CN102492634A - 一株耐高温酵母菌及其应用 - Google Patents
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种耐高温酵母菌及其应用，该耐高温酵母菌Ogataeasp.WXT3已保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号是：CCTCC NO：M2011108；本发明的酵母菌是从土壤中筛选出来的，该菌株能在25～48℃温度下发酵生产乙醇，且乙醇产率高，可发酵利用的碳源范围广，特别适用于木质纤维素同步糖化发酵（SSF）工艺制备乙醇的过程中，能够有效降低纤维素酶的使用量，从而降低了纤维素乙醇的生产成本。
Description
技术领域
本发明涉及一株耐高温酵母菌及其应用，属于微生物技术领域。
背景技术
目前，工业上是利用酵母在28～33℃发酵生产乙醇。因酵母的发酵产热，造成发酵体系温度升高，引起酵母细胞内脂肪酸、磷脂、麦角固醇等成分变化，影响细胞本身正常生理活动（Araque Edgardo, Parra Carolinaa, Rodr?guez Manuel, Freer Juanita, Baeza Jaime. Selection of thermotolerant yeast strains Saccharomyces cerevisiae for bioethanol production[J]. Enzyme and Microbial Technology，2008，43：120-123.）。因此，为了保持酵母菌的活性，需用大量冷却水降低发酵温度。同时，为了防止杂菌污染，需在发酵液中加入大量的酸，不仅对发酵罐具有很强的腐蚀作用，增加了发酵成本。若能在高温下进行发酵，可减少冷却水的用量，降低能耗。同时，高温能有效的抑制杂菌生长，减少醪液的污染性。另外，高温还能缩短发酵周期，提高乙醇得率。因此，酵母的耐高温性能直接与生产效益相关。
耐高温酵母的研究早在20世纪80年代就已经出现。1984年Hughes等筛选到一株Kluyveromyces marxianus酵母菌，能在49℃生长，在高于40℃条件下生产乙醇（Hughes,D.B.,Tudroszen,N.J. The effect of temperature on the kinetics of ethanol production by a thermotolerant strain of Kluveromyces marxianus.Biotechnology Letters，1984，6，1-6.）。D’Amore(1989)等筛选到一株Saccharomyces酵母菌，该菌在45℃时的不完全糖发酵的最佳发酵条件利用15-20%（w/v）的葡萄糖产生4.5%（w/v）的乙醇（D'Amore，T.， Celotto, G.，Russell，I. & Stewart，G.G. Selection and optimization of yeast suitable for ethanol production at 40℃. Enzyme and Microbial Technology ，1989.11，411-416.）。I.M.Bana（1992）等从印度酒厂采集的样品中分离筛选到5株能在52℃生长，在45℃和50℃发酵生产乙醇的耐热酵母菌株，在14.0%（w/v）的葡萄糖上生长，乙醇产量45℃时是5.7-7.0%（w/v），50℃时是5.0-5.5% （I.M.Banat，P.Nigam and R.Marchant. Isolation of thermotolerant, fermentative yeasts growing at 52°C and producing ethanol at 45°C and 50°C[J]. World Journal of Microbiology and Biotechnology，1992，8，259-263.）。Savitree Limtong（2007）等利用富集技术分离得到的Kluyveromyces marxianus DMKU 3-1042在35℃，40℃和45℃生产高浓度乙醇（Savitree Limtong， Chutima Sringiew，Wichien Yongmanitchai. Production of fuel ethanol at high temperature from sugar cane juice by a newly isolated Kluyveromyces marxianus[J].2007， Bioresource Technology 98 (2007) 3367–3374.）。我国的苏艳秋（2009）等人以白酒厂窖泥和生产用酒曲为材料，筛选到1株产乙醇能力强，耐高温、耐强酸、起酵速度快的菌株Y30，该菌株能在45℃正常发酵，且致死温度达到59℃（苏艳秋，朱卫华，吴 鹏，等. 耐高温、耐酸产酒精酵母的筛选与鉴定[J].微生物学杂志，2009，29(2)：43-47）。
但是，目前在高温下具有高乙醇产量的菌株相对较少，因此，能在工业乙醇生产中的高温高产酵母也相对较少。
在发酵工艺过程中，菌种是发酵的关键。将耐高温酵母菌用于发酵生产乙醇，具有的优势主要体现在： 
加快生化反应速度，提高发酵效率，提高乙醇转化的效率。②在利用纤维素生产乙醇的过程中，高温能解决糖化温度和发酵温度不协调的矛盾，实现真正意义上的边糖化边发酵．从而减少葡萄糖对纤维素酶的抑制作用，提高纤维素酶的糖化率，进而提高纤维素发酵生产燃料乙醇的得率。③高温发酵能防止杂菌的混入，有利于乙醇生产线的管理。④高温发酵可使乙醇的蒸馏回收及时简便，减少蒸馏回收成本，提高经济效益。⑤乙醇的及时回收可解除乙醇对发酵微生物的反馈抑制作用。因此，选育耐受更高温度的的酵母菌株应用于发酵生产乙醇，是提高乙醇产量，降低生产成本的有效方法。
发明内容
本发明的目的在于克服传统乙醇发酵菌株的缺点，提供一株耐高温酵母菌。
本发明所提供的菌株是从土壤中筛选出来的耐高温酵母菌Ogataea sp. WXT3，该菌株己于2011年4月5日保藏于“中国典型培养物保藏中心” (简称CCTCC) ，其保藏编号为CCTCC NO：M 2011108。
本发明中所述耐高温酵母菌株WXT3，其26S rRNA D1/D2区域具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
本发明中所述耐高温酵母菌株WXT3，其5.8S+ITS区域具有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
本发明中所述耐高温酵母菌株WXT3的内转录间隔区（ITS1+ITS2）序列比对结果显示，和Ogataea polymorpha ATCC 66057的相似性99%，WXT3属于Ogataea属（见图1）。
本发明另一目的是耐高温酵母菌株在发酵生产乙醇中的应用，该菌株能够在25～48℃条件下发酵生产乙醇，且乙醇产率高，可利用碳源范围广。
本发明中所述耐高温酵母菌株能够利用葡萄糖、蔗糖、纤维二糖、麦芽糖、木糖、木糖醇、果糖、甘油、甘露醇中一种或几种为碳源生产乙醇。
本发明中所述耐高温酵母菌株能够利用木质纤维素发酵生产乙醇。
本发明中所述耐高温酵母菌株能够利用糖蜜发酵生产乙醇。
耐高温酵母菌也可应用在生物工程及分子生物学改造用于发酵生产乙醇过程中。
酵母菌株Ogataea sp. WXT3可以用于任何淀粉和非淀粉多糖水解后单糖发酵生产乙醇的过程中。
本发明中耐高温酵母菌株Ogataea sp. WXT3具有以下微生物学特性：
1、形态学特征：
在酵母浸出粉胨葡萄糖（YPD）液体培养基中培养，细胞呈球形或卵形，有沉淀形成。在YPD琼脂培养基斜面上培养，菌落呈乳白色，表面光滑，凸起明显，边缘整齐，不透明，有光泽。
2、生理生化特性
（1）耐高温酵母菌株Ogataea sp.WXT3在无维生素培养基中生长
无维生素培养基成分：硫酸铵，2.0g/L；硫酸镁，0.2 g/L；磷酸二氢钠，0.5 g/L；氯化钙，0.1 g/L；磷酸氢二钾，0.5 g/L；补充碳源。
（2）耐高温酵母菌株Ogataea sp. WXT3在YPD(2%葡萄糖，2%蛋白胨，1%酵母提取物)培养基（pH自然）中，25～48℃条件下生长（见图4）。
（3）耐高温酵母菌株Ogataea sp. WXT3在含有0.01%环已酰亚胺的在YPD(2%葡萄糖，2%蛋白胨，1%酵母提取物)培养基（pH自然）中生长。
（4）耐高温酵母菌株Ogataea sp. WXT3在50%的D-葡萄糖培养基（50%的D-葡萄糖，2%蛋白胨，1%酵母提取物，2%琼脂粉）上生长，在60%的D-葡萄糖培养基（60%的D-葡萄糖，2%蛋白胨，1%酵母提取物，2%琼脂粉）上不生长，结果见图2。
（5）耐高温酵母菌株Ogataea sp. WXT3在含有10% NaCl的YPD(2%葡萄糖，2%蛋白胨，1%酵母提取物)培养基（pH自然）上生长，在含有16% NaCl的YPD(2%葡萄糖，2%蛋白胨，1%酵母提取物)培养基（pH自然）上不生长。
（6）碳源利用情况（见表1）
表1：耐高温酵母菌株Ogataea sp. WXT3的碳源利用实验结果
| 葡萄糖 | + | 阿拉伯糖 | - | 纤维二糖 | + |
| 半乳糖 | - | 木糖醇 | + | 山梨糖 | - |
| 乳糖 | + | 麦芽糖 | + | 甘露醇 | + |
| 鼠李糖 | - | 蔗糖 | + | 木糖 | + |
| 甘油 | + | 果糖 | + | 甲醇 | + |
注：表中“+”代表可利用，“-”代表不利用。
（7）耐高温酵母菌株Ogataea sp. WXT3在含2%蛋白胨，1%酵母提取物的培养基（pH自然）上不发酵淀粉。
（8）和Ogataea polymorpha ATCC 66057相比，不同点见表2(Sung-Oui Suh & Jianlong J. Zhou. Methylotrophic yeasts near Ogataea (Hansenula) polymorpha：aproposal of Ogataea angusta comb. nov. and Candida parapolymorpha sp.nov. [J]. FEMS Yeast Research，2010，10，631–638.)：
表2：酵母Ogataea polymorpha ATCC 66057和Ogataea sp. WXT3的差异
| 特征 | Ogataea polymorpha ATCC 66057 | Ogataea sp. WXT3 |
| 蔗糖 | V | + |
| 山梨糖 | V | + |
| 阿拉伯糖 | + | - |
| 鼠李糖 | V | - |
| 纤维二糖 | V | + |
| 50%D-葡萄糖 | - | + |
| 10%NaCl | - | + |
注：“+”代表可生长，“-”代表不生长，“V”代表可变。
本发明提供的酵母菌株Ogataea sp. WXT3在YPD(2%葡萄糖，2%蛋白胨，1%酵母提取物)培养基（pH自然）上的培养液的OD值与时间之间的关系，见图3。
本发明提供的酵母菌株Ogataea sp. WXT3能够在在YPD(2%葡萄糖，2%蛋白胨，1%酵母提取物)培养基（pH自然）中，25～48℃条件下发酵葡萄糖生产乙醇。
本发明的酵母菌株Ogataea sp. WXT3可以在在YPD(2%葡萄糖，2%蛋白胨，1%酵母提取物)培养基中，PH 3.0～9.0条件下生长，pH范围宽泛（见图5）。
本发明的酵母菌株Ogataea sp. WXT3可以在乙醇浓度为0%～8%条件下生长，相同温度下，和工业用酵母安琪酵母相比，乙醇耐受性较高（见图6）。
本发明的Ogataea sp. WXT3菌株发酵5%的葡萄糖，42℃时的乙醇产量和在37℃，30℃时发酵的乙醇产量相差不大，一定温度范围内，并没有因为温度的升高而乙醇产量减少。
利用本发明的Ogataea sp. WXT3菌株在温度为42℃条件进行发酵，随着葡萄糖浓度的升高乙醇产量有略微下降，发酵10%葡萄糖时乙醇产量较高，乙醇转化率达79.3%。
利用本发明的Ogataea sp. WXT3菌株进行发酵，本发明的有益效果是:
(1)本发明提供的耐高温酵母菌株Ogataea sp.WXT3菌株生产乙醇的温度大幅提高到36～48℃，最适产乙醇的温度高达38～42℃。本发明菌株可以用于木质纤维素SSF工艺制备乙醇过程中，糖化与发酵在同一反应器中同时进行，温度可提高到42℃。从而也适用于纤维素的乙醇发酵，是一株极具纤维素乙醇工业发酵潜力的菌株。
(2) 本发明的菌株生长pH范围宽泛，可以在中性的条件下发酵，减少因强酸条件对发酵设备的腐蚀；本发明的菌株可以耐受高浓度的乙醇，提高了发酵终止时发酵液的乙醇浓度，降低了生产成本。
生物材料保藏说明：
本发明提供的Ogataea sp. WXT3菌株，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)；地址：湖北省武汉市武昌珞珈山，武汉大学保藏中心；保藏编号是：CCTCC NO：M 2011108；保藏日期：2011年4月5日。
附图说明
图1是本发明Ogataea sp. WXT3菌株根据ITS序列所作的系统进化树。
图2是本发明Ogataea sp. WXT3菌株在50%的D-葡萄糖或60%的D-葡萄糖上的生长情况，其中1是含50%D-葡萄糖的试管，2是60% D-葡萄糖的试管。
图3是本发明Ogataea sp. WXT3菌株在37℃和42℃条件下的生长曲线。
图4是本发明Ogataea sp. WXT3菌株在不同温度下的生长情况曲线示意图。
图5是本发明Ogataea sp. WXT3菌株在不同pH下的生长情况曲线示意图。
图6是本发明Ogataea sp. WXT3菌株在不同乙醇浓度下的生长情况曲线示意图，其中A表示安琪酵母，购于安琪酵母公司。
图7是本发明Ogataea sp. WXT3菌株利用5%葡萄糖为原料配制培养基，在30℃、37℃、42℃和45℃条件下发酵72h 后，发酵液中葡萄糖、乙醇和乙酸浓度示意图。
图8是本发明Ogataea sp. WXT3菌株利用不同葡萄糖为原料配制培养基，在42℃条件下发酵，发酵液中葡萄糖和乙醇浓度变化示意图，其中15%表示利用15%的葡萄糖发酵，10%表示利用10%的葡萄糖发酵，实心标识表示乙醇浓度，空心标识表示葡萄糖浓度。
图9是本发明Ogataea sp. WXT3菌株利用水葫芦在42℃条件下同步糖化发酵，发酵液中的乙醇浓度变化曲线示意图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明保护范围不限于所述内容，实施例中如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1：耐高温酵母菌Ogataea sp. WXT3菌株的筛选，具体操作过程如下：
取采自西双版纳果园的土壤样品5g，接种到100mL YPD液体培养基中，培养基中加入终浓度为50μg/ml的氯霉素和四环素，在42℃，150rpm摇床培养2天；取培养物100μl，接种到10ml新鲜YPD液体培养基中，24后取100μl培养物涂布于YPD琼脂平板上，42℃培养24h，挑选单菌落接种于YPD液体琼脂培养基上，共挑选了26株单菌落，在45℃、48℃培养，选取其中乙醇产率最高的菌落编号为WXT3，然后做分子生物学及生理生化鉴定，送CCTCC保藏，保藏编号是：CCTCC NO：M 2011108。
本实施例中所用培养基如下：
YPD液体培养基组成为：2%葡萄糖，2%蛋白陈，1%酵母膏，自然pH。
YPD固体培养基组成为：2%葡萄糖，2%蛋白陈，1%酵母膏，2%琼脂粉，自然pH。
实施例2：耐高温酵母菌Ogataea sp. WXT3菌株在不同温度下利用葡萄糖发酵生产乙醇
取250ml的三角瓶，加入100ml培养基（培养基组成为：5%葡萄糖，1%酵母膏，1%蛋白胨），115℃灭菌20min；同时配制YPD液体培养基，接种Ogataea sp. WXT3酵母菌株，42℃培养8h，作为种子培养液备用。
在灭菌的三角瓶中加入5mL种子培养物（发酵接种量为5%（V/V）），分别在30℃，37℃，42℃，45℃，150rpm摇床发酵培养，设置三组平行发酵，发酵72h后，在30℃，37℃，42℃，45℃发酵产生的乙醇在体系中的浓度分别为15.41g/L，13.41 g/L，13.45 g/L，1.34 g/L，结果见图7。在42℃发酵时的乙醇产量和37℃发酵的乙醇产量一样，略低于30℃发酵的乙醇产量，但差距不大。该菌株适合用于高温下发酵，在一定温度范围内，乙醇产量不会大幅下降。
实施例3：耐高温酵母菌Ogataea sp. WXT3菌株利用不同浓度葡萄糖发酵生产乙醇
取250ml的三角瓶，加入100ml培养基（培养基组成为：10%或15%葡萄糖，0.5%酵母膏，1%蛋白胨），115℃灭菌20min，同时配制YPD液体培养基，接种WXT3酵母菌株，42℃培养8h，作为种子培养物备用。
在灭菌的三角瓶中加入5mL种子培养物，在42℃，150rpm下摇床发酵培养，设置三组平行发酵，结果见图8，图中显示72h之前，乙醇浓度均随着发酵时间的延长而升高，且乙醇浓度随着葡萄糖浓度的升高有所下降。在72h-96h，利用10%葡萄糖发酵的乙醇浓度较15%葡萄糖发酵的乙醇浓度低，是因为利用10%葡萄糖发酵96h时，葡萄糖几乎被利用完了，而利用15%葡萄糖发酵的乙醇浓度有上升的趋势，96h时，利用10%，15%葡萄糖发酵的乙醇浓度分别是40.44
g/L，44.57 g/L；乙醇转化率分别是79.29%，58.26%；转化率较高。
利用10%葡萄糖发酵时的乙醇转率较高，该菌株可以应用于纤维素SSF工艺过程，解除葡萄糖，木糖等水解物的积累而产生的对纤维素酶的抑制作用，大幅降低纤维素酶的用量，减少成本。
实施例4：耐高温酵母菌Ogataea sp.WXT3菌株利用木质纤维素同步糖化发酵（SSF）生产乙醇
将采自云南昆明滇池的新鲜水葫芦，清洗，80℃干燥，粉碎至粒度为18-40目间，用1000ml的锥形瓶对水葫芦进行预处理，按固液比为1:20(w/v)的比例，将10g水葫芦和1% NaOH(w/v)混合，在100℃处理60min后冷却，过滤，水洗至中性，105℃干燥后存储用于之后的同步糖化发酵。
用于实验的纤维素酶是商业酶R-10，SSF在42℃下进行，所有SSF在100ml瓶子中装入5%预处理水葫芦，随后装入营养液培养基（该营养液培养基含有5 g/L蛋白胨，5g/L 酵母膏，1g/L KH2PO4，0.3g/L NH4Cl，2g/L MgSO4.7H2O和0.05M pH 4.8的柠檬酸钠缓冲液， 115℃灭菌20 min，备用）；接入本发明耐高温酵母菌和20 FPU/g预处理水葫芦纤维素酶，150rpm摇床发酵96h，结果见图9， WXT3利用预处理水葫芦在72h得到6.56 g 乙醇/L，相当于每千克水葫芦产生131.2g乙醇，实验证明发酵效果较好，该菌株较适宜用于纤维素同步糖化发酵生产乙醇。
SEQUENCE LISTING
<110> 昆明理工大学
<120> 一株耐高温酵母菌及其应用
<160> 2
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 609
<212> DNA
<213> Ogataea sp.
<400> 1
gcatatcaat aagcggagga aaagaaacca acagggattg ccttagtagc ggcgagtgaa 60
gcggcaagag ctcaaatttg aaatctggta ccttcggtgc ccgagttgta atttgaagaa 120
agctatcttg gaggtggcct ttgtctatgt tccttggaac aggacgtcat ggagggtgag 180
aatcccgtgt gatgaggtgt ccatttccgt gtaagatgct ttcgaagagt cgagttgttt 240
gggaatgcag ctcaaagtgg gtggtaaatt ccatctaaag ctaaatattg gcgagagacc 300
gatagcgaac aagtactgtg aaggaaagat gaaaagaact ttgaaaagag agtgaaaaag 360
tacgtgaaat tgttgaaagg gaagggtatt tgatcagact tggtatttag ctatcatcgc 420
tccttgtggg tggtgctcta gctttttact gggccagcat cagttttggt ggcaagataa 480
tgacagttga atgtggctcc tcggagtgtt atagcttctg ttgatgttgc ctaccgagac 540
tgaggtctgc ggcttttgcc taggatgctg gcgtaatgat ccaataccgc ccgtcttgaa 600
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<213> Ogataea sp.
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tattaggttt tatccatcgt tgattgacaa ctgcaagctt ctttcaaaaa ttggctctgc 660
cttacaaact ttaatcataa agtttgacct caaatcaggt aggattaccc gctgaactta 720
agcatatcaa taagcggagg 740
Claims (8)
1.一株耐高温酵母菌Ogataea sp. WXT3，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No：M 2011108。
2.根据权利要求1所述的耐高温酵母菌株，其特征在于：其26SrDNA D1/D2区域的基因序列为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的耐高温酵母菌株，其特征在于：其5.8S+ITS区域的基因序列为SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
4.权利要求1所述的耐高温酵母菌株在发酵生产乙醇中的应用。
5.根据权利要求4所述的耐高温酵母菌株在发酵生产乙醇中的应用，其特征在于：利用葡萄糖、蔗糖、纤维二糖、麦芽糖、木糖、木糖醇、果糖、甘油、甘露醇中一种或几种为碳源生产乙醇。
6.根据权利要求4所述的耐高温酵母菌株在发酵生产乙醇中的应用，其特征在于：利用木质纤维素发酵生产乙醇。
7.根据权利要求4所述的耐高温酵母菌株在发酵生产乙醇中的应用，其特征在于：利用糖蜜发酵生产乙醇。
8.权利要求1所述的耐高温酵母菌在生物工程及分子生物学改造用于发酵生产乙醇过程中的应用。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107164246A (zh) * | 2017-04-28 | 2017-09-15 | 昆明理工大学 | 一种耐高温酵母菌及其应用 |
| CN114149932A (zh) * | 2021-11-08 | 2022-03-08 | 泸州老窖股份有限公司 | 酿酒酵母lj-2及其应用 |
| CN114149933A (zh) * | 2021-11-08 | 2022-03-08 | 泸州老窖股份有限公司 | 酿酒酵母lj-1及其应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101328466A (zh) * | 2007-06-19 | 2008-12-24 | 同济大学 | 耐高温酒精酵母的优化方法 |
| CN102041235A (zh) * | 2009-10-21 | 2011-05-04 | 中国石油化工股份有限公司 | 一株耐高温酿酒酵母菌及其应用 |
-
2011
- 2011-12-16 CN CN201110422929XA patent/CN102492634B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101328466A (zh) * | 2007-06-19 | 2008-12-24 | 同济大学 | 耐高温酒精酵母的优化方法 |
| CN102041235A (zh) * | 2009-10-21 | 2011-05-04 | 中国石油化工股份有限公司 | 一株耐高温酿酒酵母菌及其应用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| SAVITREE LIMTONG等: "Ogataea chonburiensis sp. nov. and Ogataea nakhonphanomensis sp. nov., thermotolerant, methylotrophic yeast species isolated in Thailand, and transfer of Pichia siamensis and Pichia thermomethanolica to the genus Ogataea", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF SYSTEMATIC AND EVOLUTIONARY MICROBIOLOGY》 * |
| SUNG-OUI SUH等: "Methylotrophic yeasts nearOgataea (Hansenula)polymorpha: aproposal ofOgataea angusta comb. nov. andCandida parapolymorpha sp.nov.", 《FEMS YEAST RES.》 * |
| 华子安等: "选育耐高温酒精酵母的研究", 《酿酒》 * |
| 庞会利等: "耐高温乙醇酵母的研究现状及进展", 《酿酒科技》 * |
| 赵立峰等: "统合生物工艺与纤维素分解性高温菌乙醇转化的研究进展", 《生物技术通报》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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