CN102487950B - 一种抗光解杀菌微胶囊悬浮剂及制备和使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了属于生物农药加工与应用技术领域的一种抗光解杀菌微胶囊悬浮剂及制备和使用方法。该微胶囊的芯材活性成分为那他霉素，以明胶和阿拉伯树胶为壁材，采用复凝聚法制备微胶囊。本发明也公开了该微胶囊的制备方法和使用方法。该微胶囊能够有效提高那他霉素的抗光解能力和防治植物地上部组织真菌病害的效果，具有杀菌谱广、用量低、杀菌效果好、不易获得抗性等的特点，有良好的开发应用前景。

Description

一种抗光解杀菌微胶囊悬浮剂及制备和使用方法

技术领域

本发明属于生物农药加工与应用技术领域，具体涉及一种抗光解杀菌微胶囊悬浮剂及制备和使用方法。

背景技术

那他霉素(Natamycin，NA)，又称纳他霉素或匹马菌素(pimaricin)，分子结构式见图1。NA是纳他链霉菌(Streptomyces natalensis)、利迪链霉菌A01(Sotrytis lydicus)(中国专利：200710187435.1)等链霉菌的次生代谢产物，属抗生素类抗真菌剂。NA具有广谱、高效、安全、不易获得抗性等优点，目前已在饮料、饲料、食品及医药上广泛应用，但在农业生产上仅限于防治棉花和豆类的种菌病害。这是由于NA的分子结构属于多烯大环内酯，其在水溶液中易受紫外光影响而光解，从而限制了它在防治植物地上部病害的应用(卢向阳等.6种光稳定剂对那他霉素抗光解的影响.农药，2011，50(8)：570-572)。

目前，国内外克服药物光解的主要方法有分子结构改造、添加光稳定剂和微胶囊化，但前者耗资耗时巨大，而添加光稳定剂的方法也不够理想。微胶囊技术是一种用成膜材料将活性物质作为囊芯包覆起来形成微小粒子的技术，在医药、涂料、食品、纺织、日化、农业等行业中已被广泛应用(宋健等，微胶囊化技术及应用.化学工业出版社，2001，234-379)。微胶囊具有抑制因环境因素(如光、热、空气、雨水、土壤、微生物)造成囊芯活性成分的分解和流失，提高药剂本身稳定性的功能(高德霖，微胶囊技术在农药剂型中的应用，现代化工，2000，20(2)：10-14)。鉴于以上情况，以微胶囊化来解决NA的光解问题具有较大潜力。Koontz等采用环糊精制备了NA包结化合物，但没有取得抗光解效果(Koontz J，et al.Stability of Natamycin and its cyclodextrin inclusioncomplexes in aqueous solution.J.Agric.Food Chem.2003，51，7111-7114)。除此以外，NA微胶囊化抗光解的技术至今尚无研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗光解杀菌微胶囊悬浮剂，通过包覆那他霉素及缓释作用来提高那他霉素的抗光解性能，以达到可以喷施于植物表面防治真菌病害的作用。

本发明的目的还在于提供上述抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的制备方法和使用方法。

一种抗光解杀菌微胶囊悬浮剂，所述抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的活性成分为那他霉素，其组分的质量百分比为：那他霉素0.5％～5.4％；明胶0.3％～8％；阿拉伯树胶0.3％～8％；表面活性剂0.5％～10％；抗沉淀剂0.5％～10％；余量为水。

所述微胶囊悬浮剂还包括常规使用剂量的如下组分中的一种或多种：分散剂、防冻剂、消泡剂和pH调整剂。

所述微胶囊悬浮剂优选的各组分及其质量百分比为：那他霉素1％～5％；明胶0.6％～4％；阿拉伯树胶0.6％～4％；表面活性剂1％～5％；抗沉淀剂0.5％～8％；余量为水。

微胶囊的外观为圆球形或椭球形，球壁由明胶和阿拉伯树胶组成，内含芯材那他霉素微晶1～10个，那他霉素微胶囊的粒径范围在2～50μm。

所述表面活性剂为OP-10、TX-10、土温-20和土温-80中的一种或多种。

所述抗沉淀剂为聚烯丙烯酸钠、海藻酸钠和羧甲基纤维素中的一种或多种。

所述抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的防治对象为真菌病害。

所述真菌病害为番茄灰霉病(Botrytis cinerea)、辣椒灰霉病(Botrytiscinerea)、茄子灰霉病(Botrytis cinerea)、葡萄灰霉病(Botrytis cinerea)、玉米大斑病(Exserohilum turcicum)、瓜果腐霉病(Pythium aphanidermatum)、茄子早疫病(Alternaria solani)、小麦纹枯病(Rhizoctonia cerealis)、小麦赤霉病(Fusarium graminearum)、稻瘟病(Pyricularia oryzae)、豌豆根腐病(Fusarium solani f.sp.pisi)、番茄叶霉病(Cladosporium fulvum)、西瓜枯萎病(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、黄瓜枯萎病(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)、百合根腐病(Rhizoctonia solani)、李子褐腐病(Moniliniafructicola)、桃褐腐病(Monilinia fructicola)、桃枯萎病(Fusarium oxysporumf.sp.persica)、芹菜斑枯病(Septoria apii)、辣椒炭疽病(Colletotrichum capsici)、甘蓝枯萎病(Fusarium oxysporum Schl.f.sp.conglutinans)、苹果轮斑病(Alternaria mali)、棉花黄萎病(Verticillium dahliae)、棉花枯萎病(Fusariumoxysporum f.sp.vasinfectum)。

上述抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的制备方法，其特征在于，取NA原药在阿拉伯树胶水溶液中充分分散并超声细化后，与明胶水溶液混合均匀，控制温度40～60℃，恒速搅拌下缓慢滴加质量浓度10％的盐酸溶液，调节反应pH为3～5，继续搅拌反应30～90min后，注入去离子水，移至冰浴，待体系温度降至10℃以下后开始缓慢滴加质量浓度20％的氢氧化钠溶液，将体系pH调节至9.0，然后逐渐滴加质量浓度37％的甲醛溶液1g，保持冰浴搅拌，固化反应1h，自然升至室温，调节体系pH值至7.0，得到NA微胶囊悬浮液；微胶囊悬浮液经浓缩后，添加表面活性剂，抗沉淀剂和水等，即为微胶囊悬浮剂(CS)。

上述抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的使用方法，其特征在于，在植物发生真菌病害之前或发病初期，按活性成分NA的使用浓度20～150ppm，将微胶囊悬浮剂兑水配制成稀释液，采用喷雾法将其喷洒于植物表面。

所述的植物表面是指植物的叶、茎和果实的表面地上部组织。

本发明的有益效果：(1)采用复凝聚法制备NA微胶囊，反应条件温和，不会造成活性成分NA因高温而分解失效；(2)具有良好的抗光解作用，与常规的NA商品药剂相比，可提高抗光解能力3.0倍；与添加光稳定剂UV-531的那他霉素相比，可提高抗光解能力1.1倍，因此在紫外光照下可显著提高防病效果；(3)微胶囊内的活性成分具有良好的缓释作用，较常规制剂具有较长的持效性；(4)微胶囊囊壁具有良好的通透性，较合成高分子化合物作囊壁的微胶囊具有更好的抑菌速效性；(5)为作物生产，尤其是蔬菜生产，提供了安全的生物农药品种，保障了人民的身体健康。

附图说明

图1为那他霉素的化学结构。

图2为那他霉素微胶囊悬浮剂在水和30％甲醇溶液介质中的释放曲线。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明。

以下是实施例中涉及的菌种、原料、试剂、助剂和设备：

1、供试菌株

植物病原真菌：棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、辣椒灰霉病菌(Botrytis cinerea)、茄子灰霉病菌(Botrytis cinerea)、葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)、瓜果腐霉菌(Pythium aphanidermatum)、茄子早疫病菌(Alternaria solani)、小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)、豌豆根腐病菌(Fusarium solani f.sp.pisi)、番茄叶霉病菌(Cladosporium fulvum)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)、百合根腐病菌(Rhizoctonia solani)、李子褐腐病菌(Monilinia fructicola)、桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)、桃枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.persica)、芹菜斑枯病菌(Septoria apii)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum capsici)、甘蓝枯萎病菌(Fusarium oxysporum Schl.f.sp.conglutinans)、苹果轮斑病菌(Alternariamali)。

酵母菌：啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)。

以上植物病原真菌是由中国农业大学植物病理学系和北京市农林科学院植环所提供，啤酒酵母菌购自中国农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)。

2、供试培养基

PDA培养基：马铃薯200g，洗净切成1cm³小块煮沸约30min后用四层纱布过滤，滤液用蒸馏水补足至1000ml，加葡萄糖20g，琼脂15g，pH自然，121℃灭菌30min。

3、供试药剂

利迪链霉菌次生代谢产物的浓缩液(简称NA浓缩液)：NA浓度为1.408g/L，制备方法参照专利《一株产纳他霉素的利迪链霉菌及其应用》，申请号为200710187435.1；0.95g/L那他霉素悬乳剂，自制，含671.4g NA浓缩液，100.7g光稳定剂UV-531，123g二甲苯，33.6g农乳602，11.3g农乳500，60g硅酸镁铝；96％(质量比)那他霉素原药(粉末)(北京东方瑞德生物技术有限公司)；10g/L多抗霉素水剂(陕西绿盾生物制品有限责任公司)。

4、供试试剂和农药助剂

明胶(化学纯)，阿拉伯树胶(化学纯)，甲醇(分析纯)(国药集团化学试剂有限公司)；甲醛(分析纯，天津市永大化学试剂开发中心)。

抗沉淀剂：羧甲基纤维素(CMC)，聚丙烯酸钠(分子量3×10⁷)，海藻酸钠。

表面活性剂：OP-10、TX-10、土温-20、土温-80。

分散剂：木质素磺酸钠、萘磺酸甲醛缩合物(如NNO、MF等)。

抗冻剂：乙二醇、丙二醇、甘油、尿素。

5、仪器和设备

DU800可见-紫外分光光度计(美国BECKMAN)、JY92-IIN超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司)、DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器(巩义市予华仪器有限责任公司)、800台式离心机(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司)、生物显微镜(日本OLYMPUS)、STARTER-3C pH计(上海奥豪斯仪器有限公司)、SFJ-400型砂磨及搅拌多用机(武进市八方机械厂)、BT-9300H激光粒度仪(丹东百特仪器有限公司)、超净工作台(带20W紫外灯)。

实施例1微胶囊制备工艺条件研究及性能测试

试验方法

(1)试验设计

按正交试验L₉(3⁴)正交表设计。选择对包封率影响较大的壁材浓度(明胶与阿拉伯树胶质量比均为1∶1)、芯材与壁材的质量比(简称芯壁比)、反应pH值和反应时间为因素，每个因素设3个水平：壁材浓度(因素A)为10、20和30g/L；芯壁比(因素B)为1.5∶1、1∶1和1∶1.5；反应pH(因素C)为3.5、4.0和4.5；反应时间(因素D)为30、60和90min，试验结果以包封率为评价指标。

包封率测定方法：用可见-紫外分光光度计测定NA微胶囊悬浮液中游离NA在波长303nm处的吸光值，通过标准曲线法计算其含量，根据以下公式计算包封率：

取NA原药1.5g，加入浓度为20g/L阿拉伯树胶水溶液50ml中充分分散并超声细化后，再与浓度为20g/L的明胶水溶液50ml混合均匀，控制温度40～60℃，恒速搅拌下缓慢滴加质量浓度10％的盐酸溶液，调节反应pH为4.5，继续搅拌反应90min后，注入去离子水，移至冰浴，待体系温度降至10℃以下后开始缓慢滴加质量浓度20％的氢氧化钠溶液，将体系pH调节至9.0，然后逐渐滴加质量浓度37％的甲醛溶液1g，保持冰浴搅拌，固化反应1h，自然升至室温，调节体系pH值至7.0，得到NA微胶囊悬浮液。

(3)微胶囊的测试

1)用生物显微镜放大400倍，观察微胶囊的形貌，并用激光粒度分析仪测定微胶囊粒径。

2)释放性能测试：分别选择对囊芯成分溶解度较低的去离子水和较高的30％甲醇溶液作为释放介质比较微胶囊的释放性能。精确称取经过清洗去掉游离NA的干燥微胶囊粉末0.1g(±0.0001g)，放入内装450mL释放介质的三角瓶中，在温度28℃，转速150r/min的摇床条件下定时取2mL释放液，同时补充2mL同温度下的相同释放介质。取出的样品用可见-紫外分光光度计测其吸光值，按下式计算累积释放率，并绘制累积释放率-时间的释放曲线。

式中，C_n为各时间点取出样品的浓度，M为微胶囊含有NA的总质量。

3)抗光解测定(见实施例3)

试验结果

(1)正交试验：结果表明，因素A的极差最大，即壁材浓度对微胶囊的包封率影响最大，因素B和因素D的影响次之，因素C的极差最小，由此可见，体系的pH值对微胶囊的包封率没有显著影响。从表1中得到最佳水平为A₂，B₁，C₃，D₃，即制备微胶囊的最佳工艺条件是壁材浓度为20g/L，芯壁比为1.5∶1，反应pH为4.5，反应时间为90min(见表1)。由于该试验条件在正交试验中没有出现，故需做验证实验。按上述最佳方案重复3次试验，测得平均包封率为79.88％(m/m)，证实该方案可行。

表1 L₉(3⁴)正交试验和包埋率

注：K_i，j(i＝1，2，3；j＝A，B，C，D)为因素j在水平i下所得微胶囊包封率的累计值；

    R_j(j＝A；B；C；D)为因素j的包埋率的极差，R_j＝K_j(max)-K_j(min)。

(2)微胶囊形貌和粒径：取最佳工艺方案制备的微胶囊在显微镜下观察，NA微胶囊属于多核形，内含NA微晶1～50个不等，外观为圆球形或椭球形，粘连小，粒径范围1～100μm，平均粒径为45.01μm，符合微胶囊剂型粒径的要求。

(3)微胶囊释放性能测定：由图2可见，NA微胶囊在两种介质中的释放均经历了三个阶段：第一阶段为0～12h，为快速释放阶段，在这一阶段由于囊内外NA浓度差较大而释放较快，在释放12h时测得水和甲醇溶液中的累积释放率分别为20.3％和35.2％，该特点有利于药剂速效性的发挥；第二阶段为12～96h，为缓慢释放阶段，这一阶段随着囊外释放介质中NA浓度的增大，释放速度趋于缓慢，在释放96h时测得水和甲醇溶液中的累积释放率分别为45.5％和63.1％；第三阶段为96～132h，这一阶段囊内外NA浓度趋于平衡，释放速度更加缓慢，在释放132h时测得水和甲醇溶液中的累积释放量率别为46.8％和63.9％。第二、三阶段缓慢释放的特点有利于药剂的持效性。由此可见，NA微胶囊在两种不同的释放介质中均有很好的缓释性能，虽在以水为介质时释放速率较甲醇溶液稍慢，但可满足杀菌处理时药物良好的通透性和速效性的需要。

实施例2抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的制备

将实施例1最佳方案制备的微胶囊悬浮液经静置后弃去不同数量的上清液，得到NA含量为20g/L和60g/L的微胶囊悬浮液，然后按表2～3的组分和质量配比称取各组分配制微胶囊悬浮剂。方法为先称取抗沉剂，加适量水充分化开，调成浆糊状，再加入经称量的微胶囊悬浮液，然后加入其它成分，在搅拌机转速800～1000rpm/min条件下充分搅拌均匀，即成那他霉素微胶囊悬浮剂(NACS)。

表2 抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的各组分质量配比(一)

表3 抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的各组分质量配比(二)

注：w/w表示质量比。

实施例3药剂的抗光解性能测试

分别称取实施例2的NACS及那他霉素浓缩液、那他霉素悬乳剂(对照)，用去离子水配制至成NA有效浓度为100mg/L的稀释液，取稀释液8mL于直径9cm的培养皿中，敞口放置在超净工作台上，垂直距离紫外灯(20w)32cm进行光照处理。照射时间分别设定为0、5、10、15、20、30、40、50、65、80、95、110、130min。光照后药液的相对活性采用抑菌圈法，方法是将供试啤酒酵母菌在PDA上培养2天后，用无菌生理盐水配成10⁴CFU/ml浓度的菌悬液，取5ml菌悬液与100ml冷却至45℃左右的PDA培养基混匀后倒制平板，每个培养皿(直径9cm)倒入30ml混合液，待凝固后，用直径0.7cm无菌不锈钢打孔器等距离打制4个孔，向每孔内注入处理后的NA微胶囊悬浮剂稀释液100μL待测药液，28℃恒温培养48h，十字交叉法测量抑菌圈的直径。每个处理3次重复。各处理药液的相对活性根据以下公式计算：

微胶囊的速效性在加药24h后测定，以无光照条件的同浓度NA浓缩液的相对活性为基准来比较。

由表4可见，NA浓缩液在紫外光照65min后完全丧失抑菌活性；对于添加光稳定剂UV-531的NA悬乳剂，抗光解性能虽有所提高，但其抑菌活性在光照80min后也完全丧失；而NA微胶囊的抗光解性能则有显著提高，在光照110min后相对活性仍有41.5％，直至光照130min后抑菌活性才完全丧失。

将紫外时间转换成对数，相对活性换成机率值作线性回归(见表5)，并以相对活性下降50％时的光照时间T₅₀为评价指标，可以直观地看出NA微胶囊较其浓缩液和悬乳剂抗光解性能显著增加。经计算，NA浓缩液、NA悬乳剂和NA微胶囊的T₅₀分别为19.93、37.12和78.99min，NA微胶囊较前两者的T₅₀分别提高3.0倍和1.1倍。

在未经紫外光照的条件下，加药24h后NA微胶囊与同浓度的NA浓缩液相比，相对活性为94.1％，说明微胶囊具有良好的速效性，囊壁具有良好的通透性(见表4)。

表4 紫外光照测定结果

表5 线性回归分析结果

*T₅₀为相对活性下降50％时紫外光照时间。

实施例4那他霉素微胶囊悬浮剂的抑菌谱测定

表6 那他霉素微胶囊悬浮剂抑菌测定结果

采用抑菌圈法。供试植物病原真菌在PDA斜面上28℃恒温培养7天后，刮取其分生孢子和菌丝体置盛有无菌玻璃珠(直径2.5mm)和无菌水的三角瓶中用力充分振荡，配成10⁶CFU/ml的菌悬液；取200μl菌悬液均匀涂布在PDA平板(直径9cm)上，用直径0.7cm的无菌不锈钢打孔器等距离打制三个孔，然后向每孔内注入100mg/L NACS稀释液100μl，25℃恒温培养48h，十字交叉法测量抑菌圈的直径；供试啤酒酵母菌测定方法按实施例3进行。每个处理3次重复。

从表6中可以看出，除了对啤酒酵母菌的抑菌圈直径在3.00cm以下外，对其他病原真菌的抑菌圈直径均达到了3.00cm以上，最强的抑菌效果是对小麦纹枯病菌(R.cerealis)和李子褐腐病菌(M.fructicola)，直径达4.77cm。由此说明NA微胶囊具有广谱的抑制真菌的活性。

实施例5那他霉素微胶囊悬浮剂防治番茄灰霉病的防治效果

在大棚内将番茄苗育成8～10cm高的壮苗，然后移入高15cm，直径13cm的塑料花盆内(每盆1株)，培养至番茄初花期施药。将各药剂按表7配制成需要的NA浓度，其试验处理共8种，以NA浓缩液和多抗霉素为对照药剂。施药采用喷雾器，每株苗喷雾容量为33.3mL，重复5次，随机区组排列。喷药后将植株置于大棚内1.5h，使各处理药剂接受阳光照射，起始时间为下午1时，结束时间为下午2:30。起始时测定1次光照强度，结束时测定1次光照强度，重复5次。起始时平均光照强度为23892LX，结束时平均光照强度为13586LX，先后两次的平均值为18740LX。阳光照射后再接种，接种也采用喷雾器，菌种为番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)，悬浮液的孢子浓度为10⁷～10⁸CFU，每盆番茄苗喷雾容量为20mL。接种后立即置于环境温度为15-20℃，相对湿度为70～90％的塑料棚内保湿培养48h，然后置于塑料大棚中培养。施药后1～14天每隔1天观察药害情况；施药后7天和14天考察病情指数、发病率和防治效果，其计算方法如下：

发病率(％)＝发病叶数/调查总叶数×100

病情指数(％)＝∑[(病级叶数×代表数值)]/(调查的总叶数×发病最重级的代表数值)×100

防治效果(％)＝(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数×100

从表7可见，施药后7天和14天的防治效果差异不大。从施药后14天的防治效果来看，喷施NA浓缩液、NA悬乳剂和多抗霉素40ppm的防效分别为31.2％、61.0％和60.3％；喷施微胶囊20、40、100和150ppm的效果分别为75.2％、82.3％、92.9％和94.3％。在同一浓度40ppm情况下，微胶囊的防效优于对照药剂NA浓缩液、NA悬乳剂和多抗霉素，而且差异显著。由此可见，NA微胶囊具有良好的抗光解效果，在防治效果上有显著提高。

表7 微胶囊悬浮剂防治番茄灰霉病的效果

注：表中数据为3次重复的平均值；平均数后的不同字母表示经Duncan′s新复极差测验在p＝0.05水平上差异显著。

Claims (9)

1.一种抗光解杀菌微胶囊悬浮剂，其特征在于，所述抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的活性成分为那他霉素，其组分的质量百分比为：那他霉素0.5%～5.4%；明胶0.3%～8%；阿拉伯树胶0.3%～8%；表面活性剂0.5%～10%；抗沉淀剂0.5%～10%；余量为水。

2.根据权利要求1所述的抗光解杀菌微胶囊悬浮剂，其特征在于，所述微胶囊悬浮剂还包括常规使用剂量的如下组分中的一种或多种：分散剂、防冻剂、消泡剂和pH调整剂。

3.根据权利要求1所述的抗光解杀菌微胶囊悬浮剂，其特征在于，所述微胶囊悬浮剂的各组分及其质量百分比为：那他霉素1%～5%；明胶0.6%～4%；阿拉伯树胶0.6%～4%；表面活性剂1%～5%；抗沉淀剂0.5%～8%；余量为水。

4.根据权利要求1所述的抗光解杀菌微胶囊悬浮剂，其特征在于，微胶囊悬浮剂外观为圆球形或椭球形，球壁由明胶和阿拉伯树胶组成，内含芯材那他霉素微晶1～50个，那他霉素微晶粒径范围在1～100μm。

5.根据权利要求1所述的抗光解杀菌微胶囊悬浮剂，其特征在于，所述表面活性剂为OP-10、TX-10、土温-20和土温-80中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的抗光解杀菌微胶囊悬浮剂，其特征在于，所述抗沉淀剂为聚烯丙烯酸钠、海藻酸钠和羧甲基纤维素中的一种或多种。

7.权利要求1～6任一所述的抗光解杀菌微胶囊悬浮剂在防治真菌病害中的应用。

8.权利要求1所述的抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的制备方法，其特征在于，取那他霉素原药在阿拉伯树胶水溶液中充分分散并超声细化后，与明胶水溶液混合均匀，控制温度40～60℃，恒速搅拌下缓慢滴加质量浓度10%的盐酸溶液，调节反应pH为3～5，继续搅拌反应30～90min后，注入去离子水，移至冰浴，待体系温度降至10 ℃以下后开始缓慢滴加质量浓度20%的氢氧化钠溶液，将体系pH调节至9.0，然后逐渐滴加质量浓度37%的甲醛溶液1 g，保持冰浴搅拌，固化反应1 h，自然升至室温，调节体系pH值至7.0，得到那他霉素微胶囊悬浮液，微胶囊悬浮液经浓缩后，添加表面活性剂，抗沉淀剂和余量水。

9.权利要求1所述的抗光解杀菌微胶囊悬浮剂的使用方法，其特征在于，在植物发生真菌病害之前或发病初期，按活性成分那他霉素的使用浓度20～150ppm，将微胶囊悬浮剂兑水配制成稀释液，采用喷雾法将其喷洒于植物表面。

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