CN108208137A - 用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂，所述的保鲜剂由以下重量份数的原料组成：柚子皮发酵液12‑16份，双乙酸钠0.5‑1份，甘油0.4‑0.7份和植物提取液7‑12份，所述的植物提取液由杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟，按照重量比为（1‑1.5）：（2‑3）：（0.5‑1）：（1‑3）：（1：2）的配比混合提取后制得。本发明的一种以天然植物成分为原料的复配型蔬菜抗菌保鲜剂，成分天然，无毒性，具有较好的驱虫、抑菌和保鲜效果，可有效延长蔬菜的保鲜、贮藏和货架期，健康安全性高。
Description
技术领域
本发明涉及果蔬保鲜技术领域，具体的说是一种采用纯天然生物制剂制备的蔬菜保鲜用抗菌保鲜剂及其制备方法和用途。
背景技术
新鲜蔬菜在采摘、贮藏、加工、消费的过程中，极易腐败变质，造成巨大的资源浪费和经济损失。腐烂损失的同时，病原微生物还会产生大量毒素，危及人们的健康。据不完全统计，发达国家约有10%~20%的新鲜果蔬由于微生物而导致腐烂，发展中国家这一比例则高达40%~50%。因此在果蔬贮藏过程中需使用抗菌保鲜剂来抑制微生物的生长与繁殖，延长果蔬的贮藏期，防止其败变质。
目前，现有技术中针对蔬菜进行运输、仓库贮藏以及货架保鲜过程中使用的保鲜方式主要有以下两种：1、外套塑料薄膜的方式。这种方式虽然具有避免蔬菜与外界过多接触，防止蔬菜被外界细菌破坏，保持蔬菜自身水分不易流失等优点，但其会造成巨大的资源浪费和环境破坏。且蔬菜的塑料薄膜包装需要耗费大量的人力物力，且作用不持久，蔬菜内部的细菌还会造成蔬菜内的腐烂，变质。2、外涂化学保鲜剂的方式。随着科学技术的进步和检测方法的不断完善，一些过去认为安全的化学防腐保鲜剂存在癌或潜在致癌、致畸、致突变的风险，对人体的伤害较大。
经研究表明：许多植物都具有抑菌杀菌能力，因此植物源天然防腐剂来源十分广泛，目前已知世界上大约存在2万余种具有抑菌杀菌作用的药用植物。《中药大词典》中收录的4773种传统中草药中至少2000中植物具有抗菌防腐作用，它们的药效明确，安全性有保障，具有广阔的开发应用价值。
因此，开发研究一种取材于天然生物的，无毒、高效、天然的蔬菜保鲜剂，对于蔬菜的保鲜来说实为必要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：提供一种以天然植物成分为原料的复配型蔬菜抗菌保鲜剂，其成分天然，对人体无毒性，具有较好的驱虫、抑菌和保鲜效果，可有效延长蔬菜的保鲜、贮藏和货架期，健康安全性高。
本发明为解决上述技术问题，所采用的技术方案是：用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂，所述的保鲜剂由以下重量份数的原料组成：柚子皮发酵液12-16份，双乙酸钠0.5-1份，甘油0.4-0.7份和植物提取液7-12份，所述的植物提取液由杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟，按照重量比为（1-1.5）：（2-3）：（0.5-1）：（1-3）：（1：2）的配比混合提取后制得。
进一步的，所述的植物提取液中，各原料的重量配比为杜仲：金钱草：野菊花：鱼腥草：大蓟为1.2：2.5：0.8：2：1.4。
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的制备方法，制备步骤如下：
（1）柚子皮发酵液的制备
取新鲜柚子皮置于阳光下进行摊晒至其含水量为20%-30%，之后，将其切分成小块，并置于质量浓度为10%-15%的氯化钠溶液中进行浸泡1-2h，取出后转置于微波炉内调节微波功率为800-1000 W，进行微波处理100～150s，然后，将所得物料放入破碎机中破碎成浆液，并将所得浆液转置于发酵罐中，向其中加入浆液质量0.3-0.5%的果胶酶和浆液质量0.5-1.2%的纤维素酶，并加入浆液质量0.3-0.4倍的水，充分混匀后，于20~25℃条件下进行发酵20-48h，之后，对所得发酵物进行压榨、过滤和灭酶处理，即得柚子皮发酵液，备用；
（2）植物提取液的制备
步骤一、按照上述重量份数，分别取新鲜杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟清洗、泠干水，备用；
步骤二、取步骤一制得的杜仲和大蓟放入破碎机中破碎成浆料，之后，向所得浆料中加入其质量15-25倍的乙醇溶液进行浸泡30-60min，之后，在超声波辅助条件下进行回流提取1.5-2h，取65-100℃之间的馏分，得到植物组分A，备用；
步骤三、取步骤一制得的金钱草、野菊花和鱼腥草，阳光下摊晒至其含水量为20%-25%后，切分成粒径为0.4-0.8cm的碎块，之后，将碎块置于处理液中进行浸泡处理1-2h，取出后放入破碎机中破碎成浆料，然后，向其中加入其质量1.3-1.5倍的乙醇溶液，充分搅拌混合后，对所得产物进行压榨、过滤和去色处理，得到植物组分B，备用；
步骤四、将步骤二和步骤三制得的植物组分A和植物组分B进行混合，即得植物提取液，备用；
（3）保鲜剂的制备
步骤1）、按照上述重量份数，分别称取双乙酸钠和甘油，备用；
步骤2）、取步骤1）称取的双乙酸钠加入到上述步骤制备的植物提取液中，充分搅拌混合后，备用；
步骤3）、在不断搅拌条件下，向上述步骤制备的柚子皮发酵液中加入步骤1）称取的甘油，混合均匀后，进行多次超声分散和静置处理，之后，对所得混合物进行脱色处理，即得成品保鲜剂。
进一步的，在步骤二和步骤三中，所述乙醇溶液的质量浓度为97%。
进一步的，在步骤三中，所述的处理液中Vc的质量浓度为0.08-0.13%，NaOH的质量浓度为8%-12%。
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的使用方法，向所述的保鲜剂中加入其质量2-3倍的水，混合均匀后，喷淋或浸泡在蔬菜的表面。
有益效果：
（1）、本发明制备的一种纯天然的蔬菜用抗菌保鲜剂，能够涂覆或喷洒在蔬菜的表面，对蔬菜起到驱虫、抑菌、消毒和保鲜的效果。复配型抗菌保鲜剂中的杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟等中药成分以及含有多种皂苷、黄酮类化合物、橙皮甙和芳香油的柚子皮发酵液成品天然，无毒环保，与蔬菜的生物相容性好，且具有较好的抑菌、杀菌和驱虫作用，安全性好，抗菌保鲜效果显著。保鲜剂中的天然植物成分与双乙酸钠和甘油协同配合后，多组分协同作用，能够附着在蔬菜表面，形成生物质的保鲜隔离层，有效避免外接污染物和细菌的浸入，抑制蔬菜的有氧呼吸，从而起到较好的抗菌、保鲜和抑菌作用，延长蔬菜的保鲜、贮藏和货架期，健康安全性高。同时，本发明的蔬菜用抗菌保鲜剂在选用植物抗菌成分时，具体选择的杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟中药成分中，均为中药抗菌物中毒副作用相对较小，且亲水性较好的药用成分。这些物质在蔬菜表面涂覆或喷洒使用后，仅会在涂覆膜中留存，不易渗透到蔬菜结构的内部，对蔬菜品质造成影响。同时，亲水性较好的药用杀菌成分在洗菜时，易与外部水分结合，脱离蔬菜表面，既起到了食用前的抗菌防护作用，又达到了食用时，易清洗脱除，避免被人体过多吸收的良好去除效果。
（2）、本发明制备的抗菌保鲜剂，含有多种抗菌、抗氧化的活性生物成分，阻湿、抑菌效果好。与化学保鲜剂相比，安全无毒，稳定性好，满足了现代人安全健康的蔬菜保鲜剂需要，具有广阔的开发应用前景。对本发明所制得的抗菌保鲜剂进行防腐抑菌保鲜活性试验表明：其相比常规化学保鲜剂，保鲜防腐时间延长了25%-35%，保鲜效果显著。
（3）、本发明提供的抗菌保鲜剂的制备方法，方法本身操作简单，工艺条件温和，药用成分利用率高。在柚子皮发酵液的制备过程中，通过对柚子皮进行摊晒杀菌、浸泡杀菌吸水、微波处理以及发酵等步骤，可使柚子皮细胞中的有效药理成分冲破细胞壁的束缚，随水分进入到后续的发酵液中。而步骤中的发酵过程，可使柚子皮成分中的粗纤维、果糖等成分得到一定程度的水解，转化成小分子的多糖或细小的游离质纤维成分，从而为保鲜剂复配时，杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟等中药成分中的药用成分提供附着用的载体，进而使药用成分呈面状均匀分布，最大限度的与蔬菜表面或外界接触，起到广泛的抑菌效果，同时柚子皮发酵液本身含有芳香类化合物，气味怡人，附着在载体表面后，对蔬菜堆积产生的菜青气味得到了一定程度的掩盖。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐明本发明。以下实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容后，本领域技术人员可以对本发明做各种修改或改动，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂，所述的保鲜剂由以下重量份数的原料组成：柚子皮发酵液12-16份，双乙酸钠0.5-1份，甘油0.4-0.7份和植物提取液7-12份，所述的植物提取液由杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟，按照重量比为（1-1.5）：（2-3）：（0.5-1）：（1-3）：（1：2）的配比混合提取后制得。
进一步的，所述的植物提取液中，各原料的重量配比为杜仲：金钱草：野菊花：鱼腥草：大蓟为1.2：2.5：0.8：2：1.4。
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的制备方法，制备步骤如下：
（1）柚子皮发酵液的制备
取新鲜柚子皮置于阳光下进行摊晒至其含水量为20%-30%，之后，将其切分成小块，并置于质量浓度为10%-15%的氯化钠溶液中进行浸泡1-2h，取出后转置于微波炉内调节微波功率为800-1000 W，进行微波处理100～150s，然后，将所得物料放入破碎机中破碎成浆液，并将所得浆液转置于发酵罐中，向其中加入浆液质量0.3-0.5%的果胶酶和浆液质量0.5-1.2%的纤维素酶，并加入浆液质量0.3-0.4倍的水，充分混匀后，于20~25℃条件下进行发酵20-48h，之后，对所得发酵物进行压榨、过滤和灭酶处理，即得柚子皮发酵液，备用；
（2）植物提取液的制备
步骤一、按照上述重量份数，分别取新鲜杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟清洗、泠干水，备用；
步骤二、取步骤一制得的杜仲和大蓟放入破碎机中破碎成浆料，之后，向所得浆料中加入其质量15-25倍的乙醇溶液进行浸泡30-60min，之后，在超声波辅助条件下进行回流提取1.5-2h，取65-100℃之间的馏分，得到植物组分A，备用；
步骤三、取步骤一制得的金钱草、野菊花和鱼腥草，阳光下摊晒至其含水量为20%-25%后，切分成粒径为0.4-0.8cm的碎块，之后，将碎块置于处理液中进行浸泡处理1-2h，取出后放入破碎机中破碎成浆料，然后，向其中加入其质量1.3-1.5倍的乙醇溶液，充分搅拌混合后，对所得产物进行压榨、过滤和去色处理，得到植物组分B，备用；
步骤四、将步骤二和步骤三制得的植物组分A和植物组分B进行混合，即得植物提取液，备用；
（3）保鲜剂的制备
步骤1）、按照上述重量份数，分别称取双乙酸钠和甘油，备用；
步骤2）、取步骤1）称取的双乙酸钠加入到上述步骤制备的植物提取液中，充分搅拌混合后，备用；
步骤3）、在不断搅拌条件下，向上述步骤制备的柚子皮发酵液中加入步骤1）称取的甘油，混合均匀后，进行多次超声分散和静置处理，之后，对所得混合物进行脱色处理，即得成品保鲜剂。
进一步的，在步骤二和步骤三中，所述乙醇溶液的质量浓度为97%。
进一步的，在步骤三中，所述的处理液中Vc的质量浓度为0.08-0.13%，NaOH的质量浓度为8%-12%。
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的使用方法，向所述的保鲜剂中加入其质量2-3倍的水，混合均匀后，喷淋或浸泡在蔬菜的表面。
实施例1
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂，所述的保鲜剂由以下重量份数的原料组成：柚子皮发酵液15份，双乙酸钠0.8份，甘油0.6份和植物提取液10份，所述的植物提取液由杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟按照重量比为1.2：2.5：0.8：2：1.4的配比混合提取后制得。
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的制备方法，制备步骤如下：
（1）柚子皮发酵液的制备
取新鲜柚子皮置于阳光下进行摊晒至其含水量为30%，之后，将其切分成小块，并置于质量浓度为10%的氯化钠溶液中进行浸泡2h，取出后转置于微波炉内调节微波功率为800W，进行微波处理150s，然后，将所得物料放入破碎机中破碎成浆液，并将所得浆液转置于发酵罐中，向其中加入浆液质量0.5%的果胶酶和浆液质量0.5%的纤维素酶，并加入浆液质量0.4倍的水，充分混匀后，于20℃条件下进行发酵20h，之后，对所得发酵物进行压榨、过滤和灭酶处理，即得柚子皮发酵液，备用；
（2）植物提取液的制备
步骤一、按照上述重量份数，分别取新鲜杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟清洗、泠干水，备用；
步骤二、取步骤一制得的杜仲和大蓟放入破碎机中破碎成浆料，之后，向所得浆料中加入其质量20倍的乙醇溶液进行浸泡40min，之后，在超声波辅助条件下进行回流提取1.8h，取65-100℃之间的馏分，得到植物组分A，备用；
步骤三、取步骤一制得的金钱草、野菊花和鱼腥草，阳光下摊晒至其含水量为23%后，切分成粒径为0.5cm的碎块，之后，将碎块置于Vc的质量浓度为0.1%，NaOH的质量浓度为10%的处理液中进行浸泡处理1.5h，取出后放入破碎机中破碎成浆料，然后，向其中加入其质量1.4倍的乙醇溶液，充分搅拌混合后，对所得产物进行压榨、过滤和去色处理，得到植物组分B，备用；
步骤四、将步骤二和步骤三制得的植物组分A和植物组分B进行混合，即得植物提取液，备用；
（3）保鲜剂的制备
步骤1）、按照上述重量份数，分别称取双乙酸钠和甘油，备用；
步骤2）、取步骤1）称取的双乙酸钠加入到上述步骤制备的植物提取液中，充分搅拌混合后，备用；
步骤3）、在不断搅拌条件下，向上述步骤制备的柚子皮发酵液中加入步骤1）称取的甘油，混合均匀后，进行多次超声分散和静置处理，之后，对所得混合物进行脱色处理，即得成品保鲜剂。
实施例2
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂，所述的保鲜剂由以下重量份数的原料组成：柚子皮发酵液12份，双乙酸钠1份，甘油0.7份和植物提取液12份，所述的植物提取液由杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟按照重量比为1：3：0.5：1：2的配比混合提取后制得。
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的制备方法，制备步骤如下：
（1）柚子皮发酵液的制备
取新鲜柚子皮置于阳光下进行摊晒至其含水量为25%，之后，将其切分成小块，并置于质量浓度为12%的氯化钠溶液中进行浸泡2h，取出后转置于微波炉内调节微波功率为900W，进行微波处理120s，然后，将所得物料放入破碎机中破碎成浆液，并将所得浆液转置于发酵罐中，向其中加入浆液质量0.4%的果胶酶和浆液质量0.8%的纤维素酶，并加入浆液质量0.35倍的水，充分混匀后，于23℃条件下进行发酵35h，之后，对所得发酵物进行压榨、过滤和灭酶处理，即得柚子皮发酵液，备用；
（2）植物提取液的制备
步骤一、按照上述重量份数，分别取新鲜杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟清洗、泠干水，备用；
步骤二、取步骤一制得的杜仲和大蓟放入破碎机中破碎成浆料，之后，向所得浆料中加入其质量15倍的乙醇溶液进行浸泡60min，之后，在超声波辅助条件下进行回流提取2h，取65-100℃之间的馏分，得到植物组分A，备用；
步骤三、取步骤一制得的金钱草、野菊花和鱼腥草，阳光下摊晒至其含水量为25%后，切分成粒径为0.8cm的碎块，之后，将碎块置于Vc的质量浓度为0.13%，NaOH的质量浓度为8%的处理液中进行浸泡处理2h，取出后放入破碎机中破碎成浆料，然后，向其中加入其质量1.3倍的乙醇溶液，充分搅拌混合后，对所得产物进行压榨、过滤和去色处理，得到植物组分B，备用；
步骤四、将步骤二和步骤三制得的植物组分A和植物组分B进行混合，即得植物提取液，备用；
（3）保鲜剂的制备
步骤1）、按照上述重量份数，分别称取双乙酸钠和甘油，备用；
步骤2）、取步骤1）称取的双乙酸钠加入到上述步骤制备的植物提取液中，充分搅拌混合后，备用；
步骤3）、在不断搅拌条件下，向上述步骤制备的柚子皮发酵液中加入步骤1）称取的甘油，混合均匀后，进行多次超声分散和静置处理，之后，对所得混合物进行脱色处理，即得成品保鲜剂。
实施例3
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂，所述的保鲜剂由以下重量份数的原料组成：柚子皮发酵液16份，双乙酸钠0.5份，甘油0.4份和植物提取液7份，所述的植物提取液由杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟按照重量比为1.5：2：1：3：1的配比混合提取后制得。
用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的制备方法，制备步骤如下：
（1）柚子皮发酵液的制备
取新鲜柚子皮置于阳光下进行摊晒至其含水量为20%，之后，将其切分成小块，并置于质量浓度为15%的氯化钠溶液中进行浸泡1h，取出后转置于微波炉内调节微波功率为1000W，进行微波处理100s，然后，将所得物料放入破碎机中破碎成浆液，并将所得浆液转置于发酵罐中，向其中加入浆液质量0.3%的果胶酶和浆液质量1.2%的纤维素酶，并加入浆液质量0.3倍的水，充分混匀后，于25℃条件下进行发酵48h，之后，对所得发酵物进行压榨、过滤和灭酶处理，即得柚子皮发酵液，备用；
（2）植物提取液的制备
步骤一、按照上述重量份数，分别取新鲜杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟清洗、泠干水，备用；
步骤二、取步骤一制得的杜仲和大蓟放入破碎机中破碎成浆料，之后，向所得浆料中加入其质量25倍的乙醇溶液进行浸泡30min，之后，在超声波辅助条件下进行回流提取1.5h，取65-100℃之间的馏分，得到植物组分A，备用；
步骤三、取步骤一制得的金钱草、野菊花和鱼腥草，阳光下摊晒至其含水量为20%后，切分成粒径为0.4cm的碎块，之后，将碎块置于Vc的质量浓度为0.08%，NaOH的质量浓度为12%的处理液中进行浸泡处理1h，取出后放入破碎机中破碎成浆料，然后，向其中加入其质量1.5倍的乙醇溶液，充分搅拌混合后，对所得产物进行压榨、过滤和去色处理，得到植物组分B，备用；
步骤四、将步骤二和步骤三制得的植物组分A和植物组分B进行混合，即得植物提取液，备用；
（3）保鲜剂的制备
步骤1）、按照上述重量份数，分别称取双乙酸钠和甘油，备用；
步骤2）、取步骤1）称取的双乙酸钠加入到上述步骤制备的植物提取液中，充分搅拌混合后，备用；
步骤3）、在不断搅拌条件下，向上述步骤制备的柚子皮发酵液中加入步骤1）称取的甘油，混合均匀后，进行多次超声分散和静置处理，之后，对所得混合物进行脱色处理，即得成品保鲜剂。
下面通过具体的实验对本发明所制备的抗菌保鲜剂进行蔬菜保鲜的效果实验。
蔬菜保鲜评价实验：
1. 实验材料、试剂及仪器
1.1 实验材料
杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟均采摘于豫西地区；食品级双乙酸钠和甘油；市售新鲜柚子的果皮；黄瓜；青椒；西红柿。
1.2 实验试剂
1.3实验仪器
其他仪器均为实验室常用设备。
2. 实验方法
2.1蔬菜的处理
选取新鲜、饱满、大小均一、无机械损伤的黄瓜、青椒和西红柿，并随机分成5组，每组包含以上三种蔬菜。将这5组蔬菜进行喷涂处理（1组：喷涂实施例1制备的保鲜剂添加其质量2.5倍的水均匀混合后制得的保鲜喷涂液体；2组：喷涂实施例2制备的保鲜剂添加其质量2.5倍的水均匀混合后制得的保鲜喷涂液体；3组：喷涂实施例3制备的保鲜剂添加其质量2.5倍的水均匀混合后制得的保鲜喷涂液体；4组：喷涂实施例4制备的保鲜剂添加其质量2.5倍的水均匀混合后制得的保鲜喷涂液体；5组：涂覆无菌水，作阴性对照）。将上述蔬菜在配置的保鲜液中浸泡30s，待蔬菜表面充分浸润后置于室温沥干，然后装入打孔的塑料袋中于室温保藏。
2.2理化指标的测定
2.2.1失重率的测定
定期测定蔬菜重量的变化。计算失重率，以蔬菜的平均重量为基准，以失重的百分率表示失重率。其结果为：
2.2.2 VC含量的测定
将新鲜蔬菜洗净后淋干并用纱布拭去其表面水份，准确称取20 g,切成碎块置于匀浆机内，加入约60 mL2%草酸溶液，搅拌成匀浆。将匀浆倾入100mL容量瓶中，用2%草酸溶液洗涤匀浆器数次，洗液均转入容量瓶中，最后稀释至刻度。混匀后用快速滤纸过滤，弃去最初滤出的滤液。吸取滤液5-10mL放入锥形瓶中，立即用标定过的2,6-二氯酚靛酚进行快速滴定。整个滴定过程不得超过2 min。同时用2%草酸溶液作空白对照，分别记下各次滴定所消耗的染料溶液的体积（mL）。
计算公式：
VA为滴定样品所消耗的2,6-二氯酚靛酚的平均毫升数；
VB为滴定空白对照所消耗的2,6-二氯酚靛酚的平均毫升数；
C为样品的总毫升数；D为滴定时所取样品毫升数；
W为被检测样品的质量；
T为1毫升标准2,6-二氯酚靛酚溶液相当维生素C毫克数，T的具体数目为mg/mL。
蔬菜抗菌评价实验：
根据GB抗菌性测试，实验指标为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌。
通过将涂有保鲜剂的蔬菜与一定量的菌悬液作用一段时间后，再对菌落进行计数。实验对象的分组与保鲜评价实验一致。
将各试验菌经过增菌培养和划线分离培养，选取单个典型菌落接种普通营养琼脂培养基斜面，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌用琼脂培养基斜面，37℃培养24h。
培养基制备：将蛋白胨溶于蒸馏水中，加热进行搅拌溶解，制得液体培养基，然后将一定量的琼脂加入液体培养基，加热搅拌，制得固体培养基，其中蛋白胨和所用的蒸馏水都经过120℃高温蒸汽灭菌处理。
操作过程：用接种环从固体培养基上取一定量的新鲜细菌，加入液体培养基，然后将液体培养基用蒸馏水做10倍稀释，大肠杆菌的稀释浓度为2.5×106cfu/mL，金黄色葡萄球菌稀释浓度为8.9×106cfu/mL；分别取1mL的上述菌液滴加在五组蔬菜的表面，用灭菌覆盖膜覆盖在五组蔬菜上，在37℃、湿度大于90%的条件下，培养24h，用24mL洗脱液反复清洗覆盖膜和五组保鲜膜，然后取0.2mL洗脱液滴入固体琼脂培养基上，在37℃条件下培养1～48h，然后进行活菌计数，测定活菌数目。计算其抗菌率，结果如下表所示。
对大肠杆菌抗菌性能的影响
对金黄色葡萄球菌抗菌性能的影响
试验结论：由上述实验可知，本申请制备的抗菌保鲜剂在抗菌、抑菌，以及失重率、VC含量等多个保鲜指标上，均优于常规的市售化学保鲜剂。且其无毒副作用作用效果稳定，安全可靠性高。
Claims (6)
1.用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂，其特征在于：所述的保鲜剂由以下重量份数的原料组成：柚子皮发酵液12-16份，双乙酸钠0.5-1份，甘油0.4-0.7份和植物提取液7-12份，所述的植物提取液由杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟，按照重量比为（1-1.5）：（2-3）：（0.5-1）：（1-3）：（1：2）的配比混合提取后制得。
2.根据权利要求1所述的用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂，其特征在于：所述的植物提取液中，各原料的重量配比为杜仲：金钱草：野菊花：鱼腥草：大蓟为1.2：2.5：0.8：2：1.4。
3.根据权利要求1所述的用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：
（1）柚子皮发酵液的制备
取新鲜柚子皮置于阳光下进行摊晒至其含水量为20%-30%，之后，将其切分成小块，并置于质量浓度为10%-15%的氯化钠溶液中进行浸泡1-2h，取出后转置于微波炉内调节微波功率为800-1000 W，进行微波处理100～150s，然后，将所得物料放入破碎机中破碎成浆液，并将所得浆液转置于发酵罐中，向其中加入浆液质量0.3-0.5%的果胶酶和浆液质量0.5-1.2%的纤维素酶，并加入浆液质量0.3-0.4倍的水，充分混匀后，于20~25℃条件下进行发酵20-48h，之后，对所得发酵物进行压榨、过滤和灭酶处理，即得柚子皮发酵液，备用；
（2）植物提取液的制备
步骤一、按照上述重量份数，分别取新鲜杜仲、金钱草、野菊花、鱼腥草和大蓟清洗、泠干水，备用；
步骤二、取步骤一制得的杜仲和大蓟放入破碎机中破碎成浆料，之后，向所得浆料中加入其质量15-25倍的乙醇溶液进行浸泡30-60min，之后，在超声波辅助条件下进行回流提取1.5-2h，取65-100℃之间的馏分，得到植物组分A，备用；
步骤三、取步骤一制得的金钱草、野菊花和鱼腥草，阳光下摊晒至其含水量为20%-25%后，切分成粒径为0.4-0.8cm的碎块，之后，将碎块置于处理液中进行浸泡处理1-2h，取出后放入破碎机中破碎成浆料，然后，向其中加入其质量1.3-1.5倍的乙醇溶液，充分搅拌混合后，对所得产物进行压榨、过滤和去色处理，得到植物组分B，备用；
步骤四、将步骤二和步骤三制得的植物组分A和植物组分B进行混合，即得植物提取液，备用；
（3）保鲜剂的制备
步骤1）、按照上述重量份数，分别称取双乙酸钠和甘油，备用；
步骤2）、取步骤1）称取的双乙酸钠加入到上述步骤制备的植物提取液中，充分搅拌混合后，备用；
步骤3）、在不断搅拌条件下，向上述步骤制备的柚子皮发酵液中加入步骤1）称取的甘油，混合均匀后，进行多次超声分散和静置处理，之后，对所得混合物进行脱色处理，即得成品保鲜剂。
4.根据权利要求3所述的用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的制备方法，其特征在于：在步骤二和步骤三中，所述乙醇溶液的质量浓度为97%。
5.根据权利要求3所述的用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的制备方法，其特征在于：在步骤三中，所述的处理液中Vc的质量浓度为0.08-0.13%，NaOH的质量浓度为8%-12%。
6.根据权利要求1所述的用于蔬菜保鲜的抗菌保鲜剂的使用方法，其特征在于：向所述的保鲜剂中加入其质量2-3倍的水，混合均匀后，喷淋或浸泡在蔬菜的表面。
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