CN102507547A - 一种地沟油的检测试剂及其制备方法和检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及地沟油检测技术领域，特别是涉及一种地沟油的检测试剂及其制备方法和检测方法；包括按照体积百分比计算的邻二氮菲溶液10％～20％、醋酸铵缓冲液10％～20％、盐酸羟胺铁溶液10％～20％、二氯甲烷40％～60％；本发明克服现有检测技术的缺陷，建立能适用于现场监督检验、分析成本低的快速筛查方法。不仅快速筛查方法快速、简便，整个操作过程包括显色溶液制备2min、油样提取17min，然后加入到显色溶液中进行显色，整个操作过程在20min完成。且无需对照品也无需精密仪器，分析成本低、操作简单快速，可适用于现场监督检验；而且该方法可以检出用现行国家标准检验合格的地沟油，弥补了现行国家标准缺陷。

Description

一种地沟油的检测试剂及其制备方法和检测方法

技术领域

本发明涉及地沟油检测技术领域，特别是涉及一种地沟油的检测试剂及其制备方法和检测方法。

背景技术

地沟油，是不法分子将下水道中的油腻漂浮物或者将宾馆、酒楼的剩饭、剩菜(通称泔水)回收，经过过滤、加热、沉淀、分离、脱色、洗油等工序加工、提炼出的油，其主要成分仍然是甘油三酯，这种被称作地沟油的三无产品，不仅质量极差、极不卫生，而且也比真正的食用油多了许多致病、致癌的毒性物质。一旦食用地沟油，它会破坏人们的白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌的严重后果。所以地沟油是严禁用于食用油领域的。但是，也确有一些不法商贩受利益驱动而不顾人民群众生命安全私自生产加工地沟油并作为食用油低价销售给一些小餐馆，给人们的身心都带来极大伤害。

购买普通食用油时，一般的消费者会被建议要学会感官鉴别。根据经验，食用植物油一般通过看、闻、尝、听、问五个方面来进行鉴别。但是对于对于掺杂有有害物质的劣质地沟油，仅仅靠人为的看、闻、尝、听的感官来进行鉴别是十分困难的。

目前，国内尚未制定地沟油鉴别检测的国家标准方法，虽然国内外研究人员进行了一些探索，鉴别油脂优劣的常规指标一般是水分、含量、比重、折光率、皂化值、酸价、氧化值、过氧化值、羰基值、碘值、挥发性组分、动物油脂、醛和酮类化合物(合格食用油所不含的)、电导率等指标。但是对地沟油检测的研究报道并不多见，其主要原因是高酸值的地沟油成分比较复杂，其检测的特异性理化指标还处于实验研讨阶段，要准确定性定量目前仍比较困难。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的之一在于提供了一种能快速检测出地沟油的显色化学试剂；

本发明的目的之二在于提供了能快速检测出地沟油的显色化学试剂的制备方法：

本发明的目的之三在于提供了用所述显色化学试剂快速检测地沟油的方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种地沟油的检测试剂，包括按照体积百分比计算的如下物质：

较佳地，所述盐酸羟胺铁溶液由按照质量百分比计算的盐酸羟胺20～100mg/ml和硫酸亚铁0.1～0.7mg/ml组成。

较佳地，所述邻二氮菲溶液为质量浓度为2～4mg/ml的邻二氮菲溶液。

较佳地，所述醋酸铵缓冲液为质量浓度为0.6～0.8mg/ml的醋酸铵缓冲液。

较佳地，所述盐酸羟胺溶液为质量浓度为20～100mg/ml的盐酸羟胺溶液，硫酸亚铁溶液为质量浓度为0.1～0.7mg/ml的硫酸亚铁溶液。

制备检测试剂的方法，具体为：

试剂的配置：

(1)、邻二氮菲溶液的配制：取邻二氮菲，加水使之溶解，摇匀即得所述质量浓度的邻二氮菲溶液；

(2)、醋酸铵缓冲液的配制：称取醋酸铵，加水使溶解，摇匀即得摇匀即得所述质量浓度的醋酸铵缓冲液；

(3)、盐酸羟胺铁溶液的配制：取盐酸羟胺、硫酸亚铁，加水使溶解，摇匀即得摇匀即得所述质量浓度的盐酸羟胺铁溶液；

检测试剂配置：

(1)、先往反应器内依次加入所述邻二氮菲溶液、醋酸铵缓冲液、盐酸羟胺铁溶液，摇匀后制得混合溶液I(溶液显砖红色)；

(2)、再往装有混合溶液I的反应器内加入二氯甲烷，用力振摇1～2min，制得所述检测试剂(静置分层，二氯甲烷层(下层)透明无色，得到所述试剂)。

用所述检测试剂检测地沟油的方法，包括如下制备步骤：

步骤A、从地沟油油样中提取十二烷基苯磺酸钠溶液；

步骤B、检测试剂的配置：

试剂的配置：

(1)、邻二氮菲溶液的配制：取邻二氮菲，加水使之溶解，摇匀即得所述质量浓度的邻二氮菲溶液；

(2)、醋酸铵缓冲液的配制：称取醋酸铵，加水使溶解，摇匀即得摇匀即得所述质量浓度的醋酸铵缓冲液；

(3)、盐酸羟胺铁溶液的配制：取盐酸羟胺、硫酸亚铁，加水使溶解，摇匀即得摇匀即得所述质量浓度的盐酸羟胺铁溶液；

检测试剂配置：

(1)、先往反应器内依次加入所述邻二氮菲溶液、醋酸铵缓冲液、盐酸羟胺铁溶液，摇匀后制得混合溶液I；

(2)、再往装有混合溶液I的反应器内加入二氯甲烷，用力振摇0.5～2min，制得所述检测试剂。

步骤C、将步骤A中提取得到的十二烷基苯磺酸钠溶液1～2ml，加入到步骤B中所制得的检测试剂中，振荡摇匀、静置分层后，下层(二氯甲烷层)显示呈现浅红色至深红色，表明待测油样中存在十二烷基苯磺酸钠，可证实该油样为地沟油。

较佳地，步骤A从地沟油油样中提取十二烷基苯磺酸钠溶液，具体为：取10ml油样品，加乙醇10～15ml，摇匀，在80～100℃水浴中加热5～10min，取出，剧烈震荡3～5min，5000～10000r/min离心3～5min，收集上清液得到十二烷基苯磺酸钠溶液。

较佳地，所述乙醇为体积百分比为40％～60％的乙醇溶液。

其筛查原理为：地沟油，是不法分子将下水道中的油腻漂浮物或者将宾馆、酒楼的剩饭、剩菜(通称泔水)回收，经过过滤、加热、沉淀、分离、脱色、洗油等工序加工、提炼出的油。十二烷基苯磺酸钠(简称DBS，以下同)为常用洗涤剂，被大量使用于餐饮业的清洗消毒环节中，具有中等毒性，动物实验表明有明显促致癌作用。该物质在天然食用油中不可能存在，但用于精制地沟油的原材料-含有洗碗水中的洗涤剂，且加工、精制过程难以去除该洗涤剂化学成分，导致性质稳定的DBS残留在地沟油中，因此，选择DBS作为鉴别地沟油的特异指标，专属性强。

本发明包括按照体积百分比计算的邻二氮菲溶液10％～20％、醋酸铵缓冲液10％～20％、盐酸羟胺铁溶液10％～20％、二氯甲烷40％～60％；在pH值为2～9的溶液中，邻二氮菲与亚铁离子形成红色的稳定络合物，加入二氯甲烷作萃取试剂，当溶液含中有十二烷基苯磺酸钠时，十二烷基苯磺酸钠作为阴离子表面活性剂，有很好的降低液体表面张力和润湿、渗透和乳化的性能，改变了二氯甲烷对红色络合物的萃取能力，故二氯甲烷层呈现浅红色至红色，二氯甲烷层色度与十二烷基苯磺酸钠的量呈正相关，本方法检出限为20μg/ml。

向邻二氮菲中加入盐酸羟胺铁溶液，目的使邻二氮菲与Fe²⁺生成红色稳定络合物，加入含有十二烷基苯磺酸钠的提取溶液，改变二氯甲烷对红色络合物的萃取能力，二氯甲烷萃取层显色。

其络合过程如下：

本发明克服现有检测技术的缺陷，建立能适用于现场监督检验、分析成本低的快速筛查方法。不仅快速筛查方法快速、简便，整个操作过程包括显色溶液制备2min、油样提取17min，然后加入到显色溶液中进行显色，整个操作过程在20min完成。且无需对照品也无需精密仪器，分析成本低、操作简单快速，可适用于现场监督检验；而且该方法可以检出用现行国家标准检验合格的地沟油，弥补了现行国家标准缺陷。

具体实施方式

为了使本领域技术人员更好的理解本发明，以下通过几个具体实施例来进行详尽说明。

实施例1

一种地沟油的检测试剂，包括0.5ml邻二氮菲溶液(2mg/ml)、0.5ml醋酸铵缓冲液(0.6mg/ml)、1ml盐酸羟胺铁溶液(盐酸羟胺20mg/ml和硫酸亚铁0.1mg/ml)、3ml二氯甲烷。

试剂的配制：

(1)、邻二氮菲溶液：取邻二氮菲(又名二氮杂菲)0.2g，加水100ml使溶解，摇匀，即得。

(2)、醋酸铵缓冲液的配制：称取醋酸铵0.3g，加水500ml使溶解，摇匀，即得。

(3)、盐酸羟胺铁溶液：取盐酸羟胺2g，加硫酸亚铁0.01g，加水100ml使溶解，摇匀，即得。

检测试剂的配制：

取试管，依次加入配制好的邻二氮菲溶液0.5ml、醋酸铵缓冲液0.5ml、盐酸羟胺铁溶液1ml；摇匀，溶液显砖红色，加入二氯甲烷3ml，用力振摇1min，静置分层，二氯甲烷层(下层)透明无色，得到所述检测试剂。

地沟油的测定：

取10ml油样品，加40％乙醇10ml，摇匀，在80℃水浴中加热5min，取出，剧烈震荡5min，5000r/min离心3min，收集上清液。取离心得到的上清液1ml加入到上述所述检测试剂中，振荡摇匀，静置观察。二氯甲烷层(下层)如呈现浅红色至深红色，表明待测样品中存在十二烷基苯磺酸钠，判断待测样品为地沟油。

实施例2

一种地沟油的检测试剂，包括0.7ml邻二氮菲溶液(3mg/ml)、1ml醋酸铵缓冲液(0.65mg/ml)、0.5ml盐酸羟胺铁溶液(盐酸羟胺50mg/ml和硫酸亚铁0.4mg/ml)、2.8ml二氯甲烷。

试剂的配制：

(1)、邻二氮菲溶液：取邻二氮菲(又名二氮杂菲)0.3g，加水100ml使溶解，摇匀，即得。

(2)、醋酸铵缓冲液的配制：称取醋酸铵0.33g，加水500ml使溶解，摇匀，即得。

(3)、盐酸羟胺铁溶液：取盐酸羟胺5g，加硫酸亚铁0.04g，加水100ml使溶解，摇匀，即得。

检测试剂的配制：

取试管，依次加入配置好的邻二氮菲溶液0.7ml、醋酸铵缓冲液1ml、盐酸羟胺铁溶液0.5ml；摇匀，溶液显砖红色，加入二氯甲烷2.8m，用力振摇2min，静置分层，二氯甲烷层(下层)透明无色，得到所述检测试剂。

地沟油的测定：

取10ml油样品，加45％乙醇11ml，摇匀，在90℃水浴中加热6min，取出，剧烈震荡3min，7000r/min离心4min，收集上清液。取离心得到的上清液2ml加入到上述所述检测试剂中，振荡摇匀，静置观察。二氯甲烷层(下层)如呈现浅红色至深红色，表明待测样品中存在十二烷基苯磺酸钠，判断待测样品为地沟油。

实施例3

一种地沟油的检测试剂，包括1ml邻二氮菲溶液(4mg/ml)、1ml醋酸铵缓冲液(0.77mg/ml)、1ml盐酸羟胺铁溶液(盐酸羟胺10mg/ml和硫酸亚铁0.7mg/ml)、2ml二氯甲烷。

试剂的配制：

(1)、邻二氮菲溶液：取邻二氮菲(又名二氮杂菲)0.4g，加水100ml使溶解，摇匀，即得。

(2)、醋酸铵缓冲液的配制：称取醋酸铵0.3855g，加水500ml使溶解，摇匀，即得。

(3)、盐酸羟胺铁溶液：取盐酸羟胺10g，加硫酸亚铁0.07g，加水100ml使溶解，摇匀，即得。

检测试剂的配制：

取试管，依次加入配制好的邻二氮菲溶液1ml、醋酸铵缓冲液1ml、盐酸羟胺铁溶液1ml；摇匀，溶液显砖红色，加入二氯甲烷2ml，用力振摇1min，静置分层，二氯甲烷层(下层)透明无色，得到所述检测试剂。

地沟油的测定：

取10ml油样品，加50％乙醇20ml，摇匀，在80℃水浴中加热15min，取出，剧烈震荡5min，10000r/min离心5min，收集上清液。取离心得到的上清液1.5ml加入到上述所述检测试剂中，振荡摇匀，静置观察。二氯甲烷层(下层)如呈现浅红色至深红色，表明待测样品中存在十二烷基苯磺酸钠，判断待测样品为地沟油。

实施例4

一种地沟油的检测试剂，包括1ml邻二氮菲溶液(4mg/ml)、0.7ml醋酸铵缓冲液(0.8mg/ml)、0.8ml盐酸羟胺铁溶液(盐酸羟胺80mg/ml和硫酸亚铁0.6mg/ml)、2.5ml二氯甲烷。

试剂的配制：

(1)、邻二氮菲溶液：取邻二氮菲(又名二氮杂菲)0.4g，加水100ml使溶解，摇匀，即得。

(2)、醋酸铵缓冲液的配制：称取醋酸铵0.4g，加水500ml使溶解，摇匀，即得。

(3)、盐酸羟胺铁溶液：取盐酸羟胺8g，加硫酸亚铁0.06g，加水100ml使溶解，摇匀，即得。

检测试剂的配制：

取试管，依次加入配制好的邻二氮菲溶液1ml、醋酸铵缓冲液0.7ml、盐酸羟胺铁溶液0.8ml；摇匀，溶液显砖红色，加入二氯甲烷2.5ml，用力振摇2min，静置分层，二氯甲烷层(下层)透明无色，得到所述检测试剂。

地沟油的测定：

取10ml油样品，加60％乙醇13ml，摇匀，在100℃水浴中加热8min，取出，剧烈震荡4min，8000r/min离心4min，收集上清液。取离心得到的上清液2ml加入到上述所述检测试剂中，振荡摇匀，静置观察。二氯甲烷层(下层)如呈现浅红色至深红色，表明待测样品中存在十二烷基苯磺酸钠，判断待测样品为地沟油。

以上所述仅为了是本领域技术人员理解本发明所列举的几个具体实施例，并非用来限制本发明所要求保护的范围。故凡以本发明权利要求所述的特征、结构及原理所做的等效变化或修饰，均应包括在本发明权利要求范围之内。

Claims (8)

1.一种地沟油的检测试剂，其特征在于，包括按照体积百分比计算的如下物质：

2.根据权利要求1中所述的检测试剂，其特征在于，所述盐酸羟胺铁溶液由按照质量百分比计算的盐酸羟胺20～100mg/ml和硫酸亚铁0.1～0.7mg/ml组成。

3.根据权利要求1中所述的检测试剂，其特征在于，所述邻二氮菲溶液为质量浓度为2～4mg/ml的邻二氮菲溶液。

4.根据权利要求1中所述的检测试剂，其特征在于，所述醋酸铵缓冲液为质量浓度为0.6～0.8mg/ml的醋酸铵缓冲液。

5.制备权利要求1所述检测试剂的方法，其特征在于，具体为：

试剂的配置：

(1)、邻二氮菲溶液的配制：取邻二氮菲，加水使之溶解，摇匀即得所述质量浓度的邻二氮菲溶液；

(2)、醋酸铵缓冲液的配制：称取醋酸铵，加水使溶解，摇匀即得摇匀即得所述质量浓度的醋酸铵缓冲液；

(3)、盐酸羟胺铁溶液的配制：取盐酸羟胺、硫酸亚铁，加水使溶解，摇匀即得摇匀即得所述质量浓度的盐酸羟胺铁溶液；

检测试剂配置：

(1)、先往反应器内依次加入所述邻二氮菲溶液、醋酸铵缓冲液、盐酸羟胺铁溶液，摇匀后制得混合溶液I；

(2)、再往装有混合溶液I的反应器内加入二氯甲烷，用力振摇1～2min，制得所述检测试剂。

6.用权利要求1所述检测试剂检测地沟油的方法，其特征在于，包括如下制备步骤：

步骤A、从地沟油油样中提取十二烷基苯磺酸钠溶液；

步骤B、试剂的配置：

试剂的配置：

(1)、邻二氮菲溶液的配制：取邻二氮菲，加水使之溶解，摇匀即得所述质量浓度的邻二氮菲溶液；

(2)、醋酸铵缓冲液的配制：称取醋酸铵，加水使溶解，摇匀即得摇匀即得所述质量浓度的醋酸铵缓冲液；

(3)、盐酸羟胺铁溶液的配制：取盐酸羟胺、硫酸亚铁，加水使溶解，摇匀即得摇匀即得所述质量浓度的盐酸羟胺铁溶液；

检测试剂配置：

(1)、先往反应器内依次加入所述邻二氮菲溶液、醋酸铵缓冲液、盐酸羟胺铁溶液，摇匀后制得混合溶液I；

(2)、再往装有混合溶液I的反应器内加入二氯甲烷，用力振摇1～2min，制得所述检测试剂。

步骤C、将步骤A中提取得到的十二烷基苯磺酸钠溶液1～2ml，加入到步骤B中所制得的检测试剂中，振荡摇匀、静置分层后，下层显示呈现浅红色至深红色，表明待测油样中存在十二烷基苯磺酸钠，可证实该油样为地沟油。

7.根据权利要求6中所述检测地沟油的方法，其特征在于，步骤A从地沟油油样中提取十二烷基苯磺酸钠溶液，具体为：取10ml油样品，加乙醇10～15ml，摇匀，在80～100℃水浴中加热5～10min，取出，剧烈震荡3～5min，5000～10000r/min离心3～5min，收集上清液得到十二烷基苯磺酸钠溶液。

8.根据权利要求7中所述检测地沟油的方法，其特征在于，所述乙醇为体积百分比为40％～60％的乙醇溶液。