CN102422976A - 一种银杏多肽的制备方法 - Google Patents

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孙汉巨
涂智雄
冯之涛
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Abstract

本发明公开了一种银杏果多肽的制备方法，主要包括以下操作步骤：(1)脱壳、去膜；(2)醇提；(3)粗磨；(4)细磨；(5)超滤；(6)加酶水解；(7)第一次膜分离；(8)第二次膜分离；(9)干燥。本发明改变银杏果实应用范围狭窄的局面，提高附加值，丰富了银杏产品的种类。

Description

一种银杏多肽的制备方法
技术领域
本发明涉及一种食品的制备方法，具体涉及一种银杏多肽的制备方法。
技术背景
银杏是现存种子植物中最古老的孑遗植物，是中国特有而丰富的经济植物资源。银杏果实又称为白果，含有蛋白质、淀粉、维生素及矿物质等营养成分，但因含有银杏酚酸等有毒成分，一次性多食可导致中毒，也制约了银杏资源的进一步深加工。到目前为止，银杏主要是作为菜肴或者是用来提取银杏内酯、银杏黄酮等药物原料，对原料中的蛋白质等利用率较低，浪费比较严重。
多肽是体内各种细胞功能的生物活性物质。科学发现，几乎所有细胞都受多肽调节，如：细胞分化、神经激素递质调节、免疫调节等均与活性多肽密切相关，它具有调节机体生理功能和为机体提供营养的双重功效。利用酶水解蛋白质生产生物活性多肽是蛋白质利用的有效手段之一。生物活性多肽具有易消化吸收的特点，不仅能提供人体生长发育所需的营养成分，还可调节机体的免疫功能、促进矿物质的吸收、调节神经系统、并有抗氧化、降血压、降血脂、降胆固醇、护肝、抗菌等作用。多肽以其分子质量低、活性强、用量少的独特优势，越来越多地引起人们的重视，也为开发多肽药物、肽类保健食品提供了理论依据。
因此，本专利通过膜分离技术制备银杏脱毒蛋白粉，并通过蛋白酶水解银杏蛋白，再通过膜分离技术提取银杏多肽，不但可以提高银杏的附加产值，降低银杏产品的毒性，也能使银杏的利用率发挥到最大。此方法具有环境友好、设备便宜，方法简单等优点，能够对银杏多肽进行大规模的制备及分离，在实际生产的应用确实可行。
发明内容
本发明专利的目的是为了改变银杏果实应用范围狭窄的局面，提高附加值，丰富了银杏产品的种类。
本发明提供一种银杏果多肽的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：
(1)脱壳、去膜：选择无破损，内部无霉变的果实，将银杏采用人工或者机械脱去外壳，然后采用碱法或者机械法去除表面的粘膜；
(2)醇提：将银杏在20～40℃下浸泡2～6小时，按质量/体积比1∶1～10(m/v)的比例加入95％乙醇，固液分离，得醇提固相物和醇提液；反复数次，至酒精无色为止；
(3)粗磨：将银杏和水按质量体积比(m/v)为1∶10的比例混合粗磨，得粗磨浆；
(4)细磨：将粗磨液用胶体磨细磨浆，所得细磨浆的的颗粒度在20μm以内；
(5)超滤：将细磨液加入500kDa的超滤装置中，控制操作压力为0.2Mpa，操作时间为2-4小时，去除银杏酚酸、低聚糖、单糖、色素、无机盐及残存的酒精等成分。操作过程中，补充去离子水1-2次，得银杏蛋白液；
(6)加酶水解：然后向银杏蛋白液中按体积与质量比为25～100∶1(v/m)添加风味复合蛋白酶，在50℃的条件下，酶解3～6h，得粗银杏多肽水解液；
(7)第一次膜分离：将银杏多肽水解液在20kDa的超滤膜进行分离，控制操作压力为0.3Mpa，操作时间为2～4h，操作过程中，补充水1～2次，每次补充3～5倍的水，去除未分解的蛋白质、酶及淀粉等，收集滤出液；
(8)第二次膜分离：将上一步的流出液通过100Da的纳滤膜分离设备，控制操作压力为0.3Mpa，操作时间为2～4h，操作过程中，补充水1～2次，每次补充3～5倍的水，去除掉单糖及一些无机盐等小分子杂质，并对原料进行浓缩；
(9)干燥：将银杏多肽浓缩液在50℃的条件下进行真空干燥，得银杏多肽粉。该发明所述果实去壳去膜，所述银杏多肽是用20kDa和100Da的两种膜分离进行分离纯化，所述的酶解用酶是风味复合蛋白酶。
本发明采用风味复合蛋白酶酶解蛋白质制作银杏果多肽带来的有益技术效果主要体现在以下几个方面：
1、银杏食品开发的技术突破
长期以来，由于银杏中含有银杏酚酸等有毒物质，制约其在食品中广泛的应用。通过本技术获得的银杏多肽可以可直接食用，或者作为保健食品原料，拓宽了银杏的应用范围。
2、银杏果多肽产品开发的方法
银杏果多肽通过风味复合蛋白酶水解，大部分蛋白质在蛋白酶的作用下充分水解为多肽和氨基酸，更容易被人体消化吸收；同时采用了先进的膜分离设备，使得多肽提取率更高，更安全。
3、丰富了银杏果实的深加工
长期以来银杏果实主要作为中药及烹饪原料，深加工的产品很少。本发明利用银杏果实制作银杏果多肽，开拓其应用的新领域。
4、该分离方法具有良好的环境友好性
本发明采用乙醇作为提取剂脱除银杏酚酸，乙醇可以回收循环使用；采用超滤技术用水作为溶剂进一步分离残留的银杏酚酸等小分子物质；再利用100Da及20kDa的膜分离技术纯化多肽，该方法能有效地节省能源消耗，工艺简单，操作方便，易于自动化。
具体实施方式
实施例1：
银杏果多肽制备的具体操作步骤如下：
(1)脱壳、去膜：选择无破损，内部无霉变的果实，将银杏采用人工或者机械脱去外壳，然后采用碱法或者机械法去除表面的粘膜；
(2)醇提：将银杏在20～40℃下浸泡2～6小时，按质量/体积比1∶1～10(m/v)的比例加入95％乙醇，固液分离，得醇提固相物和醇提液；反复数次，至酒精无色为止；
(3)粗磨：将银杏和水按质量体积比(m/v)为1∶10的比例混合粗磨，得粗磨浆；
(4)细磨：将粗磨液用胶体磨细磨浆，所得细磨浆的的颗粒度在20μm以内；
(5)超滤：将细磨液加入500kDa的超滤装置中，控制操作压力为0.2Mpa，操作时间为2～4小时，去除银杏酚酸、低聚糖、单糖、色素、无机盐及残存的酒精等成分。操作过程中，补充去离子水1～2次，得银杏蛋白液；
(6)加酶水解：然后向银杏蛋白液中按体积与质量比为25∶1(v/m)添加风味复合蛋白酶，在50℃的条件下，酶解6h，得粗银杏多肽水解液；
(7)第一次膜分离：将银杏多肽水解液在20kDa的超滤膜进行分离，控制操作压力为0.3Mpa，操作时间为3h，操作过程中，补充水2次，每次补充3～5倍的水，去除未分解的蛋白质、酶及淀粉等，收集滤出液；
(8)第二次膜分离：将上一步的流出液通过100Da的纳滤膜分离设备，控制操作压力为0.3Mpa，操作时间为34h，操作过程中，补充水1～2次，每次补充3～5倍的水，去除掉单糖及一些无机盐等小分子杂质，并对原料进行浓缩；
(9)干燥：将银杏多肽浓缩液在50℃的条件下进行真空干燥，得银杏多肽粉。
实施例2：
银杏果多肽的制备方法包括以下操作步骤：
(1)脱壳、去膜：选择无破损，内部无霉变的果实，将银杏采用人工或者机械脱去外壳，然后采用碱法或者机械法去除表面的粘膜；
(2)醇提：将银杏在20～40℃下浸泡2～6小时，按质量/体积比1∶1～10(m/v)的比例加入95％乙醇，固液分离，得醇提固相物和醇提液；反复数次，至酒精无色为止；
(3)粗磨：将银杏和水按质量体积比(m/v)为1∶10的比例混合粗磨，得粗磨浆；
(4)细磨：将粗磨液用胶体磨细磨浆，所得细磨浆的的颗粒度在20μm以内；
(5)超滤：将细磨液加入500kDa的超滤装置中，控制操作压力为0.2Mpa，操作时间为3小时，去除银杏酚酸、低聚糖、单糖、色素、无机盐及残存的酒精等成分。操作过程中，补充去离子水1～2次，得银杏蛋白液；
(6)加酶水解：然后向银杏蛋白液中按体积与质量比为100∶1(v/m)添加风味复合蛋白酶，在50℃的条件下，酶解3h，得粗银杏多肽水解液；
(7)第一次膜分离：将银杏多肽水解液在20kDa的超滤膜进行分离，控制操作压力为0.3Mpa，操作时间为3h，操作过程中，补充水1～2次，每次补充3～5倍的水，去除未分解的蛋白质、酶及淀粉等，收集滤出液；
(8)第二次膜分离：将上一步的流出液通过100Da的纳滤膜分离设备，控制操作压力为0.3Mpa，操作时间为3h，操作过程中，补充水1～2次，每次补充3～5倍的水，去除掉单糖及一些无机盐等小分子杂质，并对原料进行浓缩；
(9)干燥：将银杏多肽浓缩液在50℃的条件下进行真空干燥，得银杏多肽粉。

Claims (4)

1.一种银杏多肽的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：
(1)脱壳、去膜：选择无破损，内部无霉变的果实，将银杏采用人工或者机械脱去外壳，然后采用碱法或者机械法去除表面的粘膜；
(2)醇提：将银杏在20～40℃下浸泡2～6小时，按质量/体积比1∶1～10(m/v)的比例加入95％乙醇，固液分离，得醇提固相物和醇提液；反复数次，至酒精无色为止；
(3)粗磨：将银杏和水按质量体积比(m/v)为1∶10的比例混合粗磨，得粗磨浆；
(4)细磨：将粗磨液用胶体磨细磨浆，所得细磨浆的的颗粒度在20μm以内；
(5)超滤：将细磨液加入500kDa的超滤装置中，控制操作压力为0.2Mpa，操作时间为2-4小时，去除银杏酚酸、低聚糖、单糖、色素、无机盐及残存的酒精等成分。操作过程中，补充去离子水1-2次，得银杏蛋白液；
(6)加酶水解：然后向银杏蛋白液中按体积与质量比为25～100∶1(v/m)添加风味复合蛋白酶，在50℃的条件下，酶解3～6h，得粗银杏多肽水解液；
(7)第一次膜分离：将银杏多肽水解液在20kDa的超滤膜进行分离，控制操作压力为0.3Mpa，操作时间为2～4h，操作过程中，补充水1～2次，每次补充3～5倍的水，去除未分解的蛋白质、酶及淀粉等，收集滤出液；
(8)第二次膜分离：将上一步的流出液通过100Da的纳滤膜分离设备，控制操作压力为0.3Mpa，操作时间为2～4h，操作过程中，补充水1～2次，每次补充3～5倍的水，去除掉单糖及一些无机盐等小分子杂质，并对原料进行浓缩；
(9)干燥：将银杏多肽浓缩液在50℃的条件下进行真空干燥，得银杏多肽粉。
2.根据权利要求1所述的一种银杏果多肽的制备方法，其特征在于：所述果实去壳去膜。
3.根据权利要求1所述的一种银杏果多肽的制备方法，其特征在于：所述银杏多肽是用20kDa和100Da的两种膜分离进行分离纯化。
4.根据权利要求1所述的一种银杏果多肽的制备方法，其特征在于：酶解用酶是风味复合蛋白酶。
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