CN102423353A - 一种具有美白作用的中药组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有美白作用的中药组合物，系以玫瑰花4-6份、旋花4-6份、梨花2-4份、樱桃花1-3份、李子花1-3份为原料，采用水蒸气蒸馏法提取而得的挥发油。本发明组合物美白作用明显。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药组合物，尤其是一种具有美白作用的中药组合物。
背景技术
随着社会的发展和生活水平的提高，化妆品已成为人们生活中不可缺少的一部分。与此同时，人们对于化妆品的质量和性能要求也越来越高。
皮肤颜色由三个因素决定：皮肤内各种色素的含量与分布状况，皮肤血液内氧合血红蛋白与还原血红蛋白的含量，皮肤的厚度及光线在皮肤表面的散射现象。其中皮肤内含有的黑素细胞所产生的黑素是决定皮肤颜色的主要因素，酪氨酸酶则是合成黑素的关键酶，因此抑制酪氨酸酶活性从而抑制黑素的产生是最终达到美白效果的关键途径。
目前国内外用于化妆品的美白剂主要为氢醌、曲酸、果酸、熊果苷和维生素C衍生物等,其中一些物质存在细胞毒性较强，皮肤渗透性弱以及稳定性差或价格昂贵等缺点。
植物美白依其纯天然性，来源的广泛性，品种丰富，无毒、无副作用等优点，越来越多的受到广大消费者的关注。
中药材玫瑰花：为蔷薇科植物玫瑰Rosa rugosa Thunb.的花。具有理气解郁、和血调经的功效。
中药材旋花：为旋花科植物旋花Calystegia sepium (L.) R.Br.的花。具有益气、养颜、涩精的功效。
中药材梨花：为蔷薇科植物白梨Pyrus bretschneideri Rehd.,沙梨P. pyriflolia (Burm. F.) Nakai,秋子梨P. ussuriensis Maxim.的花。具有泽面祛斑的功效。
中药材樱桃花：为蔷薇科植物樱桃Cerasus pseudocerasus (Lindl.) G. Don的花。具有养颜祛斑的功效。
中药材李子花：为蔷薇科植物李Prunus salicina Lindl.的花。具有泽面的功效。
挥发油（volatile oils）又称精油（essential oils），是一类具有芳香气味的油状液体的总称。在常温下能挥发，可随水蒸气蒸馏。挥发油类成分主要存在种子植物，尤其是芳香植物中。
发明内容
本发明所要解决的问题是提供一种具有美白作用的组合物。
为了解决上述技术问题，本发明提出了下述技术方案：
一种具有美白作用的中药组合物，以一组中药材为原料，采用水蒸气蒸馏法提取而得的挥发油；所述中药材的质量份数如下：玫瑰花4-6份、旋花4-6份、梨花2-4份、樱桃花1-3份、李子花1-3份。
所述中药材的质量份数优选为：玫瑰花5份、旋花5份、梨花3份、樱桃花2份、李子花2份。
本发明组合物的美白作用，通过下列功效试验证明。
试验例1对小鼠B16黑色素细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。
1.1 材料
小鼠B16黑色素瘤细胞株、DMEM培养基购于中国医学科学院。胰蛋白酶、L-DOPA、四甲基偶氮唑蓝(MTT)购于南京建成生物公司。熊果苷（98%）购于南京泽朗医药科技有限公司，本发明组合物,按实施例11方法自制。
酶标仪,美国BIO-RAD公司。
1.2 方法
1.2.1 供试药物的制备
取按实施例11方法制备的中药组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组。
1.2.2 小鼠B16黑色素细胞培养
无菌条件下,将1×105个/mL的小鼠B16黑色素细胞接种于含10% (体积分数)小牛血清的DMEM培养基的培养瓶中,在37℃、5%CO2培养箱中培养,每3天用0.25%胰酶消化传代一次。
1.2.3 细胞内酪氨酸酶活力测定
待细胞生长到对数期,用0.25%胰酶消化,调整到细胞2×104个/mL,接种于96孔板中,每孔100μL。置于培养箱中培养24h后,弃上清液,添加待测药物。每一浓度设8个孔,对照组不加药物,代之同量维持液。孵育3天。药物作用3天后,弃去上清液,用pH6.8 PBS冲洗两遍,每孔加90μL含1%Triton X-100的PBS。冰浴中超声破碎,每孔加10μL 10mM的L-DOPA,37℃孵育60min,测量490nm各孔吸光度值。
抑制率=(1-药物组平均吸光度值/对照组平均吸光度值)×100%。
1.2.4 细胞内黑色素含量测定
将B16黑色素细胞以1×105个/mL的密度接种于6孔板。每孔3mL,孵育24h后,弃上清液,添加待测药物,药物作用3d后,弃上清液,PBS洗涤,每孔加入0.5mL胰酶消化细胞3min,加2mL维持液终止消化,分别计数每组细胞。细胞悬液离心弃上清,沉淀中加入1mol/L NaOH溶液,80℃加热30min。分光光度计检测475nm的吸光度。
黑色素合成抑制率=[1-(药物孔吸光度值/药物孔细胞数)/(对照孔吸光度值/对照孔细胞数)]×100%
1.2.4 数据处理
数据以均值±标准差表示。
1.3 结果
由于高浓度药物对细胞的生长有明显影响,为了避免药物细胞毒性对酶活性作用的干扰,本实验采用了对细胞正常生理无影响的药物浓度。
试验结果（见表1）表明，本发明组合物能显著抑制酪氨酸酶活性，抑制黑色素合成。
表1 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 53.6±0.3 | 46.5±0.5 |
| 中剂量组 | 67.4±0.2 | 52.0±0.4 |
| 高剂量组 | 88.3±0.2 | 76.8±0.4 |
| 熊果苷组 | 82.4±0.4 | 70.1±0.3 |
试验例2、人体皮肤实验
2.1 材料
皮肤黑色素检测仪,德国CK公司。
2.2 方法
2.2.1 供试药物的制备
测试样品：取按实施例11方法制备的中药组合物，按下述配方制备成乳浊液：本发明组合物，质量百分比20%；无水乙醇，质量百分比15%；羧甲基纤维素，质量百分比1%；去离子水，质量百分比64%。
对照品：参照测试样品配方，由不含中药组合物的基质制成。
2.2.2 试验方法
选皮肤健康的成年女性30人，左右前臂内侧2cm×2cm区域为受试部位,一侧为实验区,涂抹样品；一侧为对照区,涂抹对照品。每天涂抹1次,共28天。每隔7天用皮肤黑色素测试仪检查皮肤中黑色素含量。并按下列方法计算黑色素抑制率：
皮肤黑色素抑制率=（对照区皮肤黑色素含量-实验区皮肤黑色素含量）/对照区皮肤黑色素含量×100%。
2.2.4 数据处理
数据以均值±标准差表示。
2.3 结果
试验结果（见表2）表明，本发明组合物能明显降低皮肤黑色素含量,并且随着时间逐步降低。
表2 对人体皮肤中黑色素的影响。
| 第1周 | 第2周 | 第3周 | 第4周 | |
| 黑色素抑制率(%) | 9.8±4.5 | 12.2±6.8 | 14.6±5.4 | 18.7±9.6 |
上述试验表明，本发明组合物具有很强的美白作用，可作为美白添加剂用于化妆品的制备，根据不同的制备方式，其在化妆品中的质量百分比可以是1-50%。
为了更好的说明本发明的技术方案，下文将对其具体实施方式作进一步的表述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
处方：玫瑰花400g、旋花600g、梨花400g、樱桃花300g、李子花300g（相当于4:6:4:3:3）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得20g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表3）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表3 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 54.8±0.2 | 44.2±0.4 |
| 中剂量组 | 63.6±0.3 | 51.3±0.6 |
| 高剂量组 | 85.4±0.5 | 72.6±0.5 |
实施例2
处方：玫瑰花600g、旋花400g、梨花200g、樱桃花100g、李子花100g（相当于6: 4: 2: 1:1）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得15g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表4）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表4 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 52.2±0.3 | 41.6±0.5 |
| 中剂量组 | 61.4±0.5 | 50.7±0.5 |
| 高剂量组 | 80.2±0.6 | 67.5±0.6 |
实施例3
处方：玫瑰花600g、旋花400g、梨花400g、樱桃花300g、李子花300g（相当于6: 4: 4: 3:3）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得19g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表5）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表5 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 53.4±0.4 | 43.3±0.4 |
| 中剂量组 | 63.6±0.4 | 53.4±0.6 |
| 高剂量组 | 82.8±0.6 | 62.8±0.5 |
实施例4
处方：玫瑰花400g、旋花600g、梨花200g、樱桃花100g、李子花100g（相当于4: 6: 2: 1:1）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得16g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表6）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表6 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 51.2±0.6 | 40.4±0.6 |
| 中剂量组 | 62.7±0.5 | 51.7±0.7 |
| 高剂量组 | 79.3±0.4 | 62.9±0.4 |
实施例5
处方：玫瑰花600g、旋花600g、梨花200g、樱桃花300g、李子花300g（相当于6: 6: 2: 3:3）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得21g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表7）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表7 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 54.7±0.6 | 42.8±0.5 |
| 中剂量组 | 65.2±0.6 | 54.6±0.4 |
| 高剂量组 | 81.4±0.7 | 64.5±0.6 |
实施例6
处方：玫瑰花400g、旋花400g、梨花400g、樱桃花100g、李子花100g（相当于4: 4: 4: 1:1）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得15g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表8）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表8 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 50.7±0.5 | 41.2±0.6 |
| 中剂量组 | 61.4±0.7 | 50.3±0.6 |
| 高剂量组 | 78.6±0.4 | 61.2±0.5 |
实施例7
处方：玫瑰花600g、旋花600g、梨花400g、樱桃花100g、李子花300g（相当于6: 6: 4: 1:3）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得20g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表9）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表9 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 54.5±0.6 | 44.3±0.5 |
| 中剂量组 | 65.7±0.8 | 53.7±0.4 |
| 高剂量组 | 81.3±0.7 | 65.5±0.5 |
实施例8
处方：玫瑰花400g、旋花400g、梨花200g、樱桃花300g、李子花100g（相当于4: 4: 2: 3:1）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得15g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表10）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表10 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 50.2±0.5 | 40.2±0.6 |
| 中剂量组 | 61.5±0.6 | 50.6±0.5 |
| 高剂量组 | 77.5±0.4 | 60.8±0.6 |
实施例9
处方：玫瑰花600g、旋花600g、梨花400g、樱桃花300g、李子花100g（相当于6: 6: 4: 3:1）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得20g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表11）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表11 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 55.7±0.7 | 44.4±0.7 |
| 中剂量组 | 68.4±0.8 | 55.6±0.6 |
| 高剂量组 | 84.7±0.6 | 66.7±0.7 |
实施例10
处方：玫瑰花400g、旋花400g、梨花200g、樱桃花100g、李子花300g（相当于4: 4: 2: 1:3）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得13g。
美白作用试验：取本发明组合物，分别用去离子水稀释至0.5、1、10mg/mL，标为低、中、高剂量组，试验方法参照试验例1，试验结果（见表12）表明本发明组合物具有较强的美白作用。
表12 本发明组合物对酪氨酸酶及黑色素的影响。
| 酪氨酸酶抑制率(%) | 黑色素合成抑制率(%) | |
| 低剂量组 | 48.7±0.6 | 40.1±0.5 |
| 中剂量组 | 57.3±0.5 | 46.5±0.4 |
| 高剂量组 | 75.2±0.7 | 57.6±0.6 |
实施例11
处方：玫瑰花500g、旋花500g、梨花300g、樱桃花200g、李子花200g（相当于5: 5: 3: 2:2）。
制法：取上述5种原料，混匀，水蒸气蒸馏法提取挥发油至尽，得18g。
Claims (2)
1.一种具有美白作用的中药组合物，其特征在于所述的组合物为以一组中药材为原料，采用水蒸气蒸馏法提取而得的挥发油；所述中药材的质量份数如下：玫瑰花4-6份、旋花4-6份、梨花2-4份、樱桃花1-3份、李子花1-3份。
2.根据权利要求1所述一种具有美白作用的中药组合物，其特征在于所述中药材的质量份数如下：玫瑰花5份、旋花5份、梨花3份、樱桃花2份、李子花2份。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120425 |