CN102499074A

CN102499074A - 一种金线莲组培培养基

Info

Publication number: CN102499074A
Application number: CN2011102949794A
Authority: CN
Inventors: 王莹; 王雁
Original assignee: HANGZHOU DINGYUN AGRICULTURAL DEVELOPMENT Co Ltd
Current assignee: HANGZHOU DINGYUN AGRICULTURAL DEVELOPMENT Co Ltd
Priority date: 2011-09-30
Filing date: 2011-09-30
Publication date: 2012-06-20

Abstract

本发明涉及一种金线莲组织培养用的培养基。所要解决的技术问题是提供的培养基应具有加快金线莲组培过程的生长速度、降低感染率以及增多繁殖倍数的特点，并且制作培养基方法简单、方便、成本低。技术方案是：一种金线莲组培培养基，其中包括的成分及含量为：香蕉或土豆50-100g/L；NAA0.1-3mg/L；6BA0.1-5mg/L；白糖25g/L；花宝1号1-3g/L；花宝5号1-3g/L；蛋白胨2-4g/L；琼脂粉5-7g/L；活性炭0.1-3g/L；包括大量元素、微量元素、铁盐和有机成分的MS，其余是水，pH值5.8-6.0。

Description

一种金线莲组培培养基

技术领域

本发明涉及一种植物培养基，具体是金线莲组织培养用的培养基。

背景技术

金线莲，拉丁名为Anoectochilus Formosanus Hayata，是兰科开唇兰属植物，兼具赏叶和观花之功用，是观赏价值极高的室内花卉珍品，但其主要价值在于药用。金线莲素有“金草”、“神药”、“药王”、“鸟人参”等美称。经有关部门测定发现，金线莲中氨基酸组成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量高于野生西洋参。全草药用，性味甘、淡、平、凉，具有清热、凉血、祛风利湿、强心利尿、固肾平肝以及降血压等功效，被称为“药中之王”。由于金线莲的显著的药用功效及保健功能已为世人公认，其商品价格多年来一直不菲。

金线莲生长于台湾、福建、浙江等省海拔200～1800米的温带山林下，性喜阴凉、潮湿，尤其喜欢生长在有常绿阔叶树木的沟边、石壁、土质松散的潮湿地带，要求温度18～23℃，光照约为正常日照的1/3，最忌阳光直射。由于金线莲属植物的种子不具胚乳，无发芽能力，只有在真菌共生下，才促进种子萌发生长，发芽率很低，长期以来其有性繁殖未取得突破性进展；加之其对生长条件要求严格、自然条件恶化、野生资源锐减、人为肆意采挖，现已濒临灭绝，致使药源紧缺，国内外市场供不应求。

近年来，许多专家学者为保护这一珍贵的药用植物资源，做了大量的研究工作。野生金线莲虽然现已濒临灭绝，但经过广大研究者们的努力，诸多专家学者进行了金线莲的组培快繁和人工栽培技术研究；但由于人工栽培成活率低的原因，目前总体生产规模小而分散、繁殖未能商品化，未形成规范的繁殖和人工栽培体系，其生产也未形成规模化。采用现代组织培养生物技术和人工栽培技术，可使野生金线莲变家种，不仅能大大加快繁殖速度，使金线莲的质量均衡一致，更适合规范化管理；而且利于保护其野生资源，解决中药材来源匮乏的问题，同时还能满足人民用药需要，繁荣农村经济，增加创汇来源，促进我国植物药产业逐步走向国际化和规范化，促进我国中医药事业的发展。因此，金线莲的组培技术有着重要的现实意义。组培（组织培养）技术的核心是培养基配方，它决定了金线莲组培过程的生长速度，成活率以及繁殖倍数。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种金线莲组培培养基，该培养基应具有加快金线莲组培过程的生长速度、降低感染率以及增多繁殖倍数的特点，并且制作培养基方法简单、方便、成本低。

本发明提供的技术方案是：一种金线莲组培培养基，其中包括的成分及含量为：

香蕉或土豆50-100g/L，NAA0.1-3mg/L，6BA0.1-5mg/L，白糖25g/L，花宝1号1-3g/L，花宝5号1-3g/L ，蛋白胨2-4g/L，琼脂粉5-7g/L，活性炭0.1-3g/L，包括大量元素、微量元素、铁盐和有机成分的MS，其余是水，pH值5.8-6.0；

所述大量元素为：硝酸钾700-1900mg/L，硝酸铵700-1700mg/L，磷酸二氢钾70-170mg/L，硫酸镁170-400mg/L，氯化钙200-450mg/L，

所述微量元素为：碘化钾0.4-1mg/L ，硼酸3-7mg/L，硫酸锰10-25mg/L，硫酸锌4-10mg/L，钼酸钠0.05-0.5mg/L，硫酸铜0.005-0.05mg/L，氯化钴0.005-0.05mg/L，

所述铁盐为：乙二胺四乙酸二钠17-40mg/L，硫酸亚铁12-30mg/L，

所述有机成分为：肌醇50mg/L ，甘氨酸0.5-2mg/L，盐酸硫胺素0.05-0.5mg/L ，盐酸吡哆醇0.05-0.5mg/L，烟酸0.05-0.5mg/L，

所述的NAA为萘乙酸；

所述的6BA为6-苄氨基腺嘌呤；

所述的花宝1号由硝态氮、氧化磷、氧化钾组成，配比为：7:6:19；

所述的花宝5号由硝态氮、氧化磷、氧化钾组成，配比为：30:10:10。

该培养基的pH値用NaOH或HCL来调节。

所述活性炭的细度为100-200目。

本发明提供的培养基，具有以下优点：1）所制成的培养基应能使金线莲组培过程的生长速度加快（3个半月就可长成母苗），成活率提高（成活率95%以上）以及繁殖倍数增多（增殖倍数大于5倍）。2）制作方法简单、方便；3）由于该配方以白糖和香蕉（或者土豆）为主要原料，不仅取材方便，来源广泛，价格低廉，还极大地节省了生产成本，可进行大面积的推广。

具体实施方式

杭州鼎韵农业开发有限公司采用本发明提供的培养基，用于金线莲组培试验取得显著效果；曾试用了50组不同配方的培养基，唯有本发明的效果最为理想。

本发明所述的母苗的标准是：植株直径在2.5mm-3.0mm之间，高度在10cm左右，重量在1.0g-1.5g之间。

本发明中的PH值为5.8-6.0，采用NaOH或HCL来调节；优选浓度低一些（如１％）的NaOH或HCL。

本发明的制作十分简单，只需把所有原料混合搅拌均匀即可。

以下通过具体实施例进一步清楚地阐述本发明；但它们不是对本发明的限定。

实施例1（母苗培养基）：

选健壮的母苗（取用金线莲的茎的每1-2节），培养基的成分及含量是（每升中的重量）： NAA 1mg/L ，6BA 1mg/L ，白糖25g/L ，花宝1号 1g/L ，花宝5号1g/L，蛋白胨2g/L，琼脂粉 5g/L ，香蕉或者土豆 70g/L，活性炭（80目）1g/L，包括大量元素、微量元素、铁盐和有机成分的MS，其余是水。

所述大量元素为：硝酸钾700mg/L，硝酸铵700mg/L，磷酸二氢钾70mg/L ，硫酸镁170mg/L ，氯化钙450mg/L；

微量元素为：碘化钾0.4mg/L ，硼酸3mg/L ，硫酸锰10mg/L ，硫酸锌4mg/L，钼酸钠0.05mg/L ，硫酸铜0.005mg/L ，氯化钴0.005mg/L；

铁盐为：乙二胺四乙酸二钠17mg/L ，硫酸亚铁12mg/L；

有机成分为：肌醇50mg/L ，甘氨酸0.5mg/L，盐酸硫胺素0.05mg/L ，盐酸吡哆醇0.05mg/L ，烟酸0.05mg/L；

pH值为5.8，采用１％的NaOH或HCL来调节。

该培养基组培金线莲，植株大小均衡一致，3个半月就可长成母苗。

实施例2（母苗培养基）：

选健壮的母苗（取用金线莲的茎的每1-2节），培养基的成分及含量是（每升中的重量）： NAA1mg/L ，6BA2mg/L，白糖 25g/L ，花宝1号1.5g/L，花宝5号1.5g/L，蛋白胨 2.5g/L ，琼脂粉5.5g/L，香蕉或土豆70g/L，活性炭（150目）1g/L，其余是水；

所述的MS包括以下含量的大量元素、微量元素、铁盐以及有机成分：

大量元素为：硝酸钾1200mg/L，硝酸铵1000mg/L，磷酸二氢钾100mg/L，硫酸镁220mg/L，氯化钙300mg/L；

微量元素为：碘化钾0.6mg/L ，硼酸4mg/L，硫酸锰15mg/L，硫酸锌6mg/L ，钼酸钠0.2mg/L ，硫酸铜0.02mg/L ，氯化钴0.2mg/L；

铁盐为：乙二胺四乙酸二钠25mg/L，硫酸亚铁18mg/L；

有机成分为：肌醇50mg/L，甘氨酸1mg/L，盐酸硫胺素0.02mg/L，盐酸吡哆醇0.02mg/L，烟酸0.02mg/L；

pH值为5.9，采用１％的NaOH或HCL来调节。

实施例3（壮苗培养基）：

1）取母苗的顶芽1-2节，培养基的成分及含量是（每升中的重量）：

NAA2mg/L，6BA4mg/L，白糖25g/L，花宝1号2g/L，花宝5号2g/L ，蛋白胨3.5g/L，琼脂粉6g/L，香蕉或土豆85g/L，活性炭（200目）2g/L，包括大量元素、微量元素、铁盐和有机成分的MS，其余是水。

所述大量元素为：硝酸钾1600mg/L，硝酸铵1500mg/L，磷酸二氢钾 150mg/L，硫酸镁320mg/L，氯化钙400mg/L；

微量元素为：碘化钾0.8mg/L，硼酸5mg/L，硫酸锰20mg/L ，硫酸锌8mg/L，钼酸钠0.4mg/L，硫酸铜0.03mg/L，氯化钴0.03mg/L；

铁盐为：乙二胺四乙酸二钠40mg/L，硫酸亚铁30mg/L；

有机成分为：肌醇50mg/L，甘氨酸1.5mg/L，盐酸硫胺素0.3mg/L，盐酸吡哆醇0.3mg/L，烟酸0.2mg/L；

pH值为6.0，采用１％的NaOH或HCL来调节。

该配方组培金线莲，植株大小均衡一致，2个半月就可长成成苗用于大棚定植；感染率在4.55%，增殖倍数6倍。此外组培得到的金线莲苗成活率96%。

2）取剩下茎的每1-2节，使用实施例1所述的培养基，3个半月就可长成母苗。相比之下，壮苗配方可以利用顶芽的增长优势，比母苗配方早一个月用于大棚定植。

实施例4（壮苗培养基）：

NAA3mg/L，6BA5mg/L，白糖25g/L ，花宝1号3g/L ，花宝5号3g/L，蛋白胨4g/L，琼脂粉7g/L，香蕉或土豆100g/L，活性炭（300目）3g/L，包括大量元素、微量元素、铁盐和有机成分的MS，其余是水。

所述大量元素为：硝酸钾1900mg/L，硝酸铵1700mg/L，磷酸二氢钾 170mg/L，硫酸镁400mg/L，氯化钙450mg/L；

微量元素为：碘化钾1mg/L，硼酸7mg/L，硫酸锰25mg/L，硫酸锌10mg/L，钼酸钠0.5mg/L，硫酸铜0.05mg/L ，氯化钴0.05mg/L；

铁盐为：乙二胺四乙酸二钠40mg/L，硫酸亚铁30mg/L；

有机成分为：肌醇50mg/L，甘氨酸2mg/L，盐酸硫胺素0.5mg/L，盐酸吡哆醇0.5mg/L，烟酸0.5mg/L；

pH值为6.0，采用１％的NaOH或HCL来调节。

该配方组培金线莲，植株大小均衡一致，2个半月就可长成成苗用于大棚定植；感染率在4%，增殖倍数在5.5倍。此外组培得到的金线莲苗成活率97%。

2）取剩下茎的每1-2节，使用实施例3所述的培养基， 3个半月就可长成母苗（也可直接用于大棚定植）；相比之下壮苗配方可以利用顶芽的增长优势比母苗配方早一个月用于大棚定植。

Claims

1.一种金线莲组培培养基，其中包括的成分及含量为：

香蕉或土豆50-100g/L ，NAA0.1-3mg/L，6BA0.1-5mg/L，白糖25g/L，花宝1号1-3g/L，花宝5号1-3g/L ，蛋白胨2-4g/L，琼脂粉5-7g/L，活性炭 0.1-3g/L ，包括大量元素、微量元素、铁盐和有机成分的MS，其余是水，PH值 5.8-6.0；

所述大量元素为：硝酸钾700-1900mg/L，硝酸铵700-1700mg/L，磷酸二氢钾70-170mg/L，硫酸镁170-400mg/L，氯化钙200-450mg/L；

所述微量元素为：碘化钾0.4-1mg/L，硼酸3-7mg/L ，硫酸锰10-25mg/L，硫酸锌4-10mg/L，钼酸钠0.05-0.5mg/L，硫酸铜0.005-0.05mg/L，氯化钴0.005-0.05mg/L；

所述铁盐为：乙二胺四乙酸二钠17-40mg/L，硫酸亚铁12-30mg/L；

所述有机成分为：肌醇50mg/L ，甘氨酸0.5-2mg/L，盐酸硫胺素0.05-0.5mg/L，盐酸吡哆醇0.05-0.5mg/L，烟酸0.05-0.5mg/L；

所述的NAA为萘乙酸；

所述的6BA为6-苄氨基腺嘌呤；

2.根据权利要求1所述的一种金线莲组培培养基，其特征在于该培养基的pH値用NaOH或HCL来调节。

3.根据权利要求2所述的一种金线莲组培培养基，其特征在于所述活性炭的细度为100-200目。