CN101088966A - 一种微生物肥料及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种微生物肥料，由光合细菌、芽孢杆菌、放线菌和乳酸菌的发酵菌液按比例混合而成。本发明还涉及该微生物肥料的制备方法，包括分别将光合细菌、芽孢杆菌、放线菌和乳酸菌的母种接种于一级培养基进行培养，获得一级菌种；分别将上述一级菌种接种于二级培养基进行培养，获得二级菌种；分别将上述二级菌种接种于发酵培养基进行培养，获得发酵菌液；将各发酵菌液按比例混匀即得。本发明还涉及所述微生物肥料在制备治疗烟草黑颈病、树木干枯、死亡、冻害和病害中的应用及其使用方法。本发明微生物肥料可以延缓烟草黑颈病病菌的扩散，真正实现了以菌治菌的生物防治理念，是一项非常经济有效的增产措施的微生物肥料。
Description
技术领域
本发明属于肥料领域，具体涉及一种微生物肥料及其制备方法和应用。
背景技术
烟草黑颈病，由鞭毛菌亚门疫霉属的真菌侵染引起。该真菌喜欢高温多湿，菌丝生长最适温度为28～32℃。苗期发生较少，主要危害大田成株，根茎叶均可发病。有人称之为“打地症”。发病时有以下几种表现形式，其一是“穿大褂”：茎部受害后向髓部扩展，白天萎蔫。第二种情况是“黑颈”：病菌从根部或茎基部侵染，导致根部和茎基部出现黑褐色坏死斑，地上部分萎黄枯死。第三种情况是“黑膏药”：根部发病后变黑，在多雨潮湿时，中下部叶片常产生黑褐色坏死斑，直径可达4～5厘米。
现有技术中根本没有能够根治此病的方法，一般均为采用杀菌消毒溶剂喷施，结果破坏了烟草生长环境中的菌群平衡，不仅没有起到治疗的效果，反而影响了烟草的对有效营养成分的吸收，加速了烟草的死亡。由于一般杀菌剂原料为化学合成成分，在喷施后容易对环境造成破坏，环境破坏后不易轻易治理。
发明内容
本发明的目的是提供一种微生物肥料。
本发明的目的还在于提供该微生物肥料的制备方法。
本发明的目的还在于提供该微生物肥料制备治疗烟草黑颈病肥料中的应用。
本发明的目的还在于提供该微生物肥料制备治疗树木干枯、死亡、冻害和病害肥料中的应用。
本发明的目的还在于提供该微生物肥料的使用方法。
本发明提供了一种微生物肥料，是由光合细菌、芽孢杆菌、放线菌和乳酸菌的发酵菌液混合而成。其中，所述各发酵菌液的体积按体积份计优选为：放线菌发酵液1～10，光合细菌发酵液1～10，芽孢杆菌发酵液1～20，乳酸菌发酵液1～10。
各种发酵菌液中单位有效活菌数不低于5亿/毫升。其中所述光合细菌优选为沼泽红假单孢菌(Rhodopseudomonaspalustris)和/或类球红细菌(Rhodbacter sphaeroides)；所述芽孢杆菌优选为下列组分的一种或多种：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、腊样芽孢杆菌(Bacillus cereus)或胶质芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)；所述放线菌优选为泾阳链霉菌(Streptomycesjingyangesis)；所述乳酸菌优选为植物乳酸菌(Lactobacillusplantarum)和/或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)。
本发明还提供了所述微生物肥料的制备方法。该制备方法包括下述步骤：
(1)分别将光合细菌、芽孢杆菌、放线菌和乳酸菌的母种接种于一级培养基进行培养，获得一级菌种；
(2)分别将光合细菌、芽孢杆菌、放线菌的一级菌种接种于二级培养基进行培养，获得二级菌种；
(3)分别将光合细菌、芽孢杆菌、放线菌的二级菌种接种于发酵培养基进行培养，获得发酵菌液；
(4)将各发酵菌液按比例混匀即得。
所述步骤(1)中光合细菌一级培养时接种量优选为20％～50％，培养pH优选为6～10，培养温度优选为28～36℃，光照强度优选为3000～4000勒克斯，培养时间优选为7～10天；芽孢杆菌一级培养时接种量优选为5％～15％，培养pH优选为6～8，培养温度优选为28～34℃，培养时间优选为2～3天；放线菌一级培养时接种量优选为10％～50％，培养pH优选为6～8，培养温度优选为27～32℃，培养时间优选为5～7天；乳酸菌一级培养时接种量优选为5％～20％，培养pH优选为6～8，培养温度优选为28～34℃，培养时间优选为2～5 。
所述步骤(2)中光合细菌二级培养优选为间歇式通气培养，接种量优选为20％～50％，培养pH优选为6～10，培养温度优选为28～36℃，光照强度优选为3000～4000勒克斯，培养时间优选为7～10天；芽孢杆菌二级培养优选为通气培养，接种量优选为5％～15％，培养pH优选为6～8，培养温度优选为28～32℃，培养时间优选为2～5天；放线菌二级培养优选为通气培养，接种量优选为20％～50％，培养pH优选为6～8，培养温度优选为27～32℃，培养时间优选为5～7天；乳酸菌二级培养优选为不通气培养，接种量优选为5％～20％，培养pH优选为6～8，培养温度优选为28～34℃，培养时间优选为2～5天。
所述步骤(3)中光合细菌发酵培养优选为间歇式通气培养，将二级菌种接种于500L种子罐，接种量优选为20％～50％，培养pH优选为7～8，培养温度优选为28～36℃，光照强度优选为3000～4000勒克斯，培养时间优选为7～10天，之后接种于2吨发酵罐，接种量优选为20％～50％，培养pH优选为7～8，培养温度优选为28～36℃，光照强度优选为3000～4000勒克斯，培养时间优选为7～10天；芽孢杆菌发酵培养优选为通气培养，将二级菌种接种于200L种子罐，接种量优选为5％～15％，培养pH优选为6～8，培养温度优选为28～32℃，培养时间优选为2～3天，之后接种于2吨发酵罐，接种量优选为20％～50％，培养pH优选为7～8，培养温度优选为28～36℃，培养时间优选为2～3天；放线菌发酵培养优选为通气培养，将二级菌种接种于500mL种子罐，接种量优选为20％～50％，培养pH优选为6～8，培养温度优选为27～32℃，培养时间优选为5～7天之后接种于2吨发酵罐，接种量优选为20％～50％，培养pH优选7～8，培养温度优选为28～36℃，培养时间优选为7～10天；乳酸菌发酵培养为不通气培养，将二级菌种接种于200L种子罐，接种量优选为5％～20％，培养pH优选为6～8，培养温度优选为28～32℃，培养时间优选为2～3天，之后接种于2吨发酵罐，接种量优选为5％～20％，培养pH优选为7～8，培养温度优选为28～36℃，培养时间优选为2～3天。
本发明还提供了所述微生物肥料在制备治疗烟草黑颈病肥料中的应用。
本发明还提供了所述微生物肥料在制备治疗树木干枯、死亡、冻害和病害肥料中的应用。
本发明还提供了所述微生物肥料的使用方法，其特征在于在烟草、大棚作物浸种、育苗期和生长期或树木浸根时按比例加入所述微生物肥料，喷施与灌根同时使用。
本发明所述微生物肥料提供一种可以延缓烟草黑颈病病菌的扩散，真正实现了“以菌治菌”的生物防治理念；对蔬菜和大田作物的种子进行浸种催芽后，可以快速打破种子休眠、促进种子发芽、增强种子抗性，为保证全苗、壮苗打下了坚实的基础，同时对于防治病害、抑制虫害的发生、提高作物的抗性等起到了很好的效果，是一项经济有效增产措施的微生物肥料。施入本发明后，可以解磷解钾固氮，并化土壤中的微量元素，可产生多种植物调解剂，极大改变作物微循环状态，促进对养份的吸收与转化，增强光合作用，加速细胞分裂速率，加快细胞膨大，促进生长，提高产量，改善品质，同时具有杀菌抑虫功效，对于常见的细菌、真菌病均有效果。本发明的微生物肥料，技术水平已达到国际先进水平，是由多种有益活性微生物经过科学配比，共同复合而成，真正达到了多效性，单位有效活菌数不低于20亿/毫升，远远超过国家标准。
有益技术效果体现在如下几个方面：
一、攻克烟草黑颈病技术难关
本发明中的微生物肥料应用在攻克烟草黑颈病技术上及浸种应用技术上效果十分明显，见图4。其中中央为本发明有效菌，其周围为黑颈病，在本发明有效菌周围可观察到明显的抑菌圈，在抑菌圈内，黑颈病菌无法正常生长繁殖，相反无抑菌圈的地方，菌丝长得多而密。观察中央和侧面一大一小两块有益菌菌苔均呈现同样现象，充分说明本发明有效菌对黑颈病菌起到了明显的抑制作用。
二、提高种子发芽率、出苗整齐，抑制病害、虫害的发生，防止土传病害。该微生物肥料对蔬菜和大田作物的种子进行浸种催芽后，可以快速打破种子休眠、促进种子发芽、增强种子抗性，为保证全苗、壮苗打下了坚实的基础，同时对于防治病害、抑制虫害的发生、提高作物的抗性等起到了很好的效果，是一项经济有效增产措施的微生物肥料。
播种前应用此发明专利对蔬菜或大田作物的种子进行浸种催芽后，可以快速打破种子休眠、促进种子发芽、增强种子抗性，为保证全苗、壮苗打下了坚实的基础，同时对于防治病害、抑制虫害的发生、提高作物的抗性等起到了很好的效果，是一项非常经济有效的增产措施。
蔬菜种子如黄瓜、番茄、叶菜等应用此发明50倍稀释液浸泡2～5个小时，然后进行催芽10～20个小时，发芽率提高，发芽势强，2～3天可以全苗，而且全齐均壮，无猝倒病、立枯病等发生，抗寒耐旱能力增强。
大田栽培中，同样表现出了很好的效果。棉花种植前，应用此发明对种子进行50倍稀释液浸种催芽后，苗出的全，无大小苗现象，苗壮，无猝倒病、枯黄萎病的发生，对于解决重茬有明显的效果，后期每亩单产增加50～100斤。水稻浸种以后，秧苗素质好，无病发生，生长期提前，后期生长中分蘖能力强，小穗多，籽实饱满，产量明显增加，增产幅度在20％以上。
三、增加了树木移栽的成活率，对干枯、接近死亡的树木进行灌根和叶喷处理，起到了起死回生的效果。
附图说明
图1微生物菌液生产工艺流程图。
图2-1施用本发明微生物肥料前烟叶窄长、发黄、长势不健康。
图2-2施用本发明微生物肥料后烟叶宽厚、叶色正绿、长势健康。
图3-1施用本发明微生物肥料前根部为黑色，黑颈病态。
图3-2施用本发明微生物肥料后根部为白色，恢复正常。
图4本发明微生物肥料对黑颈病菌的抑制效果。
图5-1施用本发明微生物肥料后出苗率高、苗齐、苗壮、苗高、叶片厚，叶色深绿。
图5-2未施用本发明微生物肥料出苗率明显低于施用本发明，且苗参差不齐、矮小、叶片发黄。
图6-1为施用本发明微生物肥料后：叶片宽大、叶色深绿，瓜蔓长，提前进入花期。
图6-2为未施用本发明微生物肥料：叶色黄绿、叶片和植株较使用本发明微生物肥料的作物小。
图7-1为施用本发明之前，整个植株有70％以上干枯、发黄、树体接近死亡。
图7-2为使用本发明半月后，树稍长出了新叶，且原本黄叶底部2-3cm处长变为绿色的新叶，整个植株呈现恢复正常生长状态。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
其中，光合细菌一级培养基为：MgSO4·7H2O 0.2g、(NH4)2SO41.0g、NaHCO3 5.0g、K2HP04 0.5g、NaCl 0.2g、蛋白胨1.5g；将各成分溶于400ml蒸馏水中，用H3PO4和Na2CO3调pH 7.1，再加入蒸馏水至1000ml，115℃灭菌10分钟。二级培养基为：醋酸钠3g、NaCl 0.1g、(NH4)2SO4 0.3g、MgSO4 0.2g、KH2PO3 0.5g、K2HPO3 0.3g、柠檬酸铁铵7ml、蛋白胨1.2g、蒸馏水定容至1000ml，用H3PO4和Na2CO3调pH为7.2。发酵培养基为：醋酸钠2.6g、NaCl 0.07g、(NH4)2SO4 0.25g、MgSO4 0.16g、KH2PO3 0.38g、K2HPO3 0.25g、柠檬酸铁铵5ml、蛋白胨1.0g、水定容至1000ml、用H3PO4和Na2CO3调pH为7.1～7.2。
芽胞杆菌一级培养基为：牛肉膏0.3％、蛋白胨1.0％、氯化钠0.5％、蒸馏水定容至1000ml，pH 7.0。二级培养基为：牛肉膏1.0％、蛋白胨1.0％、氯化钠0.5％、琼脂2.0％、蒸馏水定容至1000ml，pH7.0。发酵培养基为：淀粉0.3％、蔗糖0.5％、30.8mg/Kg硫酸锰溶液0.2％、磷酸氢二钾0.3％、磷酸二氢钾0.15％、豆粕3.0％，水补足100％，pH7.0。
放线菌一级培养基为：硝酸钾1克，可溶性淀粉20克，磷酸氢二钾0.5克，硫酸镁0.5克，氯化钠0.5克，硫酸亚铁0.01克，琼脂20克，蒸馏水补足1000ml，pH7.2～7.4。二级培养基为硝酸钾0.8克，可溶性淀粉8克，葡萄糖5克，酵母汁5克，磷酸氢二钾0.3克，硫酸镁0.2克，氯化钠0.4克，硫酸亚铁0.05克，水补足1000ml，pH7.2～7.4。发酵培养基为：葡萄糖1％，酵母汁1％，磷酸氢二钾0.015％，氯化钠0.02％，硫酸亚铁0.003％，水补足100％，pH7.2～7.5。
乳酸菌一级培养基为：硝酸钾1克，可溶性淀粉10克，磷酸氢二钾0.5克，硫酸镁0.5克，氯化钠0.5克，硫酸亚铁0.01克，琼脂20克，蒸馏水补足1000ml，pH7.2～7.4。二级培养基为：硝酸钾0.8克，可溶性淀粉8克，葡萄糖5克，酵母汁5克，磷酸氢二钾0.3克，硫酸镁0.2克，氯化钠0.4克，硫酸亚铁0.05克，水补足1000ml，pH7.2～7.4。发酵培养基为：葡萄糖1％，酵母汁1％，磷酸氢二钾0.015％，氯化钠0.02％，硫酸亚铁0.003％，水补足100％，pH7.2～7.5。
实施例1
各发酵菌液的生产条件见表1。
其中，光合细菌沼泽红假单孢菌培养过程中光照强度为3000勒克斯。
表1
| 培养过程 | 菌种 | ||||
| 沼泽红假单孢菌枯草芽孢杆菌泾阳链霉菌嗜酸乳杆菌 | |||||
| 一级培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 206327 | 157283 | 108325 | 56283 |
| 二级培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 358287 | 56302 | 208325 | 207282 |
| 种子罐培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 207287 | 157283 | 508325 | 56283 |
| 发酵罐培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 508367 | 207283 | 208327 | 127323 |
取四种发酵好的并且检验合格的菌液体积按体积份计沼泽红假单孢菌150升，枯草芽孢杆菌150升，泾阳链霉菌700升，嗜酸乳杆菌150升，打入储液罐，将储液罐的菌液混合均匀后即为成品。
实施例2
各发酵菌液的生产条件见表2。
其中，光合细菌类球红细菌培养过程中光照强度为4000勒克斯。
表2
| 培养过程 | 菌种 |
| 类球红细菌腊样芽孢杆菌泾阳链霉菌植物乳杆菌 |
| 一级培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 50102810 | 56312 | 506276 | 127345 |
| 二级培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 2063610 | 158285 | 507276 | 56345 |
| 种子罐培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 5083610 | 56322 | 206276 | 207302 |
| 发酵罐培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 2072810 | 508362 | 5072810 | 58282 |
取四种发酵好的并且检验合格的菌液体积按体积份计沼泽红假单孢菌100升，枯草芽孢杆菌100升，泾阳链霉菌2000升，嗜酸乳杆菌100升，打入储液罐，将储液罐的菌液混合均匀后即为成品。
实施例3
各发酵菌液的生产条件见表3。
其中，光合细菌沼泽红假单孢菌培养过程中光照强度为3500勒克斯。
表3
| 培养过程 | 菌种 | ||||
| 沼泽红假单孢菌胶质芽孢杆菌泾阳链霉菌嗜酸乳杆菌 | |||||
| 一级培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 358369 | 88343 | 307307 | 208312 |
| 二级 | 接种量(％) | 50 | 10 | 35 | 12 |
| 培养 | pH温度(℃)培养时间(天) | 10329 | 7323 | 6325 | 8313 |
| 种子罐培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 357328 | 108303 | 357297 | 128323 |
| 发酵罐培养 | 接种量(％)pH温度(℃)培养时间(天) | 508328 | 357323 | 358369 | 207363 |
取四种发酵好的并且检验合格的菌液体积按体积份计沼泽红假单孢菌1000升，枯草芽孢杆菌1000升，泾阳链霉菌100升，嗜酸乳杆菌1000升，打入储液罐，将储液罐的菌液混合均匀后即为成品。
实施例4
按照实施例1中的方法制得菌液，取四种发酵好的并且检验合格的菌液体积按体积份计沼泽红假单孢菌500升，枯草芽孢杆菌500升，泾阳链霉菌1000升，嗜酸乳杆菌500升，打入储液罐，将储液罐的菌液混合均匀后即为成品。
实施例5
按照实施例1中的方法制得菌液，取四种发酵好的并且检验合格的菌液体积按体积份计沼泽红假单孢菌300升，枯草芽孢杆菌300升，泾阳链霉菌1500升，嗜酸乳杆菌300升，打入储液罐，将储液罐的菌液混合均匀后即为成品。
实施例6
按照实施例1中的方法制得菌液，取四种发酵好的并且检验合格的菌液体积按体积份计沼泽红假单孢菌800升，枯草芽孢杆菌800升，泾阳链霉菌1200升，嗜酸乳杆菌800升，打入储液罐，将储液罐的菌液混合均匀后即为成品。
实施例7
本发明进一步公开了所述微生物肥料在攻克烟草黑颈病技术上及浸种应用技术上的使用方法。
浸种时用50倍稀释液浸2-6小时，叶面喷施每次300倍稀释进行喷洒，整个生长期喷3次以上，每亩用2000毫升的稀释液灌根，可提高种子的发芽率，增强种子抗性，为保证全苗、壮苗打下了坚实的基础，同时对于防治病害、抑制虫害的发生、提高作物的抗性等起到了很好的效果，有效防止烟草黑颈病的发生。
实验例1：攻克烟草黑颈病技术难关
2005年6月，全国白色农业示范基地贵州省遵义市凤冈县何坝乡种植的大面积烤烟发生了黑颈病，造成了减产，有的地块甚至绝收。为此，专门针对此种情况进行试验示范：通过应用此发明微生物肥料进行灌根，并同时进行叶面喷洒，个别严重的进行了根部注射，半个月后发现，具有明显的效果，有效控制达70％以上，而且生长良好(见图2-1、图2-2、图3-1、图3-2)。为了更进一步验证此发明的效果，我们对处理过的病根进行了实验室内病理分析，结果是：此发明微生物肥料可以明显延缓黑颈病病菌的扩散(见图4)，凡是有此发明分布的地方，黑颈病菌呈溢缩状态，真正实现了以菌制菌的生物防治理念。
实验例2：提高种子发芽率、出苗整齐，抑制病害、虫害的发生，防止土传病害。
河北省固安县东塘洋村于春元家(黄瓜种植户)，2005年12月21日播种。播种前，用此发明微生物肥料50倍稀释液浸种，然后催芽20小时，两天苗出齐，苗壮，没有得猝倒病，后期没有用地热线加温，但是黄瓜苗长势特别好，而其他家没有应用此发明微生物肥料浸种的，出苗不整齐，苗弱，死苗的特别多。同村的牛树昆家的同样如此，并且生长期间因使用多菌灵造成药害的情下，三天内应用此发明微生物肥料喷两次后，使药害得到有效控制，挽救成活率达90％，充分说明了此发明微生物肥料不但可以促进作物生长，还可以分解农残，降解药害。山东沾化富国镇黄瓜种植户通过应用此发明微生物肥料浸种后发现，出苗快，长势快，提前10天左右，而且苗床杂草少，病虫害如根结线虫等明显减轻(见图5-1、图5-2)。
贵州省凤冈县新建乡使用此发明肥料对西葫芦苗进行喷洒，施用后的示范组叶片大而绿且表面无病斑，叶脉清晰，瓜秧大而健壮，光合作用强，开花多，生长速度快；未使用本发明微生物肥料的对照组，出苗弱，叶面积小而枯黄，瓜秧小，不健壮，发病机率高于示范组(见图6-1、图6-2)。
Claims (10)
1、一种微生物肥料，其特征在于，是由光合细菌、芽孢杆菌、放线菌和乳酸菌的发酵菌液混合而成。
2、根据权利要求1所述的微生物肥料，其特征在于，所述各发酵菌液的体积按体积份计为：放线菌发酵液1～10，光合细菌发酵液1～10，芽孢杆菌发酵液1～20，乳酸菌发酵液1～10。
3、根据权利要求1或2所述的微生物肥料，其特征在于，所述光合细菌为沼泽红假单孢菌和/或类球红细菌；所述芽孢杆菌为下列组分的一种或多种：枯草芽孢杆菌、腊样芽孢杆菌或胶质芽孢杆菌；所述放线菌为泾阳链霉菌；所述乳酸菌为植物乳酸菌和/或嗜酸乳杆菌。
4、一种权利要求1～3任一所述微生物肥料的制备方法，该方法包括下述步骤：
(1)分别将光合细菌、芽孢杆菌、放线菌和乳酸菌的母种接种于一级培养基进行培养，获得一级菌种；
(2)分别将上述一级菌种接种于二级培养基进行培养，获得二级菌种；
(3)分别将上述二级菌种接种于发酵培养基进行培养，获得发酵菌液；
(4)将各发酵菌液按比例混匀。
5、根据权利要求4所述的微生物肥料的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中光合细菌一级培养时接种量20％～50％，培养pH6～10，培养温度28～36℃，光照强度3000～4000勒克斯，培养时间7～10天；芽孢杆菌一级培养时接种量5％～15％，培养pH6～8，培养温度28～34℃，培养时间2～3天；放线菌一级培养时接种量10％～50％，培养pH6～8，培养温度27～32℃，培养时间5～7天；乳酸菌一级培养时接种量5％～20％，培养pH6～8，培养温度28～34℃，培养时间2～5天。
6、根据权利要求4所述的微生物肥料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中光合细菌二级培养为间歇式通气培养，接种量20％～50％，培养pH6～10，培养温度28～36℃，光照强度3000～4000勒克斯，培养时间7～10天；芽孢杆菌二级培养为通气培养，接种量5％～15％，培养pH6～8，培养温度28～32℃，培养时间2～5天；放线菌二级培养为通气培养，接种量20％～50％，培养pH6～8，培养温度27～32℃，培养时间5～7天；乳酸菌二级培养为不通气培养，接种量5％～20％，培养pH6～8，培养温度28～34℃，培养时间2～5天。
7、根据权利要求4所述的微生物肥料的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中光合细菌发酵培养为间歇式通气培养，将二级菌种接种于500L种子罐，接种量20％～50％，培养pH7～8，培养温度28～36℃，光照强度3000～4000勒克斯，培养时间7～10天，之后接种于2吨发酵罐，接种量20％～50％，培养pH7～8，培养温度28～36℃，光照强度3000～4000勒克斯，培养时间7～10天；芽孢杆菌发酵培养为通气培养，将二级菌种接种于200L种子罐，接种量5％～15％，培养pH6～8，培养温度28～32℃，培养时间2～3天，之后接种于2吨发酵罐，接种量20％～50％，培养pH7～8，培养温度28～36℃，培养时间2～3天；放线菌发酵培养为通气培养，将二级菌种接种于500mL种子罐，接种量20％～50％，培养pH6～8，培养温度27～32℃，培养时间5～7天之后接种于2吨发酵罐，接种量20％～50％，培养pH7～8，培养温度28～36℃，培养时间7～10天；乳酸菌发酵培养为不通气培养，将二级菌种接种于200L种子罐，接种量5％～20％，培养pH6～8，培养温度28～32℃，培养时间2～3天，之后接种于2吨发酵罐，接种量5％～20％，培养pH7～8，培养温度28～36℃，培养时间2～3天。
8、权利要求1～3任一所述的微生物肥料在制备治疗烟草黑颈病肥料中的应用。
9、权利要求1～3任一所述的微生物肥料在制备治疗树木干枯、死亡、冻害和病害肥料中的应用。
10、一种权利要求1～3任一所述的微生物肥料的使用方法，其特征在于在烟草、大棚作物浸种、育苗期和生长期或树木浸根时按比例加入所述微生物肥料，喷施与灌根同时使用。
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