CN102531716B - 一种含有固氮菌的微生物肥料 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种微生物肥料，由下列体积百分比的微生物发酵液组成：所述的微生物为光合细菌、褐色球形固氮菌、解磷巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、放线菌、乳酸菌；所述的微生物发酵液体积比为：1-15：2-10：5-9：1-8：2-10：3-8。本发明所述的微生物肥料，除具有固氮、解磷、提高育苗成活率、种子的发芽率外，同时还能够有效的预防病虫害、提高植物的抗病能力。
Description
技术领域
本发明涉及一种微生物肥料，属于种植领域。
背景技术
微生物肥料是以微生物的生命活动导致作物得到特定肥料效应的一种制品，是农业生产中使用肥料的一种。其在中国已有近50年的历史。微生物肥料是活体肥料，它的作用主要靠它含有的大量有益微生物的生命活动来完成。只有当这些有益微生物的生命活动来完成。只有当这些有益微生物处于旺盛的繁殖和新陈代谢的情况下，物质转化和有益代谢产物才能不断形成。因此，微生物肥料中有益微生物的种类、生命活动是否旺盛是其有效性的基础，而不像其它肥料是以氮、磷、钾等主要元素的形式和多少为基础。正因为微生物肥料是活制剂，所以其肥效与活菌数量、强度及周围环境条件密切相关，包括温度、水分、酸碱度、营养条件及原生活在土壤中土著微生物排斥作用都有一定影响。随着化肥的大量使用，其利用率不断降低已是众所周知的事实。这说明，仅靠大量增施化肥来提高作物产量是有限的，更何况还有污染环境等一系列的问题。为此各国科学家一直在努力探索提高化肥利用率达到平衡施肥、合理施肥以克服其弊端的途径。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有抗病能力的微生物肥料。
为达到上述目的，本发明所述的肥料各种微生物菌种为：
光合细菌（photosynthetic bacteria）、褐色球形固氮菌（Azotobacter chroococcum）、解磷巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium phosphaticum)和胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mecilaginosus)、放线菌（Actinomycete）和乳酸菌（Lactobacillus）；
所述的微生物肥料由上述微生物发酵液按下列体积百分比配制而成：
1-15：2-10：5-9：1-8：2-10：3-8
优选的，微生物发酵液体积比为：3-10：4-8：6-8：3-7：4-8：4-6；
进一步优选的，微生物发酵液体积比为：4：6：6：6：5：5。
所述的光合细菌选自沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）、加墨红假单胞菌（Rhodopseudomonas capsulatus）或球形红假单胞菌（Rhodopseudomonas sphaeroides）中的任意一种或几种。
所述的放线菌优选为诺卡氏菌属（Nocardia）。所述的乳酸菌优选为植物乳酸菌（Lactobacillus plantarum）。
微生物肥料的制备方法，包括分别将光合细菌、褐色球形固氮菌（Azotobacter chroococcum）、解磷巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium phosphaticum))和胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mecilaginosus)、放线菌和乳酸菌的母种接种于一级培养基进行培养，获得一级菌种；分别将上述一级菌种接种于二级培养基进行培养，获得二级菌种；分别将上述二级菌种接种于发酵培养基进行培养，获得发酵菌液；将各发酵菌液按比例混匀即得。
褐色球形固氮菌
一级培养
蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，琼脂3%。PH 7-7.2，25-27℃培养2-3天。
二级培养基
一级去掉琼脂，25-27℃培养3-5天。
三级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。25-27℃培养3-5天。
解磷巨大芽孢杆菌
一级培养
常规马铃薯加琼脂培养基，25-27℃培养2-3天。
二级培养
去掉琼脂，25-27℃培养3-5天。
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。25-27℃培养5-7天。
胶冻样芽孢杆菌
一级培养
蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%，余量为水。25-27℃培养2-3天。
二级培养：
一级培养基去掉琼脂，25-27℃培养3-5天。
三级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠。调pH值，将二级培养菌种接种在种子罐中，25-27℃培养5-7天。
光合细菌
一级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水；
PH6~10，温度28-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天。
二级培养
一级培养基加0.1%柠檬酸铁铵，发酵培养温度为28℃~35℃，培养时间5-7天；
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水；
将二级培养菌种接种种子罐， PH7~8，温度26-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天；之后再接种于发酵罐培养2-3天，培养条件同上。
放线菌
一级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，调pH值，温度28-32℃，时间5-7天。
二级培养基去琼脂
一级培养基加0.1%柠檬酸铁铵，培养条件同一级培养。
三级（发酵）培养基：
葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水。调pH值，将二级培养菌种接种在种子罐中，温度28-32℃，时间5-7天。
乳酸菌
一级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，PH6~8，温度28-32℃，时间2-5天。
二级培养
一级培养基加0.1%柠檬酸铁铵，培养条件同一级培养。
三级培养
将二级培养菌种接种在种子罐中，温度28-32℃，时间5-7天。
培养基：葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水。
本发明细菌培养未记载事项，均以现有技术的手段进行。
本发明的发酵液中也可以加入吸附剂、赋形剂，低温干燥，制成固体菌剂。
本发明所述的微生物肥料，除具有固氮、解磷、提高育苗成活率、种子的发芽率外，同时还能够有效的预防病虫害、提高植物的抗病能力。对棉花黄萎、黑根腐、炭疽病、赤霉病；玉米全蚀病；水稻白叶枯病；花生青枯病；马铃薯软腐病；黄瓜角斑；青椒疮痂具有显著的效果。
试验例
1、试验方法和材料
观察患有棉花黄萎、黑根腐、炭疽病、赤霉病；玉米全蚀病；水稻白叶枯病；花生青枯病；马铃薯软腐病；黄瓜角斑；青椒疮痂的植株各200株；实验组试验本发明实施例10制备的肥料，稀释40倍喷洒15天；对照组使用多粘芽孢杆菌制剂。实验组和对照组各100株，观察15天后治愈数（株），结果如下：
| 组别 | 棉花黄萎 | 棉花黑根腐 | 棉花炭疽病 | 棉花赤霉病 | 玉米全蚀病 | 水稻白叶枯病 | 花生青枯病 | 马铃薯软腐病 | 黄瓜角斑 | 青椒疮痂 |
| 对照组 | 64 | 67 | 61 | 69 | 49 | 71 | 70 | 60 | 62 | 71 |
| 实验组 | 87 | 83 | 78 | 86 | 67 | 95 | 93 | 79 | 89 | 91 |
2、结论
本发明的肥料较多粘芽孢杆菌制剂对上述植物疾病具有良好的治疗作用，可以用于防治上述疾病。
具体实施方式
实施例1
褐色球形固氮菌培养基：
一级培养
蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，琼脂3%。PH 7-7.2，25-27℃培养2-3天。
二级培养基
一级去掉琼脂，25-27℃培养3-5天。
三级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水。25-27℃培养3-5天。
实施例2
胶冻样芽孢杆菌
一级培养
蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%，余量为水。25-27℃培养2-3天。
二级培养：
一级培养基去掉琼脂，25-27℃培养3-5天。
三级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠。调pH值，将二级培养菌种接种在种子罐中，25-27℃培养5-7天。
实施例3
光合细菌
一级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水；
PH6~10，温度28-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天。
二级培养
一级培养基加0.1%柠檬酸铁铵，发酵培养温度为28℃~35℃，培养时间5-7天；
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水；
将二级培养菌种接种种子罐， PH7~8，温度26-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天；之后再接种于发酵罐培养2-3天，培养条件同上。
实施例4
放线菌
一级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，调pH值，温度28-32℃，时间5-7天。
二级培养
一级培养基加0.1%柠檬酸铁铵，培养条件同一级培养。
三级培养基：
葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水。调pH值，将二级培养菌种接种在种子罐中，温度28-32℃，时间5-7天。
实施例5
乳酸菌
一级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，PH6~8，温度28-32℃，时间2-5天。
二级培养
一级培养基加0.1%柠檬酸铁铵，培养条件同一级培养。
三级培养
将二级培养菌种接种在种子罐中，温度28-32℃，时间5-7天。
培养基：葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水。
实施例6
将制备的细菌按照下列比例配制：
上述微生物发酵液体积比为：1：2：5：1：2：3。
实施例7
将制备的细菌按照下列比例配制：
微生物发酵液体积比为：15： 10： 9： 8： 10：8
实施例8
将制备的细菌按照下列比例配制：
微生物发酵液体积比为：3：4：6：3：4：4。
实施例9
将制备的细菌按照下列比例配制：
微生物发酵液体积比为： 10： 8： 8： 7： 8： 6。
实施例10
将制备的细菌按照下列比例配制：
微生物发酵液体积比为：4：6：6：6：5：5。
Claims (3)
1.一种微生物肥料，由下列体积百分比的微生物发酵液组成：
所述的微生物为光合细菌、褐色球形固氮菌、解磷巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、放线菌、乳酸菌；所述的微生物发酵液体积比为：4：6：6：6：5：5；
所述光合细菌培养方法如下：
一级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水；
pH6~10，温度28-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天；
二级培养
一级培养基加0.1%柠檬酸铁铵，发酵培养温度为28℃~35℃，培养时间5-7天；
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水；
将二级培养菌种接种种子罐， pH7~8，温度26-35℃，光照强度3000-4000勒克斯，时间6-8天；之后再接种于发酵罐培养2-3天，培养条件同上；
所述的褐色球形固氮菌培养方法如下：
一级培养
蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，琼脂3%，pH 7-7.2，25-27℃培养2-3天；
二级培养
一级去掉琼脂，25-27℃培养3-5天；
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水，25-27℃培养3-5天；
所述解磷巨大芽孢杆菌培养方法如下：
一级培养
常规马铃薯加琼脂培养基，25-27℃培养2-3天；
二级培养
去掉琼脂，25-27℃培养3-5天；
三级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，余量为水，25-27℃培养5-7天；
所述胶冻样芽孢杆菌培养方法如下：
一级培养
蔗糖1.5%，磷酸二氢钾0.05%，碳酸钙0.05%，硫酸镁0.05%，氯化钠0.02%，酵母膏0.05%，琼脂3%，余量为水，25-27℃培养2-3天；
二级培养
一级培养基去掉琼脂，25-27℃培养3-5天；
三级培养基
培养基成分以质量百分比计为：0.5%醋酸钠、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，调pH值，将二级培养菌种接种在种子罐中，25-27℃培养5-7天；
所述放线菌培养方法如下：
一级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，调pH值，温度28-32℃，时间5-7天；
二级培养基去琼脂
一级培养基加0.1%柠檬酸铁铵，培养条件同一级培养；
三级发酵培养基
葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水，调pH值，将二级培养菌种接种在种子罐中，温度28-32℃，时间5-7天；
所述乳酸菌培养方法如下：
一级培养
培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钠，pH6~8，温度28-32℃，时间2-5天；
二级培养
一级培养基加0.1%柠檬酸铁铵，培养条件同一级培养；
三级培养
将二级培养菌种接种在种子罐中，温度28-32℃，时间5-7天；
培养基：葡萄糖1-3%，酵母汁1-2%，磷酸二氢钾0.01-0.05%，氯化钠0.02-0.05%，硫酸亚铁0.001-0.005%，余量为水。
2.根据权利要求1所述的肥料，其特征在于，所述的光合细菌选自沼泽红假单胞菌、加墨红假单胞菌或球形红假单胞菌中的任意一种或几种。
3.根据权利要求1所述的肥料，其特征在于，所述的放线菌为诺卡氏菌属。
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| CN106811433A (zh) * | 2017-02-22 | 2017-06-09 | 广州聚禅现代农业研究院有限公司 | 一种具有固氮解磷解钾功效的液体微生物肥料及制备方法 |
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| CN102531716A (zh) | 2012-07-04 |
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