治疗骨质疏松的药物组合物，其辅料为药学上可接受的载体或稀释剂。

所述药学上可接受的载体或稀释剂是指药学领域常规的药物载体，选自填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、润湿剂、防腐剂、溶剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种。

所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素或葡萄糖等；

所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等；

所述崩解剂选自微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素或交联羧甲基纤维素钠；

所述润滑剂选自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸钙、碳酸氢钠、微粉硅胶、滑石粉或硬脂酸镁，所述聚乙二醇选自聚乙二醇4000、聚乙二醇6000；

所述助悬剂选自微粉硅胶、蜂蜡、炼蜜、纤维素、固态聚乙二醇；

所述润湿剂选自甘油、吐温-80、乙氧基氢化蓖麻油或卵磷脂；

所述溶剂选自乙醇、液态聚乙二醇、异丙醇、吐温-80、甘油、丙二醇或植物油，所述植物油选自大豆油、蓖麻油、花生油、调和油等；

所述表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、硬脂酸、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、脂肪酸山梨坦或聚山梨酯(吐温)等；

所述矫味剂选自阿斯巴甜、甜菊素、蔗糖素、香精、枸橼酸、柠檬酸或糖精钠。

所述防腐剂选自羟苯乙酯或苯甲酸。

所述制剂为胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液或丸剂。

具体的，本发明提供的药物组合物由以下重量份成分组成：牡蛎300-500重量份，硬脂酸镁3-5重量份。

优选地，本发明提供的药物组合物由以下重量份的成分组成：牡蛎350-450重量份，硬脂酸镁3.5-4.5重量份。

进一步优选，本发明提供的药物组合物由以下重量份的成分组成：牡蛎400重量份，硬脂酸镁4重量份。

本发明还提供了上述药物组合物在制备治疗骨质疏松症的药物或保健品中的应用。

本发明提供的药物组合物具有以下优点：

1、现有技术如中国专利申请200610125157.2公开了由牡蛎粉的颗粒剂，其中牡蛎是通过以下方法提取的，将牡蛎粉碎成粗粉后，用醋酸浸渍三次，每次时间为24小时、12小时、12小时，牡蛎用食用醋浸泡时间长达24、12、12小时，反应时间长，工艺繁琐，不便于操作；牡蛎粉用食用醋提取收率低，乙酸钙的收率仅33.3％。

本发明提供的提取方法中，将牡蛎粉碎为40-200目筛的细粉，细度要求较高，然后与冰醋酸反应4-8小时，反应充分，反应时间较对比文件少，节约能耗，牡蛎提取物的收率可高达120％，有效成分转移率高(含钙量由原来的22.39％增加到23.14％以上)。

2、本发明提供的药物组合物具有治疗抗维甲酸所致大鼠骨质疏松的作用，能明显增加维甲酸骨质疏松大鼠骨钙含量和骨小梁宽度，能增加血清钙、磷含量，能增加股骨重量、直径和骨密度；对氢化可的松所致小鼠阳虚证具有一定的改善作用；能明显减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀以及蛋清所致大鼠足肿胀，具有抗炎作用；本发明能明显降低醋酸所致小鼠扭体反应数，具有镇痛作用，效果优于现有技术。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1：治疗骨质疏松的胶囊剂

1、牡蛎提取物：牡蛎400g，粉碎，过80目筛，加4倍量的水，搅拌30分钟，缓缓加入冰醋酸480g，边加边搅拌，反应6小时，滤过，液体比重15波美度，喷雾干燥，粉碎，即得牡蛎提取物464g，收率：116％。

2、制剂：464g牡蛎提取物加硬脂酸镁4.6g，经常规工艺制成胶囊剂。

3、规格：0.25g/粒(含0.25g牡蛎提取物)。

实施例2：治疗骨质疏松的片剂

1、牡蛎提取物：牡蛎280g，粉碎，过80目筛，加5倍量的水，搅拌25分钟，缓缓加入冰醋酸336g，边加边搅拌，反应5小时，滤过，液体比重15波美度，喷雾干燥，粉碎，即得到牡蛎提取物330g，收率117.8％。

2、制剂：加淀粉30g，硬脂酸镁3.6g经常规工艺制成片剂。

3、规格：0.25g/片(含0.25g牡蛎提取物)。

实施例3：治疗骨质疏松的滴丸剂

1、牡蛎提取物：牡蛎200g，粉碎，过80目筛，加5倍量的水，搅拌20分钟，缓缓加入冰醋酸240g，边加边搅拌，反应6小时，滤过，液体比重15波美度，喷雾干燥，粉碎，即得到牡蛎提取物250g，收率125％。

2、制剂：牡蛎提取物250g加聚乙二醇400075g，聚乙二醇6000675g，经常规工艺制成滴丸剂。

3、规格：0.25g/丸(含0.25g牡蛎提取物)。

实施例4：治疗骨质疏松的口服液

1、牡蛎提取物：牡蛎800g，粉碎，过80目筛，加4倍量的水，搅拌25分钟，缓缓加入冰醋酸960g，边加边搅拌，反应7小时，滤过，液体比重15波美度，即得到牡蛎提取物957g，收率119.6％。

2、制剂：加蔗糖320g，羟苯乙酯1.2g，苯甲酸2g，经常规工艺制成口服液。

3、规格：0.25g/ml(含0.25g牡蛎提取物)。

实施例5：治疗骨质疏松的丸剂

1、牡蛎提取物：牡蛎300g，粉碎，过80目筛，加4.5倍量的水，搅拌30分钟，缓缓加入冰醋酸360g，边加边搅拌，反应8小时，滤过，液体比重15波美度，喷雾干燥，粉碎，即得到牡蛎提取物360g，收率120％。

2、制剂：加炼蜜160g，经常规工艺制成丸剂。

3、规格：0.25g/片(含0.25g牡蛎提取物)。

对比例：参考200610125157.2的实施例4的方法制备

1、牡蛎提取物：取300g牡蛎粉碎成粗粉，用3倍量食用醋在80℃浸提三次(24小时，12小时，12小时)，合并三次提取液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1.35(80℃)的稠膏，真空干燥，粉碎，得到100g干膏粉，收率33.3％；

2、制剂：向干膏粉中加入95g可溶性淀粉和5g甜菊素，混匀，加入105的淀粉浆40g制软材，14目筛制粒，干燥，12目筛整粒，得200g颗粒。

3、规格：0.25g/袋(含0.25g牡蛎提取物)。

实验例1：提取方法比较的试验

对现有技术(设为对比例)和本发明提供的提取物进行比较，其中现有技术参考200610125157.2的实施例4：

取300g牡蛎粉碎成粗粉，用3倍量食用醋在80℃浸提三次(24小时，12小时，12小时)，合并三次提取液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1.35(80℃)的稠膏，真空干燥，粉碎，得到100g干膏粉。

对对比例和实施例1-5的提取物进行检测，检测方法为：取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量(约相当于钙50mg)，加水100ml溶解后，加氢氧化钠试液15ml与钙紫红素指示剂约0.1g，用乙二胺四醋酸二钠液(0.05mol/L)滴定，至溶液自紫红色转变为纯蓝色，即得。每1ml乙二胺四醋酸二钠(0.05mol/L)滴定液相当于2.004mg的Ca。检测结果见表1：

表1：提取方法及提取物含量比较

表1结果显示：对比例的牡蛎提取物收率为33.3％，本发明提供的牡蛎提取物收率明显高于对比例，含钙量也略高于现有技术。

实验例2：药效实验

1、药物与试剂

1)龙牡壮骨颗粒：武汉健民药业集团股份有限公司生产。人用量按30g/人/日计，按体表面积折算，以人用等效量的2倍作为实验动物剂量，实验中大鼠剂量为5.4g/kg，小鼠剂量为7.8g/kg。

2)维甲酸：重庆华邦制药有限公司生产，用1％羧甲基纤维素钠配成混悬液。

3)血清钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒：南京建成生物工程公司产品。

4)氢化可的松注射液：湖北制药厂生产。

5)羧甲基纤维素钠：中国医药(集团)上海化学试剂公司。

6)戊巴比妥钠：广州南方化玻公司进口分装。

7)二甲苯：衡阳有机试剂厂生产。

8)冰醋酸：湖南试剂厂生产。

2、实验动物

1)SD大鼠，清洁级，雌雄兼用，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供。

2)清洁级昆明种小鼠，雌雄兼用，由湖南省卫生防疫站实验动物养殖场提供。

3、主要仪器

1)XR-26型双能X线骨密度测量仪：美国Nodand公司产品。

2)AA-670型原子吸收分光光度计；日本岛津公司产品。

3)KONE-PRO全自动生化分析仪：芬兰康艺仪器公司产品。

4)AB204型电子天平：METTLER TOLEDO公司产品。

4、实验方法：

4.1对维甲钠所致骨质疏松模型大鼠影响

4.1.1实验方法：取SD雄性大鼠110只，体重180-220g，随机分为11组，分别为空白对照组、模型对照组、对比例组(0.50g/kg)、实验1高剂量组(实施例1的1.00g/kg)、中剂量组(实施例1的0.50g粉/kg)、低剂量组(实施例1的0.25g/kg)、实验2(实施例2的0.50g/kg)、实验3(实施例3的0.50g/kg)、实验4(实施例4的0.50g/kg)、实验5组(实施例5的0.50g粉/kg)和龙牡壮骨冲剂5.4g/kg，每组10只。

除空白对照组外，其他10组均以维甲钠70mg/kg灌胃造模，每天1次，连续14天，造模当天各灌胃给予相应药物，每天1次，连续28天，正常对照组和模型对照组灌胃等体积蒸馏水。

末次给药后24小时，全部动物腹腔注射戊巴比妥钠45mg/kg麻醉，腹主动脉取血，然后处死动物，将其左后腿股骨剥离干净称重。

4.1.2检测指标：

血液：离心分离血清，用KONE-PRO全自动生化分析仪测定血清钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)；

左右后腿股骨：1)测量其长度、同一部位的直径，用双能X线骨密度测量仪测骨密度，然后将其用氯仿、甲醇(2∶1)混合悬液浸泡3-4小时脱脂，反复3次，置于105℃烘箱中，烤至恒重，称量骨重，接着在高温炉800℃灰化6小时，将灰分溶于6N盐酸中用原子吸收法测定骨钙含量；2)取含股骨头的一段2cm长的右后股肢骨常规脱钙，石蜡包埋切片，HE染色，显微镜下测定骨小梁宽度。

4.2对小鼠阳虚证的影响

4.2.1实验方法：

取昆明种雄性小鼠110只，体重18-22g，随机分为11组，分别为空白对照组、模型对照组、对比例组(0.72g/kg)、实验1高剂量(实施例1的1.44g/kg)、中剂量(实施例1的0.72g/kg)、低剂量(实施例1的0.36g/kg)组、实验2组(实施例2的0.72g/kg)、实验3组(实施例3的0.72g/kg)、实验4组(实施例4的0.72g/kg)、实验5组(实施例5的0.72g/kg)和龙牡壮骨冲剂7.8g/kg，每组10只。

除正常对照组外，其他10组均肌内注射氢化可的松25mg/kg，每天1次，连续10天，正常对照组肌内注射生理盐水，肌注同时各组均每日灌胃给予相应药物，每天1次，连续10天，正常对照组和模型对照组灌胃等体积蒸馏水。

4.2.2检测指标：

末次给药后，记录各组动物体重、体温、自主活动次数及低温游泳存活时间。

体温测量：末次给药后45分钟，用NIHON KADEN皮温仪测量每鼠右腹皮肤温度，以探头片压紧皮肤，测量时间为1分钟。

自主活动数观察：将小鼠置于无色有机玻璃制成的15cm×25cm×20cm长方形箱内，以5分钟内小鼠双肢向上抬举次数为指标。

低温游泳存活时间：将小鼠放入4℃水深0.6米、水面0.8平方池中，观察小鼠游泳存活时间，以下沉不再浮出水面为死亡时间。

4.3对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

4.3.1实验方法：

取昆明种雄性小鼠100只，体重25～30g，随机分为10组，分别为空白对照组、对比例组(0.72g/kg)、实验1高剂量(实施例1的1.44g/kg)、中剂量(实施例1的0.72g/kg)、低剂量(实施例1的0.36g/kg)组、实验2组(实施例2的0.72g/kg)、实验3组(实施例3的0.72g/kg)、实验4组(实施例4的0.72g/kg)、实验5组(实施例5的0.72g/kg)和龙牡壮骨颗粒7.8g/kg组，每组10只，每天灌胃给药1次，连续10天，对照组给予等体积蒸馏水。

4.3.2检测指标：

末次给药后30分钟，每只小鼠左右两面涂以二甲苯0.02ml致肿，15分钟后处死动物，用8mm打孔器将小鼠双耳同部位等面积切下，用AB204型电子天平称重，左右耳重量差即为肿胀度。

4.4对蛋清所致大鼠足跖肿胀的影响

4.4.1实验方法：

取SD大鼠100只，体重120-150g，雌雄各半，随机分为10组，分别为空白对照组、对比例组(0.50g/kg)、实验1高剂量组(实施例1的1.00g/kg)、中剂量组(实施例1的0.50g粉/kg)、低剂量组(实施例1的0.25g/kg)、实验2(实施例2的0.50g/kg)、实验3(实施例3的0.50g/kg)、实验4(实施例4的0.50g/kg)、实验5组(实施例5的0.50g粉/kg)和龙牡壮骨颗粒5.4g粉/kg组，每组10只，每天灌胃给药1次，连续10天，对照组给予等体积蒸馏水。

4.4.2检测指标：

末次给药30分钟，以10％鲜蛋清0.1ml/只注入大鼠右后跖内，测量致炎前及致炎后0.5、1、2、3、4、5、6小时足跖容积，致炎前后足跖容积之差为肿胀度。

4.5对小鼠醋酸扭体反应的影响：

4.5.1实验方法：

取昆明种雄性小鼠100只，体重25-30g，雌雄各半，随机分为10组，分别为空白对照组、对比例组(0.72g/kg)、实验1高剂量(实施例1的1.44g/kg)、中剂量(实施例1的0.72g/kg)、低剂量(实施例1的0.36g/kg)组、实验2组(实施例2的0.72g/kg)、实验3组(实施例3的0.72g/kg)、实验4组(实施例4的0.72g/kg)、实验5组(实施例5的0.72g/kg)和龙牡壮骨颗粒7.8g粉/kg，每组10只，每天灌胃给药1次，连续10天，对照组等体积蒸馏水。

4.5.2检测指标：

末次给药后1小时，每只小鼠腹腔注射0.6％冰醋酸0.2ml/只，记录注射致痛剂后15分钟内各鼠扭体反应(腹部内凹、伸屈后腿、臀部指高)次数，计算扭体反应抑制率。

5、实验结果：

5.1对维甲钠所致骨质疏松模型大鼠影响：结果见表2-4。

表2：对大鼠血清Ca、P、ALP和骨钙的影响

组别

动物数

剂量(/kg)

血清Ca(mmol/L)

血清P(mmol/L)

血清ALP(u/L)

骨钙(mg/g)

空白对照组

10

10ml

2.77±0.25

2.36±0.29

177.6±36.5

65.81±5.52

模型对照组

10

10ml

2.59±0.21

2.15±0.24

210.4±40.8

52.61±7.47##

实验1高剂量组

10

1.00g

2.82±0.21*

2.47±0.34*

184.6±31.7&

61.94±4.55**&

实验1中剂量组

10

0.50g

2.73±0.23

2.22±0.18

186.5±41.9&

59.20±6.10*&

实验1低剂量组

10

0.25g

2.62±0.19

2.31±0.20

197.9±37.5

57.76±4.96*

实验2组

10

0.50g

2.74±0.21

2.27±0.19

184.5±40.3&

58.54±6.00*

实验3组

10

0.50g

2.75±0.24

2.26±0.18

185.1±39.2&

59.03±59.6*&

实验4组

10

0.50g

2.71±0.21

2.23±0.16

181.1±36.8&

59.65±5.89*&

实验5组

10

0.50g

2.76±0.22

2.29±0.21

182.7±33.7&

60.23±5.46*&

对比例组

10

0.50g

2.71±0.19

2.03±0.14

193.5±41.6

56.09±5.0*

龙牡壮骨冲剂

10

5.4g

2.73±0.27

2.25±0.18

183.1±31.2

61.51±3.37**

注：与空白对照组比较，##P＜0.01；与模型对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01，与对比例组比较，^&P＜0.05。

表3：对大鼠股骨重量、长度、直径和骨密度的影响

注：与空白对照组比较，^##P＜0.01；与模型对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01，与对比例组比较，^&P＜0.05。

表4：对大鼠骨小梁的影响

注：与空白对照组比较，##P＜0.01；与模型对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01，与对比例组比较，^#P＜0.05。

表2-4的结果显示：

与空白对照组比较，模型组的骨小梁宽度、骨钙含量、血清钙、磷含量、股骨重量、股骨直径及骨密度明显降低；

与模型对照组相比，本发明药物能明显增加维甲酸骨质疏松大鼠骨钙含量和骨小梁宽度，能增加血清钙、磷含量，能增加股骨重量、直径和骨密度；

与对比例组相比，实验1中、高剂量组、实验2-5组的血清ALP值、股骨直径、骨小梁宽度有明显差异(P＜0.05)，实验1中、高剂量组、实验3-5组的骨钙有明显差异(P＜0.05)，实验1中剂量组、高剂量组、实验2组、实验4、5组股骨的骨密度有明显差异(P＜0.05)。

结果表明：本发明药物对维甲酸所致大鼠骨质疏松具有防治作用，效果优于现有技术。

5.2对小鼠阳虚证的影响：结果见表5

表5：对小鼠肾阳虚的影响(n＝10，)

注：与空白对照组比较，##P＜0.01；与模型对照组比较，^*P＜0.05，与对比例组比较，^&P＜0.05。

表5结果显示，小鼠肌注氢化可的松后，体重明显减轻，体温明显降低，自主活动数明显减少，低温游泳存活时间明显缩短，表现出小鼠阳虚证。实验各组、对比例组和龙牡壮骨冲击组能不同程度的能增加阳虚证小鼠自主活动数，1.44g粉/kg还能延长低温游泳存活时间；

与对比例组相比，实验1中、高剂量组、实验2-5组的自主活动数和低温游泳时间均有明显增加(P＜0.05)。

结果表明：本发明的药物组合物对氢化可的松所致小鼠阳虚证有一定的改善作用，效果优于现有技术。

5.3对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响：见表6

表6：对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

组别	动物数	剂量(/kg)	耳肿胀度(mg)
				空白对照组	10	20ml	12.15±2.92
实验1高剂量组	10	1.44g	8.17±1.94**&
				实验1中剂量组	10	0.72g	8.40±1.57**&
实验1低剂量组	10	0.36g	9.12±2.06*
				实验2组	10	0.72g	8.43±1.58**&
实验3组	10	0.72g	8.35±1.81**&
				实验4组	10	0.72g	8.45±1.56**&
实验5组	10	0.72g	8.28±1.64**&
				对比例组	10	0.72g	9.27±1.49*
龙牡壮骨冲剂	10	7.8g	8.39±1.57**

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01，与对比例组比较，^&P＜0.05。

表6结果显示：与空白对照组相比，实验各组对二甲苯所致小鼠耳肿胀度有不同程度的减少(P＜0.01，P＜0.05)；与对比例组相比，实验1中、高剂量组、实验2-5组有明显的差异(P＜0.05)。

结果表明：本发明提供的药物组合物能明显减轻二甲苯所致小鼠肿胀，对小鼠耳肿胀炎症具有明显抑制作用，效果优于现有技术。

5.4对蛋清所致大鼠足跖肿胀的影响：见表7

表7：对蛋清所致大鼠足跖肿胀的影响

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01，与对比例组比较，^&P＜0.05。

表7结果显示：与空白对照组相比，实验各组能不同程度的减轻蛋清所致大鼠足跖肿胀(P＜0.01，P＜0.05)；与对比例组相比，在致炎后第4小时，实验1中、高剂量组、实验2-5组具有明显差异(P＜0.05)。

结果表明：本发明提供的药物组合物能明显减轻蛋清所致大鼠足跖肿胀，对大鼠足肿胀具有明显抑制作用，效果优于现有技术。

5.5对小鼠醋酸扭体反应的影响：结果见表8。

表8：对小鼠醋酸扭体反应的影响

组别	动物数	剂量(/kg)	扭体次数(次)	抑制率(％)
					空白对照组	10	20ml	19.4±5.3	/
实验1高剂量组	10	1.44g	9.1±4.6**&	53.1
					实验1中剂量组	10	0.72g	10.2±3.2**&	47.4
实验1低剂量组	10	0.36g	10.9±3.9**	43.8
					实验2组	10	0.72g	10.1±3.1**&	47.9
实验3组	10	0.72g	9.9±4.3**&	48.2
					实验4组	10	0.72g	10.0±3.1**&	49.7
实验5组	10	0.72g	9.8±4.0**&	47.7
					对比例组	10	0.72g	11.6±3.1**	45.6
龙牡壮骨冲剂	10	7.8g	10.7±3.0**	44.8

注：与空白对照组比较，^**P＜0.01，与对比例组比较，^&P＜0.05。

表8结果显示：与空白对照组相比，实验各组均能显著减轻扭体次数(P＜0.01)；与对比例组相比，实验1中、高剂量组、实验2-5组具有明显差异(P＜0.05)。

结果表明：本发明提供的药物组合物能明显降低醋酸所致小鼠扭体反应数，具有明显镇痛作用，效果优于现有技术。

6、结论：

本发明提供的药物组合物有抗维甲酸所致大鼠骨质疏松的作用，能明显增加维甲酸骨质疏松大鼠骨钙含量和骨小梁宽度，能增加血清钙、磷含量，能增加股骨重量、直径和骨密度；对氢化可的松所致小鼠阳虚证具有一定的改善作用；能明显减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀以及蛋清所致大鼠足肿胀，具有抗炎作用；本发明能明显降低醋酸所致小鼠扭体反应数，具有镇痛作用，效果优于现有技术。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (6)

1.一种治疗骨质疏松的药物组合物，其特征在于，该药物组合物的活性成分为牡蛎提取物，由以下方法制备：牡蛎加4-5倍量的水，然后加入冰醋酸，反应4-8小时，即得。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，该牡蛎提取物是由以下方法制备：牡蛎粉碎，过40-200目筛，加4-5倍量的水，搅拌20-30分钟，然后边搅拌边加入冰醋酸，反应4-8小时，滤过，液体比重15-18波美度，干燥，粉碎，即得牡蛎提取物。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，所述冰醋酸与牡蛎的重量比为5-20∶10。

4.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物的辅料为药学上可接受的赋形剂。

5.根据权利要求1-4任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述制剂为胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液或丸剂。

6.权利要求1-5任一项所述的药物组合物在制备治疗骨质疏松症的药物或保健品中的应用。