CN102520102A - 款冬花药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 - Google Patents
款冬花药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102520102A CN102520102A CN2011104223486A CN201110422348A CN102520102A CN 102520102 A CN102520102 A CN 102520102A CN 2011104223486 A CN2011104223486 A CN 2011104223486A CN 201110422348 A CN201110422348 A CN 201110422348A CN 102520102 A CN102520102 A CN 102520102A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- coltsfoot
- fingerprint
- medicinal material
- standard
- test solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 235000004869 Tussilago farfara Nutrition 0.000 title claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 15
- 240000000377 Tussilago farfara Species 0.000 title 1
- 241000249864 Tussilago Species 0.000 claims abstract description 35
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 32
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims abstract description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims abstract description 6
- FGDQGIKMWOAFIK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;phosphoric acid Chemical compound CC#N.OP(O)(O)=O FGDQGIKMWOAFIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 claims description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 3
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims description 3
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 4
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 abstract 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 5
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 206010062717 Increased upper airway secretion Diseases 0.000 description 2
- 208000026435 phlegm Diseases 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 2
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 description 1
- 208000000616 Hemoptysis Diseases 0.000 description 1
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 208000013116 chronic cough Diseases 0.000 description 1
- 238000007621 cluster analysis Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000011496 digital image analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明提供了一种款冬花药材HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。首先，取款冬花药材粉末，加入乙醇，超声提取，将上清液用微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。然后，进行高效液相色谱分析，色谱柱为Diamonsil-C18柱(5μm，250×4.6mm)；流动相为0.1%磷酸-乙腈，采用梯度洗脱方式；检测波长240nm；柱温30℃。吸取供试品溶液进样，得到款冬花药材的HPLC指纹图谱。通过对10批次款冬花药材HPLC指纹图谱的比对，确定其共有指纹特征，得到标准指纹图谱。利用标准指纹图谱可以有效监控款冬花药材的质量，保持其稳定、均一、可控。
Description
技术领域
本发明涉及中药材指纹图谱的建立方法，尤其是款冬花药材高效液相色谱（HPLC）指纹图谱的建立方法，以及由此方法所得到的款冬花药材标准指纹图谱，属于药物分析技术领域。
背景技术
中药指纹图谱特指中药样本经光谱或色谱等现代分析技术得到的中药各组分群体特征的图谱或图象。目前指纹图谱已成为国内外公认的鉴别中药品种或评价中药质量的最有效手段之一。美国食品药品管理局在1996年制定的《FDA关于植物制品的指南》中，要求对植物原料、植物药中间品和植物药产品提供相应的指纹图谱。英国草药典、印度草药典以及加拿大药用及芳香植物学会、德国药用植物学会也接受色谱指纹图谱。中国国家药品监督管理部门于2000年发布了《中药注射剂的指纹图谱研究的技术要求（暂行）》，明确要求对新申报的中药注射剂和已上市的中药注射剂实行指纹图谱标准。
中药指纹图谱经过数十年的研究，使用了包括紫外、红外、气相、高效液相、薄层、核磁共振、扫描电子显微镜、计算机图像分析、电泳技术、同工酶分析法、分子生物学技术、聚类分析技术等许多现代分析测试手段，为中药的物质鉴定和成分分析积累了大量的数据。但从中药全面质量控制的角度看，还远未达到有效地反映和控制中药的整体质量的目的。高效液相色谱（HPLC）指纹图谱在国际上容易获得认可，包括美国、英国、法国、加拿大、德国、日本和印度在内的许多国家更愿意接受HPLC指纹图谱。因此，为中药材建立相应的HPLC指纹图谱，是现阶段控制中药内在质量的有效手段。
款冬花为菊科款冬属植物款冬的花蕾，具有润肺下气，止咳化痰之功效。临床上主要用于新久咳嗽，咳喘痰多，劳嗽咳血。本品已报道的化学成分包括萜类，黄酮类，生物碱，挥发油等。由于受产地、气候和生态环境等的影响，不同款冬花药材所含的成分也存在一定差异。《中国药典》对款冬花药材的质量控制仅限于款冬酮的含量测定，不能系统、完整地反映款冬花的内在质量。
发明内容
本发明的目的是提供一种款冬花药材指纹图谱的建立方法，以及由此方法所得到的款冬花药材标准指纹图谱。为实现此目的，本发明通过对款冬花药材高效液相色谱指纹图谱的研究，提出了一种更好的款冬花药材质量控制方法，弥补了现有质量控制技术的不足，使款冬花药材的质量控制更加完善和科学。
本发明的款冬花药材高效液相色谱指纹图谱的建立方法，包括如下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取款冬花药材粉末1.0 g，精密称定，置具塞容器中，精密加入10~100mL乙醇，超声处理1小时，冷却后上清液用0.45μm微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。
（2）高效液相色谱分析：色谱分离柱填料5μm Diamonsil- C18，250×4.6mm；流动相0.1%磷酸-乙腈；采用梯度洗脱方式：0min→30min→40min→50min→60min，乙腈10%→25%→75%→100%→100%；流速0.5~1.5mL/min；检测波长240nm；柱温：20~40℃。在此条件下分析供试品溶液，得到款冬花药材的指纹图谱。
按照本发明提供的方法，对10批款冬花药材建立了HPLC指纹图谱，通过分析，确定了13个共有峰，保留时间分别为：3.9min、10.0min、21.0min、22.3min、25.0min、26.1min、28.8min、37.1min、38.6min、45.6min、48.7min、51.1min、54.5min，这些共有特征峰构成了款冬花药材的指纹特征，可作为款冬花药材的标准指纹图谱。
本发明具有如下显著的优点和用途：
（1）将款冬花药材作为一个整体对待，通过比较其共有峰可以找出不同药材之间的细微差异；
（2）供试品制作简便，色谱条件容易实现；
（3）方法的稳定性和重现性都比较好；
（4）适用于对款冬花药材真伪、产地和品质的鉴别和控制。
附图说明
图1是本发明提供的款冬花药材的标准指纹图谱。图中从左到右分别标出了其共有特征峰1至13号。
具体实施方式
本发明的优选实施例如下：
（1）仪器和药品：使用Waters高效液相色谱仪；款冬花药材共10批，购于药店或药材市场；其它试剂为色谱纯或分析纯。
（2）供试品溶液的制备：取款冬花药材粉末1.0 g，精密称定，置具塞容器中，精密加入50 mL乙醇，超声处理1小时，冷却后上清液用0.45μm微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。
（3）高效液相色谱分析：色谱分离柱填料5μm Diamonsil- C18，250×4.6mm；流动相0.1%磷酸-乙腈；采用梯度洗脱方式：0min→30min→40min→50min→60min，乙腈10%→25%→75%→100%→100%；流速0.5~1.5mL/min；检测波长240nm；柱温：20~40℃。在此条件下分析供试品溶液，得到款冬花药材的指纹图谱。
（4）按照本发明提供的方法，对10批款冬花药材建立了HPLC指纹图谱，通过分析，确定了13个共有峰，保留时间分别为：3.9min、10.0min、21.0min、22.3min、25.0min、26.1min、28.8min、37.1min、38.6min、45.6min、48.7min、51.1min、54.5min，这些共有特征峰构成了款冬花药材的指纹特征，可作为款冬花药材的标准指纹图谱。
Claims (1)
1.一种款冬花药材高效液相色谱指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取款冬花药材粉末1 g，精密称定，置具塞容器中，精密加入10~100 mL乙醇，超声处理1 小时，冷却后上清液用0.45 μm微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；
（2）指纹图谱的制作：色谱分离柱填料5μm Diamonsil- C18柱，250×4.6mm；流动相0.1%磷酸-乙腈；采用梯度洗脱方式：0min→30min→40min→50min→60min，乙腈10%→25%→75%→100%→100%；流速0.5~1.5mL/min；检测波长240nm；柱温：20~40℃，在此条件下分析供试品溶液，得到款冬花药材的指纹图谱；
（3）标准指纹图谱的确定：确定了13个共有特征峰，保留时间分别为3.9min、10.0min、21.0min、22.3min、25.0min、26.1min、28.8min、37.1min、38.6min、45.6min、48.7min、51.1min、54.5min，这些共有特征峰构成了款冬花药材的指纹特征，作为款冬花药材的标准指纹图谱。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2011104223486A CN102520102A (zh) | 2011-12-16 | 2011-12-16 | 款冬花药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2011104223486A CN102520102A (zh) | 2011-12-16 | 2011-12-16 | 款冬花药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102520102A true CN102520102A (zh) | 2012-06-27 |
Family
ID=46291090
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2011104223486A Pending CN102520102A (zh) | 2011-12-16 | 2011-12-16 | 款冬花药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102520102A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107290456A (zh) * | 2017-07-19 | 2017-10-24 | 山西大学 | 一种款冬花液相指纹图谱的构建方法和应用 |
| CN109001323A (zh) * | 2018-08-01 | 2018-12-14 | 山西大学 | 一种款冬花液相特征图谱的构建方法 |
| CN114113433A (zh) * | 2021-11-12 | 2022-03-01 | 北京康仁堂药业有限公司 | 一种款冬花配方颗粒的制备工艺及其评价方法 |
-
2011
- 2011-12-16 CN CN2011104223486A patent/CN102520102A/zh active Pending
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 刘玉峰等: "款冬花药材的HPLC化学成分指纹图谱研究", 《药学学报》 * |
| 喻强等: "巫溪款冬花芦丁含量测定", 《重庆中草药研究》 * |
| 汪树理等: "长白山区野生款冬花不同采收期芦丁含量的差异", 《时珍国医国药》 * |
| 邓益媛等: "不同产地款冬花中总黄酮和芦丁的含量比较", 《岳阳职业技术学院学报》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107290456A (zh) * | 2017-07-19 | 2017-10-24 | 山西大学 | 一种款冬花液相指纹图谱的构建方法和应用 |
| CN107290456B (zh) * | 2017-07-19 | 2019-09-24 | 山西大学 | 一种款冬花液相指纹图谱的构建方法和应用 |
| CN109001323A (zh) * | 2018-08-01 | 2018-12-14 | 山西大学 | 一种款冬花液相特征图谱的构建方法 |
| CN114113433A (zh) * | 2021-11-12 | 2022-03-01 | 北京康仁堂药业有限公司 | 一种款冬花配方颗粒的制备工艺及其评价方法 |
| CN114113433B (zh) * | 2021-11-12 | 2023-08-22 | 北京康仁堂药业有限公司 | 一种款冬花配方颗粒的制备工艺及其评价方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101216465A (zh) | 甘草药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 | |
| CN105606734A (zh) | 一种快速高分离度液相色谱检测金银花和山银花药材的方法 | |
| CN107290456B (zh) | 一种款冬花液相指纹图谱的构建方法和应用 | |
| Chen et al. | Separation of six compounds including two n‐butyrophenone isomers and two stibene isomers from Rheum tanguticum Maxim by recycling high speed counter‐current chromatography and preparative high‐performance liquid chromatography | |
| Chen et al. | Separation of three anthraquinone glycosides including two isomers by preparative high‐performance liquid chromatography and high‐speed countercurrent chromatography from Rheum tanguticum Maxim. ex Balf | |
| CN104569252B (zh) | 一种中药组合物的指纹图谱的建立方法 | |
| CN107860832A (zh) | 复方大黄清胰汤指纹图谱的建立方法 | |
| CN106353417A (zh) | 一种云南重楼或其多芽品系中多种甾体皂苷的uplc检测方法 | |
| CN101216466A (zh) | 枸杞hplc指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 | |
| CN102141558B (zh) | 竹叶提取物及其制品中黄酮含量的测定方法 | |
| CN110297060B (zh) | 一种山苦荬药材指纹图谱检测方法及其指纹图谱 | |
| CN102520102A (zh) | 款冬花药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 | |
| CN104849363A (zh) | 鱼腥草破壁饮片的指纹图谱构建及其质量检测方法 | |
| CN110045050A (zh) | 一种乙肝解毒胶囊中七种原料药的鉴别检测方法 | |
| Zhou et al. | Fingerprinting and determination of hepatotoxic constituents in Polygoni Multiflori Radix Praeparata of different producing places by HPLC | |
| CN101183092B (zh) | 金莲花药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱 | |
| Huang et al. | Determination of flavonoids in magnolia officinalis leaves based on response surface optimization of infrared assisted extraction followed by high-performance liquid chromatography (HPLC) | |
| CN108169345A (zh) | 蒙药小秦艽花指纹图谱建立方法以及质量评价方法 | |
| CN104007213B (zh) | 石柑子药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
| CN108982736B (zh) | 一种消毒散口服液hplc指纹图谱的建立方法 | |
| CN106290643A (zh) | 一种中药荆芥抗肺癌活性成分的质量控制方法 | |
| CN103389343B (zh) | 白头翁汤颗粒可变波长指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 | |
| CN102565257B (zh) | 一种建立新疆雪莲高效液相色谱指纹图谱的方法 | |
| CN102928538A (zh) | 丹参药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 | |
| CN110274976B (zh) | 一种紫花杜鹃药材hplc指纹图谱构建方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120627 |