CN102515891A - 一种含有枯草芽孢杆菌的微生物肥料 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种微生物肥料，包含下列比例的微生物发酵液：光合细菌、乳酸菌、放线菌、康宁木霉菌、枯草芽孢杆菌发酵液体积比为1∶0.8~1∶1.2~1.4：0.6~0.8:1~1.2。本发明制备的肥料，可以提高肥料的利用效率，并且还能够起到防治植物枯死、病害的作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种微生物肥料，属于种植领域。
背景技术
微生物肥料是以微生物的生命活动导致作物得到特定肥料效应的一种制品，是农业生产中使用肥料的一种。其在中国已有近50年的历史。微生物肥料是活体肥料，它的作用主要靠它含有的大量有益微生物的生命活动来完成。只有当这些有益微生物的生命活动来完成。只有当这些有益微生物处于旺盛的繁殖和新陈代谢的情况下，物质转化和有益代谢产物才能不断形成。因此，微生物肥料中有益微生物的种类、生命活动是否旺盛是其有效性的基础，而不像其它肥料是以氮、磷、钾等主要元素的形式和多少为基础。正因为微生物肥料是活制剂，所以其肥效与活菌数量、强度及周围环境条件密切相关，包括温度、水分、酸碱度、营养条件及原生活在土壤中土著微生物排斥作用都有一定影响。随着化肥的大量使用，其利用率不断降低已是众所周知的事实。这说明，仅靠大量增施化肥来提高作物产量是有限的，更何况还有污染环境等一系列的问题。为此各国科学家一直在努力探索提高化肥利用率达到平衡施肥、合理施肥以克服其弊端的途径。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有较好抗病能力的微生物肥料。
为达到上述目的，本发明所述的各种微生物菌种重量百分比为：
一种微生物肥料，由下列重量百分比的微生物组成：
有机质30-40%、玉米粉10-15%、骨粉4-8%、秸秆灰20-30%、硫酸钾1-5%、硫酸铵1-2%、微生物发酵液10-15%。
微生物发酵液按下列体积比进行配制：
光合细菌（photosynthetic bacteria）、乳酸菌（Lactobacillus）、放线菌（Actinomycete）、康宁木霉菌(Trichoderma koningii)、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）=1∶0.8~1∶1.2~1.4：0.6~0.8:1~1.2。
优选的，光合细菌：乳酸菌：放线菌：康宁木霉菌：枯草芽孢杆菌=1∶1∶1.2：0.6: 1.2。
本发明所述的微生物肥料细菌数3亿/g以上。
所述的光合细菌选自沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）、加墨红假单胞菌（Rhodopseudomonas capsulatus）或球形红假单胞菌（Rhodopseudomonas sphaeroides）中的任意一种或几种。
所述的放线菌优选为诺卡氏菌属（Nocardia）。所述的乳酸菌优选为植物乳酸菌（Lactobacillus plantarum）。
微生物肥料的制备方法，包括分别将光合细菌、康宁木霉菌(Trichoderma koningii)、枯草芽孢杆菌、放线菌和乳酸菌的母种接种于一级培养基进行培养，获得一级菌种；分别将上述一级菌种接种于二级培养基进行培养，获得二级菌种；分别将上述二级菌种接种于发酵培养基进行培养，获得发酵菌液；将各发酵菌液按比例混匀即得。
康宁木霉菌
常规马铃薯加琼脂培养基，25-27℃培养24-48h。
二级培养基
去掉琼脂，25-27℃培养48-72h。
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。25-27℃培养2-5天。
枯草芽孢杆菌
一级培养
蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%，余量为水。PH 7-7.2，温度为28℃~35℃，培养时间5~7天。
二级培养：
一级培养基去掉琼脂，PH 7-7.2，温度为28℃~35℃，培养时间5~7天。
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。PH 7-7.2，温度为28℃~35℃，培养时间5~7天。
光合细菌
一级培养
PH6~10，温度26-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天
二级培养
培养条件同一级培养
三级培养
将二级培养菌种接种种子罐， PH7~8，温度26-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天；之后再接种于发酵罐培养2-3天，培养条件同上。
一级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。调节pH值7.1-7.2，发酵培养温度为28℃~35℃，培养时间20~24h；
二级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠、0.1%柠檬酸铁铵，余量为水。调节pH值，发酵培养温度为26℃~35℃，培养时间20~24h；
三级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。
放线菌
一级培养
培养基：蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%。PH6~8，温度28-32℃，时间5-7天。
二级培养
一级培养基去琼脂，培养条件同一级培养。
三级（发酵）培养：
培养基重量体积比：葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水，PH7.2-7.5，温度28-32℃，时间5-7天。
乳酸菌
一级培养：
培养基：蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%，余量为水。PH6~8，温度28-32℃，时间2-5天
二级培养
一级培养基去琼脂，培养条件同一级培养。
三级培养
将二级培养接种在种子罐中，条件同上。
培养基重量体积比：葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水，PH7.2-7.5温度28-32℃，时间5-7天。
本发明各组配比中，涉及液体者，为重量体积比；均为固体者，为重量比；均为液体者，为体积比，以方便操作。
本发明所述的微生物发酵液可以加入吸附剂、赋形剂，低温干燥，制成固体菌剂。
本发明制备的肥料，可以提高肥料的利用效率，并且还能够起到防治植物枯死、病害的作用。
试验例
1、试验方法和材料
观察患有生姜细菌性青枯病；兰花炭疽病；棉花赤霉病；水稻白叶枯病；花生青枯病；马铃薯软腐病；黄瓜角斑的植株各200株；实验组试验本发明实施例10制备的肥料，稀释40倍喷洒15天；对照组使用枯草芽孢杆菌制剂。实验组和对照组各100株，观察15天后治愈数（株），结果如下：
| 组别 | 生姜细菌性青枯病 | 兰花炭疽病 | 棉花赤霉病 | 水稻白叶枯病 | 花生青枯病 | 马铃薯软腐病 | 黄瓜角斑 |
| 对照组 | 61 | 63 | 66 | 71 | 67 | 61 | 65 |
| 实验组 | 88 | 85 | 84 | 93 | 91 | 75 | 86 |
2、结论
本发明的肥料较枯草芽孢杆菌制剂对上述植物疾病具有良好的治疗作用，可以用于防治上述疾病。
具体实施方式
实施例1
康宁木霉菌
常规马铃薯加琼脂培养基，25-27℃培养24-48h。
二级培养基
去掉琼脂，25-27℃培养48-72h。
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。25-27℃培养2-5天。
枯草芽孢杆菌
一级培养
蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%，余量为水。PH 7-7.2，温度为28℃~35℃，培养时间5~7天。
二级培养：
一级培养基去掉琼脂，PH 7-7.2，温度为28℃~35℃，培养时间5~7天。
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。PH 7-7.2，温度为28℃~35℃，培养时间5~7天。
实施例2
光合细菌
一级培养
PH6~10，温度26-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天
二级培养
培养条件同一级培养
三级培养
将二级培养菌种接种种子罐， PH7~8，温度26-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天；之后再接种于发酵罐培养2-3天，培养条件同上。
一级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。调节pH值7.1-7.2，发酵培养温度为28℃~35℃，培养时间20~24h；
二级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠、0.1%柠檬酸铁铵，余量为水。调节pH值，发酵培养温度为26℃~35℃，培养时间20~24h；
三级
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。
实施例3
放线菌
一级培养
培养基：蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%。PH6~8，温度28-32℃，时间5-7天。
二级培养
一级培养基去琼脂，培养条件同一级培养。
三级培养：
培养基重量体积比：葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水，PH7.2-7.5，温度28-32℃，时间5-7天。
实施例4
乳酸菌
一级培养：
培养基：蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%。PH6~8，温度28-32℃，时间2-5天
二级培养
一级培养基去琼脂，培养条件同一级培养。
三级培养
将二级培养接种在种子罐中，条件同上。
培养基重量体积比：葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水，PH7.2-7.5温度28-32℃，时间5-7天。
实施例5
将上述制备的微生物发酵液按下列体积比配制：
光合细菌：乳酸菌：放线菌：康宁木霉菌：枯草芽孢杆菌=1∶0.8~1∶1.2~1.4：0.6~0.8:1~1.2合。
优选的，光合细菌：乳酸菌：放线菌：康宁木霉菌：枯草芽孢杆菌=1∶1∶1.2：0.6: 1.2。
也可以按照以下比例进行配制：
光合细菌：乳酸菌：放线菌：康宁木霉菌：枯草芽孢杆菌=1∶0.81∶1.4： 0.8:1。
实施例6
将配制好的微生物组合物与其他原料按重量体积比进行配制即得：
有机质39%、玉米粉15%、骨粉4%、秸秆灰30%、硫酸钾1%、硫酸铵1%、微生物发酵液10%。
实施例7
将配制好的微生物组合物与其他原料按重量体积比进行配制即得：
有机质30%、玉米粉15%、骨粉8%、秸秆灰25%、硫酸钾5%、硫酸铵2%、微生物发酵液15%。
实施例8
将配制好的微生物组合物与其他原料按重量体积比进行配制即得：
有机质34%、玉米粉15%、骨粉6%、秸秆灰28%、硫酸钾3%、硫酸铵2%、微生物发酵液12%。
实施例9
将配制好的微生物组合物与其他原料按重量体积比进行配制即得：
有机质35%、玉米粉14%、骨粉7%、秸秆灰26%、硫酸钾4%、硫酸铵1%、微生物发酵液13%。
Claims (8)
1.一种微生物肥料，包含下列比例的微生物发酵液：光合细菌、乳酸菌、放线菌、康宁木霉菌、枯草芽孢杆菌发酵液体积比为1∶0.8~1∶1.2~1.4：0.6~0.8:1~1.2。
2.根据权利要求1所述的肥料，其特征在于，所述的微生物发酵液体积比为：光合细菌：乳酸菌：放线菌：康宁木霉菌：枯草芽孢杆菌=1∶1∶1.2：0.6: 1.2。
3.根据权利1或2所述的肥料，其特征在于，所述的肥料含下列重量体积比的原料：
有机质30-40%、玉米粉10-15%、骨粉4-8%、秸秆灰20-30%、硫酸钾1-5%、硫酸铵1-2%、微生物发酵液10-15%。
4.根据权利要求1或2所述的肥料，其特征在于，所述的康宁木霉菌培养为：
一级培养
常规马铃薯加琼脂培养基，25-27℃培养24-48h；
二级培养基
去掉琼脂，25-27℃培养48-72h；
三级培养
培养基成分为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水，25-27℃培养2-5天。
5. 根据权利要求1或2所述的肥料，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌培养为：
一级培养
蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%，余量为水，PH 7-7.2，温度为28℃~35℃，培养时间5~7天；
二级培养：
一级培养基去掉琼脂，PH 7-7.2，温度为28℃~35℃，培养时间5~7天；
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水，PH 7-7.2，温度为28℃~35℃，培养时间5~7天。
6.根据权利要求1或2所述的肥料，其特征在于，所述的光合细菌培养为：
一级培养
PH6~10，温度26-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天；
二级培养
培养条件同一级培养；
三级培养
将二级培养菌种接种种子罐， PH7~8，温度26-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天；之后再接种于发酵罐培养2-3天，培养条件同上；
一级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水；
调节pH值7.1-7.2，发酵培养温度为28℃~35℃，培养时间20~24h；
二级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠、0.1%柠檬酸铁铵，余量为水，调节pH值，发酵培养温度为26℃~35℃，培养时间20~24h；
三级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。
7.根据权利要求1或2所述的肥料，其特征在于，所述的放线菌培养为：
一级培养
培养基：蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%，
PH6~8，温度28-32℃，时间5-7天；
二级培养
一级培养基去琼脂，培养条件同一级培养；
三级培养
培养基重量体积比：葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水，PH7.2-7.5，温度28-32℃，时间5-7天。
8.根据权利要求1或2所述的肥料，其特征在于，所述的乳酸菌培养为：
一级培养
培养基：蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%，余量为水，PH6~8，温度28-32℃，时间2-5天；
二级培养
一级培养基去琼脂，培养条件同一级培养；
三级培养
培养基重量体积比：葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水；
将二级培养接种在种子罐中，PH7.2-7.5温度28-32℃，时间5-7天。
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