CN102526078A - 复方倍他米松混悬注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明发现了用尼泊金和苯甲醇在复方倍他米松混悬注射液中作为絮凝剂的用途，并筛选出了合适的絮凝剂用量。加入絮凝剂可有效控制混悬微粒的粒径大小、均匀性和微粒沉降速度，保证了注射液长期放置后混悬微粒能够再次振摇分散均匀而不结块。本发明还提供了一种能适应工业化方式生产上述混悬型注射液的无菌工艺，解决了采用终端高温灭菌法其主药降解，微粒聚集成块的问题，最终制得了质量稳定的无菌产品。

Description

复方倍他米松混悬注射液及其制备方法

技术领域

本发明涉及用尼泊金和苯甲醇在制备混悬注射液中作为絮凝剂的用途。本发明还涉及一种含二丙酸倍他米松和倍他米松磷酸钠的混悬型注射液，特别是添加了可增加混悬微粒稳定性的辅剂的注射液；本发明还涉及一种能适应工业化方式生产上述混悬型注射液的无菌工艺。

背景技术

复方倍他米松混悬注射液含两种不同溶解度的活性成分：高溶解性的倍他米松磷酸钠及微溶性的二丙酸倍他米松。前者水溶性大，在体内起效迅速。而二丙酸倍他米松水溶性小，在注射液中呈混悬微粒状态，可被缓慢吸收，因而作用持久。

因为两种活性成分中，二丙酸倍他米松在制剂中呈混悬微粒态，倍他米松磷酸钠热稳定性较差，两者对于制备混悬注射液存在如下困难：

1、需要克服混悬微粒的动力学不稳定性

1)需严格控制混悬微粒的粒径大小及均匀性，微粒过大会引起疼痛、静脉栓塞及影响注射通针性；

2、需控制混悬微粒的沉降速度，过快不利于注射及产品的物理稳定性；

3、需控制微粒表面电荷数的范围，以保证微粒成均匀絮状。以免长期放置后注射液混悬微粒不能再次振摇分散均匀，而形成结块。

2、需要克服混悬液的热力学不稳定性

本发明人通过实验发现(见对比试验例1)：

不能采用常规的终端高温灭菌法对复方倍他米松混悬注射液成品进行灭菌。这是因为两种活性药物都不能进行高温灭菌：倍他米松磷酸钠热稳定性较差，尤其在高温条件下易发生降解。而难溶性二丙酸倍他米松微粒在高温条件下易集聚成块。

既要保证注射液无菌，又需解决高温灭菌造成的药物分解和集聚问题也成为一个技术瓶颈。

由于有以上技术难点，目前国内市场上仅有一种进口产品(商品名为得宝松Diprospan)，由比利时先灵葆雅制药厂生产(Schering-Plough Labo N.V.Belgium)。但该产品的制备工艺目前尚不清楚。

专利CN200710164299.4公开了一种制备复方倍他米松混悬注射液的方法，采用终端灭菌。

因此，研究复方被他米松注射液的配方和制备工艺，以替代进口，具有重大意义。

发明内容

本发明的目的在于克服复方倍他米松混悬液的动力学和热力学不稳定性带来的技术问题，提供一种物理化学性质稳定，药效性能良好，并保证无菌的复方倍他米松混悬注射液及其制备方法。

本发明要解决的技术问题有两方面：解决混悬微粒的动力学不稳定性和热力学不稳定性问题。本发明用以下手段解决了这两个技术难点：

一、添加絮凝剂，解决二丙酸倍他米松混悬微粒的动力学不稳定性问题

即，使二丙酸倍他米松微粒产生絮凝，以形成稳定的混悬液。

本发明有以下发现：

1、本发明发现尼泊金及其用量对产生絮凝起重要作用

本发明人通过实验发现，通常在制剂中作为防腐剂的尼泊金在本注射液中能够起到絮凝剂的作用，其用量对二丙酸倍他米松微粒产生絮凝的效果也至关重要。

实验证明：无尼泊金或其用量低于0.01％时，二丙酸倍他米松微粒不产生絮凝，而尼泊金用量高于0.25％时，二丙酸倍他米松絮凝较差。

发明人发现，所述尼泊金包括尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯中的一种或一种以上组合均可起到絮凝剂的作用，优选尼泊金甲酯；

尼泊金的优选用量为0.05-0.1％。

我们对复方倍他米松混悬液的制备工艺进行比较研究，发现如将极性相对较小辅料羧甲基纤维素钠、苯甲醇等与盐类辅料磷酸氢二钠缓冲液、氯化钠等先混合制得溶液，最后加入二丙酸倍他米松微粒进行混悬，此法制得混悬液的微滤较易结块，且微粒沉降后，上部溶液显乳光，较混浊。分析此现象的原因可能是当二丙酸倍他米松加入上述混合溶液时，由于溶液含有较多的正电荷及负电荷，因此较难保证微粒表面所带电荷的一致，即部分微粒表面可能带正电，而另一部分因先接触负电荷而带负电，因而带正电微粒与带负电微粒易相互聚集而沉降结块。而溶液部分显乳光、较混浊的现象可能为苯甲醇以及溶解在其中的尼泊金因没有完全被消耗利用所致。此研究表明，尼泊金对本产品制剂的混悬起至关重要的作用，无其存在，二丙酸倍他米松微粒根本不产生絮凝。

2、本发明发现加入合适量的苯甲醇，使絮凝效果更好

因尼泊金仅微溶于水，若加入苯甲醇，可作为其溶解剂，絮凝效果会更好。

但苯甲醇的用量也极其重要。研究表明苯甲醇用量越小，絮团沉降速度越慢；用量越大，二丙酸倍他米松絮凝微粒再分散越困难，当浓度达到2％时，部分二丙酸倍他米松成团块状而较难分散均匀；

同时考虑到苯甲醇具有较佳镇痛效果，最终优选苯甲醇的浓度为0.5～1％。

本发明人对尼泊金甲酯和苯甲醇进行了最佳配比的选择研究，通过实验证实，当最终控制二者比例在0.1～0.15∶1之间，制得的二丙酸倍他米松混悬液絮凝效果最佳。

3、其它条件的选择，可使得发明效果更好

1)合适的高分子助悬剂、润湿剂

在混悬注射液中，助悬剂的作用主要是增加介质粘度，减小了微粒与分散介质之间的密度差，同时微粒吸附助悬剂分子而增加亲水性，以增加微粒的动力学稳定性。

本发明助悬剂选自甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或羟丙基纤维素，优选羧甲基纤维素钠，其用量为0.01～0.5％。

润湿剂可被吸附于微粒表面，增加其亲水性，产生较好的分散效果，本发明润湿剂选自吐温-80、司盘80或泊洛沙姆F188，优选吐温-80，用量0.01～0.1％。

2)选择合适的pH范围和PH调节剂

复方倍他米松混悬液中，缓冲体系对主药的化学稳定性起至关重要作用，其主要维持注射液的pH值环境。

经研究发现其注射液的最佳pH值为6.7～7.7。PH调节剂选自磷酸-磷酸盐缓冲体系，优选磷酸-磷酸氢二钠缓冲体系；用量为磷酸0.1％，磷酸盐1.25％；

3)选择其它合适的药物辅剂

本发明渗透压调节剂选自氯化钠、甘露醇中的一种或两种，优选氯化钠与甘露醇组合，用量为氯化钠0.15％，甘露醇1％。；

金属离子络合剂，选自依地酸二钠或依地酸钙钠，优选依地酸钙钠，其用量0.04％；

胶体保护剂，选自聚乙二醇4000、聚乙二醇3350或聚乙二醇6000，优选聚乙二醇4000；用量为0.5％；

以上所述的所有百分比均为质量比(W/W)。

本发明的一个优选的实例的配方为：

二丙酸倍他米松    0.646％        氯化钠          0.15％

倍他米松磷酸钠    0.266％        甘露醇          1％

尼泊金甲酯        0.05-0.1％     聚乙二醇4000    0.5％

苯甲醇            0.5-1％        依地酸钙钠      0.04％

吐温-80           0.05％         磷酸氢二钠      1.25％

羧甲基纤维素钠    1％            磷酸            0.1％

其余为注射用水。

复方倍他米松混悬液的制备方法

本发明所研制的复方倍他米松混悬液在制备中，最重要的是需要防止在高温条件下，主药中倍他米松磷酸钠降解和二丙酸倍他米松微粒聚集成块，又要保证药物的无菌。

本发明研制的含二丙酸倍他米松和倍他米松磷酸钠混悬注射液的制备方法，步骤为：

(1)制备无菌二丙酸倍他米松混悬液；

(2)制备无菌倍他米松磷酸钠溶液；

(3)将(1)所得混悬液和(2)所得溶液混合均匀，得到产品；

其特征是，步骤(1)中，先制备混悬液基质，进行灭菌后，在无菌混悬液基质中加入无菌的二丙酸倍他米松微粒，得到无菌混悬液；步骤(2)将倍他米松磷酸钠溶液过0.22um滤膜或滤芯，得到无菌倍他米松磷酸钠溶液；步骤(3)在百级无菌条件下搅拌混合，并在搅拌状态下将产品灌装于无菌西林瓶或安瓿等容器；步骤；(2)步骤(3)均不进行高温灭菌。

由于步骤(1)、(2)得到的均为无菌液，此后的过程均不涉及高温灭菌过程，解决了倍他米松磷酸钠降解和二丙酸倍他米松微粒聚集成块的难点。

上述混悬注射液制备方法中，步骤(1)的优选制备方法为：

A配制助悬剂溶液

将助悬剂加入注射用水，搅拌状态下加热溶胀，冷却，过5～15um滤膜，得助悬剂溶液；

B制备无菌混悬液基质

取絮凝剂、润湿剂，加入注射用水，在35～60℃搅拌溶解后，将所得溶液加于助悬剂溶液中，超声或均质分散后经热压灭菌，再超声或均质使分散均匀，即得无菌混悬液基质；

C制备无菌二丙酸倍他米松混悬液

在百级层流条件下，将无菌二丙酸倍他米松微粒加于无菌混悬液基质中；

所述助悬剂，选自甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或羟丙基纤维素；所述絮凝剂选自尼泊金或尼泊金与苯甲醇的组合。尼泊金选自尼泊金甲酯，尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯中的一种或两种以上的组合；所述润湿剂选自吐温-80、司盘80或泊洛沙姆F188。

上述混悬注射液制备方法中，步骤(2)的优选制备方法为：

A配制缓冲液

将pH调节剂加注射用水搅拌溶解；所述PH调节剂选自磷酸-磷酸盐缓冲体系，优选磷酸-磷酸氢二钠缓冲体系；用量为磷酸0.1％，磷酸盐1.25％；

B  配制无菌倍他米松磷酸钠溶液

将倍他米松磷酸钠、胶体保护剂、渗透压调节剂、金属离子络合剂加于缓冲液中，搅拌溶解完全，过0.22um滤膜或滤芯，即得无菌倍他米松磷酸钠溶液；

所述胶体保护剂选自聚乙二醇4000、聚乙二醇3350或聚乙二醇6000，优选聚乙二醇4000；用量为0.5％；

所述渗透压调节剂选自氯化钠、甘露醇中的一种或两种，优选氯化钠与甘露醇组合，用量为氯化钠0.15％，甘露醇1％。；

所述金属离子络合剂，选自依地酸二钠或依地酸钙钠，优选依地酸钙钠，其用量0.04％；

上述混悬注射液制备方法中，步骤(3)的优选制备方法为：

在百级层流保护下将无菌二丙酸倍他米松混悬液与无菌倍他米松磷酸钠溶液混合，测定中间品含量，搅拌状态下灌装，得无菌复方倍他米松混悬注射液。

本方法中将混悬液制备分成了三大步骤，前两步骤为无菌二丙酸倍他米松混悬液及无菌倍他米松磷酸钠溶液的制备，前者制备工艺中所含辅料极性相对较小，而后者辅料极性较大，较多为盐类辅料。其优点是：

1、先将二丙酸倍他米松加入带负电荷的羧甲基纤维素钠体系进行絮凝，由于此体系中只含有负电荷，因而二丙酸倍他米松微粒表面均带负荷点，互相排斥而不聚集成块。

2、体系中含有的尼泊金甲酯及苯甲醇相对集中，能更完全地被有效利用，因此，制得的混悬液中溶液部分相当澄清，无乳光现象。

3、加无菌二丙酸倍他米松之前，由于羧甲基纤维素钠溶液粘度较大不能采用过滤法除菌，因此采用可靠的高温灭菌法保证产品无菌，而倍他米松磷酸钠溶液，只需过0.22um滤膜或滤芯，即可达到无菌效果。

第三步骤为无菌二丙酸倍他米松混悬液及无菌倍他米松磷酸钠溶液按比例在百级无菌条件下，搅拌混合均匀，并在搅拌状态下灌装于无菌西林瓶或安瓿中，即得无菌复方倍他米松注射液。

本发明混悬注射液的质量检验：通过以下各种试验，表明本发明制备的复方倍他米松混悬注射液质量稳定可靠：

1、无菌检测

符合中国药典2000年版规定。

2、微粒大小测定

实施例1的微粒90％小于12.87um(见附图1)，实施例2的微粒90％小于12.07um(见附图2)，且粒径大小均成良好的正态分布。均优于进口药物“得宝松”，更符合药典小于15um的要求。

3、渗透压测定

符合中国药典2000年版规定。

4、沉降容积比测定

本发明2种产品混悬微粒缓慢沉降，表明处方及工艺设计优良。

5、重新分散试验

重分散性良好，离心后的微粒饼状物能再次分散成离心前的均匀絮状，且较“得宝松”的离心重分散次数少。

6、影响因素(光照、高温)试验

光照、高温对主药稳定性的影响与进口产品无显著差异。

7、加速试验

30℃条件下加速考察3月、6月，符合质量标准要求，稳定性略优于进口产品“得保松”。

8、长期稳定性试验

25℃条件下加速考察3月、6月、12月、18月、24月、36月，考察其质量指标性状、pH值、易注射性、含量、有关物质的变化情况。结果符合质量标准要求。可在避光和防冻的2～25℃条件下保存3年。

本发明的主要贡献在于：

1、发现了尼泊金及苯甲醇可使二丙酸倍他米松微粒产生絮凝，并筛选出了絮凝剂合适的用量，可有效地控制混悬微粒的粒径大小、均匀性和微粒沉降速度等指标，保证了混悬注射液长期放置后混悬微粒能够再次振摇分散均匀而不结块。

2、采用了一种新颖的能适应大生产要求的无菌工艺，解决了复方倍他米松混悬注射液采用终端高温灭菌法其主药降解，微粒聚集成块的问题，最终制得了质量稳定性良好的无菌产品，有效期可达3年。

总之，本发明提供一种物理化学性质稳定，药效性能良好，并保证无菌的复方倍他米松混悬注射液配方，以及这种注射液的制备方法。

附图说明：

图1是实施例1混悬液微粒的粒度分布图，微粒90％小于12.87um，粒径呈正态分布，峰形良好；

图2是实施例2混悬液微粒的粒度分布图，微粒90％小于12.07um，粒径呈正态分布，峰形良好；

图3是进口药物“得宝松”混悬液微粒的粒度分布图，微粒90％小于13.97um，粒径呈正态分布，峰形一般。

具体实施方式：

下面将结合实施例对本发明作进一步说明，可使本领域专业技术人员更加全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

(1)配方

二丙酸倍他米松    64.6g   氯化钠          15g

倍他米松磷酸钠    26.6g   甘露醇          100g

尼泊金甲酯        5g      聚乙二醇4000    50g

苯甲醇            50g     依地酸钙钠      4g

吐温-80           5g      磷酸氢二钠      125g

羧甲基纤维素钠    100g    磷酸            10g

加注射用水补充定容至10000ml

(2)制备方法

1)制备无菌二丙酸倍他米松混悬液

①羧甲基纤维素钠溶液配制

取处方量羧甲基纤维素钠，于万级洁净室内加热注射用水搅拌状态下溶胀，冷却至室温，过10um滤膜，得溶液(I)。

②无菌基质液的制备

取处方量的苯甲醇、吐温-80、尼泊金甲酯，于万级洁净室内水浴40℃搅拌溶清后，得溶液(II)。将溶液(II)加于溶液(I)中，密闭，于湿热灭菌柜中121℃灭菌20min；取出，于百级无菌条件下冷却至室温置于转速1×10³rpm条件下均质均质5min，即得无菌基质液(III)。

③无菌二丙酸倍他米松混悬液的制备

取64.6g无菌微晶化二丙酸倍他米松原料于百级无菌条件下加于溶液(III)中，转速1×10³rpm下均质5min，即得无菌混悬液(IV)。

2)无菌倍他米松磷酸钠溶液的制备

①磷酸氢二钠缓冲液配制

取处方量磷酸氢二钠于万级洁净室内加于2500g注射用水中，搅拌溶解，再加适量磷酸调溶液pH值至7.5，即得缓冲液(V)。

②倍他米松磷酸钠溶液配制

于万级洁净室内将处方量的倍他米松磷酸钠、聚乙二醇4000、氯化钠、依地酸钙钠加于缓冲液(V)中，搅拌溶解完全，过0.22um至百级无菌区，即得无菌溶液(VI)。

3)总混

在百级层流保护下将无菌二丙酸倍他米松混悬液(IV)与无菌倍他米松磷酸钠溶液(VI)混合，搅拌均匀，搅拌速度200rpm，测定中间品含量，搅拌状态下灌装于西林瓶中，即得复方倍他米松混悬注射液。

实施例2

(1)配方

二丙酸倍他米松    64.6g    羧甲基纤维素钠    100g

倍他米松磷酸钠    26.6g    氯化钠            15g

尼泊金甲酯        10g      甘露醇            100g

苯甲醇            70g      聚乙二醇4000      50g

吐温-80           5g       依地酸钙钠        4g

磷酸氢二钠    125g        磷酸    10g

加注射用水补充定容至10000ml

(2)制备方法

1)制备无菌二丙酸倍他米松混悬液

①羧甲基纤维素钠溶液配制

取处方量羧甲基纤维素钠，于万级洁净室内加热注射用水搅拌状态下溶胀，冷却至室温，过10um滤膜，得溶液(I)。

②无菌基质液的制备

取处方量的苯甲醇、吐温-80、尼泊金甲酯，于万级洁净室内水浴40℃搅拌溶清后，得溶液(II)。将溶液(II)加于溶液(I)中，密闭，于湿热灭菌柜中121℃灭菌20min；取出，于百级无菌条件下冷却至室温置于转速1×10³rpm条件下均质均质5min，即得无菌基质液(III)。

③无菌二丙酸倍他米松混悬液的制备

取64.6g无菌微晶化二丙酸倍他米松原料于百级无菌条件下加于溶液(III)中，转速1×10³rpm下均质5min，即得无菌混悬液(IV)。

2)无菌倍他米松磷酸钠溶液的制备

①磷酸氢二钠缓冲液配制

取处方量磷酸氢二钠于万级洁净室内加于2500g注射用水中，搅拌溶解，再加适量磷酸调溶液pH值至7.5，即得缓冲液(V)。

②倍他米松磷酸钠溶液配制

于万级洁净室内将处方量的倍他米松磷酸钠、聚乙二醇4000、氯化钠、依地酸钙钠、甘露醇加于缓冲液(V)中，搅拌溶解完全，过0.22um至百级无菌区，即得无菌溶液(VI)。

3)总混

在百级层流保护下将无菌二丙酸倍他米松混悬液(IV)与无菌倍他米松磷酸钠溶液(VI)混合，搅拌均匀，搅拌速度200rpm，测定中间品含量，搅拌状态下灌装于西林瓶中，即得复方倍他米松混悬注射液。

产品质量检验

对实施例1、2中制得的复方倍他米松混悬注射液进行了无菌检测、微粒大小测定、渗透压测定、沉降容积比测定、重新分散试验、影响因素试验、加速试验、长期稳定性试验等8种试验，具体如下：

1、无菌检测

方法：按中国药典2000年版二部附录XI H的直接接种法进行：取本品11支，在硫乙醇酸盐和真菌汤培养基中均加入0.5％的土温-80。

结果：均符合药典规定，见表1。

表1无菌检测试验结果

受试注射液样品	无菌检测结果
		实施例1	符合药典规定
实施例2	符合药典规定

2、微粒大小测定

方法：分别取本发明2种产品及进口药物“得宝松”各5ml，超声1min分散均匀，缓慢滴加于LS-POP(II)激光粒度分析仪的进样池，水为流动载体，采用动态法测定。

结果：见表2。

表2混悬微粒大小测定试验结果

由表2可知，实施例1的微粒90％小于12.87um，实施例2的微粒90％小于12.07um，且粒径大小均成正态分布。均优于进口药物“得宝松”，更符合药典的要求。

3、渗透压测定

方法：取本发明2种产品及进口药物“得宝松”各5ml，振摇均匀，再取约0.5ml于洁净试管内，套在测量探头上，用FM-8P全自动冰点渗透压计进行测定。

测定结果见表3。

表3产品渗透压测定结果

4、沉降容积比测定

方法：取本发明制备的2种产品及进口药物“得宝松”各5ml，放于5ml量筒中，摇匀，测定混悬剂的总容积Vo，静置30min后，观察沉降面不再改变时沉降物的容积Vu，其沉降容积比F为：F＝Vu/Vo。

结果：三种受试物摇匀后，5min开始缓慢沉降，9min后有明显沉降面，15min后沉降微粒达到90％左右，30min后，沉降面不再改变。其中本发明2种产品混悬微粒缓慢沉降，表明处方及工艺设计优良。沉降容积比见表4。

表4沉降容积比测定试验结果

受试注射液样品	沉降容积比
		实施例1	0.61/5
实施例2	0.62/5
		得宝松	0.60/5

5、重新分散试验

方法：取本发明制备的2种产品及进口药物“得宝松”各10ml进行离心重新分散试验。具体为：先将10ml混悬液摇匀后，置于25ml试管中，再将其放入离心机，转速40000转/min条件下，离心5min，取出，固定试管口，然后将试管底部倒置，然后再顺置，往返来回，计作1次，直至微滤饼再次完全分散絮凝，记录所用分散次数，并用其评价产品的再分散性。

结果：实施例样品较“得宝松”的离心重分散次数少，表明本发明制得的该混悬注射剂重分散性良好。具体结果见表5。

表5重新分散试验结果

6、影响因素(光照、高温)试验

方法：取本发明制备的2种样品及进口药物“得宝松”，分别进行4500LX光照加速试验5天、10天，40℃条件下高温加速5天、10天及60℃条件下高温加速5天、10天，以评价光照、高温对本注射剂的影响情况。

结果：由表6可知，光照、高温对三种受试物的主药稳定性均有影响，但结果无显著差异，三者均应该在避光，适宜温度条件下贮藏。本产品与进口产品此项试验结果相当。具体结果见表6。

表6影响因素试验结果

注：所有受试物试验后性状均为白色混悬液

7、加速试验

方法：将本发明的复方倍他米松注射液及进口药物“得宝松”，置于恒温恒湿箱内，30℃条件下加速考察3月、6月，考察其质量指标性状、pH值、易注射性、含量、有关物质的变化情况。

结果：

进口药物“得宝松”在30℃条件下加速考察6个月，倍他米松磷酸钠含量降低约3％，有关物质增加0.8％，

本发明制备的复方倍他米松注射液，在相同条件下，倍他米松磷酸钠含量降低仅约2％，有关物质略有增加，而它指标无明显变化，符合质量标准要求，说明本发明产品稳定性略优于上市产品“得保松”。具体见表7。

表730℃加速试验结果

8、长期稳定性试验

方法：将本发明的复方倍他米松注射液，置于恒温恒湿箱内，25℃条件下加速考察3月、6月、12月、18月、24月、36月，考察其质量指标性状、pH值、易注射性、含量、有关物质的变化情况。

结果：本发明制备的复方倍他米松注射液，在20℃条件下加速考察36个月，倍他米松磷酸钠含量降低约4％左右，而二丙酸倍他米松含量降低约2.5％左右，有关物质略有增加，而它指标无明显变化，符合质量标准要求。

具体见表8。

表825℃下，放置三年稳定性试验结果

结论：根据30℃加速试验及长期25℃稳定性考察试验结果，本发明制备的复方倍他米松注射液的可在避光和防冻的2～25℃条件下保存3年。

对比试验例1终端灭菌方法对二丙酸倍他米松和倍他米松磷酸钠注射液的影响考察

一、试验目的：

考察二丙酸倍他米松和倍他米松磷酸钠的混悬型注射液及其两种主药的终端灭菌方法，以筛选灭菌条件。

二、试验方法

用以下三种方法分别进行灭菌试验，考察灭菌前后样品外观变化及有关物质含量变化：

1、热压灭菌法(121℃，20min或115℃，30min)；

2、流通蒸汽灭菌法(100℃，灭菌30分钟)；

3、低温间歇灭菌法(80℃，水浴灭菌1小时，常温放置24小时后，再同法操作3次以上)

三、结果

1、热压灭菌方法

灭菌效果可靠(Fo≥12)，但二丙酸倍他米松药物微粒结块成团，有关物质增长明显，不符合质量标准要求。筛选结果见表9。

表9热压灭菌方法筛选结果

2、流通蒸汽灭菌法结果：微粒仍有聚集现象，且有关物质增加较大；未达到SAL＜10--6的灭菌标准；

3、低温间歇灭菌法：同法操作3次以上，结果微粒不聚集，有关物质变化较小，产品物理化学指标符合质量标准；但产品未达到SAL＜10^-6的灭菌标准(SAL：灭菌保证水平sterility assurance level，SAL为10^-6，即经灭菌处理后在一百万件物品中最多只允许有一件物品存在活微生物)。

四、结论

1、注射液中所含主药具有对热不稳定的化学性质，采用经典热压灭菌法虽然灭菌效果可靠，但灭菌后产品的物理化学指标不符合质量标准；

2、而流通蒸汽灭菌法和低温间歇灭菌法不能有效保证注射剂的无菌。

对比试验例2絮凝剂的选择及用量试验

一、试验目的：

选择加入絮凝剂的种类、用量。找到合适的对混悬微粒起稳定作用的絮凝剂，并选择其优选用量。

二、试验方法

1、配方

进行了13种配方的絮凝试验，每种配方中的絮凝剂尼泊金和苯甲醇不同，其它成分均如下：

二丙酸倍他米松     64.6g       聚乙二醇4000    50g

吐温-80            2.5g        依地酸二钠      4g

羧甲基纤维素钠     200g        磷酸氢二钠      100g

倍他米松磷酸钠     26.6g       磷酸            适量

氯化钠             30g         注射用水        加至10000g

2、制备

①羧甲基纤维素钠溶液配制

取处方量羧甲基纤维素钠，加热注射用水搅拌状态下溶胀，冷却至室温，过10um滤膜，得溶液(I)。

②基质液的配制

取处方量的苯甲醇、吐温-80、尼泊金水浴40℃搅拌溶清后，得溶液(II)。

向溶液(II)中加入溶液(I)，密闭，于湿热灭菌柜中121℃灭菌30min；取出，置于转速1×10³rpm条件下均质均质5min，即得无菌基质液(III)。

③二丙酸倍他米松混悬液的制备

取64.6g无菌微晶化二丙酸倍他米松原料加于溶液(III)中，转速1×10³rpm下均质5min，结果二丙酸倍他米松不发生混悬，成颗粒状沉降于底部。

④磷酸氢二钠缓冲液配制

取处方量磷酸氢二钠加于2500g注射用水中，搅拌溶解，再加适量磷酸调溶液pH值至7.5，即得缓冲液(V)。

⑤倍他米松磷酸钠溶液配制

将处方量的倍他米松磷酸钠、聚乙二醇4000、氯化钠、依地酸二钠、甘露醇加于缓冲液(V)中，搅拌溶解完全，过0.22um，即得无菌溶液(VI)。

⑥总混

将无菌二丙酸倍他米松混悬液(IV)与无菌倍他米松磷酸钠溶液(VI)混合，测定中间品含量，搅拌状态下灌装于西林瓶中，即得复方倍他米松注射液。

3、评价指标

1)微粒形成絮状物情况；

2)沉降现象：

摇匀后，观察沉降现象(开始沉降时间、形成沉降面时间、沉降微粒达到90％时间、沉降面不再改变时间等)；

3)重新分散次数。

三、结果

见表10。

表10不同絮凝剂及不同用量对混悬剂的影响对比

从上表可知，絮凝状态：配方1及配方3最佳；沉降速度：配方1及配方3沉降最慢，重分散次数：配方1及配方3均小于10次；综合评定：最佳配方为1及3。

四、结论

絮凝剂最佳为尼泊金甲酯，且用量为0.05-0.1％；苯甲醇最佳用量为0.5％-1％。

Claims (10)

1.一种含二丙酸倍他米松和倍他米松磷酸钠的混悬型注射液，其特征是含有絮凝剂，所述絮凝剂选自尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯中的一种或一种以上组合，用量是0.05％～0.1％(W/W)。

2.一种含二丙酸倍他米松和倍他米松磷酸钠的混悬型注射液，其特征是含有絮凝剂，所述絮凝剂是0.05％～0.1％(W/W)的尼泊金和0.5％～1％(W/W)的苯甲醇；所述尼泊金选自尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯中的一种或一种以上组合。

3.权利要求1或2所述的混悬型注射液，所述尼泊金是尼泊金甲酯。

4.权利要求1或2所述的混悬型注射液，含有高分子助悬剂，选自甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或羟丙基纤维素，用量为0.01％～0.5％(W/W)。

5.权利要求1或2所述的混悬型注射液，含有润湿剂，选自吐温-80、司盘80或泊洛沙姆F188，用量是0.01％～0.1％(W/W)。

6.一种工业化生产二丙酸倍他米松和倍他米松磷酸钠混悬型注射液的无菌工艺方法，步骤为：

(1)制备无菌二丙酸倍他米松混悬液；

(2)制备无菌倍他米松磷酸钠溶液；

(3)将(1)所得混悬液和(2)所得溶液混合均匀，得到产品；

其特征是不进行终产品高温灭菌，具体特征如下：

A步骤(1)中，先制备混悬液基质，进行灭菌后，加入无菌的二丙酸倍他米松微粒，得到无菌混悬液；

B步骤(2)是将倍他米松磷酸钠溶液过0.22um滤膜或滤芯；

C步骤(3)中所述混合是在百级无菌条件下搅拌均匀；

D终产品的包装是在搅拌状态下将步骤(3)所得产品灌装于容器中；

E步骤(2)、步骤(3)均不进行高温灭菌。

7.权利要求6所述的方法，其中步骤(1)的方法为：

A配制助悬剂溶液

将权利要求4所述的助悬剂加入注射用水，搅拌状态下加热溶胀，冷却，过5～15um滤膜，得助悬剂溶液；

B制备无菌混悬液基质

取絮凝剂、润湿剂，加入注射用水，在35～60℃搅拌溶解后，将所得溶液加于助悬剂溶液中，超声或均质分散后经热压灭菌，再超声或均质使分散均匀，即得无菌混悬液基质；所述絮凝剂如权利要求1或2所述；所述润湿剂如权利要求5所述；

C制备无菌二丙酸倍他米松混悬液

在百级层流条件下，将无菌二丙酸倍他米松微粒加于无菌混悬液基质中；

其中步骤(2)的方法为：

A配制缓冲液

将pH调节剂加注射用水搅拌溶解；所述PH调节剂选自磷酸-磷酸盐缓冲体系；

B  配制无菌倍他米松磷酸钠溶液

将倍他米松磷酸钠、胶体保护剂、渗透压调节剂、金属离子络合剂加于缓冲液中，搅拌溶解完全，过0.22um滤膜或滤芯；

所述胶体保护剂选自聚乙二醇4000、聚乙二醇3350或聚乙二醇6000；所述渗透压调节剂选自氯化钠、甘露醇中的一种或两种；所述金属离子络合剂选自依地酸二钠或依地酸钙钠。

8.尼泊金和苯甲醇在制备混悬型注射液中作为絮凝剂的应用，用量是：尼泊金0.05％～0.1％(W/W)、苯甲醇0％～1％(W/W)，所述尼泊金选自尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯中的一种或一种以上组合。

9.权利要求8所述的应用，所述尼泊金是尼泊金甲酯，苯甲醇的用量是0.5％～1％(W/W)。

10.权利要求8或9所述的应用，所述混悬注射液是二丙酸倍他米松和倍他米松磷酸钠注射液。

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